摘要：肉苁蓉属植物具有补肾壮阳及通便、抗疲劳、抗衰老、增强记忆力、抗骨质疏松的作用，近年来成为研究的热点。文章通过对近十年来肉苁蓉属植物的化学成分、药理活性进行综述，为广泛深入研究该植物提供理论依据。关键词：肉苁蓉；化学成分；药理活性0 引言肉苁蓉(Cistanchedeserticola Ma)，别名疆芸、寸芸。属植物归属列当科，主要分布内蒙古、陕西、甘肃、宁夏、新疆等地。本草纲目中记载：“五劳七伤，补中，除茎中寒热痛，养五腑，强阴，益精气，多子，妇人症瘕。”进年来，国内外学者积极探索，发现该植物化学成分丰富，富含氨基酸、京尼平酸(Geniposidicacid)、苁蓉氯素(Cistanchlorin)、β- 谷甾醇、胡萝卜苷等；药理活性广泛，具有增强记忆力[1]、抗骨质疏松[2]、补肾壮阳及通便、抗疲劳、抗衰老[3] 等作用。1 化学成分1.1 苯乙醇苷类国内外学者近几年来对肉苁蓉属植物中的化学成分积极进行研究，刘文静等[4] 在肉苁蓉中鉴定出了12 个苯乙醇苷类化合物，分别为毛蕊花糖苷、2′- 乙酰基毛蕊花糖苷、肉苁蓉苷C、肉苁蓉苷D、异毛蕊花糖苷、管花苷B、管花苷E、盐生肉苁蓉苷D、盐生肉苁蓉苷EPlantainosideC、OsmanthusideB6(Z/E) 和松果菊苷。南泽东等[5] 采用正相硅胶、凝胶SephadexLH-20、MCI、ODS 以及半制备高效液相色谱等方法在新疆塔中栽培荒漠肉苁蓉的3 肉质茎中分离提取了新的顺式苯乙醇苷类化合物。分别是：顺式管花苷B、顺式肉苁蓉苷K、顺式肉苁蓉苷 J、顺式异肉苁蓉苷C。张开梅[6] 采用正、反相硅胶柱层析技术，从肉苁蓉总苷中分离到了异类叶升麻苷、管花苷B、类叶升麻苷。1.2 环烯醚萜苷类环烯醚萜苷类化合物为一大类广泛存在于中药中的，具有多种药理活性的天然产物，包括獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、橄榄苦苷、京尼平苷、桃叶珊瑚苷、毛蕊花苷、哈巴俄苷等[7]。杨建华等[8] 对新疆原生态环境下人工种植的盐生肉苁蓉进行了研究，采用大孔树脂、活性碳、SephadexLH-20 等柱色谱技术分离纯化，首次得到了8- 表马钱子苷酸(8-Epiloganicacid, Ⅰ)、益母草苷(Leonuride, Ⅱ)。刘文静等[4] 首次在肉苁蓉的花及木茎中利用HPLC-IT-TOF-MS 分离得到了环烯醚萜苷类化合物。1.3 木脂素苷类张杰等[9] 利用制备液相色谱和Sephadex LH-20 的方法在德赢vwin登录 中得到了丁香树脂酚葡萄糖苷(+)-SyringaresinolO-β-Dglucopyranoside。张开梅[6] 采用正、反相硅胶柱层析技术从肉苁蓉总苷中分离得木质素类化合物，香脂素-O-β-D- 吡喃葡萄糖苷。1.4 糖类杨太新等[10] 对华北平原德赢vwin登录 进行研究，绘制标准多糖含量曲线，提取不同时期的不同部位的肉苁蓉的多糖，用紫外- 分光光度法测定其含量，结果表明1、2 年生肉苁蓉年内均以10 月的多糖含量最高，分别为11 月、12 月呈下降趋势，9月最低。2 年生多糖总含量总是大于同期1 年生的多糖总含量。不同部位中的多糖含量：基部＞中部＞顶部，不同时期多糖含量：10 月＞11 月＞12 月＞9 月。王力伟[11] 利用反相硅胶层析、凝胶层析、HPLC 制备等分离纯化技术，从肉苁蓉的甲醇提取物中分离得到了2- 乙酰-3- 鼠李糖基-4- 咖啡酰葡萄糖。2 药理作用2.1 神经保护作用蔡克瑞等[12] 将小鼠随机分为青年对照组，衰老模型组，肉苁蓉多糖组，其中肉苁蓉多糖组和衰老模型组均注射射 D- 半乳糖使小鼠致衰，青年对照组注射相同剂量的生理盐水，肉苁蓉多糖组小鼠灌服肉苁蓉多糖，其余两组注射生理盐水，检测结果表明，灌服肉苁蓉多糖组SOD 活性、GSH-Px 活力、神经细胞 DNA 损伤的修复能力均有所提高，MDA 含量降低，肉苁蓉多糖对致衰小鼠的神经有保护作用。张开梅[6] 构建构建化合物-靶点- 疾病网络，在通路水平上分析相关靶蛋白之间的关系，发现肉苁蓉能够通过调节CTNNBI、APP、MAPT、PTGS2、CASP3及HMOXI 等潜在的靶点及Wnt、P13K-AKT 和VEGF 等14 条信号通路起到神经保护作用，防治和治疗AD、帕金森等神经系统疾病。苗鑫等[13] 在研究中发现，肉苁蓉毛蕊花糖苷作用24h后，P-CREB 表达增加，PKA、CAMP、BDNF 和SOD 水平提高，MDA 和LDH 水平下降，而阻断剂干预后1h 后，P-CREB 表达减少，PKA、CAMP、BDNF 和SOD 水平显著降低，表明肉苁蓉毛蕊花糖苷对D- 半乳糖诱导的PC12 神经细胞损伤有明显的保护作用。2.2 抗氧化作用王国卫等[14] 研究了肉苁蓉多糖体外抗氧化活性，与抗坏血酸作对比，结果表明，肉苁蓉多糖对DPPH·、·OH的清除能力均随着多糖浓度的增大而增大，且优于抗坏血酸，而对O-2·的清除效果却不如抗坏血酸。当浓度为0～4.0mg/mL 时，清除单线态氧的能力低于抗坏血酸，当浓度大于4.0mg/mL 时，肉苁蓉多糖清除能力大于抗坏血酸。杨建华等[15] 对肉苁蓉属植物中6 种苯乙醇苷类化合物进行了抗氧化作用的研究，它们的清除能力为2′- 乙酰基毛蕊花糖苷最强，其次实毛蕊花糖苷、管花苷B、异毛蕊花糖苷、松果菊苷、最后是肉苁蓉苷A。它们的清除能力均和浓度成线性关系。覃文婷等[16] 将肉苁蓉多糖、醇提物、总苷同时与DPPH·自由基乙醇溶液反应，结果表明，清除能力最强的是总苷，其苯乙醇苷类的清除能力显著高于多糖。2.3 抗衰老作用武燕等[17] 对D- 半乳糖建立急性衰老的小鼠进行Morris 水迷宫实验，相较于模型组，肉苁蓉多糖各剂量组逃避潜伏期明显缩短。在空间探索实验中，肉苁蓉多糖组与模型组比较，小鼠第1 次到达站台时间明显缩短而穿越站台次数增加，表明对衰老模型小鼠的学习记忆能力有明显的改善作用。范亚楠等[18] 灌胃给予D- 半乳糖建立衰老大鼠模型，用ELISA 法检测大鼠血清中MDA、SOD、NO 的含量，结果表明，肉苁蓉不同炮制品能明显降低MDA、NO 的水平，SOD 有上升的趋势，脑内mt DNA 高剂量组及阳性药组未出现缺失情况，且高剂量组优于低剂量组，表明肉苁蓉炮制品具有抗衰老作用。玄国东等[19]考察了肉苁蓉苯乙醇苷对D- 半乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用，四周后发现苯乙醇苷组小鼠的学习和记忆的错误次数降低，学习反应期缩短，记忆潜伏期延长，肉苁蓉苯乙醇苷具有抗衰老的作用。2.4 其他作用张娜娜等[20] 对摘除卵巢并给予燥性饲料的小鼠进行实验，模仿更年期高血压燥证。结果表明肉苁蓉多糖能通过增强 HPOA 功能实现对神经递质与内分泌激素的调节，促进内分泌功能的改善，并加速新陈代谢，发挥改善更年期症状的作用。胡琼等[21] 研究发现灌胃了肉苁蓉苯乙醇总苷的小鼠，它们的肝癌细胞生长受到抑制、数目较少、异质性降低、并伴有大量坏死细胞，抑癌率随着苯乙醇总苷剂量增加而升高，表明了肉苁蓉苯乙醇苷能降低肝癌小鼠肝脏损伤，并对其肿瘤生长有抑制作用。陈百泉等[22] 将肉苁蓉提取物注射到四氯化碳致急性肝损伤的小鼠中，与对照药丁基羟基茴香醚(BHA)相差不大，大于丁基羟基甲苯(BHT)，能显著降低小鼠血清中ALT、AST 活性以及肝匀浆MDA 含量，并能显著提高小鼠肝脏中的SOD 值，具有显著的肝保护功能。许晓雪[23] 建立HPLC特征图谱和含量测定方法对宁夏栽培的荒漠肉苁蓉进行研究，用去卵巢骨质疏松的小鼠来模拟绝经后的妇女，分别口服不同浓度的肉苁蓉提取物，显示均有不同程度的改善骨质疏松的作用。3 结语肉苁蓉中活性成分较多，药用价值开发潜力巨大。目前对肉苁蓉的药理作用机制研究不够深入，临床研究较欠缺，而中国西部沙漠边缘地区广泛载培肉苁蓉属植物，新疆和田主产的德赢vwin登录 、内蒙古自治区阿拉善盟主产的肉苁蓉、甘肃武威地区主产的荒漠肉苁蓉，为肉苁蓉的开发研究提供了基础。参考文献：[1] Peng X M, Gao L, Huo S X, et al.The Mechanism ofMemory Enhancement of Acteoside(Verbascoside)in the SenescentMouse Model In-duced by a Combination of D-gal and AlCl3[J].Phytother Res, 2015, 29(8):1137-1144.[2] Liang H, Yu F, Tong Z, et al.CistanchesHerba aqueousextract affecting serum BGP and TRAP and bone marrowSmad1 mRNA, Smad5 mRNA, TGF-β1 mRNA and TIEG1Mrnaexpression levels in osteoporosis disease[J].Molecular BiologyReports, 2013, 40(2):757-763.[3] 陈飞，陈卓，邢雪飞，等. 肉苁蓉的研究进展[J]. 药物评价研究，2013, 36(6)：469-475.[4] 刘文静，曹妍，宋青青，等. 荒漠肉苁蓉花及木质化茎的化学成分定性分析[J]; 中国中药杂志，2018,43(18):3708-3714.[5] 南泽东，任华忠，赵明波，等. 塔中栽培荒漠肉苁蓉中4 个新的顺式苯乙醇苷类成分[J]. 中国中药杂志，2018, 43(6):1169-1174.[6] 张开梅. 肉苁蓉化学成分及其神经保护作用初探[M].大连: 大连工业大学，2017:22-27[7] 薛长松，徐晶，李萃萍，等. 环烯醚萜苷类化合物体内代谢及代谢物药理活性研究进展[J]. 中国中药杂志，2018, 43(1):39-45.[8] 杨建华，胡君萍，热娜·卡斯木，等. 人工栽培盐生肉苁蓉环烯醚萜苷类成分的研究[J]. 时珍国医国药，2009, 20(3): 522-523.[9] 张杰，赵天翼，李鸿钰，等. 德赢vwin登录 提取物中化学成分研究[J]. 海峡药学，2016, 28(10): 39-41.[10] 杨太新，杜艳华，刘金娜，等. 华北平原德赢vwin登录 中多糖的含量分析[J]. 时珍国医国药，2013, 24(5): 1149-1150.[11] 王力伟. 肉苁蓉成分的分离鉴定、定量分析及生物活性研究[M]. 内蒙古：内蒙古大学，2016:24-27.[12] 蔡克瑞，刘志新，孙晓冬，等. 肉苁蓉多糖对 D- 半乳糖致衰小鼠脑神经细胞的保护作用及机制[J]. 中国老年学杂志，2018, 38(19): 4732-4734.[13] 苗鑫，张弘，武燕，等. 肉苁蓉毛蕊花糖苷对 D- 半乳糖诱导PC12 神经细胞损伤的保护作用[J]. 中国药学杂志2017,(23)：2071-2078.[14] 王国卫，赵芳. 新疆肉苁蓉多糖清除活性氧自由基[J].光谱实验室，2011, 28(3): 1545-1548.[15] 杨建华，胡君萍，热娜·卡斯木，等. 肉苁蓉属植物中六种苯乙醇苷类化合物抗氧化活性的构效关系研究[J]. 中药材，2009, 32(7): 1067-1069.[16] 覃文婷，王小明，徐荣，等. 荒漠肉苁蓉中苯乙醇苷类与多糖含量的测定及抗氧化作用研究[J]. 中国现代中药，2018,20(4): 426-431.[17] 武燕，张弘，布仁，等. 肉苁蓉多糖对D- 半乳糖所致急性衰老模型保护作用研究[J]. 中国药理学通报，2017, 33(7):927-933.[18] 范亚楠，黄玉秋，贾天柱，等. 肉苁蓉炮制前后对衰老模型大鼠抗衰老及免疫功能的影响[J]. 中华中医药学刊，2017,(11):2882-2885.[19] 玄国东，刘春泉. 肉苁蓉苯乙醇苷对 D- 乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用研究[J]. 中药材，2008, 31(9): 1385-1388.[20] 张娜娜. 肉苁蓉多糖对更年期高血压燥证大鼠内分泌功能调节的研究[J]. 中医药学报，2018, 46(1): 65-69.[21] 胡琼，由淑萍，刘涛，等. 肉苁蓉苯乙醇总苷抗肝癌作用的实验研究[J]. 癌变·畸变·突变，2018, 30(3): 194-199.[22] 陈百泉，刘瑜新，康文艺. 人工栽培肉苁蓉保肝和抗氧化活性研究[J]. 精细化工，2010, 27(4): 342-345.[23] 许晓雪. 肉苁蓉及其有效成分抗骨质疏松药效学及代谢组学研究[D]. 宁夏: 宁夏医科大学，2017:40-42.

［摘要］ 肉苁蓉与德赢vwin登录 皆收录于《中华人民共和国药典》( 2015 版) ，两者功效相似，但价格却相差悬殊。本研究对历代本草典籍和现代文献中肉苁蓉与德赢vwin登录 的来源进行考证，并对两种肉苁蓉的化学成分及生物活性进行比较，搜集两者在药品、保健品中的应用及进出口方面的相关信息，分析总结两种肉苁蓉的商业价值，为肉苁蓉和德赢vwin登录 的开发利用提供参考。［关键词］ 肉苁蓉; 德赢vwin登录 ; 本草考证; 比较研究; 市场分析肉苁蓉始载于《神农本草经》，被列为上品。《中华人民共和国药典》( 2015 版) 中“肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y. C. Ma 或德赢vwin登录 Cistanche tubulosa( Schenk) Wight 的干燥带鱗叶的肉质茎，功能与主治为补肾阳，益精血，润肠通便，用于肾阳不足，精血亏虚，阳痿不孕，腰膝酸软，筋骨无力，肠燥便秘”［1］。肉苁蓉是我国传统名贵中药材，素有“沙漠人参”之美誉［2］。近年来，肉苁蓉的野生资源日益匮乏，被列为国家三级重点保护野生中药材，其产量已无法满足市场需求。据调查，2011 年野生肉苁蓉的年产量在150 t 左右，而野生德赢vwin登录 年产量在500 t 左右［3］。肉苁蓉和德赢vwin登录 的大面积人工种植极大地缓解了资源的供求矛盾。然而，两种肉苁蓉在市场上的价格差异很大，德赢vwin登录 的价格只有肉苁蓉的1/6～1/4。这种差价是否与药用价值的差异相一致，有必要进一步探讨。本研究通过本草考证和文献统计，对历代本草典籍中肉苁蓉的来源、性状及应用情况进行考证，并对两种肉苁蓉的化学成分及生物活性进行比较，搜集肉苁蓉与德赢vwin登录 在药品、保健品中的应用及进出口方面的相关信息，对两种肉苁蓉的商业价值进行总结分析，为肉苁蓉和德赢vwin登录 的开发利用提供参考。1 肉苁蓉与德赢vwin登录 来源及应用的本草考证肉苁蓉寄生于梭梭的根部，又叫软大芸，呈扁圆柱形，密被鳞片质柔软肉性，断面棕黑色，维管束成波状排列。德赢vwin登录 寄生于柽柳属的红柳等植物的根部，又叫硬大芸，呈纺锤形、扁卵形或类扁柱形不一，体披鳞片先端多脱落，质硬体重， 难折断， 断面颗粒状， 维管束点状散在。本草文献中对肉苁蓉产地和质优者的描述如表1 所示。唐代以前，肉苁蓉的来源主要为列当科植物肉苁蓉的近源种，如草苁蓉、列当、盐生肉苁蓉等植物，且为形扁广，柔润，多花而味甘为上。北宋典籍中描述肉苁蓉“西羌界( 指今甘肃西部、青海东部地区) 中来者肉厚而力紧”及生境“大木间多生此”，此处“大木”即为其寄主，故此品指荒漠肉苁蓉，因为只有荒漠肉苁蓉的寄主梭梭是沙漠中的较高大乔木。而我国德赢vwin登录 的自然分布仅限于新疆天山以南塔克拉玛干沙漠周围各县，与古代肉苁蓉原植物记载的产地有明显出入，且历代本草典籍中对肉苁蓉药材形状的描述也与德赢vwin登录 差别较大，因此推测古时肉苁蓉药材原植物来源不包括德赢vwin登录 ［18-19］。德赢vwin登录 在20 世纪50 年代才开始地方性入药，20 世纪60 年代由于肉苁蓉商品紧缺［21］，德赢vwin登录 被大量当做肉苁蓉使用，逐渐成为肉苁蓉的替代品，因此对德赢vwin登录 的研究逐渐增加，主要集中在成分、药理、栽培等方面。从对德赢vwin登录 的文献统计数据来看，知网上关于栽培方面的论文数量明显多于其他几类，见表2。也正是因为栽培方面研究的完善，德赢vwin登录 的种植面积逐渐扩大，相关产品研发的越来越多。2005 年德赢vwin登录 被收录于《新疆维吾尔自治区药品标准》( 1987 年版) ，《中华人民共和国药典》( 2010 版) 新增列当科德赢vwin登录 作“肉苁蓉”入药。2 肉苁蓉与德赢vwin登录 的化学成分及生物活性研究现代研究表明，肉苁蓉中含有苯乙醇苷类、环烯醚萜苷类、木脂素类、多糖、生物碱等多种生物活性物质，除传统补肾壮阳、润肠通便的作用外，还具有抗疲劳、抗衰老、增强机体免疫力及防治脑缺血、脑缺血再灌注损伤等作用。2. 1 化学成分研究2. 1. 1 松果菊苷松果菊苷是肉苁蓉主要活性成分之一，具有神经保护、骨保护、抗损伤、肝保护等作用。松果菊苷能逆转保护鱼藤酮、中动脉闭塞、6-羟多巴胺诱导的多巴胺能神经元损伤; 也能自由穿过血脑屏障，有可能用于治疗帕金森病、阿尔茨海默病等神经变性疾病及预防和治疗大脑的缺血性疾病［20］。有研究［21-22］采用高效液相色谱法测定新疆不同地区种植德赢vwin登录 中松果菊苷的质量分数在2. 13%～2. 53%，钱浩等［23］用ＲP-HPLC 测定不同季节采收肉苁蓉中松果菊苷质量分数，秋季为1. 036% ～4. 400%，春季为0. 110% ～ 0. 804%，秋季采收的肉苁蓉指标成分总量明显高于春季采收的肉苁蓉。2. 1. 2 麦角甾苷麦角甾苷属于苯乙醇苷类，是肉苁蓉的主要活性成分之一，具有补肾壮阳、抗衰老、保肝、改善记忆障碍等功效。郭卫红［24］采取麦角甾苷稀甲醇溶液于200～400 nm 波长扫描，以332 nm 为检测波长，测定同属肉苁蓉、德赢vwin登录 及其不同产地药材中麦角甾苷含量。结果发现肉苁蓉中麦角甾苷平均质量分数为0. 392 4%，德赢vwin登录 中为1. 452 3%。2. 1. 3 甜菜碱肉苁蓉中的甜菜碱含量丰富，是它的主要化学成分之一，具有雄性激素样作用和很强的抗氧化性能，也具有抗脂肪肝和抗肿瘤以及扩张外周血管和降压作用［25-26］。龚立东等［27］采用高效液相色谱蒸发光散射检测法测定中药材肉苁蓉中甜菜碱含量，测得内蒙和甘肃产的肉苁蓉中甜菜碱质量分数平均值为65. 71 mg·g－1，而新疆和云南产的德赢vwin登录 中则未检出甜菜碱。但陈卫军等［28］在采用比色法含量测定不同炮制方法对新疆德赢vwin登录 甜菜碱含量的影响中，测得生品中甜菜碱质量分数为63. 94 mg·g－1，经过炮制后甜菜碱含量均明显下降，盐制、酒制和蒸制质量分数分别为12. 70、13. 80、15. 30 mg·g－1。2. 1. 4 半乳糖醇肉苁蓉自古以来就有良好的润肠通便作用，在润通丸等方剂中均有应用，现代很多学者对肉苁蓉润肠通便的有效成分进行了研究。赵奎君等［29］用HPLC-ELSD 对新疆、内蒙古、甘肃和宁夏等不同产地采集的肉苁蓉和德赢vwin登录 各10 批药材进行测定，发现肉苁蓉中半乳糖醇平均质量分数为7. 6%，而德赢vwin登录 为6. 4%。2. 1. 5 多糖肉苁蓉多糖具有免疫调节、抗衰老、改善脾虚、抗病毒抗肿瘤、促进造血等多方面的药理作用［30］。研究表明，肉苁蓉多糖能通过增强THP-1 细胞的吞噬力和促进细胞因子释放调节免疫功能，还能显著增加外周血中干扰素γ( IFN-γ) 的含量，从而抑制病毒的繁殖，并促进免疫细胞产生细胞毒性作用，杀伤肿瘤细胞［31］。杨太新等［32］用紫外-可见分光光度法测定华北平原德赢vwin登录 中多糖质量分数平均值为9. 76%; 麻景梅等［33］利用苯酚-硫酸法测定肉苁蓉多糖质量分数12. 0%; 赵国丁等［34］采用苯酚-硫酸比色法测得多糖质量分数为6. 98%。经文献统计分析可知，德赢vwin登录 中苯乙醇苷类化合物的含量高于肉苁蓉，多糖类化合物反之。《中华人民共和国药典》( 2015 版) 规定，肉苁蓉含松果菊苷和毛蕊花糖苷的总量不得少于0. 30%，德赢vwin登录 含松果菊苷和毛蕊花糖苷的总量不得少于1. 5%［1］。2. 2 生物活性研究2. 2. 1 对免疫功能的影响和抗疲劳作用两种肉苁蓉都能提高巨噬细胞吞噬功能，从而增加免疫力。张洪泉等［35］发现荒漠肉苁蓉的水提物能使巨噬细胞内环磷酸腺苷( cAMP) 升高，环磷酸乌苷( cGMP) 下降，这可能是它加强巨噬细胞吞噬功能的主要原因，表明对特异性细胞免疫功能有促进作用。曾群力等［36］研究表明荒漠肉苁蓉多糖对小鼠细胞有调节作用，能促进小鼠脾和胸腺淋巴细胞的增殖，并能显著提高小鼠脾淋巴细胞分泌IL-1 的能力。宗桂珍等［37］研究表明德赢vwin登录 可显著升高巨噬细胞的吞噬活力，使抑制低下的非特异免疫功能恢复到一定水平。但德赢vwin登录 抗衰老能力尚缺乏广泛研究。2. 2. 2 神经保护作用研究表明，肉苁蓉和德赢vwin登录 均具有抗凋亡作用。蒲小平等［38］研究发现肉苁蓉中的成分campneosideⅡ对神经毒素MPP+诱发细胞凋亡具有保护作用。王虎等［39］研究表明，肉苁蓉提取物能明显提高SH-SY5Y 细胞的存活率，并降低与蛋白的表达，对介导的细胞损伤有保护作用。邓敏等［40］研究发现管花苷B 能明显减轻肿瘤坏死因子a 诱导的细胞凋亡，研究得出PC12 神经元凋亡和氧化应激反应的关系是由管花苷B 与MPP+引起的，从而说明了管花苷B 可以预防MPP+引起的该神经元凋亡和氧化应激反应。2. 2. 3 通便作用中医常用肉苁蓉治疗老人便燥秘结、血枯便秘。张勇等［41］通过肉苁蓉类药材及其炮制品通便作用比较研究认为，德赢vwin登录 能显著缩短小鼠通便时间，作用强度与肉苁蓉相似。高云佳等［42］研究发现，肉苁蓉总寡糖及去半乳糖醇总寡糖能显著缩短便秘小鼠6 h 内的首次排红便时间，并能显著增加小鼠排便粒数及排便干质量。吴波等［43］通过肉苁蓉和德赢vwin登录 对小鼠通便作用的比较，发现两者均有明显的通便作用; 且随着剂量的增大，其排便时间差异有统计学意义( P＜0. 05) ，但肉苁蓉和德赢vwin登录 同等剂量的排便时间相比，差异无统计学意义( P＞0. 05) 。3 两种肉苁蓉的应用现状及产业价值分析3. 1 肉苁蓉发展及分布情况肉苁蓉主要分布于内蒙古、新疆、宁夏、甘肃、青海等省区; 野生资源以新疆最为丰富，收购量占全国60%左右，居首位，南疆以柽柳大芸为主，北疆以梭梭大芸为主; 其次是内蒙古，占30%以上。2000 年以前，中国的野生肉苁蓉蕴藏量非常充足，每年最少产20 000 t。然而，在许多不利因素的作用下，野生资源自21 世纪起渐渐枯竭，产量连年大幅下降。根据相关资料，肉苁蓉产量从2000—2001 年的3000 t降到2008—2009 年的1000 t 再降到2012—2013 年的500 t，2014—2015 年的时候已经锐减至300 t 以下［44］。野生肉苁蓉匮乏原因包括滥砍乱挖、环境改变、自然灾害等，其中梭梭林已从20 世纪末期的113. 33万公顷减至目前的20～26. 67 万公顷，所以肉苁蓉产量也大幅下降。随着需求量的逐年增长，野生资源早已不能满足需求，进而大力发展人工种植。自从1986 年在中科院策勒治沙站试验种植红柳大芸获得成功，德赢vwin登录 种植面积便逐渐扩大，产量不断提高［45］。2010 年和田人工种植柽柳面积已达16 000 hm2，德赢vwin登录 接种面积累计达6700 hm2;2015 年新疆和田地区种植柽柳植物26 700 hm2，接种德赢vwin登录 20 000 hm2 ; 2016 年和田地区德赢vwin登录 鲜药材产量达20 500 t，占全国肉苁蓉产量的70%以上; 截至2017 年5 月，于田县德赢vwin登录 种植面积11 700 hm2，接种德赢vwin登录 面积10 300 hm2，年产量达12 560 t。3. 2 两种肉苁蓉商品规格及易混淆品3. 2. 1 商品规格两种肉苁蓉药材根据外形、大小，均可分为一、二、三等品，具体如表3 所示。肉苁蓉商品现有甜苁蓉和盐苁蓉两种规格。春季采者，通常半埋于沙土中晒干，商品称为“甜大芸” “淡大芸”或“淡苁蓉”; 秋采者，因水分多，不易晒干，需投入盐湖中1～ 3 年后，取出晒干，称为“盐大芸” “咸大芸”或“咸苁蓉”，药用时需洗去盐分。肉苁蓉两种规格性状如表4 所示。甜苁蓉以身肥软，块大，鳞片细，色灰褐者为佳; 咸苁蓉以色黑，条粗质糯，鳞细体圆扁，断面有芝麻点者为佳。甜苁蓉质量优于咸苁蓉。3. 2. 2 易混淆品作为沙漠多年生寄生植物，肉苁蓉及德赢vwin登录 特殊的生物学特性和相对狭窄的生存空间使其资源自古以来都比较紧缺。这种供求的不平衡导致其伪品时有出现，目前肉苁蓉的伪品中药为同属及近缘属多种植物，如盐生肉苁蓉、沙苁蓉、锁阳等［46］。混乱的药材来源肯定会影响质量的稳定性、可靠性以及临床用药的安全性和有效性，因此有必要鉴别研究肉苁蓉正品的来源及其伪品，各性状鉴别要点见表5。3. 3 产业价值分析3. 3. 1 药材贸易情况肉苁蓉和德赢vwin登录 商品均有甜苁蓉统货、甜苁蓉干货、咸苁蓉统货、咸苁蓉干货等规格，习惯认为甜苁蓉统货质量最优。两者的市场价格如图1 所示，肉苁蓉价格波动平稳，德赢vwin登录 近3 年来下降幅度较大且价格不高。产生这种情况的原因有二，一是肉苁蓉的成本高于德赢vwin登录 ，二是市场上他们的销量有差距。近5 年来德赢vwin登录 销量约为肉苁蓉的2 倍，可能是因为新疆地区开展防沙治沙绿色生态工程，在种植柽柳治沙的同时，大面积扩种德赢vwin登录 ，使得产量过剩，价格自然大幅度下降。图1 2013 年1 月1 日—2019 年1 月1 日肉苁蓉与德赢vwin登录 的价格变化3. 3. 2 中成药及保健品贸易情况在肉苁蓉市场前景大好的情况下，新疆各地州、中国台湾及日本各企业，都围绕这肉苁蓉进行了产品深加工。屠鹏飞等［3］基于肉苁蓉苷类的研究，与杏辉天力( 杭州) 药业有限公司合作，以德赢vwin登录 为原料提取其苯乙醇总苷，成功研制治疗血管性痴呆的二类新药。还有“帝辰牌康卡片”和“疆芸牌苁蓉劲片”，均是以德赢vwin登录 为主要原料的保健食品，具有缓解疲劳的功效。根据国家处方数据库和保健品数据库统计，在中成药中，以药材肉苁蓉为原料的药品共有196 种，没有明确写出原料为肉苁蓉或德赢vwin登录 。国产保健品共46 种，进口2 种，其中以德赢vwin登录 为原料的共3 种，占6. 25%，以肉苁蓉为原料的有45 种，占93. 75%( 见图2) 。3. 3. 3 进出口贸易情况虽然2000 年肉苁蓉被列为《濒危野生动植物种国际贸易公约( CITES) 》附录Ⅱ物种，并为我国二级保护物种。在国际贸易过程中，受禁止贸易限制，且在进出口环节中受海关的严格监管。但作为出口创汇的重要商品之一，自我国加入世界贸易组织( WTO) 之后，肉苁蓉出口范围扩大，市场份额增加，已出口到日本、韩国、东南亚地区各国及我国港澳台市场等38 个国家和地区，出口量呈逐年增长之势。我国的野生肉苁蓉主要是从哈萨克斯坦进口，2016 年进口500 t，主要销往广东、安徽、河北、中国台湾、东南亚等地，但由于近几年哈萨克斯坦对肉苁蓉野生资源的严加管控和限制，使货源不足。据中华人民共和国商务部发布的《2014—2017 年中药材流通市场分析报告》，药材肉苁蓉以“苁蓉”或“肉苁蓉”为商品名出口数量及出口额如图3 所示。4 结论及展望综上所述，肉苁蓉与德赢vwin登录 的成分虽有差异，但功能与主治相同且临床应用不做区分。2010版《中华人民共和国药典》将德赢vwin登录 Cistanchetubulosa( Schenk) Wight 列为基原植物之一，是为了解决肉苁蓉资源不足的问题，在保护资源的同时满足市场的需求。市场上，肉苁蓉价格高于德赢vwin登录 ，这种差价与其药用价值的差异不完全一致，相对于成分含量来说，其产量、道地性、临床功能与主治对价格的影响更大。虽然德赢vwin登录 松果菊苷和麦角甾苷的含量远大于肉苁蓉，但在临床上公认肉苁蓉效果更好，且为道地药材、产量相对小。德赢vwin登录 作为肉苁蓉的新基原进入市场，具有产量大、价格低的优点，既保护了野生资源又缓解了供求关系。肉苁蓉在商务部《2017 年中药材流通市场分析报告》中被列为“中药材重点品种”，足以证明肉苁蓉的发展趋势良好，国家对其重视，因此我们可以综合肉苁蓉应用历史久、道地性强、认可度高和德赢vwin登录 产量大、价格低、质量相对稳定的优点，在加大保护肉苁蓉野生资源的同时，大力发展人工种植，加强开发利用研究，促进肉苁蓉产业进步。参考文献［1］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典［M］．北京: 中国医药科技出版社，2015: 135．［2］ 杨峻山．沙漠人参———肉苁蓉［J］．中国药学杂志，2011，46( 12) : 881．［3］ 屠鹏飞，姜勇，郭玉海，等．肉苁蓉研究及其产业发展［J］．中国药学杂志，2011，46( 12) : 882-887．［4］ 佚名．神农本草经［M］．孙景衍，孙冯翼，辑校．太原: 山西科学技术出版社，2010: 49．［5］ 陶弘景．名医别录［M］．尚志钧，辑校．北京: 人民卫生出版社，1986: 51．［6］ 陶弘景．本草经集注［M］．尚志钧，辑校．北京: 人民卫生出版社，1994: 239．［7］ 吴普．吴普本草［M］．尚志钧，辑校．芜湖: 芜湖医学专科学校，1961: 6．［8］ 苏敬．新修本草［M］．胡方林，整理．太原: 山西科学技术出版社，2013: 161．［9］ 吴越．蜀本草日华子本草［M］．尚志钧，辑校．合肥: 安徽科学技术出版社，2005: 370［10］ 寇宗奭．本草衍义［M］．梁茂新，范颖，点校．北京: 中国医药科技出版社，201: 66．［11］ 苏颂．本草图经［M］．尚志钧，辑校．合肥: 安徽科学技术出版社，1994: 118．［12］ 唐慎微．证类本草［M］．郭君双，校注．北京: 中国医药科技出版社，2011: 203．［13］ 李时珍．本草纲目［M］．余瀛鳌，编选．北京: 科学出版社，1997: 17．［14］ 陈嘉谟．本草蒙筌［M］．陆拯，赵法新，点校．北京: 中国中医药出版社，2013: 20．［15］ 刘文泰等．本草品汇精要［M］．陆拯，点校．北京: 中国中医药出版社，2013: 171．［16］ 吴仪洛． 本草从新［M］． 陆拯，赵法新，陈明显，点校． 北京: 中国中医药出版社，2013: 19．［17］ 张秉成．本草便读［M］．张效霞，校注．北京: 学苑出版社，2010: 40．［18］ 李佳蔚，周婉，李俊松．《中华人民共和国药典》中肉苁蓉的基源考证［J］．中华中医药学刊，2014，32( 7) : 1756-1760．［19］ 谢静霞，潘伯荣．德赢vwin登录 研究现状［J］．中国生态农业学报，2004，12( 3) : 201-202．［20］ 罗光明，黄远亮．肉苁蓉松果菊苷药理作用研究进展［J］．亚太传统医药，2014，9( 17) : 58-60．［21］ 汤小蕾．HPLC 法测定德赢vwin登录 中松果菊苷和麦角甾苷的含量［J］．中国药师，2009，12( 8) : 1061-1063．［22］ 宝山，鞠爱华，肖志彬．德赢vwin登录 中松果菊苷和麦角甾苷含量测定［J］．中医药导报，2017，23( 19) : 39-44．［23］ 钱浩，喻芳君，耿宗成，等．不同季节采收的肉苁蓉中4 种苯乙醇苷的含量比较研究［J］．药物分析杂志，2016，36( 11) : 1971-1975．［24］ 郭卫红．不同产地肉苁蓉中麦角甾苷含量测定［J］．世界中西医结合杂志，2014，9( 5) : 496-497．［25］ 纪旭．甜菜碱研究应用概述［J］． 畜牧兽医科技信息，2004，18( 8) : 58．［26］ 欧阳杰，赵兵，王晓东等．肉苁蓉有效成分提取集成方法的研究［J］．武汉植物学研究，2003，21( 6) : 526-530．［27］ 龚立冬，曹玉华，侯建霞．高效液相色谱蒸发光散射检测法测定肉苁蓉中的甜菜碱［J］． 色谱，2007，25 ( 2) :280-281．［28］ 陈卫军，贾翠玉，李连疆，等．新疆德赢vwin登录 不同炮制方法对甜菜碱含量的影响［J］．农垦医学，2009，31( 5) :400-402．［29］ 赵奎君，梁丽娟，毕丹，等．HPLC-ELSD 测定肉苁蓉及德赢vwin登录 中半乳糖醇含量［J］． 中国中医药信息杂志，2012，19( 8) : 52-54．［30］ 吴晓春，史颖．肉苁蓉的研究与临床应用［J］．甘肃中医，2007，20( 12) : 49-51．［31］ 陈君，彭艳丽．肉苁蓉多糖药理作用研究概况［J］．食品与药品，2015，17( 2) : 136-139．［32］ 杨太新，杜艳华，刘金娜，等．华北平原德赢vwin登录 中多糖的含量分析［J］． 时珍国医国药，2013，24 ( 5 ) :1149-1150．［33］ 麻景梅，宋新波，张丽娟，等．肉苁蓉多糖含量测定［J］．辽宁中医药大学学报，2012，8( 8) : 100-101．［34］ 赵国丁，荀雅书，董慧清，等．肉苁蓉中多糖的提取及含量测定［J］．内蒙古医学院学报，2000，22( 3) : 188-189．［35］ 张洪泉，张爱香，堵年生，等．肉苁蓉对小白鼠免疫功能的影响［J］．中西医结合杂志，1988，8( 12) : 736-737．［36］ 曾群力，毛俊浩，吕志良．肉从蓉多糖的纯化及其对T 细胞功能调节的研究［J］． 浙江医科大学学报，1998，27( 3) : 108-111．［37］ 宗桂珍，何伟，吴桂兰，等．不同品种肉苁蓉药材一些药理作用的比较［J］．中国中药杂志，1996，21( 7) 436-437．［38］ 蒲小平，李晓蓉，李慧浓，等．肉苁蓉成分campneosideⅡ对神经毒素MPP+诱发细胞凋亡的保护作用［J］．北京大学学报: 医学版，2001，33( 3) : 217．［39］ 王虎，李文伟，蔡定芳，等．肉从蓉提取物对帕金森病细胞损伤模型的保护作用［J］． 中西医结合学报，2007，5( 4) : 407-411．［40］ 邓敏，鞠晓东，屠鹏飞，等． 管花苷B 对抗H2 O2诱导的PC12 细胞凋亡［J］． 中国病理生理杂志，2008，24( 9) :1816-1821．［41］ 张勇，吴焕，王顺年，等．肉苁蓉类药材及其炮制品通便作用的比较研究［J］．中成药，1993，15( 5) : 20-21．［42］ 高云佳，姜勇，戴昉，等．肉苁蓉润肠通便的药效物质研究［J］．中国现代中药，2015，17( 4) : 307-310．［43］ 吴波，顾少菊，傅玉梅，等．肉苁蓉和德赢vwin登录 通便与补肾壮阳药理作用的研究［J］． 中医药学刊，2003，21( 4) : 539-548．［44］ 刘铭庭，刘渠华． 德赢vwin登录 大面积人工种植获得成功［G］．中国植物学会七十周年年会论文摘要汇编( 1933—2003) ，2003: 491．［45］ 古丽努尔，玉米提·哈里克，艾尔肯·买提肉孜，等．德赢vwin登录 高产稳产栽培技术研究［J］． 安徽农业科学，2012，40( 2) : 755-757．［46］ 李俊松，姚仲青，俞明霞． 肉苁蓉及其易混品鉴别研究［J］．时珍国医国药，2000，11( 4) : 317-318．

摘要: 目的探讨肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能的影响。方法54 只SD 大鼠随机分为正常组、模型组、肉苁蓉多糖组。除正常组外，其他组建立气管切开插管留置大鼠模型。造模6 小时后肉苁蓉多糖组用肉苁蓉多糖灌胃，正常组和模型组予等量生理盐水灌胃，均每日1 次。造模后第24 小时、72 小时、168 小时三个时段取材，并检测大鼠肺组织β － 防御素－ 2( rBD2) mＲNA 表达、肺泡灌洗液分泌性免疫球蛋白A( sIgA) 及外周血IL － 2、IL － 6 的含量。结果( 1) 与正常组比较，模型组大鼠rBD2 mＲNA 表达在气管切开插管留置第24 小时明显升高，随后明显下降，第168 小时降到最低点( P ＜ 0． 05) 。与模型组比较，肉苁蓉多糖组大鼠rBD2 mＲNA 表达在第24 小时降低，第72 小时、168 小时明显升高( P ＜ 0． 05) 。( 2) 与正常组比较，模型组大鼠肺泡灌洗液sIgA 含量在气管切开插管留置第24 小时明显升高( P ＜0． 05) ，在第72 小时开始下降，逐渐回落至正常组水平。与模型组比较，肉苁蓉多糖组大鼠sIgA 含量在第72 及168 小时明显升高( P ＜ 0． 05) 。( 3) 与正常组比较，模型组大鼠IL － 2 含量在第72 小时升高( P ＜ 0． 05) ，其余时间段无明显改变( P ＞ 0． 05) 。与模型组比较，肉苁蓉多糖组大鼠IL － 2 含量在第24 小时即明显升高，第72 小时继续升高，在第168 小时达到高峰。( 4) 与正常组比较，模型组大鼠IL － 6 含量在第24 小时出现明显升高( P ＜ 0． 05) ，在第72 小时稍有下降，在第168 小时无明显变化( P ＞ 0． 05) 。与模型组比较，肉苁蓉多糖用药大鼠外周血IL － 6 水平在第24 小时即显著降低，随后逐渐降低，至第168 小时达最低值( P ＜ 0． 05) 。结论肉苁蓉多糖能够改善气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能。关键词: 肉苁蓉多糖; 气管切开插管; 肺部免疫功能; β － 防御素－ 2作为肉苁蓉的主要有效成分，肉苁蓉多糖具有调节内分泌［1］、增强吞噬细胞活性、促进淋巴细胞增殖［2］、抗氧化、抗衰老［3］等诸多药理作用。我们前期研究发现，补肾阳中药肉苁蓉能够提高气管切开插管留置大鼠肺泡灌洗液肺泡表面活性物质相关蛋白A( SP － A) 的浓度，减轻肺部病理改变［4］。然而，关于肉苁蓉多糖对肺部免疫功能的影响目前尚未见相关报道。因此，本课题试图通过动态观察大鼠肺组织rBD2、肺泡灌洗液sIgA 及外周血IL － 2、IL － 6 等指标，探讨肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能的影响。1 材料与方法1． 1 主要试剂和仪器提取总ＲNA 试剂盒、逆转录试剂盒及PCＲ 试剂盒均购自TAKAＲA 公司。IL － 2、IL － 6 、sIgA，ELISA 试剂盒均购自上海源叶生物科技有限公司; 肉苁蓉多糖( 批号:C23J7Y18405) 购自上海源叶生物科技有限公司。酶标仪( Model550 BIO ＲAD，美国BIO － ＲAD 公司) ，分光光度计( NanoDrop，T小时ermo Scientific 公司，美国) ，Ｒeal － Time PCＲ 仪( FAST7500，美国AB 公司) 。1． 2 实验动物及分组54 只雄性SPF 级SD 大鼠，体重( 250 ±20) g，均由广西医科大学实验动物中心提供( 动物生产许可证号: SCXK 桂2014 － 0002，动物使用许可证号SYXK 桂2014 －0003) 。将大鼠随机分成正常组、模型组、肉苁蓉多糖组，每组18只。模型组和肉苁蓉多糖组大鼠均建立气管切开插管大鼠模型，正常组大鼠不作处理。1． 3 气管切开插管大鼠模型的制备采用一次性硬膜外麻醉导管制作气管切开插管留置大鼠模型［5］。大鼠称重，麻醉后，暴露气管，作一“V”字型切口，将导管送入气管中约15 ～ 20mm，缝合消毒。气管外预留导管15 ～ 20mm，绑线固定; 定时检测导管与外界通气情况以及导管内分泌物情况，确保其通气良好，定时消毒切口。1． 4 给药剂量与方法用温水将肉苁蓉多糖粉末状溶解成含药浓度为3． 492ng /mL 的肉苁蓉多糖水溶液。参照徐叔云［6］《药理实验方法学》换算动物剂量公式计算得出每只大鼠给药剂量为50mg /( kg·d) 。因此肉苁蓉多糖组大鼠给予肉苁蓉多糖水溶液灌胃，剂量3mL/d; 正常组及模型组大鼠予以等量生理盐水灌胃，均每日1 次，连续7 天。1． 5 取材分别于造模成功后24 小时、72 小时、168 小时，每组各取6 只大鼠，用10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠( 3． 5mL/kg) ，麻醉成功后，经腹主动脉采血3mL，置于普通干燥管中，用于测定血清IL － 2 和IL － 6 水平。取材时结扎右肺，于左肺取肺泡灌洗液，用5mL 冰冻灭菌生理盐水灌洗，反复灌洗3 次，回收约3mL;上述过程重复3 次，共回收9mL，用于检测肺泡灌洗液sIgA 含量; 在4℃，离心10min( 2400 r /min) ，取上清液，置于－ 20℃冰箱中保存。开胸，取右肺中叶组织100mg，分装，迅速置于液氮中，后转移至－ 80 ℃冰箱中保存，用于测定肺组织rBD2 mＲNA 表达。1． 6 观察指标与检测rBD2 mＲNA 水平的测定: 取肺组织标本，研碎，加入ＲNA 提取试剂ＲNAiso PLUS，按说明书提取肺组织总ＲNA; 然后进行逆转录合成cDNA，通过检索基因库，设计并合成出引物( 引物序列见表1) ，由实时荧光定量PCＲ 扩增，并检测rBD2 mＲNA 的相对表达量。肺泡灌洗液sIgA、外周血IL － 6、IL － 2 含量的测定: 均采用多抗体夹心法ELISA 法检测。按照试剂盒说明书进行检测。1． 7 统计学方法采用SPSS 22． 0 统计软件进行数据分析，计量资料以珋x ± s 表示，满足正态分布和方差齐性资料，采用单因素方差分析( one － way ANOVA) ，组间两两比较采用LSD 法、Dunnett＇3 法，以P ＜ 0． 05 为差异有统计学意义。2 结果2． 1 大鼠肺组织rBD2 mＲNA 相对表达量( 2 －△△CT ) 正常组大鼠肺组织rBD2 mＲNA 相对表达量在3 个时间段无统计学差异。与正常组比较，气管切开后，大鼠肺组织rBD2 mＲNA 相对表达量第24 小时明显升高，随后开始下降，至第72 小时表达明显降低，降低程度随着时间延长而逐渐加重，在第168 小时表达下降到最低值( P ＜ 0． 05) 。用肉苁蓉多糖干预后，气管切开插管留置大鼠rBD2 mＲNA 表达量第24 小时表达明显下降，随后逐渐上升，在第168 小时达到最高值( P ＜ 0． 01) 。说明气管切开后，大鼠肺组织rBD2 mＲNA 的表达量立即升高，但随后随时间逐渐下降; 肉苁蓉多糖能够在第168 小时对气管切开插管留置后大鼠肺组织rBD2 mＲNA 的表达起明显促进作用。见表2。2． 2 大鼠肺泡灌洗液sIgA 含量正常组大鼠肺泡灌洗液sIgA 水平在3 个时间段无明显变化。气管切开后，大鼠肺泡灌洗液sIgA含量在第24 小时即明显升高，第72 小时开始下降，第168 小时则明显回落。用肉苁蓉多糖干预后，气管切开插管留置大鼠sIgA水平在第72 小时开始明显上调，并达到高峰( P ＜ 0． 01) ，随后有所下降，但仍明显高于模型组( P ＜ 0． 01) 。说明肉苁蓉多糖可以提高气切后大鼠肺泡灌洗液sIgA 含量，且在第72 小时上调sIgA 含量的效果达到高峰。见表3。2． 3 大鼠外周血IL － 2 含量气管切开后，大鼠外周血IL － 2 水平在第72 小时升高( P ＜ 0． 05 ) ，其余时段无明显改变( P ＞0． 05) 。使用肉苁蓉多糖干预后，气管切开插管留置大鼠外周血IL － 2 含量在第24 小时即明显升高，提高程度与用药时间呈正比，在第168 小时达到高峰( P = 0． 002、0． 000、0． 000) 。提示肉苁蓉多糖对气管切开留置大鼠血清IL － 2 的含量具有明显的上调作用，上调程度随着时间延长而逐渐明显增强。见表4。2． 4 大鼠外周血IL － 6 含量正常组大鼠外周血IL － 6 含量3 个时间段表达无统计学差异。气管切开后大鼠外周血IL － 6 含量在第24 小时即明显升高( P ＜ 0． 01) ，在第72 小时稍有下降，至第168 小时再次回升。用肉苁蓉多糖干预后，其含量在第24 小时即显著降低，在第168 小时达最低值( P 均= 0． 000 ＜ 0． 01) 。提示肉苁蓉多糖可以降低气管切开留置大鼠外周血IL － 6的含量，下降程度随用药时间延长而逐渐明显。见表5。3 讨论肉苁蓉属于补肾阳类中药，最早记载于《神农本草经》，是“上品”类中药，具有补肾壮阳、添精补髓、养血润燥等功效，临床上辨证运用于肾阳不足、精血亏虚、腰膝酸软、肠燥便秘等症。现代药理发现肉苁蓉具有抗氧化、抗衰老、提高机体免疫功能、调节神经内分泌等作用［7］。寻找肉苁蓉发挥作用的有效成分成为目前的课题之一。肉苁蓉多糖属于肉苁蓉主要有效成分之一，具有促进淋巴细胞增殖［8］，改善机体免疫功能，激活免疫细胞、抗氧化、护肝［9］等药理作用。本实验发现，肉苁蓉多糖可以通过上调气管切开插管留置大鼠肺组织rBD2 mＲNA 的表达和肺泡灌洗液sIgA、外周血IL － 2 含量，同时降低外周血IL － 6 的含量，从而达到改善气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能。气管切开后，极易发生肺部感染。炎症因子释放、免疫功能低下是气管切开插管后并发肺部感染的重要因素［10］。rBD2 主要来源于唾液腺导管细胞、呼吸道上皮细胞和一些受病原体刺激的血细胞，并在呼吸道黏膜上皮的防御中起重要作用［11］，其表达水平的高低受微生物及炎症反应的影响，反过来rBD2 的表达也影响机体炎症反应状态［12］。sIgA 主要存在于乳汁、胃肠液、呼吸道分泌液等外分泌液中，是黏膜分泌的最重要的体液免疫分子，具有抗感染保护作用［13］。IL － 2 和IL － 6 均属于免疫系统产生的细胞因子。其中IL － 2 对T 细胞的增殖、分化具有促进作用，其表达的升高能够增强机体细胞免疫功能［14］。而IL － 6 属于促炎因子之一，在病理状态下，其表达的增高能引起免疫性病理损伤，加重炎症反应［15］。本实验结果显示，气管切开插管留置大鼠肺组织rBD2 mＲNA及肺泡灌洗液sIgA 含量的表达量在第24 小时升高，随后开始降低，其中rBD2 mＲNA 的表达在第72 小时显著低于正常大鼠，至第168 小时更加明显。提示气管切开后，大鼠肺部免疫功能在短时间内出现暂时增强，随后肺部免疫功能逐渐降低。这与临床上急重症患者行气管切开术后，患者肺部感染的发生率随时间逐渐增加相一致［16］。张冉令等［17］在对气管切开插管留置大鼠的研究中，发现其研究结果与本实验基本一致。同时，气管切开插管留置大鼠外周血IL － 6 水平在第24 小时即明显升高，72小时稍有下降，第168 小时与正常组大鼠比较无统计学差异，外周血IL － 2 水平在第72 小时升高，其余时段与正常组大鼠比较无统计学差异，提示气管切开后炎症反应出现，可能引发短暂的刺激性免疫应答。在用肉苁蓉多糖干预后，气管切开插管留置大鼠肺组织rBD2、肺泡灌洗液sIgA 及外周血IL － 2 的含量均出现不同程度升高。其中肺组织rBD2 和外周血IL － 2 水平在第24 小时即明显升高，提高程度与用药时间呈正比，在第168 小时达到高峰，而肺泡灌洗液sIgA 含量在第72 小时达到高峰，与此同时，其外周血IL － 6 含量在第24 小时即显著降低，降低程度与用药时间呈正比，在第168 小时降至最低。这个结果提示，肉苁蓉多糖可能是从两个方面调节大鼠肺部免疫功能，其一是通过促进rBD2、sIgA及IL － 2 等含量的表达，增强肺部免疫功能，其二则通过降低外周血IL － 6 的水平抑制炎症反应，进一步改善气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能。参考文献:［1］ 张娜娜． 肉苁蓉多糖对更年期高血压燥证大鼠内分泌功能调节的研究［J］． 中医药学报，2018，46( 1) : 65．［2］ 张涛，许文胜，贾彦斌，等． 肉苁蓉多糖对THP － 1 细胞吞噬作用的影响及其机理研究［J］． 生命科学研究，2013，17( 2) : 148．［3］ 马慧，尹若熙，郭敏，等． 肉苁蓉多糖对D － 半乳糖致衰老模型小鼠CＲEB 表达的影响［J］． 中国实验方剂学杂志，2014，20( 20) :137．［4］ 黄文川，潘宇政，张冉令，等． 肉苁蓉对气管切开插管大鼠肺部病理及肺泡灌洗液SP － A 浓度的影响［J］． 辽宁中医杂志，2016，43( 11) : 2436．［5］ 朱翠香，彭玲玲，潘宇政． 一次性硬膜外麻醉导管气管切开插管留置大鼠模型建立［J］． 中华实验外科杂志，2015，10( 32) : 2480．［6］ 徐叔云． 药理实验方法学3 版． ［M］． 北京: 人民卫生出版社，2001: 202．［7］ 薛海燕，焦婵媛，姚军． 肉苁蓉总苷药理作用的研究现状［J］． 中国临床药理学杂志，2018，34( 4) : 486．［8］ 曾群力，郑一凡，吕志良． 肉苁蓉多糖的免疫活性作用及机制［J］．浙江大学学报( 医学版) ，2002，31( 4) : 60．［9］ Guo Y，Cao L，Zhao Q，et al． Preliminary characterizations，antioxidantand hepatoprotective activity of polysaccharide from Cistanche deserticola［J］． Int J Biol Macromol，2016，93( Pt A) : 678．［10］ 张冉令，潘宇政，黄文川，等． 骨碎补对气管切开插管留置套管大鼠外周血β － 防御素－ 2 及IL － 2 和肺泡灌洗液sIgA 的干预作用［J］． 中华中医药杂志，2017，32( 4) : 1712．［11］ Abiko Y，Saitoh M． Salivary defensins and their importance in oralhealth and disease［J］． Curr Pharm Des， 2007，13( 30) : 3065．［12］ Masuda N，Mantani Y，Yuasa H，et al． Immunohistochemical study onthe distribution of β － defensin 1 and β － defensin 2 throughout the respiratorytract of healthy rats［J］． Vet Med Sci，2018，80( 3) : 395．［13］ Moraes H，Aoki MS，Freitas CG，et al． SIgA response and incidence ofupper respiratory tract infections during intensified training in youthbasketball players［J］． Biol Sport， 2017，34( 1) : 49．［14］ van Brummelen EMJ，huisman MC，de Wit － van der Veen LJ，et al．Zr － labeled CEA － targeted IL － 2 variant immunocytokine in patientswith solid tumors: CEA － mediated tumor accumulation and role of IL －2 receptor － binding［J］． Oncotarget， 2018，9( 37) : 24737．［15］ Norelli M，Camisa B，Barbiera G，et al． Monocyte － derived IL － 1and IL － 6 are differentially required for cytokine － release syndromeand neurotoxicity due to CAＲ T cells［J］． Nat Med， 2018，24( 6) : 739．［16］ 曾上飞，王丹丹，朱国文，等． 颅内血肿清除术后气管切开患者肺部感染因素研究［J］． 中华医院感染学杂志，2017，27( 2) : 359．［17］ 张冉令，潘宇政，黄文川，等． 基于β － 防御素－ 2 的中药骨碎补对气管切开留置气管套大鼠肺部免疫功能的干预作用［J］． 时珍国医国药，2016，27( 10) : 2365．

摘要: 目的: 观察肉苁蓉对帕金森病( PD) 模型大鼠行为学及中脑黑质－ 纹状体组织PI3K、Akt、Bcl － 2、Bax 蛋白表达的影响，探讨其对神经细胞的保护作用机制。方法: 将48 只健康SD 雄性大鼠随机分为正常组、溶剂对照组、模型组、肉苁蓉低、中、高剂量组6 组，采用颈背部皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液建立PD 大鼠模型，给予肉苁蓉水煎剂后，第3、7、14 天分别进行行为学步幅试验; 第14 天行为学检测后，处死大鼠，提取黑质－ 纹状体蛋白，Western Blot 检测PI3K、Akt、Bcl － 2、Bax 蛋白的表达。结果: 肉苁蓉干预14 天后，与模型组比较，中、高剂量组步幅明显增大( P ＜ 0． 01) ，低、中、高剂量组PI3K、Bcl － 2 蛋白表达、Bcl－ 2 /Bax 值明显升高( P ＜ 0． 01 或P ＜ 0． 05) ，中剂量组Akt 蛋白表达明显升高( P ＜ 0． 01) ，低、中、高剂量组Bax 表达明显降低( P ＜ 0． 01) 。结论: 肉苁蓉能改善帕金森病模型大鼠的行为障碍，其对多巴胺神经细胞的保护作用可能是通过影响PI3K/Akt信号通路，上调Bcl － 2 表达，下调Bax 表达，升高Bcl － 2 /Bax 值，进而抑制神经细胞的凋亡实现的。关键词: 帕金森病; 肉苁蓉; 行为学; PI3K/Akt 信号通路; Bcl － 2; Bax; Bcl － 2 /Bax帕金森病( Parkinson’s disease，PD) 的主要病理特征是黑质纹状体致密部多巴胺能神经元进行性丢失，其发病的重要机制之一是多巴胺能神经细胞的凋亡［1］。在细胞凋亡机制涉及的众多信号转导通路中，PI3K/ Akt 因参与调控凋亡蛋白和凋亡基因发挥抑制细胞凋亡的作用而受到重视［2］。已有研究表明，多种PD 模型及PD 患者均存在PI3K/ Akt信号通路的减弱或异常调节［3 － 4］。肉苁蓉( Herba Cistanche) 为肉苁蓉属植物干燥带鳞叶的肉质茎，能补肾阳、益精血，被誉为“沙漠人参”。本课题组前期研究发现肉苁蓉能调节多巴胺能神经细胞凋亡因子的表达，减轻多巴胺能神经细胞的凋亡［5］。但是肉苁蓉是否通过PI3K/Akt 通路发挥神经保护作用尚需进一步探讨。本实验通过观察肉苁蓉对PD 模型大鼠行为学以及黑质纹状体中PI3K、Akt、Bcl － 2、Bax 蛋白表达的影响，探讨肉苁蓉减轻多巴胺神经细胞凋亡的机制。1 材料1． 1 实验动物福建中医药大学实验动物中心提供实验动物和普通级医学实验动物环境设施，实验动物合格证号为SCXK2014 － 0012，具体为SD 健康雄性大鼠( SPF 级) ，6 ～ 7 周龄，数量48 只，每只体重( 210 ± 30) g。1． 2 试剂与仪器肉苁蓉颗粒剂( 福建中医药大学附属第三人民医院) ; 鱼藤酮( 美国Sigma 公司，批号Ｒ3875) ; 葵籽油( 美国Sigma 公司，批号S5007) ;PI3K 抗体( 美国CST 公司，批号19H8) ; Akt 抗体( 武汉三鹰，批号66009 － 1: ) ; Bcl － 2 抗体( 美国CST 公司，批号15071: ) ; Bax 抗体( 美国CST 公司，批号5023: ) ; β － actin( 武汉三鹰，批号60203) ; 电泳槽与转膜仪( 美国Bio － Ｒad 公司) ; 5417Ｒ 高速冷冻离心机( 德国Eppendorf 公司) ; DU － 650 型蛋白分析仪( 美国Beckman 公司) ; Gel DOC 2000 型凝胶成像分析系统( 美国Bio － Ｒad 公司) 。2 方法2． 1 分组6 ～ 7 周龄的SPF 级SD 雄性大鼠48只，随机法分为正常组、溶剂对照组、模型组以及肉苁蓉低、中、高剂量组，每组各8 只。普通环境饲养，自由饮水。2． 2 造模与干预溶剂对照组给予颈背部皮下注射葵花油乳化液( 1． 5 mg /kg /d) ，1次/d，连续14d;模型组、肉苁蓉低、中、高剂量组颈背部皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液( 1． 5 mg /kg /d) 建立PD 模型，注射7d 休息1 天，共15d，造模结束后按照行为评分标准选取造模成功的大鼠( 造模方法及行为评分标准均参照陈忻等［6］的方法) 。造模成功后，肉苁蓉低、中、高剂量组分别给予0． 54 g /kg /d、1． 08 g /kg /d、2． 16 g /kg /d 肉苁蓉水煎剂灌胃( 肉苁蓉低、中、高剂量根据课题组前期实验的结果确定［15］) ，1次/d，连续14d。正常组、溶剂对照组及模型组给予等体积生理盐水灌胃，频次同肉苁蓉组。给药剂量均按人和大鼠间体表面积折算的等效剂量给药。2． 3 行为学检测各组进行肉苁蓉干预后，分别在第3、7、14 天进行行为学的步幅试验，同时记录相应的数据。步幅试验操作方法如下: 制作不透光的木盒子，带有长42 cm，宽4． 5 cm，高10 cm 的跑道，在跑道上放置宽4． 5 cm，长40 cm 的白纸。将大鼠的前爪涂上墨水，训练大鼠在跑道上行走并让其穿过盒子，测量白纸上大鼠2 个前爪印记之间的距离( 取脚印的中心) ，此即步幅。每次测量3 个最长的步幅( 对应大鼠行走的最大速度) 。若出现大鼠在行走过程中停止，或者有明显减速的情形，则重新进行测试。2． 4 实验取材最后一次给药的12h 后，从每组中随机抽取6 只大鼠，采用乙醚麻醉，迅速断头处理，于冰盘上提取以中脑黑质为主的脑组织，脑组织表面的血液用冰0． 9% 氯化钠溶液冲洗干净，残余液体用滤纸吸干，置于－ 80 ℃冰箱保存备用。2． 5 提取蛋白将样品从－ 80 ℃冰箱中取出，称重后放入研磨器研碎，按12． 5μL /mg 加入ＲIＲA 裂解液，冰上裂解30min，使用1mL 注射器反复抽吸20 次。接着将样品放入4℃ 离心机中离心15min，离心机转速为12000r /min，之后每组样品各吸取30μL 上清液到新的离心管中，用BCA 法测定蛋白浓度，其余上清液以4∶ 1的比例加入5 × buffer 溶液，混合均匀后，在水浴锅中煮沸10min，之后置于－80℃冰箱备用。2． 6 Western Blot 法检测PI3K、Akt、Bcl － 2、Bax 蛋白表达将各组蛋白浓度总量调整为30μg /μL，将样品加入到10%的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳，转膜至PVDF 膜后，按1 ∶ 1000 的稀释比例加入一抗PI3K、Akt、Bcl － 2、Bax。隔天取出条带用二抗( 1 ∶2000) 孵育1h，TBST 清洗后，采用ECL 试剂盒显影并成像，用Image Lab 软件进行半定量分析，并记录相应条带的灰度值。2． 7 统计学分析本实验数据计量资料用珋x ± s( 均数± 标准差) 表示，组间比较采用重复测量方差分析或者单因素方差分析; 组间进行两两比较，方差齐则采用LSD 法，方差不齐则采用Games － Howell法。采用SPSS 22． 0 统计学软件进行分析处理。P＜ 0． 05 表示差异有统计学意义。3 结果3． 1 6 组大鼠步幅比较肉苁蓉干预后第3、7、14天，模型组大鼠步幅比正常组明显下降( P ＜ 0． 01) ;肉苁蓉给药后各组步幅有显著性差异，其中肉苁蓉干预第7 天，高剂量组步幅较模型组有显著增加( P＜ 0． 01) ; 而肉苁蓉干预14 天后，中、高剂量组步幅较模型组均出现明显增长( P ＜ 0． 01) 。见表1。3． 2 6 组大鼠黑质纹状体PI3K、Akt、Bcl － 2、Bax 蛋白表达及Bcl － 2 /Bax 值比较与正常组比较，模型组PI3K、Akt、Bcl － 2 蛋白表达、Bcl － 2 /Bax 值均明显降低( P ＜ 0． 01 或P ＜ 0． 05) ，Bax 蛋白表达显著升高( P ＜ 0． 01) 。而与模型组相比，肉苁蓉低、中、高剂量组PI3K 表达明显升高( P ＜ 0． 01 或P ＜0. 05) ，中剂量组Akt 明显升高( P ＜ 0． 01) ，低、中、高剂量组Bcl － 2 蛋白表达、Bcl － 2 /Bax 值均显著升高( P ＜ 0． 01) ，Bax 蛋白表达明显降低( P ＜ 0． 01) 。见表2、图1。4 讨论PD 是一种常见的神经系统退行性疾病，主要的发病机制是多巴胺能神经细胞的凋亡，有效抑制或减少细胞凋亡是实现神经保护的重要手段。中医理论认为，PD 虽然病位在脑，但是病机实为肾虚髓空，可通过补益肾脏来濡养脑髓。而肉苁蓉性甘、咸，温; 归肾、大肠经; 补肾阳，益精血，润肠通便，是传统补肾中药［7］。现有的研究已表明，肉苁蓉可以抗氧化、抗衰老，能够提高细胞中多种中枢神经递质的含量，起到神经保护作用［8］。本课题组前期研究也发现多味补肾中药如淫羊藿、菟丝子、肉苁蓉等均可增加细胞中神经营养因子含量，减少相关神经凋亡因子含量，从而抑制多巴胺神经细胞的凋亡，其中又以肉苁蓉作用最为突出［9］。PI3K/Akt 是一条经典的细胞信号转导通路，在神经系统中广泛存在，PI3K/AKT 激活后可以调节其下游的凋亡相关蛋白，如Bcl － 2 蛋白和Bax 蛋白，使Bcl － 2 /Bax 值升高，发挥抑制神经细胞凋亡的作用［10 － 14］。本实验结果发现，肉苁蓉干预后第7天，高剂量组步幅较模型组有显著增加，而肉苁蓉干预后第14 天，中、高剂量组的步幅均出现明显增长，提示一定剂量的肉苁蓉作用一段时间后能改善PD模型大鼠的行为障碍，这与本课题组之前的研究结论一致［15］。同时Western Blot 结果显示，模型组PI3K、Akt、Bcl － 2 表达、Bcl － 2 /Bax 值均较正常组显著降低，Bax 表达较正常组升高; 给予肉苁蓉后，与模型组相比，给药组PI3K、Akt、Bcl － 2 表达、Bcl－ 2 /Bax 值升高，Bax 水平降低，提示肉苁蓉可能是通过影响PI3K/Akt 信号通路，增加Bcl － 2 表达、降低Bax 表达，从而升高Bcl － 2 /Bax 比值，减轻神经细胞凋亡来发挥神经保护作用的。本次实验还发现肉苁蓉中剂量组无论是步幅实验，还是PI3K、Akt、Bcl － 2、Bax 的蛋白表达的变化均表现明显，可考虑将这个剂量作为下一步实验的最适浓度。另外，由于要确定肉苁蓉对PI3K/Akt 通路的激活作用，需要使用通路抑制剂进行研究，这可作为下一步深入探讨机制的思路。参考文献［1］Bonilla － Porras AＲ，Arevalo － Arbelaez A，Alzate － Ｒestrepo JF，etal． PAＲKIN overexpression in human mesenchymal stromal cellsfrom Wharton＇s jelly suppresses 6 － hydroxydopamine － induced apoptosis:Potential therapeutic strategy in Parkinson＇s disease［J］． Cytotherapy，2017，20( 1) : 45 － 61．［2］Wang J，Liu H，Zhang X，et al． Sulfated Hetero － PolysaccharidesProtect SH － SY5Y Cells from H2O2 － Induced Apoptosis by Affectingthe PI3K/Akt Signaling Pathway［J］． Mar Drugs，2017，15( 4) :110．［3］Chen WF，Wu L，Du ZＲ， et al． Neuroprotective properties of icariin inMPTP － induced mouse model of Parkinson＇s disease: Involvement ofPI3K/Akt and MEK/EＲK signaling pathways［J］． Phytomedicine，2016，25: 93 － 99．［4］Yal nkaya N，Haytural H，Bilgi B， et al． Expression changes of genesassociated with apoptosis and survival processes in Parkinson＇s disease［J］． Neurosci Lett，2016，615: 72 － 77．［5］Shaogang，Shuifen， Jinmu， et al． How do Chinese medicines that tonifythe kidney inhibit dopaminergic neuron apoptosis［J］． Neural ＲegenerationＲesearch，2013，8( 30) : 2 820 － 2 826．［6］陈忻，张楠，赵晖，等． 鱼藤酮致帕金森病大鼠行为学与黑质病理损伤的关系［J］． 中国神经精神疾病杂志，2008，34 ( 4) : 232 －234．［7］Chinese Pharmacopoeia Commission． Pharmacopoeia of the People＇sＲepublic of China( I) ［S］． Beijing: Chemical Industry Press，2015:135．［8］Zhang K，Ma X，He W，et al． Extracts of Cistanche deserticola CanAntagonize Immunosenescence and Extend Life Span in Senescence－ Accelerated Mouse Prone 8 ( SAM － P8) Mice［J］． Evidence －based Complementary and Alternative Medicine，2014，2014 ( 2 ) :601 383．［9］林少刚． 补肾中药干预MES23． 5 多巴胺能神经细胞凋亡的研究［D］． 福州: 福建中医药大学，2012．［10］Lai Z，Zhang L，Su J，et al． Sevoflurane postconditioning improveslong － term learning and memory of neonatal hypoxia － ischemiabrain damage rats via the PI3K/Akt － MPTP pathway［J］． BrainＲes， 2015，1630: 25 － 37．［11］Zhang J，Tong W，Sun H，et al． Nrf2 － mediated neuroprotection byMANF against 6 － OHDA － induced cell damage via PI3K/AKT /GSK3β pathway［J］． Exp Gerontol， 2017，100: 77 － 86．［12］Kim SM，Park YJ，Shin MS，et a． Acacetin inhibits neuronal celldeath induced by 6 － hydroxydopamine in cellular Parkinson＇s diseasemodel［J］． Bioorg Med Chem Lett，2017，27 ( 23) : 5 207 － 5212．［13］B D＇Orsi，J Mateyka， JH Prehn． Control of mitochondrial physiologyand cell death by the Bcl － 2 family proteins Bax and Bok［J］． NeurochemistryInternational，2017， 109: 162 － 170．［14］Ke K，Lou T． MicroＲNA － 10a suppresses breast cancer progressionvia PI3K/Akt /mTOＲ pathway［J］． Oncol Lett，2017，14( 5) : 5 994－ 6 000．［15］Yang S S，Qin W，Chen S Y， et al． Effects of cistanche deserticola onbehavior and expression of GSK － 3β in hippocampus of rat model ofparkinson＇s disease［J］． Ｒehabilitation Medicine，2016，26 ( 6) : 24－ 27 + 33．

摘要: 目的探讨肉苁蓉对卵巢早衰大鼠免疫因子和凋亡相关蛋白的影响及其作用机制。方法按照体重将SD 大鼠随机分为5 组: 正常组、模型组和低、中、高3 个剂量实验组，每组10 只。用雷公藤多苷50 μg·g － 1给予大鼠制备卵巢早衰大鼠模型。低、中、高3 个剂量实验组分别给予5， 10， 20 g·kg － 1 肉苁蓉。用酶联免疫吸附法检测大鼠促卵泡激素( FSH) 、雌激素和抗苗勒管激素( AMH) 水平; 以实时定量聚合酶链反应检测肿瘤坏死因子－ α( TNF － α) 和干扰素－ γ( IFN － γ) 的基因相对表达水平; 以免疫印迹法检测B 淋巴细胞瘤－ 2( Bcl － 2)和B 淋巴细胞瘤－ 2 相关X 蛋白( Bax) 蛋白相对表达水平。结果正常组、模型组和低、中、高3 个剂量实验组的FSH 水平分别为( 16. 42 ± 1. 76 ) ，( 31. 83 ± 2. 67) ，( 25. 89 ± 2. 48) ，( 23. 73 ± 2. 05) 和( 21. 55 ± 2. 94) U·L － 1 ; 上述这5 组的雌激素水平分别为( 97. 64 ± 7. 85) ，( 53. 47 ± 6. 98) ，( 89. 56 ± 7. 28) ，( 93. 35 ± 6. 29) 和( 92. 45 ± 5. 60) ng·L － 1 ; 上述这5 组的AMH 水平分别为( 280. 84 ± 22. 42) ，( 149. 35 ± 14. 57) ，( 231. 71 ± 27. 38) ，( 253. 33 ± 27. 36) 和( 265. 64 ± 25. 34) pg·mL － 1 ; 上述这5 组的TNF － α 基因的相对表达水平分别为1. 00 ± 0. 00， 3. 54 ± 0. 35， 2. 41 ± 0. 27， 2. 32 ± 0. 25 和2. 13 ± 0. 21; 上述这5 组的IFN － γ 基因的相对表达水平分别为1. 00 ± 0. 00，4. 45 ± 0. 98，2. 93 ± 0. 31，2. 85 ± 0. 29和2. 67 ± 0. 26; 上述这5 组的Bcl － 2 蛋白的相对表达水平分别为0. 72 ± 0. 05， 0. 28 ± 0. 04， 0. 42 ± 0. 04， 0. 51 ± 0. 06 和0. 64 ± 0. 07; 上述这5 组的Bax 蛋白的相对表达水平分别为0. 48 ± 0. 04，1. 05 ± 0. 07，0. 86 ± 0. 08，0. 69 ± 0. 07和0. 53 ± 0. 06。模型组与正常组比较，或者低、中、高3 个剂量实验组与模型组比较，差异均有统计学意义( 均P ＜ 0. 05) 。结论肉苁蓉能够调控FSH、雌激素和AMH 的水平，抑制TNF － α 和IFN － γ 基因的表达，其可能通过调控性激素因子及Bcl － 2 /Bax 蛋白的平衡从而影响卵巢早衰。关键词: 肉苁蓉; 卵巢早衰; 免疫因子; B 淋巴细胞瘤－ 2; B 淋巴细胞瘤－ 2 相关X 蛋白卵巢早衰( premature ovarian failure，POF) 是指卵巢内激素水平不平衡导致的卵巢功能障碍［1］。卵巢颗粒细胞的凋亡和细胞免疫因子均与POF 的发生密切相关［2］。肉苁蓉( CistanchesHerba，CH) 可以通过清除胚胎体外培养产生的自由基，提高胚胎体外发育率［3］。本实验研究肉苁蓉对POF 大鼠免疫因子和凋亡相关蛋白的影响及其作用机制。材料与方法1 材料动物SPF 级12 周龄的SD 雌性大鼠，体重250 g左右，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。动物许可证号: SCXK( 沪) 2007 － 0005。药品与试剂肉苁蓉药材，购自承德医学院附属医院附属中药房同济大药房药剂科，经陕西中医药大学丁延平教授鉴定确为肉苁蓉，参考杨志蓉等［3］方法，制成剂量为50 mg·mL － 1 肉苁蓉溶液) 。实时荧光定量聚合酶链反应( qＲT － PCＲ) 试剂盒，购自南京Vazyme 生物公司; 免疫组化所用试剂，购自福州迈新公司; 二辛可酸( BCA) 试剂盒，购自碧云天生物技术研究所。仪器荧光显微镜，德国ZIESS 公司产品;Multiskan MK3 酶标仪，美国Thermo 公司产品。2 实验方法2. 1 POF 大鼠模型的制备［4］大鼠用雷公藤多苷50 μg·g － 1 连续灌胃14 d，建立POF 大鼠模型。2. 2 分组与给药［3 － 4］将造模成功大鼠随机分为4 组: 模型组和低、中、高3 个剂量实验组，每组10 只。10 只正常SD 大鼠作为正常组。于造模结束后24 h，低、中、高3 个剂量实验组分别给予5，10，20 g·kg － 1肉苁蓉，连续灌服20 d。模型组与正常组大鼠自由饮水。自中药灌胃第11 天起，每日进行大鼠阴道脱落细胞涂片观察，连续10 d，观察并记录大鼠动情周期。2. 3 以酶联免疫吸附法( ELISA) 检测促卵泡激素( FSH) 、雌激素和抗苗勒管激素( AMH) 水平［4］分组与处置见“2. 2”。大鼠于间情期，腹主动脉取血，静置30 min，以3000 r·min － 1 离心，取上清液，按照ELISA 试剂盒说明书要求，于酶标仪450 nm 波长处测定光密度( OD) 值，即代表FSH、雌激素和AMH水平。2. 4 以qＲT － PCＲ 测定肿瘤坏死因子－ α( TNF － α) 、干扰素－ γ( IFN － γ) 、B 淋巴细胞瘤－ 2( Bcl －2) 和B 淋巴细胞瘤－ 2 相关X 蛋白( Bax) 基因的表达水平［5］分组与处置见“2. 2”。提取卵巢组织总ＲNA，逆转录成cDNA 后，按照qPCＲ 说明书进行qＲT － PCＲ扩增。循环条件: 95 ℃ 30 s，60 ℃ 30 s; 72 ℃ 30 s，共40 个循环; 60 ℃ 延长5 min; 基因的相对表达量用2 －△△Ct法计算。2. 5 以免疫印迹法检测Bcl －2 和Bax 蛋白表达［5］分组与处置见2. 2。提取各组卵巢组织蛋白，定量。按照文献方法操作。成像后，用Quantity One 凝胶分析软件处理，测定各组蛋白条带的OD 值，以目的条带和β － actin 条带的比值作为蛋白表达水平。2. 6 以免疫组化染色检测TNF － α 和IFN － γ 蛋白表达水平［4］分组与处置见“2. 2”。腹主动脉取血后，即刻剖腹取卵巢，置于4%多聚甲醛液中固定24 h，脱水后石蜡包埋，切片脱蜡，蒸馏水洗2 min，抗原修复，滴加H2O2阻断内源性过氧化物酶，再用血清封闭，清洗3次后，加入一抗孵育30 min 后，4℃过夜。再加酶标二抗，37 ℃孵育20 min; 加二氨基联苯胺显色，苏木素复染，脱水后封片，显微镜下观察染色结果。以TNF － α及IFN － γ 表达的积分OD 值代表其蛋白表达水平，每张切片随机取5 个视野。3 统计学处理用SPSS 20. 00 进行统计学分析。计量资料以珋x ± s表示，2组间比较用t 检验，多组间比较用单因素方差分析。结果1 肉苁蓉对大鼠性激素FSH、雌激素和AMH 水平的影响模型组与正常组比较，FSH 水平明显增加，而雌激素和AMH 水平明显降低，差异均有统计学意义( 均P ＜ 0. 05) ; 低、中、高3 个剂量实验组与模型组比较，上述指标的差异均有统计学意义( 均P ＜ 0. 05) ，见表1。可见，肉苁蓉可降低FSH 的水平，提高雌激素和AMH 的水平。2 肉苁蓉对大鼠TNF － α 和IFN － γ 基因表达的影响模型组与正常组比较，TNF － α 和IFN － γ 基因表达水平均明显增加，差异均有统计学意义( 均P ＜0. 05) ; 低、中、高3 个剂量实验组与模型组比较，上述指标的差异均有统计学意义( 均P ＜ 0. 05) ，见表2。可见，肉苁蓉可抑制TNF － α、IFN － γ 基因的表达。3 肉苁蓉对大鼠TNF － α 和IFN － γ 蛋白的影响模型组与正常组比较，TNF － α 和IFN － γ 蛋白表达水平均明显增加，差异均有统计学意义( 均P ＜ 0. 05) ; 低、中、高3 个剂量实验组与模型组比较，上述指标的差异均有统计学意义( 均P ＜ 0. 05) ，见表3。可见，肉苁蓉可抑制TNF － α 和IFN － γ 蛋白的表达。4 肉苁蓉对大鼠卵巢Bcl －2 和Bax 基因表达的影响模型组与正常组比较，Bcl － 2 基因的表达明显降低，Bax 基因的表达明显增加，差异均有统计学意义( 均P ＜ 0. 05) ; 低、中、高3 个剂量实验组与模型组比较，上述指标的差异均有统计学意义( 均P ＜ 0. 05) ，见表4。可见，肉苁蓉可促进Bcl － 2 基因的表达，却抑制Bax 基因的表达。5 肉苁蓉对大鼠卵巢Bcl － 2、Bax 蛋白表达和Bcl －2 /Bax比值的影响模型组与正常组比较，Bcl － 2 蛋白表达水平和Bcl － 2 /Bax 的比值均明显降低，而Bax 蛋白表达水平明显增加，差异均有统计学意义( 均P ＜ 0. 05) ; 低、中、高3 个剂量实验组与模型组比较，上述指标的差异均有统计学意义( 均P ＜ 0. 05) ，见图1 和表5。可见，肉苁蓉可促进Bcl － 2 蛋白的表达，抑制Bax 蛋白的表达，提高Bcl － 2 /Bax 的比值。讨论卵巢早衰大鼠中IFN － γ 的水平明显升高［6］。本研究结果发现，低、中、高3 个剂量实验组大鼠性激素FSH 含量显著降低，雌激素、AMH 含量显著升高;TNF － α、IFN － γ 和Bax 表达显著降低; Bcl － 2 表达水平显著升高，而Bcl － 2 /Bax 的比值显著升高。由此可见，肉苁蓉可以通过调节大鼠性激素水平，抑制TNF － α 和IFN － γ 的表达来减少卵泡闭锁和细胞凋亡，进而减缓卵巢衰竭速度; 肉苁蓉还可以上调Bcl － 2 /Bax。表明肉苁蓉有抑制卵巢早衰的作用，其机制可能与卵巢的性激素水平、TNF － α、IFN － γ 及凋亡相关蛋白Bcl － 2 /Bax 表达有关。参考文献:［1］ 崔合香. 中医分期用药治疗卵巢早衰的临床疗效观察［J］. 中国中医药科技，2019，26( 1) : 129 － 130.［2］ 梁嘉丽，邝兆民，杨静，等. 补肾阴及补肾阳法对化疗诱导的卵巢早衰大鼠外周血TNF － α、IFN － α 水平及卵巢颗粒细胞凋亡的影响［J］. 中国病理生理杂志，2017，33( 1) : 139 － 142.［3］ 杨志蓉，朱桂玉，甘世祥，等. 肉苁蓉水提液对猪早期体外发育胚胎中NO 剂量含量的影响［J］. 实验动物科学，2007，24 ( 4) :27 － 29，39.［4］ 张丽娜，郑锦，刘特，等. 补肾活血方对卵巢早衰模型大鼠性激素水平及颗粒细胞凋亡调控相关因子的影响［J］. 上海中医药杂志，2015，49( 7) : 72 － 76.［5］ 梁策，高慧，张腾. 补肾调冲方对卵巢早衰大鼠性激素水平和卵巢Bcl － 2 /Bax 表达的影响［J］. 中国实验方剂学杂志，2016，22( 19) : 100 － 104.［6］ 高慧，杨涓，夏天，等. 补肾调冲方对卵巢早衰大鼠卵巢相关细胞因子TNF － α， IFN － γ 表达的影响［J］. 国医论坛，2008，23( 2) : 35 － 37.

肉苁蓉报价当日价格：82.02日 期：2021-12-23较前日：0.21 ↓

说到滋补养生品，很多人可能第一时间想到人参、西洋参、冬虫夏草之类的补品。其实，在历史上“西域”也进贡了不少珍稀滋补品，肉苁蓉便是其中之一。由于长期乱采滥挖，其野生资源已濒临枯竭，荒漠肉苁蓉已被列入《野生动植物种国际贸易公约》附录II；因为其资源紧缺，导致长期以来肉苁蓉产业停滞不前。1990年，笔者就在导师中国工程院院士楼之岑的指导下，开始肉苁蓉研究。这一做，就是30年。从“随风接种”到高产稳产栽培技术选定肉苁蓉作为研究对象，还有一条重要的理由就是“鲜有人做”。“鲜有人做”的原因是肉苁蓉多分布在西北沙漠和荒漠地区，研究首先要过的坎就是愿意扎根在那样的环境中。寄生植物是植物界中一类靠吸取其他植物的水分和养分生长的植物，约占世界上全部植物种的十分之一。肉苁蓉与锁阳、菟丝子、桑寄生、槲寄生、檀香等很多中药一样，都来自于寄生植物。肉苁蓉属植物属于典型的根全寄生植物，叶全部退化为鳞片，没有叶绿素，完全靠吸取寄主植物的水分和养分生长。对于肉苁蓉属植物的寄生机制、生长发育，人类至今研究很少，有大量的奥秘尚待揭开。在茫茫沙漠中，肉苁蓉的种子随风飘落在沙漠，随着沙子覆盖、掩埋，直接落在寄主的根上，甚或寄主根的附近才能萌发生长，但机会极其渺茫。由于对肉苁蓉属植物的寄生机制不了解，早年的接种都是先找到寄主的根，将肉苁蓉的种子撒在寄主的根上，或将寄主的根皮扒开，将肉苁蓉的种子撒在里面。这些方法不仅接种效率很低，而且接种率也很低，无法进行大面积推广。那么，肉苁蓉与寄主根是如何建立寄生关系的？我们经过长期的野外观察和实验室研究，发现肉苁蓉的种子能够诱导寄主根向其方向生长，寄主根部的信号物质诱导肉苁蓉种子萌发，在此基础上建立了肉苁蓉种子撒播模式。为了建立肉苁蓉及其寄主植物的高产稳产栽培技术，我们邀请中国农业大学郭玉海教授、阿拉善盟林业治沙研究所原所长田永祯高级工程师、上海交通大学李晓波教授等团队，组成肉苁蓉研究协作组，对荒漠肉苁蓉、德赢vwin登录 及其寄主梭梭和柽柳属植物的生物学基础、栽培技术、采收加工等进行了系统研究。研究结果表明，肉苁蓉种子萌发需要低温层积，氟啶酮能够诱导肉苁蓉种子萌发。在此基础上，我们建立了高产稳产型和沙漠治理型肉苁蓉及其寄主的人工种植技术，使肉苁蓉栽培从“仿野生”栽培发展成为“种子处理-接种寄生期-肉质茎生长期-现蕾开花期-裂果成熟期”全程管理的大田栽培，建立了分别适用于内蒙古、新疆产区的肉苁蓉优质高产栽培技术体系。而关键技术的突破，使肉苁蓉的田间接种率从不到20％提升到95％以上，亩产从不到18公斤提升到300公斤以上，实现了肉苁蓉人工种植高产稳产的目标。从“不被待见”到被收入《中国药典》根据本草考证，历史上作为正品肉苁蓉使用的基原植物包括现今的盐生肉苁蓉、荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 。《中国药典》（1963年版）收载的肉苁蓉的基原植物为列当科植物肉苁蓉，即现今的盐生肉苁蓉；《中国药典》（1977年版）将肉苁蓉的基原修订为肉苁蓉，即现今的荒漠肉苁蓉。由于长期乱采滥挖，荒漠肉苁蓉野生资源已濒于枯竭。基于本草考证和资源调查，我们发现德赢vwin登录 在历史上就曾作为肉苁蓉使用。但因其未收入《中国药典》，当销售到内地时，常被作为假药销毁。为了解决德赢vwin登录 的药用问题，20世纪90年代，我们开始对德赢vwin登录 和荒漠肉苁蓉进行化学成分、药效作用和安全性等方面的系统比较研究，发现二者的化学成分、药效作用基本一致，安全性很高，而且德赢vwin登录 的有效成分苯乙醇苷类成分含量明显高于荒漠肉苁蓉。于是，我们向国家药典委员会提出将德赢vwin登录 作为肉苁蓉药材的来源之一收入《中国药典》，并起草了德赢vwin登录 的质量标准。通过国家药典委员会组织相关药典委员评审，德赢vwin登录 作为肉苁蓉来源植物收入《中国药典》（2005年版）。这不但迅速缓解了当时肉苁蓉药材资源短缺问题，为新疆南疆地区发展肉苁蓉产业奠定了基础，还为中药产业乃至全球提供了一种苯乙醇苷类成分含量很高的中药材，为相关药品和健康产品开发提供一种优质原料。从经验用药到更精准的“处方”肉苁蓉的传统功效为补肾阳、滋肾阴、益精血、润肠通便，一般凭借经验用药。那么，目前临床用得比较多的荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 ，如何才能更好发挥疗效呢？为了弄清楚这个问题，我们对二者进行了全成分分析。结果表明，荒漠肉苁蓉中的寡糖类、甘露醇和甜菜碱含量较高；德赢vwin登录 中的苯乙醇苷类成分含量较高，寡糖类成分含量相对较低，且不含甜菜碱。结合其药效学研究结果发现，荒漠肉苁蓉在润肠通便方面作用较强，德赢vwin登录 在补肾、益精、抗衰老、抗阿尔茨海默病和帕金森病、保肝等方面效果更好。二者各有特点，为临床精准使用提供参考。值得一提的是，肉苁蓉的补肾作用不同于其他补肾药或壮阳药，其主要机制在于调控性激素的水平趋于正常。因此，不易引发激素紊乱进而产生毒副作用，更为安全有效。肉苁蓉提取物具有显著的通便作用，主要机制为提高肠内渗透压，抑制大肠对水分的吸收，促进肠道蠕动，特别适合于老年人以及体虚等便秘患者。从近10亿元到200多亿元的年产值2000年以前，由于肉苁蓉资源枯竭，产品开发和产业化一直处于低谷。经过20多年的发展，彻底解决了肉苁蓉资源短缺问题，保障了临床用药和200多个中成药和保健产品的原料供给，相关产业的年产值也从20世纪90年代的不到10亿元发展到今天的200多亿元，产业已初具规模。肉苁蓉产业发展前景光明，但仍然面临一些新情况、新问题，应在克服困难中发展壮大。一是各级政府对肉苁蓉产业发展的生态、经济和社会价值认识不够，对产业发展支持力度不够，建议从资金、政策、人才等方面给予更大的支持。二是当前专业从事肉苁蓉开发和产业发展的企业规模较小，技术、资本和管理较缺乏，尚不具备做强、做大肉苁蓉产业的能力，建议吸引大型企业进入肉苁蓉产业领域。三是肉苁蓉基础研究尚需进一步深入，尤其是肉苁蓉所含丰富化学成分的药理作用和保健功能尚需进一步挖掘。四是肉苁蓉相关产品开发仍然非常缺乏，科技含量多数较低，难以支撑肉苁蓉大产业的发展，建议利用肉苁蓉广泛的药效作用和保健功能，开发系列药品和保健品。五是宣传和市场开拓非常薄弱，未来应该加强与国际知名院校、科研单位合作，共同开展肉苁蓉研究和产品开发，为国际市场开拓提供科技保障。

屠鹏飞”，姜勇＇，郭玉海”，田永祯，李晓波1．北京大学 药学院／天然药物及仿生药物国家重点实验室，北京 100191；2．中国农业大学 中药材研究中心，北京 100193；3．内蒙古阿拉着盟林业治沙研究所，内蒙古 阿拉善 750306；4．上海交通大学 药学院，上海 200240摘要:肉苁蓉为沙漠濒危寄生植物和著名的补益中药。2000年，首届肉苁蓉学术研讨会召开，会上成立了全国肉苁蓉研究协作组，有组织的肉苁蓉研究与产业化推广工作就此开展。在各级政府的大力推动和业界的不断努力下，肉苁蓉从昔日的濒危中药，发展到如今的种植面积达200万亩（1亩～666.67㎡）、年产量达70001的中药材品种：科研人员研发了一批创新药物和健康产品，相关产业的年产值也从不到20亿元发展到200多亿元，创建了濒危中药全产业链创新发展新模式。对30年来肉苁蓉栽培技术研究与推广、药效物质及其作用机制研究、质量控制与标准建立、新产品开发与产业发展等方面的研究进展进行综述，指出当前肉苁蓉产业发展存在的关键问题和解决路径，并对产业的发展前景进行展望，为实现肉苁蓉产业高效、优质发展提供参考，也为濒危中药全产业链发展提供借鉴。［关键词］肉苁蓉：濒危中药：产业发展：全产业链［中图分类号］R282 ［文献标识码］A ［文章编号］ 1673-4890(2021)03-0395-06doi:10.13313/j.issn.1673-4890.20200506002肉苁蓉为著名的补益中药，在《神农本草经》中被列为上品，在唐代开元年间（713-741年）的《道藏》中被列入“中华九大仙草”。肉苁蓉具有补肾阳、滋肾阴、益精血、润肠通便之功效，传统用于肾阳不足、精血亏虚、阳痿不孕、腰膝酸软、筋骨无力、肠燥便秘，在历代补肾阳处方中使用频度最高。现代研究表明，肉苁蓉具有改善性功能、抗衰老、提高学习记忆能力、抗阿尔茨海默病和帕金森病、调节免疫功能、抗疲劳、通便、保肝等多方面的药理作用，为名贵中药材之一，被誉为“沙漠人参”3。肉苁蓉属植物为根寄生植物，其寄主为沙漠先锋植物梭梭、柽柳属植物等。由于长期乱采滥挖，其野生资源已濒临枯竭，荒漠肉苁蓉已被列入《野生动植物种国际贸易公约》（CITES）附录I。由于资源紧缺，长期以来肉苁蓉产业停滞不前。20世纪90年代开始，尤其是2000年召开首届肉苁蓉学术研讨会并成立全国肉苁蓉研究协作组以来，在各级政府的大力推动下，科研人员通过不断的努力，系统阐明了肉苁蓉的寄生机制，突破了寄生植物人工种植的关键技术，建立了肉苁蓉高产稳产栽培技术体系，并在我国西北沙漠地区大规模推广，彻底解决了肉苁蓉药用资源匮乏问题，保护了野生资源：阐明了肉苁蓉传统功效的药效物质基础及其作用机制，发现了新的药效作用和临床价值：建立并完善了质量标准体系，保障药材质量和临床疗效；以肉苁蓉为主要原料开发了一批创新药物和健康产品，构建了濒危中药全产业链创新发展体系，使肉苁蓉国际影响力不断扩大，产业已初具规模，为将肉苁蓉打造成为中药材大品种奠定了良好的基础。1 建立肉苁蓉高产稳产栽培技术并大规模推广1.1 乱采滥挖导致野生资源濒临枯竭屠鹏飞等对内蒙古阿拉善盟和新疆的肉苁蓉资源进行了系统调查，发现很难看到开花的肉苁蓉，如果没有开花、结果的机会，这个物种很快就会灭亡。同时，采挖人在挖完肉苁蓉后，基本上不回填采挖坑，导致地面上到处都是采挖的深坑，沙土飞扬。野生资源的乱采滥挖不仅导致肉苁蓉资源濒临枯竭，多数药店和医院药房已无饮片供应，同时也造成沙漠环境和生态的严重破坏。为此，中华人民共和国国务院于2000年专门发文《关于禁止采集和销售发菜制止滥挖甘草和麻黄草有关问题的通知》（国发（2000）13号）制止滥挖甘草、麻黄草、肉苁蓉等5种中药材，并提出了一系列保护措施。1.2 建立高产稳产栽培技术体系1985年，阿拉善盟医药公司的戈建新开始在梭梭的根部接种荒漠肉苁蓉，开启了肉苁蓉人工种植的历史。由于对肉苁蓉属植物的寄生机制不了解，早年的接种都是先找到寄主的根，将肉苁蓉的种子撒在寄主的根上，或将寄主的根皮扒开，将肉苁蓉的种子撒在里面。这些方法不仅接种效率很低，而且接种率也很低，无法进行大面积推广。1990年，屠鹏飞开始进行肉苁蓉的资源、生物学基础研究尤其是寄生生物学的研究，发现肉苁蓉的种子能够诱导寄主根向其方向生长，寄主根部的信号物质诱导肉苁蓉种子萌发，在此基础上建立了肉苁蓉种子撤播模式。为了建立肉苁蓉及其寄主植物的高产稳产栽培技术，屠鹏飞邀请中国农业大学郭玉海教授、阿拉善盟林业治沙研究所原所长田永祯高级工程师、上海交通大学李晓波教授及和田天力沙生药物开发责任有限公司等团队，组成肉苁蓉研究协作组（以下简称“协作组”），对荒漠肉苁蓉、德赢vwin登录 及其寄主梭梭和柽柳属植物的生物学基础、栽培技术、采收加工等进行了系统研究。研究结果表明，肉苁蓉种子萌发需要低温层积，氟啶酮能够诱导肉苁蓉种子萌发田。协作组首次建立了使种子在离开寄主根的条件下进行萌发的方法，从而建立了种子萌发率测定和质量分级标准：建立了肉苁蓉优质种子生产技术规范及梭梭种子和苗木、柽柳苗木分级标准，从源头上保障接种率；研制了丸粒化种子，解决了定量和机械化接种难题：建立了可视化接种技术，为根寄生植物接种技术研究提供简便有效方法：培育了“肉苁蓉寄主”一体苗，实现寄生植物精准生产：建立了完善的田间管理方案和测土配方精准施肥技术，有效提升产量和质量：建立了德赢vwin登录 “当年秋种，次年秋收”生产模式，既防止冻害，又提升生产效率：建立了鲜切片干燥、高温杀酶后干燥、冷冻干燥等加工技术，使有效成分含量提高3～10倍：制定了2种肉苁蓉规范化栽培技术体系，其中德赢vwin登录 示范基地通过了原国家食品药品监督管理总局的《中药材生产质量管理规范》（GAP）认证：阐明了2种肉苁蓉的适宜种植区、生长年限和最佳采收期：分别建立了高产稳产型和沙漠治理型肉苁蓉及其寄主的人工种植技术，使肉苁蓉栽培从“仿野生”栽培发展成为“种子处理-接种寄生期-肉质茎生长期-现蕾开花期-裂果成熟期”全程管理的大田栽培，建立了分别适用于内蒙古、新疆产区的肉苁蓉优质高产栽培技术体系。一系列关键技术的突破，使肉苁蓉的田间接种率从不到20％提升到95％以上，亩（1亩-666.67㎡）产从不到18kg提升到300kg以上，实现了肉苁蓉人工种植高产产的目标。1.3 大规模推广高产稳产栽培技术20世纪90年代，在西部沙区推广肉苁蓉栽培技术是非常困难的。为了提高地方政府和农牧民对肉苁蓉生态产业发展的认识，协作组在肉苁蓉的主产区组织召开“肉苁蓉暨沙生药用植物学术研讨会”。从2000年至今，已连续在内蒙古阿拉善、新疆和田、内蒙古磴口等主产区召开了10届学术研讨会，不仅有效提升了地方政府和农牧民对肉苁蓉产业发展的认识，也提升了全社会对肉苁蓉的药用价值和保健功能、生态效益和社会效益的认识。“肉苁蓉暨沙生药用植物学术研讨会”已发展成为国际肉苁蓉业界和沙产业界的品牌会议，不仅弘扬了中医药文化，而且让全球了解了中国荒漠化治理和履行华盛顿条约》的创新思路和辉煌成果。为了大规模推广肉苁蓉的栽培技术，在国家科技惠民计划等项目的支持下，协作组编写了《肉苁蓉栽培技术丛书》和相关材料，免费发放给产区技术人员和农牧民：免费举办多种形式培训班，提高管理和技术人员、农牧民的种植水平，至今，已培养管理和技术人员200余人，培训农牧民6000余人：在新疆于田县建立柽柳苗木基地1220亩，年产苗木1061万株：建立德赢vwin登录 种子基地2300亩，年产种子6000kg，免费为农牧民发放德赢vwin登录 优质种子近9t；建立德赢vwin登录 高产稳产示范基地5000亩，亩产鲜药材达到300kg以上，并通过GAP认证、安利纽崔莱和有机食品认证：在内蒙古阿拉善盟建立荒漠肉苁蓉示范基地1.8万亩。在各级政府的大力支持下，在肉苁蓉业界全体同仁的长期努力下，截至2019年，协作组已在新疆和田地区沙漠推广种植柽柳和德赢vwin登录 40多万亩，结合沙漠治理，仿野生种植柽柳接种德赢vwin登录 10多万亩，年产药材5000t：在新疆且末、于田、阿拉苏、吐鲁番等地种植梭梭25万亩，接种荒漠肉苁蓉11万亩，年产药材500t；结合荒漠化治理，在内蒙古阿拉善盟和磴口县、甘肃民勤县等地推广种植梭梭550多万亩，接种荒漠肉苁蓉150万亩，年产药材1500t。迄今，累计种植梭梭和柽柳625万亩，接种肉苁蓉200万亩，年产药材7000t，完全满足了当前市场需求，不仅保障了苁蓉总苷胶囊、汇仁肾宝、劲酒等200多种中成药和健康产品的原料供给，而且为肉苁蓉大健康产业的发展和大品种培育奠定了原料基础：有效保护了野资源，成为履行CITES的典范：治理沙漠625万亩，为肉苁蓉主产区和华北地区构筑了一道牢固的生态屏障，为国家节约治沙资金120多亿元，创造了中国特色可持续治理沙漠新方法：带动沙区20余万人致富，创造了荒漠化地区精准扶贫新模式，在维护边疆民族地区社会稳定和长治久安中发挥了重要作用。2 阐明功效物质，挖掘临床价值2.1 闸明肉苁蓉功效物质及其作用机制肉苁蓉的传统功效为补肾阳、滋肾阴、益精血、润肠通便。自20世纪80年代，养命酒株式会社（日本）、屠鹏飞课题组和吉川雅之课题组等对中国产肉苁蓉属植物进行了系统的化学成分研究，发现肉苁蓉属植物主要含有苯乙醇苷类、环烯醚萜及其苷类、木脂素苷类、寡糖和寡糖酯类、多糖类、甘露醇和甜菜碱等成分网。其中，苯乙醇苷类成分为肉苁蓉属植物的主要成分，如松果菊苷在德赢vwin登录 部分样品中的质量分数高达40％，毛蕊花糖苷质量分数高达10％］。肉苁蓉补肾阳、滋肾阴和益精血的主要药效物质为苯乙醇苷类和多糖类成分，其作用机制主要为抗疲劳、改善身体机能，从而调节下丘脑-垂体肾上较强，德赢vwin登录 在补肾、益精、抗衰老、抗阿尔茨海默病和帕金森病、保肝等方面效果更好，2种肉苁蓉各有特点，为临床精准使用提供参考。屠鹏飞团队通过本草考证、生物学和化学成分比较分析，制定了“阿拉善肉苁蓉”道地药材质量标准。通过国家中药材检测认证技术专业委员会论证“阿拉善肉苁蓉”成为第一个通过国家论证的肉苁蓉道地药材，为阿拉善肉苁蓉特色产业发展奠定品牌基础。4 开发系列产品，培育中药材大品种肉苁蓉的栽培技术已经成熟，资源问题彻底解决，下游产品的开发和产业化已成为产业可持续发展的关键。国内外科技界和相关企业充分认识到这一点，投入了大量的人力和财力进行肉苁蓉相关产品的研发，目前已取得了一定的成绩。屠鹏飞团队在发现肉苁蓉苯乙醇苷类具有抗阿尔茨海默病和帕金森病的基础上，成功地将德赢vwin登录 的苯乙醇总苷研制成为治疗血管性痴呆的有效部位新药“苁蓉总苷胶囊”，2005年获批上市，目前由江苏康缘药业股份有限公司生产；将德赢vwin登录 的有效成分“松果菊苷”研制成为治疗血管性痴呆的一类新药“松果菊苷片”，2017年获得临床批件，目前已完成I期临床试验：将荒漠肉苁蓉通便的有效部位“肉苁蓉总糖醇”研制成为治疗便秘的有效部位新药，2020年获得临床批件，也已完成1期临床试验。江西汇仁药业股份有限公司以肉苁蓉为主要药味之一，开发了“肾宝片”系列产品：湖北劲牌公司以肉苁蓉为药味之一，开发了“劲酒”：内蒙古阿拉善苁蓉集团以肉苁蓉为主要药味研发了“七味苁蓉酒”“苁蓉养生液”等药品：安利（中国）研发了“银杏苁蓉片”；新疆帝辰医药生物技术有限公司与新疆民族药研究所合作研发了“康咖片”；日本荣进商社也研发了多个肉苁蓉相关的健康产品。还有一大批肉苁蓉相关产品正在申报和研发中。2017年，以内蒙古曼德拉沙产业开发有限公司为牵头单位、北京大学姜勇教授为项目负责人，成功获得国家重点研发计划中医药现代化项目的支持，计划研发一大批肉苁蓉健康产品，项目的完成将为肉苁蓉大健康产业的发展提供强劲的动力。5 产业初具规模，发展潜力巨大2000年以前，由于肉苁蓉资源枯竭，产品开发腺功能及相关激素的水平。肉苁蓉的补肾作用不同于其他补肾药或壮阳药，其主要通过提高身体机能发挥作用，这也验证了李时珍［口在《本草纲目》中提出的“此物补而不峻，故有从容之号”的论述。肉苁蓉通便作用的主要药效物质为寡糖类、甘露醇和甜菜碱，其机制主要为提高肠内渗透压、抑制大肠对水分的吸收、促进肠蠕动。因此，肉苁蓉属于容积型通便药，不会引起泻下，特别适用于老年性便秘、体虚者和孕妇便秘，是一味很有特点的通便药。2.2 挖掘肉苁蓉新的生物活性和临床价值近20年来，国内外学者对肉苁蓉提取物及其主要有效成分进行了多方面的生物活性和药理作用研究，发现肉苁蓉苯乙醇苷类成分具有抗衰老、提高学习记忆能力、抗阿尔茨海默病和帕金森病、抗抑郁、保肝、抗心肌缺血和脑缺血、促进骨质生长和抗骨质疏松等作用，其作用机制主要是抗氧化、抗炎、舒张血管平滑肌等。深入发掘肉苁蓉的临床价值和保健功能，能够为其深入开发和大品种培育提供科学依据。3 构建完善的质量标准体系，保障临床用药屠鹏飞团队构建了肉苁蓉药材和饮片完善的质量标准，包括性状、鉴别、检查、指纹图谱和多成分含量测定，对全国不同产地的荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 野生药材和栽培药材进行了长期、系统和全面的跟踪分析，为肉苁蓉适宜产区的选择提供参考，也为肉苁蓉栽培技术研究和大面积推广提供质量控制技术：起草和修订了《中华人民共和国药典》（以下简称中国药典》）2005、2010年版中肉苁蓉质量标准：根据本草考证和历史应用、化学成分、药效作用和安全性比较研究，将德赢vwin登录 作为肉苁蓉来源植物收入《中国药典》2005年版中，增加了肉苁蓉的优质资源，为新疆南疆地区发展肉苁蓉产业奠定了基础。屠鹏飞团队采用多维色谱-质谱联用技术、定量核磁共振技术，建立了肉苁蓉全成分分析方法，对荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 进行了全成分分析，结果表明，荒漠肉苁蓉寡糖类、甘露醇和甜菜碱含量高：德赢vwin登录 苯乙醇苷类成分含量较高，寡糖类成分含量相对较低，且不含甜菜碱例。结合其药效学研究结果发现，荒漠肉苁蓉在润肠通便方面作用和产业化一直处于低谷，100多个以肉苁蓉为处方药味的中成药也基本处于停产或半停产状态。随着肉苁蓉栽培技术的成熟和大面积推广的成功，特别是肉苁蓉的药用价值和保健功能逐渐被认识，从召开首届肉苁蓉学术研讨会以来，我国出现了一大批专业从事肉苁蓉栽培和产业发展的企业；同时，一批以肉苁蓉为处方药味的产品也开始涌现。据不完全统计，目前肉苁蓉药材的年销售额约为4.5亿元，饮片年销售额约为6.5亿元，相关中成药年销售额约为55亿元，相关健康产品年销售额约为140亿元。因此，目前肉苁蓉产业的总体规模约为206亿元，产业已初具规模。随着我国社会人口老龄化和“健康中国2030”规划纲要的实施，在补肾、抗衰老、抗阿尔茨海默病和帕金森病、保肝、润肠通便等方面具有确切作用和特色的肉苁蓉必将迎来辉煌的发展前景。为此，2017年在第九届肉苁蓉学术研讨会上，协作组明确提出在10年内将肉苁蓉打造成为年产值超过500亿元的中药材大品种。6 产业发展存在的问题及其对策6.1 产业发展面临的关键问题肉苁蓉产业发展前景光明，但面临的困难仍然很多，主要问题有以下几点：1）各级政府对肉苁蓉产业发展的生态、经济和社会价值认识不够，对产业发展支持力度不够：2）当前专业从事肉苁蓉开发和产业发展的企业规模较小，技术、资本和管理较缺乏，尚不具备做强、做大肉苁蓉产业的能力：3）肉苁蓉基础研究尚需进一步深入，尤其是肉苁蓉所含丰富化学成分的药理作用和保健功能尚需进一步挖掘：4）肉苁蓉相关产品开发仍然非常缺乏，科技含量多数较低，难以支撑肉苁蓉大产业的发展：5）宣传和市场开拓非常薄弱，尤其是国际市场的开拓。6.2 产业发展应采取的对策为了实现肉苁蓉产业的发展目标，肉苁蓉产区的各级政府和业界必须齐心协力，重点做好4件大事。6.2.1 各级政府加大对肉苁蓉产业发展的扶持力度 肉苁蓉产业是一个少有的同时兼具生态、社会和经济三大效益的产业，其发展不仅为人民健康事业和中医药产业发展做出巨大贡献，更重要的是可以为沙漠治理和生态保护、边疆民族地区的稳定和长治久安做出巨大贡献。因此，各级政府应将肉苁蓉产业的发展提升到生态安全和社会安定的战略高度，从资金、政策、人才等各方面给予肉苁蓉产业发展更大的支持。为此，强烈呼吁：1）应尽快将德赢vwin登录 列入药食同源中药材目录，满足人民健康事业和产业发展需求，尤其是促进南疆地区生态、经济和社会发展：2）将肉苁蓉及其寄主植物的种植列入荒漠化治理重点项目，按照荒漠化治理的相关政策给子资金的配套和支持：3）在科技项目、信贷、税收、人才项目等方面，向肉苁蓉研究和产业发展倾斜。6.2.2 深入开展基础研究，为产业发展提供强劲动力 深入开展肉苁蓉基础研究，尤其针对肉苁蓉所含丰富的化学成分，深入开展药理作用和保健功能研究，在传统功效基础上，进一步深入挖掘其药用价值和保健功能，为高附加值产品开发和各类成分综合利用提供科学依据“十四五”期间，计划开发100个肉苁蓉单味药或复方的药品、保健食品：开发5-10种肉苁蓉饮片和不同提取物；对已上市的肉苁蓉相关中成药进行再研究和二次开发，发挥已有中成药在肉苁蓉产业发展中的作用；利用荒漠肉苁蓉已列入既是食品又是中药材的物质试点工作（国卫食品函（2019）311号）的大好机遇，以荒漠肉苁蓉为主要原料开发20～30个单味或复方食品。从食品、保健产品、药品全方位构建肉苁蓉健康产品体系，为打造肉苁蓉中药材大品种提供强劲动力。6.2.3 吸引大型企业，建设肉苁蓉产业发展大平台通过产品开发、技术合作等多种形式的引导，吸引10～20家大型企业进入肉苁蓉产业领域：同时，积极支持已有的专业从事肉苁蓉产业化的企业发展，培育3～5家以肉苁蓉开发为主业的上市公司。通过10年发展，培育20家肉苁蓉相关产品年销售超过10亿元的大型企业。在肉苁蓉主产地新疆和田地区、内蒙古阿拉善盟等地建立肉苁蓉研究院和专业化市场，培育2-3个以肉苁蓉为支柱产业的特色地区。6.2.4 加大宣传，大力发展国内市场，着力开拓国际市场 进一步加强肉苁蓉具有的生态效益、药用价值和社会效益以及相关产品的宣传力度，在全国普及肉苁蓉相关知识，为市场开拓提供舆论支持。通过多种形式，大力发展国内市场。加强与国际知名院校、科研单位的合作，共同开展肉苁蓉研究和产品开发，为国际市场开拓提供科技保障：加强与国际知名企业合作，共同开拓国际市场：加强提取物出口和适合国际市场的产品研发，为国际市场提供丰富的产品：在进一步加强美国、日本、东南亚国家等已有市场开拓的基础上，抓住“一带一路”的发展机遇，着力开拓中东、欧洲等市场。

图1 肉苁蓉中苯乙醇苷类主成分母核化学Fig.1 Mother nucleus structure of main components of phenylethanoid glycosides in C.deserticola得到26个环烯醚萜类化合物，包括4个环烯醚萜以及22个环烯醚萜苷类化合物，包括8-表马钱子酸、格鲁苷、6-去氧梓醇、京尼平苷酸等。张杰等采用硅胶柱色谱，制备液相色谱和 Sephadex LH-20等方法，分离鉴定了环烯醚萜苷类成分：8-表去氧马钱酸：王力伟等刚利用反相硅胶色谱、凝胶色谱、HPLC 制备等分离纯化技术，分离得到了leonuride、巴尔蒂苷、玉叶金花甘酸等。肉苁蓉中环烯醚萜类化合物见表2，主要成分母核化学结构见图2．表2肉苁蓉中环烯醚萜类化合物Table 2 Iridoids ofC.deserticola编号 化合物名称77 肉苁蓉素（cistanin）来源肉苁蓉、肉苁蓉参考文献578 肉苁蓉氯素（cistachlorin）肉苁蓉、德赢vwin登录 579 kankanol德赢vwin登录 580 argyol德赢vwin登录 581 甘蓝苷A（kankanoside A）5,1382 甘蓝苷B（kankanoside B）德赢vwin登录 5,983 甘蓝苷C（kankanoside C）德赢vwin登录 584 甘蓝苷D（kankanoside D）德赢vwin登录 585 甘蓝苷L（kankanosideL）德赢vwin登录 586 甘蓝苷M（kankanoside M）德赢vwin登录 587 甘蓝苷N（kankanoside N）德赢vwin登录 588 巴尔蒂苷（bartsioside）肉苁蓉、德赢vwin登录 5,989 6-去氧梓醇（6-deoxycatalpol）肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉5,9,11-1390 catapol肉苁蓉591 8-表马钱子酸（8-epiloganic acid）肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉、沙苁蓉5,11,1392 8-表去氧马钱子酸（8-epideoxyloganic acid）肉苁蓉、德赢vwin登录 、沙苁蓉5,8,1393 8-表番木鳖碱（8-epiloganin）沙苁蓉594 京尼平苷酸（geniposidic acid）肉苁蓉、德赢vwin登录 5,11-1395 格鲁苷（gluroside）肉苁蓉、德赢vwin登录 5,1196 leonuride肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉、沙苁蓉5,997 玉叶金花甘酸（mussaenosidic acid）5,9,1398 玉叶金花甘酸甲酯（mussaenoside）肉苁蓉、德赢vwin登录 599 五福花苷酸（adoxosidic acid）100 antirrhide德赢vwin登录 德赢vwin登录 55 图2 肉苁蓉中环烯醚萜类主成分母核化学结构Fig.2 Mother nucieus structure of main components of iridoids in C.deserticola1.3 木脂素类宋青青通过质谱分析从肉苁蓉属植物中分离得到16个木脂素类化合物，包括阿拉善苷A、落叶松脂醇葡萄糖苷、松脂素葡萄糖苷等：张开梅7采用正、反相硅胶柱色谱技术，从肉苁蓉总苷中分离得到了木脂素类化合物1个：丁香脂素-O-β-D-吡喃葡萄糖苷：张杰等采用硅胶柱色谱，制备液相色谱和Sephadex LH-20等方法，分离鉴定了1个木脂素类化合物为丁香树脂酚葡萄糖苷。肉苁蓉中木脂素类化合物见表3，主要成分母核化学结构见图3。表3 肉苁蓉中木脂素类化合物Table 3 Lignins of C deserticola编号 化合物名称来源参考文献101 （＋）-松脂素｜（＋）-pinoresinol］肉苁蓉5,13102（＋）-松脂素-O-β-D-葡萄糖苷［（＋）-pinoresinol-O-β-D-glucopyranoside］德赢vwin登录 5,13103 （＋）-丁香树脂酚［（＋）-syringaresinol］肉苁蓉5104（＋）-丁香树脂酚-O-β-D-葡萄糖苷［（＋）-syringaresinol-O-β-D-glucopyranoside］肉苁蓉、德赢vwin登录 5,7,8,13105 syringalied A-3'-a-L-rhamnopyranoside肉苁蓉13106 isosyringalied-3'-a-L-rhamnopyranoside肉苁蓉13107 liriodendrin肉苁蓉、德赢vwin登录 5108 杜仲素A（eucommin A）肉苁蓉、德赢vwin登录 5109 isoeucommin A肉苁蓉、德赢vwin登录 5110 （＋）-松脂素单甲醚-β-D-葡萄糖苷［（＋）-pinoresinol monomethylether-β-D-glucoside］肉苁蓉5111 dehydrodiconifery alcohol-4-0-β-D-glucoside肉苁蓉、德赢vwin登录 5112 dehydrodiconifery alcohol-y-O-β-D-glucoside肉苁蓉、德赢vwin登录 5113 落叶松脂素4-0-β-D-葡萄糖苷（lariciresinol 4＇-0-β-D-glucopyranoside）肉苁蓉5114 落叶松脂素4-0-β-D-葡萄糖苷（lariciresinol 4-0-β-D-glucopyranoside）肉苁蓉5115 异落叶松脂素9-0-β-D-葡萄糖苷（isolariciresinol-9＇-0-β-D-glucopyranoside）沙苁蓉5116 conicaoside肉苁蓉5117 柠檬素A（citrusinA）118 alaschanioside A

支雅婧，甄亚钦133，田伟523，麻景梅123，牛丽颖1.2.31．河北中医学院，河北 石家庄 0500912．河北省中药配方颗粒技术创新中心，河北 石家庄 0500913．河北省中药材品质评价与标准化工程研究中心，河北石家庄 050091摘要：肉苁蓉是一味含有多种化学成分并具有补益作用的中药，近年来研究发现其有着广泛的药理作用，主要用于神经保护、免疫调节、抗衰老、抗骨质疏松、保肝护肝等。本文通过综述肉苁蓉化学成分及其药理作用的研究现状，并在此基础上基于中药质量标志物（Q-Marker）的概念，从生源途径、传统功效、不同配伍等方面对肉苁蓉Q-Marker进行预测分析，推测肉苁蓉中的毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、松果菊苷等苯乙醇苷类，甘露糖醇等多糖，6-去氧梓醇、京尼平苷酸等环烯醚萜类，（＋）-丁香树脂酚-O-β-D-葡萄糖苷等木脂素类物质及绿原酸、咖啡酸等有机酸，缬氨酸、亮氨酸、赖氨酸等氨基酸成分可作为其质量标志物，为其质量评价提供一定的参考。关键词：肉苁蓉；生源途径；传统功效；质量标志物；毛蕊花糖苷；异毛蕊花糖苷；松果菊苷；6-去氧梓醇；京尼平苷酸中图分类号：R286 文献标志码：A 文章编号：0253-2670（2021）09-2758-10   DOI:10.7501/j.issn.0253-2670.2021.09.025肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉 Cistanchedeserticola Y.C.Ma 或德赢vwin登录  C.tubulosa （Schenk）Wight的干燥带鳞叶的肉质茎＂，始载于《神农本草经》，列为上品，其后古典《本草经疏》《本草汇言》《月华子本草》等多有记载，是我国传统名贵中药，素有“沙漠人参”之美誉。肉苁蓉味甘、咸，性温，归肾、大肠二经，具有补肾阳，益精血，润肠通便的功效，用于治疗肾阳不足、精血亏虚、阳痿不孕、腰膝酸软、筋骨无力、肠燥便秘川。肉苁蓉主产于内蒙古（阿左旗）、甘肃（昌马）及新疆等地口。肉苁蓉主要含有苯乙醇苷类、环烯醚萜类、木脂素类、糖类等化学成分，具有神经保护、抗衰老、抗肝损伤、润肠通便等药理作用，广泛应用于中医临床中，有着很好的发展前景。本文对肉苁蓉化学成分及药理作用研究进展进行了综述，并基于中药质量标志物（Q-Marker）的基本要求，对肉苁蓉 Q-Marker 进行预测，为肉苁蓉质量评价和质量控制提供一定的理论依据。1 化学成分肉苁蓉中含有多种化学成分，主要为苯乙醇苷类、环烯醚萜类、木脂素及其苷类、糖类等多种化学成分，此外，还含有苯甲醇苷类、单萜类、生物碱类、挥发油类、氨基酸、无机微量元素等成分4。1.1 苯乙醇苷类苯乙醇苷类（PhGs）为肉苁蓉的主要成分，目前，宋青青通过质谱分析已分离得到该类化合物70余个，包括4个单糖苷，41个二糖苷和25个三糖苷，包括红景天苷、肉苁蓉苷C、异肉苁蓉苷C、肉苁蓉苷D、管花苷B、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、松果菊苷、金石蚕苷和2＇-乙酰基金石蚕苷等：南泽东等1采用正相硅胶、凝胶 SephadexLH-20、MCI、ODS 以及半制备高效液相色谱等方法从塔中栽培荒漠肉苁蓉干燥肉质茎85％乙醇提取物中分离得到顺式管花苷B、顺式肉苁蓉苷K、顺式肉苁蓉苷 J、顺式异肉苁蓉苷C：张开梅7采用正、反相硅胶柱色谱技术，从肉苁蓉总苷中分离得到了3个苯乙醇苷类化合物：异类叶升麻苷、管花苷B、类叶升麻苷；张杰等采用硅胶柱色谱，制备液相色谱和 Sephadex LH-20 等方法，分离鉴定了苯乙醇苷类化合物管花苷A等；王力伟等利用反相硅胶色谱、凝胶色谱、HPLC 制备等分离纯化技术，分离得到了2＇-乙酰毛蕊花糖苷、肉苁蓉苷A、osmanthuside B等。肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物见表1，主要成分母核化学结构见图1。1.2 环烯醚萜类宋青青通过质谱分析从肉苁蓉属植物中分离表1 肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物Table 1 Phenylethanoid glycosides of C.deseticola编号 化合物名称来源参考文献1 肉苁蓉苷A（cistanoside A）肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉5,9-122 肉苁蓉苷B（cistanoside B）肉苁蓉5,93 肉苁蓉苷C（cistanoside C）肉苁蓉、盐生肉苁蓉5,9.124 顺式异肉苁蓉苷C（cis-isocistanoside C）肉苁蓉5.65 异肉苁蓉苷C（isocistanoside C）肉苁蓉5.66 肉苁蓉苷D（cistanoside D）肉苁蓉、盐生肉苁蓉57 肉苁蓉苷E（cistanoside E）肉苁蓉58 肉苁蓉苷F（cistanoside F）盐生肉苁蓉9,11,139 肉苁蓉苷G（cistanoside G）肉苁蓉5.1310 肉苁蓉苷H（cistanoside H）肉苁蓉511 肉苁蓉苷J（cistanoside J）肉苁蓉512 顺式肉苁蓉苷J（cis-cistanoside J）肉苁蓉5,613 肉苁蓉苷K（cistanoside K）肉苁蓉514 顺式肉苁蓉苷K（cis-cistanoside K）肉苁蓉5,615 肉苁蓉苷L（cistanoside L）肉苁蓉516 肉苁蓉苷M（cistanoside M）肉苁蓉517 肉苁蓉苷N（cistanoside N）肉苁蓉518 毛蕊花糖苷（acteoside）肉苁蓉、德赢vwin登录 5,9,11-1319 顺式毛蕊花糖苷（cis-Acteoside）德赢vwin登录 520 异毛蕊花糖苷（isoacteoside）肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉5,9,11-1321 2＇-乙酰毛蕊花糖苷（2＇-acetylacteoside，）肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉9,11-1322 去咖啡酰基毛蕊花糖苷（decaffeoyl mulleinglycoside）肉苁蓉1323 松果菊苷（echinacoside）肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉5,8,9,11-1324 紫藏新苷1（campneoside1）德赢vwin登录 525 异紫藏新苷1（isocampneoside1）德赢vwin登录 5,1326 紫藏新苷I1（campneoside II）德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉5,13续表1编号 化合物名称来源参考文献27 德赢vwin登录 苷（cistantubuloside）德赢vwin登录 1328 德赢vwin登录 苷A（cistantubuloside A）肉苁蓉、德赢vwin登录 5,1329 管花苷肉苁蓉B：（cistantubuloside B1）肉苁蓉、德赢vwin登录 5,1330 管花苷肉苁蓉B2（cistantubuloside B2）肉苁蓉、德赢vwin登录 5,1335 管花苷B（tubuloside B）肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉、沙苁蓉5,7,1336 顺式管花苷B（cis-tubuloside B）肉苁蓉5,637 管花苷C（tubuloside C）德赢vwin登录 538 管花苷D（tubuloside D）德赢vwin登录 539 管花苷E（tubuloside E）肉苁蓉、德赢vwin登录 5,1340 盐生肉苁蓉苷D（salsaside D）肉苁蓉、盐生肉苁蓉541 盐生肉苁蓉苷E（salsaside E）肉苁蓉、盐生肉苁蓉542 盐生肉苁蓉苷F（salsasideF）盐生肉苁蓉543 甘蓝苷E（kankanosideE）肉苁蓉1344 甘蓝苷F（kankanoside F）德赢vwin登录 545 甘蓝苷G（kankanoside G）德赢vwin登录 5,1346 甘蓝苷H：（kankanoside Hi）德赢vwin登录 5.1347 甘蓝苷H2（kankanoside 1H）德赢vwin登录 5,1348 甘蓝苷1（kankanoside1）德赢vwin登录 549 甘蓝苷J／D2（kankanoside J／b）德赢vwin登录 550 甘蓝苷Ki／K：（kankanoside Ka／K2）德赢vwin登录 551 甘蓝苷O（kankanoside O）肉苁蓉1352 甘蓝苷P（kankanoside P）肉苁蓉1353 沙苁蓉苷A（cistansinenside A）沙苁蓉554 沙苁蓉苷B（cistansinenside B）沙苁蓉555 2＇-0-乙酰基金石蚕苷（2＇-O-acetylpoliumoside）沙苁蓉556 去咖啡酰毛蕊花糖苷（decaffeoylacteoside）肉苁蓉、德赢vwin登录 557 桂叶苷（osmanthuside B）肉苁蓉、盐生肉苁蓉5,9,1358 红景天苷（salidroside）肉苁蓉、德赢vwin登录 5,11-1359 Syringalide A-3'-a-L-rhamnopyranoside肉苁蓉、德赢vwin登录 560 isosyringalide A-3'-a-β-L-rhamnopyranoside德赢vwin登录