摘要　目的：探析黄元御运用肉苁蓉汤治疗阳衰土湿之便秘的思想。方法：查阅文献法，结合临床验证。结果：黄元御从阳衰土湿、肝肠失滋入手，补肾温阳，健脾燥湿，滋肝润肠，运用肉苁蓉汤治疗阳衰土湿之便秘，验之临床，疗效明显。结论：黄元御运用肉苁蓉汤治疗阳衰土湿之便秘的思想值得临床推广。关键词　黄元御；阳衰土湿；便秘；肉苁蓉汤黄元御是清代著名医学家，尊经派的代表人物［１］。他在《四圣心源》中提出“枢轴运动”（圆运动）之观点，即崇尚气化，首重中气（脾胃），兼及四维（心、肺、肝、肾），诸病之由最终均可化于中土不作。便秘是由于大肠传导功能失常导致的以大便排出困难，排便时间或排便间隔时间延长为临床特征的一种大肠病证［２］，随着年龄的增加，便秘的发生率会逐渐增高，且伴随症状也随着年龄的增长而加重［３］。便秘迁延日久，可引起或加重直肠肛门疾病，严重者可诱发或加重心脑血管疾病，甚至引起粪性溃疡与大肠癌［４］。临床多用的寒胃滑肠药物，虽起到暂时通便的作用但会造成阴阳失衡，加重便秘，同时还会导致胃肠功能紊乱而出现腹泻、脱水等症状［５］。笔者研究《四圣心源》发现，黄元御从阳衰土湿、肝肠失滋入手，运用肉苁蓉汤补肾温阳，健脾燥湿，滋肝润肠，治疗阳衰土湿之便秘，疗效明显，现简要论述如下。１　阳衰土湿之便秘的病因病机１．１　从阳论治黄元御重视阳气的作用，大倡贵阳贱阴之说，指出人身立命，全赖阳气，唯阳气旺盛，则邪气不能外侵，七情不能内扰，神安体健，禀受天年。肾司二便，若肾阳正常则能温煦，肠道传导有力，则大便通畅；若肾阳虚弱失于温煦，则大肠传导无力而致便秘。故此黄氏在辨证中处处以顾护阳气为先，临证时从阳衰立论，认为百病之源，源于阳衰土湿。正如《素问微蕴·脏象解》所述“阳盛而病者，千百之一，阴盛而病者，尽人皆是”。１．２　从湿论治“一气周流”学说认为中焦阳气虚衰，则升降失常，水湿无以运化，百病由生。《内经》云：“中气不足，便为之变。”如脾胃功能虚弱，则肠道平滑肌痿弱，大便传送无力而易产生便秘。如《四圣心源·中气》载：“湿则中气不运，升降反作，清阳下陷，浊阴上逆，人之衰老病死，莫不出此，以故医家之药，首在中气。”黄元御在《四圣心源·六气解》中提出“湿者，太阴土气之所化也，在天为湿，在地为土，在人为脾。太阴以湿土主令，辛金从土而化湿”，阳衰则湿化而归太阴，若脾肾阳衰湿盛，不能腐化水谷；肾失温煦，凝阴固结，阳气不通，津液不行；肝失疏泄，肠道艰于传导，闭塞不开，积日延久，约而为丸，故粪若羊矢，结涩难下。《四圣心源·杂病解中》指出“以阳主开，阴主阖，阳盛则隧窍开通而便坚，阴盛则关门闭涩而便结”“便坚者，手足阳明之病……然手阳明，燥金也，戊土从令而化燥；足太阴，湿土也，辛金从令而化湿”。总之，阳衰土湿之便秘责之阳衰而阴盛，湿阻中焦，脾肾阳虚，气化失权，而致津液输布失衡，肝肠失滋，大肠传送失职，糟粕积日延久，形成坚便，正如“凡粪若羊矢者，皆阴盛而肠结，非关火旺也”。２　治疗方法及方药针对脾肾阳衰湿盛，肝肠失滋生燥而致阳衰土湿之便秘，黄元御以补肾温阳，健脾燥湿，滋肝润肠为治疗大法，选用肉苁蓉汤治之。方药组成：肉苁蓉三钱，麻仁三钱，茯苓三钱，半夏三钱，甘草二钱，桂枝三钱。方中肉苁蓉滋肝滑肠，其虽属性温，但为柔润多液之品，重用温而不燥，滋而不腻，且善通便秘［６］；麻仁润肠通便；茯苓淡渗利水，渗湿兼可健脾，以杜生痰之源；半夏燥湿化痰，降气和胃；桂枝疏木，温通阳气，协助茯苓以布津行水；甘草益气健脾，调和诸药。六药合用可补肾温阳，健脾燥湿，滋肝润肠以达通便之效，实为治疗阳衰土湿之便秘之良方。３　典型病案张某，女，４９岁，２０１７年９月２０日初诊。因饮食失调，喜食生冷，起居无常，情绪不定，便无定时，大便若羊矢，色黑而不黄，胸腹部气胀，自服硝、黄等寒胃滑肠药物，不得缓解，停药后更重。现仍自觉口淡滋腻，口渴不欲饮，口气重浊，偶有头晕，面色不华，畏寒，腰膝酸软，饮食无味，小便清长，舌淡苔白滑腻，脉象弦滑。此属脾肾阳虚湿盛之证，治宜舒肝健脾、补肾润肠，方选肉苁蓉汤。处方：肉苁蓉９ｇ，麻仁９ｇ，茯苓９ｇ，半夏９ｇ，甘草６ｇ，桂枝９ｇ。５剂，每日１剂，水煎分２次温服。二诊：胸腹部气胀缓解，面色渐红润，畏寒减轻，腰膝酸软稍缓解，再守上方服用半月，诸症皆缓解，便通纳增，渐至正常。按：本案中年妇女，便秘病之日久，妄投寒胃滑肠之品损伤脾胃，起居失节而致脾肾阳虚、痰湿壅盛之证，故见口淡滋腻，渴不欲饮，怕冷，腰膝酸软，小便清长诸症；又因起居无常，情绪不定，阳虚日久生湿而致脾气郁结，肝肠失滋化燥，故粪如羊矢，色黑而不黄者，水气旺而土气衰也。本证乃阳衰湿盛，脾气郁结而致肝肠失滋生燥，不能仅从果而治其症而不辨其因，黄元御指出临床上多数医家常用滋阴药物的时弊：“龟板、地黄、天冬之类，滋湿伐阳，慎不可用，中气一败，则大势去矣。”临床切忌一味妄投苦寒泻下之品，或单纯润肠泻热通便。治宜补肾温阳，健脾燥湿，滋肝润肠，运用肉苁蓉汤加减治疗阳衰土湿之便秘，与本案证机相符，均收佳效。参考文献：［１］　黄元御．黄元御医书精华·四圣心源［Ｍ］．孙洽熙，校注．北京：中国中医药出版社，２０１５：１０１－１０２．［２］　周仲瑛．中医内科学［Ｍ］．北京：中国中医药出版社，２００７：２５１－２５４．［３］　李乾构，王自立．中医胃肠病学［Ｍ］．北京：中国医药科技出版社，１９９５：３２５－３２６．［４］　黄样．便秘的危害及防治［Ｊ］．中华中医药学刊，２００７，２５（５）：１１２－１１３．［５］　郑学宝，胡玲，王汝俊，等．便秘治疗机制研究思路探讨［Ｊ］．广州中医药大学学报，２００１，１８（３）：２８３－２８６．［６］　陈华良，顾文芬．自拟肉苁蓉汤治疗习惯性便秘４０例疗效观察［Ｊ］．云南中医中药杂志，２００４，２５（２）：２２．

[ 摘要]　目的：采用三种方法制备pPB 修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体，并对其体外性质进行考察。方法：分别采用薄膜分散法、二次包封法、逆相蒸发法制备肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体，并对不同方法制得脂质体的粒径、电位、包封率进行比较。结果：薄膜分散法、二次包封法、逆相蒸发法制得的脂质体粒径分别为（209.20 ± 1.77） nm、（212.70 ± 1.27） nm、（196.40 ±1.56） nm,ξ 电位分别为（– 43.35 ± 2.17） mV、（– 37.85 ± 0.68） mV、（– 47.95 ± 2.62） mV左右，包封率分别为（28.55 ± 5.61）%、（38.46 ± 7.85）%、（33.88 ± 3.50）%。结论：三种方法制得的脂质体的包封率之间有显著性差异，其中二次包封法所得脂质体的包封率最高，因此选择二次包封法作为pPB修饰的肉苁蓉总苷脂质体的制备方法。[ 关键词]　苯乙醇总苷；脂质体；包封率；粒径肉苁蓉（Herba Cistanches）为列当科植物德赢vwin登录 的干燥带鳞叶的肉质茎，具有补肾、益经血、润肠通便等作用，有“沙漠之参”之称[1-3]。苯乙醇总苷是肉苁蓉的主要化学成分之一，主要包含松果菊苷与毛蕊花糖苷两种成分。研究显示苯乙醇总苷能够明显抑制机体内酪氨酸酶的活性，并在修复自由基损伤、抗衰老、抗疲劳、抗色素沉着、抗老年痴呆症方面显示了强大的功效[3-5]。肝纤维化（hepatic fibrosis，HF）是肝脏遭受反复或慢性损伤后的一种损伤与修复过程，主要与慢性炎症和引起慢性肝脏损伤的化学因素相关。研究表明，肉苁蓉苯乙醇总苷可降低肝纤维化大鼠肝组织中的胶原纤维生成，因此具有良好的抗肝纤维化的作用[6-8]。环肽pPB 能特异性识别血小板源生长因子受体，因此能靶向到肝纤维化细胞。脂质体（liposomes）是由磷脂构成的双分子层结构的微型囊泡，脂质体作为药物载体具有缓释、降低药物毒性、保护被包封的药物和靶向性等特点，以脂质体给药后，其可将药物自动转运到肝、脾、肺和骨髓等组织器官，对于治疗肝、脾部位疾病及提高药物的治疗指数具有很好的作用[9-11]。在上述基础上，本研究拟将肉苁蓉苯乙醇总苷制成pPB环肽修饰的脂质体，利用pPB 环肽作用，使脂质体聚集到肝纤维化的细胞，更好地发挥肉苁蓉苯乙醇总苷治疗肝纤维化的作用。本研究采用不同的制备方法分别制备pPB 修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体，并选择松果菊苷为含量测定指标，对脂质体的粒径、电位和包封率进行测定，最终确定该脂质体的制备方法[12-13]。1　仪器与试药1.1　仪器AB135-S分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）；T6新世纪紫外可见分光光度仪（北京普析通用仪器有限公司）；EYELAN-2100 旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）；Malvern Nano-2S90 型激光粒径测定仪（英国马尔文仪器有限公司）；JEOL-1340H 透射电子显微镜（捷欧路科贸有限公司）；85-2 型控温磁力搅拌机（江苏金怡仪器科技有限公司）；KQ-500DE 超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。1.2　试药松果菊苷对照品（批号327A021，含量98%，北京索莱宝科技有限公司）；苯乙醇总苷原料药（实验室自制，纯度95%）；大豆卵磷脂（Lipoid 公司）；二棕榈磷脂酰胆碱（DPPC，意大利Corden Pharma 公司，批号T0343）；胆固醇（美国Sigma 公司）；马来酰基- 二硬脂酸磷脂酰乙醇胺- 聚乙二醇2000（Mal-DSPE-PEG2000，美国Nanocs 公司，批号130916）；pPB（Cys*-Ser-Arg-Asn-Leu-lle-Asp-Cys*，批号20170204，含量98.49%，上海吉尔生化有限公司）；N- 琥珀酰亚胺基-S- 乙酰硫基乙酸酯（SATA，美国Sigma 公司，批号SLBR3300V）；Sephadex G-50（100-300）（美国Sigma 公司，批号SLBB6637V）；其余试剂均为分析纯。2　方法与结果2.1　含量测定方法的建立2.1.1　最大吸收波长的选择　取适量甲醇溶解松果菊苷对照品，以甲醇作为空白，在紫外分光光度仪上200 ~ 400 nm 范围内进行紫外扫描，考察最大吸收波长，结果显示在330 nm 处松果菊苷有最大吸收。2.1.2　标准曲线建立　精密称取松果菊苷对照品适量，用甲醇溶解并定容至刻度，得200 μg·mL-1 的松果菊苷对照品储备液。分别精密量取对照品储备液适量，用甲醇溶解，制得浓度分别为5.0、8.0、10.0、20.0、40.0 μg·mL-1 对照品溶液，将各溶液置于330 nm处测定吸光度值，以浓度（C）对吸光度（A）值作线性回归，得线性回归方程C = 42.615 A + 1.210 8，r =0.999 8，结果表明，在5.0 ~ 40.0 μg·mL-1 范围内线性关系良好。2.1.3　精密度实验　配制10.0、20.0、40.0 μg·mL-1 的低、中、高浓度的松果菊苷对照品溶液，每个浓度配3份，1 天内重复测定3 次，计算日内精密度，连续测定3 d，计算日间精密度。结果显示日内精密度和日间精密度的RSD值均小于2%，表明方法精密度良好。2.1.4　回收率考察　取0.8 mL 肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体作为样品的加入量，并加入高、中、低浓度松果菊苷对照品溶液分别为0.5、1.0、2.0 mL，使对照品量分别为样品加入量的120%、100%、80%，样品与对照品溶液混合均匀后，用甲醇定容至刻度，用紫外分光光度计测定药物含量，计算对照品的加入量及回收率。回收率（%）=（测得总量– 样品加入量）/ 实际对照品的加入量×100%。结果显示松果菊苷的平均回收率分别为98.85%、100.67%、99.62%，RSD均小于2%，回收率符合规定，结果见表1。2.2　肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体的制备2.2.1　薄膜分散法制备肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体　称取卵磷脂、DPPC、胆固醇适量（质量比为2∶2∶1），溶于适量氯仿和甲醇混合溶剂中（氯仿∶甲醇 = 4∶2，v∶v），置于旋转蒸发仪，在49 ~ 50 ℃ 下旋转蒸发使成膜状，然后加入250 μg·mL-1的苯乙醇总苷水溶液旋转水化，即得脂质体，将所得脂质体分别用0.45 μm微孔滤膜挤压4 ~ 5 次，0.22 μm 的微孔滤膜挤压18 ~20 次，即得肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体。2.2.2　二次包封法制备肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体　称取卵磷脂、DPPC、胆固醇适量（质量比为2∶2∶1），溶于适量氯仿和甲醇混合溶剂中（氯仿∶甲醇 = 4∶2，v∶v），置于旋转蒸发仪，在49 ~ 50 ℃ 下旋转蒸发使成膜状，然后加入250 μg·mL-1的苯乙醇总苷水溶液旋转水化，得脂质体备用。同法再次取磷脂成分溶于氯仿，旋转成膜状后，将制得备用的脂质体加入，再次旋转水化，即得二次包封的脂质体。将所得脂质体分别用0.45 μm 的微孔滤膜挤压4 ~ 5 次，0.22 μm 的微孔滤膜挤压18 ~ 20 次，即得肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体。2.2.3　逆相蒸发法制备肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体　称取质量比为2∶2∶1 的卵磷脂、DPPC、胆固醇，溶于适量氯仿和甲醇混合溶剂中（氯仿∶甲醇 = 4∶2，v∶v），加入250 μg·mL-1 苯乙醇总苷原料药水溶液适量，冰浴超声1 h，直至形成稳定的乳剂，采用旋转蒸发仪减压蒸发，达到胶态后，加适量水水化，继续减压蒸发除去残留溶剂，将所得脂质体分别用0.45 μm的微孔滤膜挤压4 ~ 5次，0.22 μm的微孔滤膜挤压18 ~20 次，即得肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体。2.2.4　pPB-DSPE-PEG2000 的制备　首先将环肽pPB分子中引入巯基（-SH），然后使pPB 环肽上巯基与Mal-DSPE-PEG2000 末端的马来酰基发生C-S 加成反应。具体方法为：将4 mg pPB 溶于PBS 缓冲液，并与8 mg SATA 混合，使SATA与pPB 质量比为2 : 1,在室温下搅拌2 h 后，加入Mal-DSPE-PEG2000，室温下磁力搅拌24 h，将所得反应产物用截留分子量为3500Da 的透析袋透析除去多肽、SATA等，截留下链接好的产物pPB-DSPE-PEG2000，将产物冷冻干燥后备用。为检测偶联是否成功，将pPB-PEG2000-DSPE和Mal-PEG2000-DSPE分别溶于氚代氯仿中，分别测定1H-NMR，通过比较马来酰基特征峰（6.7 ppm）的消失与否来验证偶联是否成功。结果表明pPB-PEG2000-DSPE 1H-NMR图谱中6.7 ppm未见相应的马来酰基峰出现，说明偶联已成功。2.2.5　pPB修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体的制备　称取大豆磷脂、DPPC、胆固醇、pPB-DSPE-PEG200（0 质量比为10 : 10 : 5 : 1）溶于氯仿和甲醇的混合溶剂，同“2.2.2”项下方法制备pPB修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体。2.3　苯乙醇总苷脂质体的体外性质考察2.3.1　不同方法制得的脂质体的粒径、电位测定　采用Malvern粒径测定仪测定脂质体的粒径和电位，结果见表2，由结果可知，3 种方法形成的脂质体粒径均在200 nm左右，粒径均匀，电位均在35 ~ 45 mV。2.3.2　脂质体的包封率测定　1）洗脱曲线测定：采用葡聚糖凝胶柱洗脱法测定脂质体的包封率，取SephadexG-50 装柱，使径高比为1∶10（cm∶cm），取1 mL 脂质体上样，用pH 7.2 的磷酸盐缓冲液洗脱，流速控制在1 mL·min-1，每2 mL 接取一个流份，共接取30个流份，所得流份分别用2 mL甲醇溶解，置于330 nm处测定吸收度，以流份为横坐标，以药物浓度为纵坐标，绘制洗脱曲线。结果表明，脂质体流份在第3 ~ 6流份流出，游离药物在7 ~ 14 流份流出。2）不同制备方法制得的脂质体包封率的测定：包封率测定方法为：取SephadexG-50（粒径100 ~ 300μm）装柱，使径高比为1 cm∶10 cm，取不同制备方法制得的脂质体1 mL 分别上样，用pH 7.2 的磷酸盐缓冲液进行洗脱，流速控制在1 mL·min-1，收集脂质体流份，从中取2 mL 加甲醇破乳溶解后测定松果菊苷的含量，作为脂质体中包封的药物含量。另取苯乙醇总苷脂质体1 mL 直接加甲醇破乳溶解后，测定松果菊苷的含量作为脂质体中药物总量。按下述公式计算包封率：包封率%=（脂质体中包封药物量/ 脂质体中药物总量）×100%。本研究结果表明，采用薄膜分散法、二次包封法、逆相蒸发法制得脂质体的载药量分别为（28.55 ±5.61）%，（38.46 ± 7.85）%，（33.88 ± 3.50）%。用SPSS16.0 软件中SNK-Q 检验对三种方法制备的肉苁蓉总苷脂质体包封率均数两两比较，以P < 0.05 为差异具有统计学意义。结果显示，二次包封法制得的脂质体的包封率最高。2.3.3　脂质体的载药量测定　取制得的脂质体1 mL精确称重，记录载药脂质体的总重量，将此1 mL 脂质体同“2.3.2”项下方法上样洗脱后，测得脂质体中的载药量，依据公式：载药量=Wd/WL×100%，其中Wd表示包封于脂质体中的药量，WL 表示载药脂质体的总重量。结果显示采用薄膜分散法、二次包封法、逆相蒸发法制得脂质体的载药量分别为（2.73±0.57）%，（3.71±0.32）%，（3.28±0.49）%。2.3.4　pPB 修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体的体外性质测定　1）pPB 修饰的苯乙醇总苷脂质体的粒径、电位、包封率、载药量的测定：对不同制备方法所得的脂质体的粒径、电位、包封率和载药量的结果进行比较，结果表明，二次包封法制得的脂质体的包封率和载药量最高，粒径和电位与其它制备方法相似，因此确定二次包封法是制备脂质体的最优方法。在此基础上，采用二次包封法制备了pPB 修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体，其粒径为（227.60±1.63）nm、电位为（– 45.37±1.62） mV、包封率为（35.55±7.35）%、载药量为（3.80±0.28）%。2）脂质体形态观察：取二次包封法制得的pPB修饰的苯乙醇总苷脂质体混悬液1 滴，滴至专用铜网上，用磷钨酸染色后，自然晾干，于透射电镜下观察脂质体形态，结果见图1。3　讨论脂质体是磷脂双分子层构成的囊泡，无毒副作用和免疫原性，用其包封药物后，具有使药物生物利用度提高，增加药物靶向性，降低药物毒性等优点。同时在脂质体表面偶联能与靶点高效结合的配体（如pPB 环肽）后，可使脂质体与靶细胞表面相应的受体分子特异性结合，从而将药物靶向至具有特异性受体的细胞、组织或器官。通过HPLC方法测定，发现肉苁蓉总苷主要成分为松果菊苷和毛蕊花糖苷，这两种成分在HPLC条件下能够同时出峰，其中松果菊苷含量更高，同时根据文献报道，肉苁蓉总苷可选用松果菊苷作为指标性成分，因此本研究选用松果菊苷作为测定肉苁蓉总苷的指标性成分。有文献报道，除HPLC方法外，由于松果菊苷在总成分中占比较高，因此为了便于测定，本文在采用UV法测定肉苁蓉苯乙醇总苷含量时，以测定松果菊苷含量为主要指标[14]。凝胶柱层析法是利用分子筛的原理，通过在凝胶柱上滞留时间的差别对传递体和游离药物进行分离，脂质体的分子大，滞留时间短，洗脱较快；游离药物分子小，滞留时间长，洗脱较慢，从而使脂质体与游离药物得到较好的分离。选择适当的有机溶剂和油水比可制备较稳定的脂质体，本研究过程中发现氯仿和甲醇混合溶剂为有机溶剂，比单独使用一种溶剂更容易形成稳定的脂质体。本实验测得的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体的包封率较低，可能与该药物本身的性质有直接的关系。当药物油水分布系数（logP）< – 0.3或> 4.5时，药物可被包封成具有较高包封率的脂质体，否则包封率较低。肉苁蓉苯乙醇总苷的logP约为1，介于两者之间，这可能是导致脂质体包封率较低的主要因素[15]。[ 参考文献][1]　 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摘 要　目的：HPLC测定在液氮条件研磨以及在自然风干条件下研磨不同种肉苁蓉中松果菊苷的含量，比较野生肉苁蓉和人工培养的肉苁蓉中松果菊苷含量。方法：采用日本岛津LC-20A高效液相色谱仪测定。色谱柱为YMC-Inertsil ODS-SP(4.6 mm×150 mm，5μm；YMC Co Ltd，Japan)；流动相：乙腈-甲醇-1%甲酸（10∶15∶75）；检测波长334 nm；流速0.7 mg·mL-1。柱温30 ℃。结果：处理条件的不同对松果菊苷含量有非常明显影响，液氮条件下研磨的肉苁蓉中松果菊苷的含量普遍高于自然风干条件下研磨的肉苁蓉；野生肉苁蓉的有效成分含量要远高于人工培养。关键词　肉苁蓉；松果菊苷；高效液相色谱法肉苁蓉（Herba Cistanches Y.C.Ma）又称红柳、大芸，属于濒危物种，是一种寄生在沙漠树木梭梭、红柳根部的寄生植物。在我国主要分布于内蒙古、宁夏、甘肃和新疆[1]，素有“沙漠人参”之美誉，具有极高的药用价值。中国药典规定，以列当科植物肉苁蓉的干燥带鳞片肉质茎入药[2]，其主要药用成分有苯乙醇苷类，根据其取代基的不同可分为松果菊苷、类叶升麻苷、肉苁蓉苷等[3]。其中，松果菊苷（Echinacoside）具有改善性功能、抗氧化和清除自由基作用，而且具有一定的抗凋亡作用[4]。20世纪80年代以来，高速液相色谱技术（HPLC）广泛应用于天然产物的分离中，这种技术为苯乙醇苷类化合物的分离提供了一种简单快速的方法[5-6]。选择采用HPLC法，分析不同生长时期野生肉苁蓉和人工栽培肉苁蓉主要有效成分松果菊苷的含量，为合理开发和利用肉苁蓉及有效评价肉苁蓉的质量提供一定科学依据。1　仪器与试剂日本岛津LC-20A高效液相色谱仪，LC-20AT串联双柱塞泵，CTO-20A柱温箱，SPDA-20A紫外可见双波长检测器；昆山KQ-100型超声波清洗器；乙腈（色谱纯，天津光复化工研究所）；甲醇（色谱纯，天津光复化工研究所）；甲酸（色谱纯，天津光复化工研究所）；水（屈臣氏蒸馏水）。对照品：松果菊苷，含量≥98.43%（上海原叶生物科技有限公司）。肉苁蓉样品5种：人工鲜一年期以下（未出头）肉苁蓉，人工鲜（出头）肉苁蓉，人工干肉苁蓉，野生鲜肉苁蓉，野生三年期以上干肉苁蓉。2　方法与结果2.1　色谱条件的确定为使所测松果菊苷在液相色谱图中的峰与其他物质分离，以及控制泵压、时间能在合适的范围内，对色谱的条件进行了实验改进，经流动相的优化实验得出结论：温度越高，液相的保留时间越短，浓度越低，泵压越小且保留时间变短，但峰高变低，不利于测量。根据室温、泵的最大承压等客观状况，最终确定以流动相为乙腈-甲醇-1%甲酸（10:15:75）、检测波长334 nm、流速0.7 mL/min、柱温30 ℃的条件进行分析，得到的信息较为丰富，各成分峰形尖锐而且分离度良好。2.2　色谱柱的确定色谱柱：YMC-Inertsil ODS-SP(4.6 mm×150 mm，5 μm；YMC Co Ltd，Japan)。2.3　实验溶液制备2.3.1 标准品溶液的制备精密称取松果菊苷标准品适量，加流动相乙腈-甲醇-1%甲酸（10:15:75），分别制成0.06 mg·mL-1、0.05 mg·mL- 1、0.04 mg·mL- 1、0.03 mg·mL- 1、0.02 mg·mL-1、0.01 mg·mL-1和0.005 mg·mL-1的松果菊苷标准品溶液。2.3.2 供试品溶液的制备取适量的人工一年期以下（未出头）鲜肉苁蓉、人工鲜肉苁蓉、野生鲜肉苁蓉用研钵在液氮下研磨成粉末；同样再取适量的上述3种肉苁蓉切成块状，在阴凉通风处自然风干，干燥后，将其粉碎研磨成粉末状。人工干肉苁蓉及野生三年期以上干肉苁蓉直接粉碎研磨成粉末状。取上述制的肉苁蓉粉末（过100目筛）0.5 g，置于离心管中，加入流动相25 mL，称重后浸泡30 min，超声处理40 min，冷却后再称定重量，用流动相补足缺失的重量，摇匀后离心，取上清液用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。2.4　松果菊苷标准样品回归曲线的绘制将配制好的松果菊苷标准样品分别注入液相色谱仪，以对照品的浓度（mg·L-1）为横坐标，相应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线图，得到回归方程为Y=66 867 100X-46 360.83，R2=0.986 37，显示松果菊苷在0.1~1.2μg内呈良好线性关系。2.5　样品测定按照2.3所示方法，制备样品液，然后在色谱条件项下测定，标样及样品的HPLC图谱见图1。各样品中松果菊苷的含量见表1。3　讨论松果菊苷是肉苁蓉主要的有效成分之一，松果菊苷能够很好地代表肉苁蓉药理作用的化学物质基础，使药材的质量评价和其药理作用相对应，提高肉苁蓉质量评价的针对性。处理条件的不同对松果菊苷含量有明显的影响，在液氮条件下研磨的肉苁蓉要比在自然风干条件下研磨的肉苁蓉中松果菊苷的含量普遍都高。普通的风干会降低松果菊苷的含量，可能是在风干过程中损耗或是松果菊苷发生了转化。为防止有效成分含量减少、保证肉苁蓉药效，应选取合适的处理方法。一直以来，大部分人认为肉苁蓉的人工栽培环境以及生长习性与野生品没有明显区别，质量也相差无几，往往只重视产量，并未对质量进行分析。本研究表明，人工栽培的肉苁蓉松果菊苷的含量低于野生肉苁蓉松果菊苷的含量。最高的为野生鲜肉苁蓉0.336 0%，含量最低的是人工鲜肉苁蓉0.007 0%。因此在栽培技术上仍需研究，提高有效成分的含量。肉苁蓉质量的好坏取决于其有效成分松果菊苷含量的多少，而有效成分又与采收的季节、时间、方法有很大的关系，所以肉苁蓉的采收应该考虑有效成分的积累状态和生长发育阶段。既考虑质量，又考虑产量。本方法测定松果菊苷的含量，简便、精密度高、重复性好，结果准确可靠。可用于肉苁蓉药材的含量测定。参考文献：[1] 雷载权.中药学[M].上海:上海科学技术出版社,2001.[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[M].北京:化学工业出版社,2000.[3] 吴培培,闫明,霍仕霞.苯乙醇苷类化合物的药理研究进展[J].医药导报,2006,30(3):142-143.[4] 蒲小平,李晓蓉,李慧浓,等.肉苁蓉成分campneosideⅡ对神经毒索MPP+诱发细胞凋亡的保护作用[J].北京大学学报(医学版),2001,33(3):217-220.[5] Lei L, Yang F, Zhang T, et al. Ito. preparative isolationand Purification of Acteoside and 2’-acety-lacteosidefrom Cistanches Salsa (C.A.Mey.)G.Beck by High-speedCounter-current Chromatography[J].J. Chromatogr. A.,2001,912:181-185.[6] Li L, Tsao R, Liu Z, et al. Isolation and Purification ofActcoside and lsoacteoside from Plantago Psyllium L,byHigh-speed Counter-current Chromatography[J].J.Chromatogr. A.,2005,1063(1):161-169.

［摘要］ 目的: 通过HPLC-MS 对新疆塔中荒漠栽培肉苁蓉Cistanche deserticola 药材60%甲醇提取物的色谱图进行鉴定。方法: 采用Agilent ZOＲBAX Eclipse Plus C18色谱柱( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，以乙腈-水( 含0. 1%的甲酸) 为流动相进行梯度洗脱，流速1 mL·min － 1 ，检测波长254 nm，柱温25 ℃，进样量10 μL。结果: 在相同色谱条件下，通过与已分离得到的对照品的保留时间、相对分子质量以及碎片离子进行比较，对新疆塔中荒漠栽培肉苁蓉药材的16 个色谱峰中的17 个成分进行了准确的鉴定，分别确定为松柏苷，去甲紫丁香苷，紫丁香苷，松果菊苷，肉苁蓉苷A，类叶升麻苷( 管花苷A) ，肉苁蓉苷B，异类叶升麻苷，2'-乙酰基肉苁蓉苷A，肉苁蓉苷C，异肉苁蓉苷C，2'-乙酰基类叶升麻苷，管花苷B， epimeridinoside A，肉苁蓉苷K，肉苁蓉苷J。结论: 该研究方法适用于肉苁蓉60% 甲醇提取物色谱峰的鉴定，为全面分析该药材的化学成分提供了一定的科学数据。［关键词］ 荒漠肉苁蓉; 肉苁蓉属; 液质联用; 甲醇提取物肉苁蓉又名“大芸”，为著名的补益中药，在我国内蒙古、宁夏、甘肃及新疆都有分布［1］。具有补肾阳、益精血、润肠通便的功效，临床常用于治疗男子阳痿、女子不孕、腰膝冷痛、血枯便秘等［2-3］。2015年版《中国药典》一部收载的肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉和德赢vwin登录 的干燥肉质茎［4］。本课题组多年来对肉苁蓉属植物进行了系统深入的研究，该属植物化学成分主要为苯乙醇苷类，除此还有环烯醚萜及其苷类、木脂素及其苷类、苯甲醇苷类等［5］。现代药理学研究表明该属植物主要成分苯乙醇苷类化合物，具有神经保护、抗氧化、保肝、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗炎等作用［6-11］。在我国，肉苁蓉分布于内蒙古西部、新疆北疆及青海的柴达木盆地，在新疆南疆的塔里木盆地无自然分布。20 世纪90 年代末，为了保护塔中油田，治理沙漠，油田指挥部在塔中油田周围及沙漠公路两侧引种了大量的梭梭Haloxylon ammodendron，同时在梭梭上接种了肉苁蓉，至今已有10 多年的时间。由于南疆地区温暖的气候，加上石油基地良好的滴灌条件，其肉苁蓉产量很高，亩产鲜肉苁蓉达到500 kg以上［8］。肉苁蓉药材中很多化学成分由于取代基连接位置不同而产生了大量的同分异构体，这就给对该药材色谱峰的鉴定工作带来很大的困难，如果单纯依靠LC-MS 而没有单体化合物作为对照很难准确鉴定色谱峰的成分，因此，前期很少有文献报道这方面的工作。作者前期从塔中荒漠栽培肉苁蓉中分离得到很多单体化合物［9-11］，通过前期得到的这些单体化合物，对肉苁蓉60% 甲醇提取物的HPLC 部分色谱峰进行准确的鉴定。这样不仅可以避免后面研究肉苁蓉化学成分中对于一些已知化合物的重复鉴定工作，也为进一步对于该药材质量控制等方面的研究有一定的借鉴作用。本文主要报道通过HPLC-MS 鉴定了荒漠肉苁蓉60% 甲醇提取物的17 个成分。1 材料Inova-500 型核磁共振仪( 美国Varian 公司) ;6320 Ion Trap 型LC-MS 质谱仪，Eclipse XDB-C18色谱柱( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ( 美国Agilent 公司) ; QUINTIX313-1CN 型1 /1 万电子天平( 赛多利斯公司) ; KQ-500DV 型超声波清洗器( 江苏昆山市超声仪器有限公司) ; KMUP-Ⅰ痕量分析型超纯水发生系统( 成都浩纯仪器设备有限责任公司) 。本实验所用的39 个对照品均是笔者前期从塔中荒漠栽培肉苁蓉中分离得到，并且通过NMＲ 等波谱技术确定其结构。39 个对照品结构分别鉴定为肉苁蓉苷J，肉苁蓉苷K，肉苁蓉苷L，肉苁蓉苷M，肉苁蓉苷N，epimeridinoside A，异肉苁蓉苷C，管花苷B，异类叶升麻苷，异角胡麻苷，肉苁蓉苷D，肉苁蓉苷C，类叶升麻苷，2'-乙酰基肉苁蓉苷A，2'-乙酰基类叶升麻苷，肉苁蓉甘B，肉苁蓉甘A，松果菊苷，管花苷A，肉苁蓉苷E，红景天苷，6'-乙酰基红景天苷， salsaside B，紫丁香苷，去甲基紫丁香苷，松柏苷，( 2E，6E) -3，7-dimethyl-8-hydroxyoctadien-1-O-β-D-glucoside，( + ) -丁香脂素，( + ) -丁香脂素-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，( + ) -isoeucommin A，eucomminA，( + ) -松脂素单甲基醚-β-D-葡萄糖苷，落叶松脂醇-4'-O-β-D-葡萄糖苷，落叶松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷，conicaoside，dehydrodiconiferyl alcohol 4-O-β-Dglucopyranoside，橙皮素A，阿拉善苷A，6-去氧梓醇。以上所有对照品纯度均＞ 98. 0%。乙腈为色谱纯( 美国DikmaPure) ，水为超纯水，其他试验过程中用到的试剂均为分析纯试剂，由北京化工厂生产。本实验所用药材肉苁蓉于2010 年11 月采自新疆塔中荒漠地区，经北京大学药学院屠鹏飞教授鉴定为列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola 的干燥肉质茎，标本存放于北京大学中医药现代研究中心( 标本编号CD201011) 。2 方法与结果2. 1 对照品溶液制备取前期从肉苁蓉中得到的39 个对照品各约1 mg，精密称定，分别置5 mL 量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，即得各单一对照品溶液。2. 2 供试品溶液的制备参考2015 年版《中国药典》，取本品粉末( 过四号筛) 约1 g，精密称定，置100 mL 棕色瓶中，精密加入60%甲醇50 mL，密塞，摇匀，称定质量，浸泡30 min，超声处理40 min，放冷，再称定质量，加50% 甲醇补足减少的质量，摇匀，静置，取上清液，用0. 45 μm 的微孔滤膜过滤，取续滤液即得供试品溶液。2. 3 色谱条件采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，检测波长254 nm，柱温25 ℃; 以乙腈( A) -0. 1% 甲酸水溶液( B) 为流动相，梯度洗脱( 0 ～ 20 min，5% ～ 15%A; 20 ～ 50 min，15% ～ 30% A; 50 ～ 60 min，30% ～ 50% A; 60 ～70 min，50% ～ 95%A) ; 流速1. 0 mL·min － 1，进样量10 μL。2. 4 质谱条件毛细管温度350 ℃; 毛细管电压3 500 V; 夹套气( 氮气) 流速12. 0 L·min － 1 ; 辅助气( 氮气) 压力206. 8 kPa; 质谱全扫描范围为m/z50 ～ 1 000; 碰撞气体氦气，试验过程中碰撞能量自动选择; 正负离子模式各采集1 针。2. 5 对照品测试分别将2. 1 项下制备的39 个对照品溶液在2. 3 项色谱条件以及2. 4 项质谱条件下进行测试，并记录其保留时间和相对分子质量( 表1) 。2. 6 供试品溶液测定取采自新疆塔中荒漠地区的肉苁蓉药材，按2. 2 项下方法制备供试品溶液，再按2. 3 项下的色谱条件以及2. 4 项下的质谱条件进行测定，测定其HPLC 色谱图以及正负离子模式下的质谱图( 图1 ～ 3) 。2. 7 药材HPLC 色谱图鉴定在同一条件下( 2. 3项色谱条件以及2. 4 项质谱条件) ，通过比较供试品和对照品的保留时间以及相对分子质量进行成分鉴定，供试品色谱峰( 图1) 具体鉴定过程如下。2. 7. 1 色谱峰1 的鉴定色谱峰1 的保留时间为16. 67 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z365 为［M + Na］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 387 ［M + COOH］－ ，确定峰1 的相对分子质量为342。同时给出碎片离子m/z 179，来源于苷键断裂失去1 分子葡萄糖163 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量将色谱峰1 鉴定为松柏苷。2. 7. 2 色谱峰2 的鉴定色谱峰2 的保留时间为17. 36 min，负离子模式下给出准分子离子峰m/z357［M – H］－ ，393［M + Cl］－ ，确定峰2 的相对分子质量是358。同时给出碎片离子m/z 195，来源于苷键断裂失去1 分子葡萄糖163 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量将色谱峰2 鉴定为去甲紫丁香苷。2. 7. 3 色谱峰3 的鉴定色谱峰3 的保留时间为19. 04 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z395［M + Na］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 417［M + HCOO］－ ，确定峰3 的相对分子质量是372。同时给出碎片离子m/z 209，来源于苷键断裂失去1 分子葡萄糖163 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量将色谱峰3 鉴定为紫丁香苷。2. 7. 4 色谱峰4 的鉴定色谱峰4 的保留时间为27. 66 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z804［M + NH4］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 785［M – H］－ ，确定峰4 的相对分子质量是786。同时给出碎片离子m/z 623，来源于酯键断裂失去1 分子咖啡酰基163 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量鉴定色谱峰4 为松果菊苷。2. 7. 5 色谱峰5 的鉴定色谱峰5 的保留时间为31. 48 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z818［M + NH4］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 799［M – H］－ ，确定峰5 的相对分子质量是800。同时给出碎片离子m/z 637，来源于酯键断裂失去1 分子咖啡酰基163 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量确认色谱峰5 为肉苁蓉苷A。2. 7. 6 色谱峰6 的鉴定色谱峰6 的保留时间为34. 17 min，正离子模式下给出2 个准分子离子峰m/z 846，642 ［M + NH4］+ ，负离子模式下也给出2个准分子离子峰m/z 827，623 ［M – H］－ ，推测峰6可能含有2 个化合物，相对分子质量分别为828，624。同时分别给出碎片离子m/z 665，461，来源于酯键断裂失去1 分子咖啡酰基163 Da，碎片离子m/z 622 来源于乙酰基酯键断裂。这2 个化合物都分离得到，结合对照品的保留时间和相对分子质量鉴定色谱峰6 为类叶升麻苷和管花苷A 的混合物。2. 7. 7 色谱峰7 的鉴定色谱峰7 的保留时间为35. 34 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z832［M + NH4］+ ，837［M + Na］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 813［M – H］－ ，得出峰7 的相对分子质量是814。同时给出碎片离子m/z 637，来源于酯键断裂失去1 分子阿魏酰基177 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量鉴定色谱峰7 为肉苁蓉苷B。2. 7. 8 色谱峰8 的鉴定色谱峰8 的保留时间为36. 17 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z647［M + Na］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 623［M – H］－ ，确定峰8 的相对分子质量是624。同时给出碎片离子m/z 461，来源于酯键断裂失去1 分子咖啡酰基163 Da。结合对照品的保留时间和相对相对分子质量鉴定色谱峰8 为异类叶升麻苷。2. 7. 9 色谱峰9 的鉴定色谱峰9 的保留时间为38. 20 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z860［M + NH4］+ ，865［M + Na］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 841［M – H］－ ，877［M +Cl］－ ，确定峰9 的相对分子质量是842。同时给出碎片离子m/z 679，636 来源于酯键断裂失去1 分子咖啡酰基163 Da 以及1 分子乙酰基43 Da。与对照品的保留时间和相对分子质量一致，鉴定色谱峰9为2'-乙酰基肉苁蓉苷A。2. 7. 10 色谱峰10 的鉴定色谱峰10 的保留时间为39. 04 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z656［M + NH4］+ ，661［M + Na］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 637［M – H］－ ，673［M +Cl］－ ，确定峰10 的相对分子质量是638。同时给出碎片离子m/z 475，来源于酯键断裂失去1 分子咖啡酰基163 Da。与对照品的保留时间和相对分子质量一致，鉴定色谱峰10 为肉苁蓉苷C。2. 7. 11 色谱峰11 的鉴定色谱峰11 的保留时间为40. 82 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z661［M + Na］+ ，677［M + K］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 637［M – H］－ ，673［M + Cl］－ ，可以确定峰11 的相对分子质量是638。同时给出碎片离子m/z 475，来源于酯键断裂失去1 分子咖啡酰基163 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量将色谱峰11 鉴定为异肉苁蓉苷C 。2. 7. 12 色谱峰12 的鉴定色谱峰12 的保留时间为41. 48 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z684 ［M + NH4］+ ，689 ［M + Na］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 665 ［M – H］－ ，可以确定峰12 的相对分子质量是666。同时给出碎片离子m/z503，460 来源于酯键断裂失去1 分子咖啡酰基163 Da以及1 分子乙酰基43 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量将色谱峰12 鉴定为2'-乙酰基类叶升麻苷。2. 7. 13 色谱峰13 的鉴定色谱峰13 的保留时间为44. 29 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z689［M + Na］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 665［M – H］－ ，得出峰13 的相对分子质量是666。同时给出碎片离子m/z 503，460 来源于酯键断裂失去1 分子咖啡酰基163 Da 以及1 分子乙酰基43 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量将色谱峰13 鉴定为管花苷B。2. 7. 14 色谱峰14 的鉴定色谱峰14 的保留时间为46. 67 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z675［M + Na］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 651［M – H］－ ，得出峰14 的相对分子质量是652。同时给出碎片离子m/z 475，来源于酯键断裂失去1 分子阿魏酰基177 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量将色谱峰14 鉴定为epimeridinoside A。2. 7. 15 色谱峰15 的鉴定色谱峰15 的保留时间为49. 90 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z698［M + NH4］+ ，703［M + Na］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 679［M – H］－ ，715 ［M +Cl］－ ，得出峰15 的相对分子质量是680。同时给出碎片离子m/z 517，474 来源于酯键断裂失去1 分子咖啡酰基163 Da 以及1 分子乙酰基43 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量将色谱峰15 鉴定为肉苁蓉苷K。2. 7. 16 色谱峰16 的鉴定色谱峰16 的保留时间为55. 36 min，正离子模式下给出准分子离子峰m/z717［M + Na］+ ，负离子模式下给出准分子离子峰m/z 693 ［M – H］－ ，729 ［M + Cl］－ ，得出峰16 的相对分子质量是694。同时给出碎片离子m/z 517，474 来源于酯键断裂失去1 分子阿魏酰基177 Da 以及1 分子乙酰基43 Da。结合对照品的保留时间和相对分子质量将色谱峰16 鉴定为肉苁蓉苷J。以上采用HPLC-MS 技术并结合已分离得到的对照品的相对分子质量、保留时间以及碎片离子对肉苁蓉60%甲醇提取物色谱峰进行鉴定，结果对16 个色谱峰中的17 个成分进行了准确的鉴定( 表2) 。3 讨论3. 1 供试品制备方法的选择本研究主要目的是鉴定肉苁蓉的HPLC 色谱峰，因此，选择提取溶剂和提取方法都是基于能得到更多的HPLC 色谱峰而进行的。课题组长期开展肉苁蓉药材的相关研究，在质量分析方面做了很多工作。本文选择肉苁蓉药材的提取溶剂和提取方法也是在参考课题组前期的一些分析工作以及2015 年版《中国药典》基础上，最终选择采用60%甲醇溶剂超声提取40 min 作为提取方法。3. 2 HPLC-MS 条件选择本文对色谱柱的选择是在参考课题组前期对肉苁蓉药材质量分析的基础上，考察了Agilent ZOＲBAX Eclipse Plus C18( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，Dionex C18( 4. 6 mm ×250 mm，5 μm) ，Thermo C18( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) 色谱柱，最终选择Agilent ZOＲBAX EclipsePlus C18色谱柱( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) 对肉苁蓉药材有较好的分离效果; 39 个对照品包括苯乙醇苷、木脂素和苯丙素类型，因此，检测波长选择了254 nm;同时考察了甲醇-水、乙腈-水、甲醇-0. 1% 磷酸水、乙腈-0. 1% 甲酸水等流动相对色谱分离和质谱检测的影响，最终选择乙腈-0. 1%甲酸水作为流动相。3. 3 小结本研究建立的方法对荒漠肉苁蓉60%甲醇提取物16 个色谱峰中的17 个成分进行了准确的鉴定。研究结果不仅对该药材进一步的质量分析有一定的借鉴作用，同时也可以避免对该药材已知化合物结构鉴定的一些重复工作。但是，总体上鉴定的色谱峰比较少，还有很多色谱峰由于未分到对照品而没有得到鉴定，大部分鉴定的成分是苯乙醇苷类化合物，木脂素类化合物很少。这可能是由于参考2015年版《中国药典》的提取方法主要针对苯乙醇苷类化合物，也可能因为该药材提取物中松果菊苷和类叶升麻苷化合物含量太大，导致其他含量小的化合物难以检测到，具体原因有待于进一步阐明。［参考文献］［1 ］ 《中国植物志》编辑委员会． 中国植物志［M］． 北京:科学出版社， 1990: 86．［2 ］ 杨峻山． 沙漠人参———肉苁蓉［J］． 中国药学杂志，2011， 46( 12) : 881．［3 ］ 屠鹏飞，姜勇，郭玉海，等． 肉苁蓉研究及其产业发展［J］． 中国药学杂志， 2011， 46( 12) : 882-887．［4 ］ 国家药典委员会． 中华人民共和国药典． 一部［M］．北京: 中国医药科技出版社， 2015: 135．［5 ］ JIANG Y，TU P F． Analysis of chemical constituents inCistanche species ［J］． J Chromatogr A，2009，1216( 11) : 1970-1979．［6 ］ PAN J，YUAN C S，LIN C J，et al． Pharmacologicalactivities and mechanisms of natural phenylpropanoidglycosides［J］． Pharmazie， 2003， 58( 11) : 767-775．［7 ］ FU G M，PANG H H，Wong Y． Naturally occurringphenylethanoid glycosides: potential leads for newtherapeutics［J］． Curr Med Chem，2008，15 ( 25 ) :2592-2613．［8 ］ 罗德梅，龙梅，杜文静，等． 新疆肉苁蓉提取液对MKOOPG小鼠抗骨质疏松的作用机制［J］． 中国实验方剂学杂志， 2016， 22( 10) : 138-142．［9 ］ 马慧，尹若熙，郭敏，等． 肉苁蓉多糖对D-半乳糖致衰老模型小鼠CＲEB 表达的影响［J］． 中国实验方剂学杂志， 2014， 20( 20) : 137-141．［10］ 陶义存，李建英，许永华，等． 肉苁蓉苯乙醇苷对大鼠高原肺水肿的防治作用［J］． 中国实验方剂学杂志，2014， 20( 15) : 134-138．［11］ 周海涛，曹建民，林强． 肉苁蓉对大鼠力竭游泳能力和心肌线粒体抗氧化能力的影响［J］． 中国实验方剂学杂志， 2012， 18( 6) : 229-233．［12］ NAN Z D，ZHAO M B，ZENG K W，et al． Antiinflammatoryiridoids from the stems of Cistanchedeserticola cultured in Tarim desert ［J］． Chin J NatMed， 2016， 14( 1) : 61-65．［13］ NAN Z D，ZENG K W，SHI S P，et al． Phenylethanoidglycosides with anti-inflammatory activities from thestems of Cistanche deserticola cultured in Tarim desert［J］． Fitoterapia， 2013， 89: 167-174．［14］ 南泽东，赵明波，姜勇，等． 塔中栽培荒漠肉苁蓉化学成分研究［J］． 中国中药杂志，2013，38 ( 16 ) :2665-2670．［15］ 南泽东，赵明波，姜勇，等． 塔中栽培荒漠肉苁蓉中的木脂素类成分［J］． 中国中药杂志，2015，40 ( 3 ) :463-468．

如今，已经85岁的刘铭庭依然忙碌。记者日前见到这位老人时，他刚参加完一项柽柳保护实地考察活动，从青海同德县回到乌鲁木齐。作为植物学家、知名治沙专家，刘铭庭从中国科学院新疆生态与地理研究所退休后，仍在关心红柳研究、肉苁蓉培育和推广工作。“我研究红柳60年，就做了两件事：发现了红柳新品种；发明红柳肉苁蓉人工种植技术，创下小面积亩产2000公斤以上的高产纪录。”刘铭庭说：“研究了一辈子红柳和肉苁蓉，我放不下它们。”“以苦为乐，以苦为荣”1956年在兰州大学生物系学习的刘铭庭去新疆实习，来到孔雀河下游尉犁县考察塔克拉玛干沙漠。“沙漠里热得很，生态条件差，一定要改善那里的环境。”那次经历，让刘铭庭终生难忘，也让他暗下决心：“把自己的一生献给祖国的治沙事业。”第二年，刘铭庭从兰州大学生物系毕业。毕业前，他满腔热情地给当时的高教部写信，主动请缨到边疆，投身治沙事业。“我到新疆工作，就是要改善生态环境，这是一份事业。”漠，寻找优良的固沙植物品种。“考察中他发现一个很高的沙丘上长满了红柳，针形的叶子与众不同。”红柳又名柽柳，刘铭庭当时意识到这可能是一种新型柽柳，会在防风治沙中发挥很大作用。“这种红柳生命力顽强，如果流沙将它掩埋，它还会继续向上生长，而且它的枝条柔性好，抗风沙能力极强。”刘铭庭对这一品种柽柳作了深入研究，后被学术界命名为“塔克拉玛干柽柳”。此后，刘铭庭又相继发现了莎车柽柳、塔里木柽柳、金塔柽柳等新品种，成为柽柳属植物研究领域公刘铭庭说。要胜任工作，先磨炼意志。到新疆两个月后，自治区团委号召广大青年参加义务修渠，从山上修建一条30多公里的引水渠，刘铭庭主动报名参加。整个工程分五期，别人都是一个月轮一期，刘铭庭则是从开始修建到通水，参与了建设全过程。研究红柳，就要与沙漠打交道，必须常往沙漠里钻。一天早晨，因为前一天夜里下了雨，非常凉爽，刘铭庭和同事就光着脚向沙漠腹地行进。10点钟太阳出来了，沙子的水分很快被晒干，滚烫难耐。“我们走两步就跪下来，把脚翘起来凉一下。因为沙子表面太热，几乎没法走。”刘铭庭笑着回忆，“幸亏我们带着采集土壤用的布袋子，把它套在脚上，赶快跑回去”。“刚参加工作时，脑海中就两个想法：一是奉献自己的青春和智慧，积极参与国家建设；二是在艰苦的劳动中锻炼自己。”刘铭庭说：“在沙漠里工作，确实很苦，但保持好的心态，反而以苦为乐、以苦为荣，因为我有明确的目标，就是要研究出成果。”“大自然是最好的老师。”1959年，刘铭庭参加中国科学院塔克拉玛干沙漠科学考察队，走进荒漠，寻找优良的固沙植物品种。“考察中他发现一个很高的沙丘上长满了红柳，针形的叶子与众不同。”红柳又名柽柳，刘铭庭当时意识到这可能是一种新型柽柳，会在防风治沙中发挥很大作用。“这种红柳生命力顽强，如果流沙将它掩埋，它还会继续向上生长，而且它的枝条柔性好，抗风沙能力极强。”刘铭庭对这一品种柽柳作了深入研究，后被学术界命名为“塔克拉玛干柽柳”。此后，刘铭庭又相继发现了莎车柽柳、塔里木柽柳、金塔柽柳等新品种，成为柽柳属植物研究领域公认的权威。“大自然是最好的老师。”刘铭庭说，“在深入接触自然界的过程中，你会发现可学的东西很多”。从“六五”到“十三五”期间，刘铭庭承担了多项国家和自治区荒漠化治理重点科研项目，成为我国该研究领域学术带头人。在流沙地、重盐碱地通过引洪成功，大面积恢复和发展了红柳灌木林，十余年间推广400万亩，取得了明显的生态、经济和社会效益。刘铭庭获得过联合国、国家、省部级奖28项，在防治荒漠化领域是获得国际奖项最多的科学家。“科研成果要应用于实践，在实践中接受检验。”这是刘铭庭坚持的原则。历史上三次被迫迁移的和田地区策勒县，于20世纪80年代初又面临“流沙围城”困境。在自治区一次现场会上，刘铭庭和同事提出用5年时间治理流沙6万亩，植被覆盖率恢复到30%至40%的目标。随后他将自己多年的科研成果应用在策勒县流沙治理上，取得了显著成效：仅用3年就完成了任务，红柳等植被覆盖在15万亩流沙上，流沙前锋后退了逾4公里。“治沙致富一盘棋”“科研只是第一步，关键是要将红柳的研究成果大面积应用于固沙造林。”刘铭庭认为，治沙致富一盘棋，治沙不能只靠投入，还要有产出，发展沙产业，让沙区群众在治沙中致富。1985年，刘铭庭在中科院新疆生地所策勒沙漠研究站开始试种红柳肉苁蓉。红柳肉苁蓉是寄生在红柳上的肉苁蓉，具有很高的药用价值。功夫不负有心人，一年后试种成功。地处塔克拉玛干沙漠南缘的和田地区长年饱受风沙之害，该地区于田县政府部门负责人慕名找到已退休的刘铭庭，寻求治沙之策。于是，刘铭庭从治沙站拿出自己培育的红柳肉苁蓉苗木，赴于田县奥依托格拉克乡试种。为了便于观察和研究，刘铭庭在沙漠里自建的土坯房中住，没有水，也没有电，生活物资要从外面运来，生活、交通条件极为不便。周边几公里，除了他和老伴，再没有人居住。刘铭庭为此买了一辆毛驴车、一只大水桶，从外面拉回漂满虫子的涝坝水饮用。起风沙时，昏天黑地，沙漠中的几间小屋被尘沙包裹，有时门都难以推开。在沙漠中生活，刘铭庭的老伴储慧芳养成每天记日记的习惯，因为怕忘了每周二的集市，一周所需的生活用品都要去集市采购。儿子、女儿来探望，看到艰苦的生活条件，禁不住泪如泉涌，恳请父母回乌鲁木齐生活，被父母回绝：“有淳朴乡亲们的等待，在这里研究、培育肉苁蓉，不觉得苦。”“当试验地里种出肉苁蓉，让乡亲们看到了增收的希望时，这比做多少场报告效果都好，找我学技术的人也越来越多。”刘铭庭高兴地说。“将技术交给老百姓”为了“给群众吃定心丸”，刘铭庭手把手教农民种植肉苁蓉，告诉乡亲们“不仅要种得好，还要卖得好”，带领更多人在治沙中致富。年过80岁，刘铭庭还经常骑着电动车去指导农户生产。如今，和田地区推广红柳、肉苁蓉种植成效明显。在刘铭庭的示范带动下，肉苁蓉种植面积近50万亩，和田已成为我国肉苁蓉药材重要的产地、集散地及交易市场，并开拓出国际市场。于田县沙区红柳肉苁蓉种植积达到16万亩，总产量达1.6万吨以上；肉苁蓉亩产最高达200公斤以上，一亩收入4000元至8000元。于田县奥依托格拉克乡种植专业户达吾提·阿布都拉说：“以前家里穷得很，在刘教授的指导下，种上了肉苁蓉，日子越过越好，家里不仅盖了新房，还买了小汽车。”由于刘铭庭多年来为肉苁蓉人工种植研究和大面积推广应用作出了突出贡献，群众称他为“红柳老人”“人工肉苁蓉之父”。1995年，联合国环境规划署在第一个“世界防治荒漠化和干旱日”，将首次设立的“全球土地退化和荒漠化控制成功业绩奖”授予了刘铭庭主持研究的“盐碱地、沙地引洪灌溉大面积恢复红柳造林技术”项目。刘铭庭作为“策勒流沙治理研究”成果的主要完成者，也同时获得了这一奖项。对于各种荣誉，刘铭庭看得很淡。刘铭庭似乎忘记了自己的年龄，如今仍继续走在研究推广红柳、肉苁蓉种植的道路上。“科技工作者不能图名利，而是要将技术真正交给老百姓。”现在，许多沙漠边缘地带都被农民种上了红柳和肉苁蓉，既绿化了沙漠，也让农民得到了收获，改善了生活。刘铭庭说：“沙漠边缘绿起来的同时，乡亲们也富起来了，这才是我最高兴的事。”

【摘要】补益药主要指具有补气、补血、补阴、补阳等功能的中药，其偏性能够调整人体的气血、均衡阴阳、补益不足，一般用于人体各类虚症的治疗，能增强久病后身体虚弱的人的体质，促进机体康复，同时也具有抗衰老，提高免疫力、改善认知功能等作用。最近几年，肉苁蓉由于其独特的保健及治疗功效，引起人们越来越多的关注和研究。肉苁蓉（Cistanche deserticola Y.C.Ma）也叫金笋、大芸、地精。是列当科（orobanchaceac）肉苁蓉属草本植物，多年生，主要寄生在梭梭树根部，分布于欧亚大陆和北非的干旱和半干旱生境，如伊朗、印度、蒙古。在我国主要生长于甘肃、宁夏等西北地区。肉苁蓉的作为一味中药，最早见于《神农本草经》记载。其药用部分主要是干燥带鳞叶的肉质茎。肉苁蓉味甘、性温，传统中医认为肉苁蓉能够补肾阳，益精血、润肠通便等效用。目前，人们通过乙醇提取等方法从肉苁蓉中提取出包括苯乙醇苷类、环烯醚萜类及多糖素类等诸多有效成分，还有少量生物碱、黄酮类及氨基酸类成分。研究发现，肉苁蓉粗提物以及分离出来的有效成分均具有广泛的药理作用，如免疫调节、抗炎、肝保护、抗氧化、抗菌和抗肿瘤等作用。此外，还具有神经保护、认知改善等功能。该文主要围绕近年来关于肉苁蓉有效成分对改善学习记忆，保护神经等方面的研究进行综述。认为肉苁蓉的作用主要是提高脑内神经生长因子（NGF）水平，抑制AChE过度激活进而维持突触间隙ACh正常水平，以及促进海马神经细胞的分化和突触形成等。【关键词】肉苁蓉；NGF；AChE；认知改善

重庆市荣昌县中医院（402460）李仁生重庆市荣昌中学医务室妇女更年期综合征主要表现为眩晕耳鸣头痛、潮热汗出、性情急躁易怒、心悸心烦失眠、月经异常等。我们在临床实践中，重用肉苁蓉治疗该病，疗效颇佳，举例介绍如下。高某某，女，49岁，2000年3月6日初诊，患更年期综合征5年，病情逐年加重。症见：头昏胀痛，甚则眩晕耳鸣，潮热汗出日夜阵发10余次，未发时畏风身凉，心烦躁扰，失眠多梦，月经周期紊乱，经量少，神疲形瘦，腰酸肢软，纳呆，大便结，小便黄少，咽干口渴不欲饮，舌红少苔欠润，脉弦细数。辩证：精血亏虚，阴损及阳，虚阳上亢，心肾失交，治法：补肾精，兼扶肾阳，养血平肝，宁心安神。处方：肉苁蓉60g，熟地黄20g，山茱英20g，天冬20g，白芍20g，酸枣仁15g，炙何首乌10g，山药20g，炙甘草10g，石决明30g，龙骨30g，每日1剂。服6剂后诸症大减，長风肢凉症除，但仍感神疲乏力。续用上方去石决明、龙骨，肉苁蓉减为30g，加人参15g。守方治疗2月后，体质增强，诸症消失。近2年中如因情绪不好，或遇炎热、闷热天时，潮热头昏痛偶发，但症轻微，用上述方加减调治，数剂即愈。更年期综合征以肝肾精血亏虚症多见，日久病深者，阴损累及阳气化生不足，可致机体阴阳二气低水平的不平衡，脏腑气血不相协调，单纯滋补阴精收效欠佳。张景岳谓：“善补阴者必于阳中求阴，则阴得阳生，泉源不竭”。选用温性平和的肉苁蓉于滋补阴精之剂中使阳生阴充，阴阳平衡，脏腑之气自和。肉苁蓉，甘、咸、温，补肾助阳、润肠通便，具有阴阳相济之功效。《本草汇言》说：“养命门，滋肾气，补精血之药也···..·，此仍平补之剂，温而不热，补面不峻，暖而不燥，滑而不泄，故有从容之名”。

核工业成都四一六医院（610051）杨德明肉苁蓉，味甘、咸，性温，功具补肾阳，益精血，润燥滑肠。其特点是温而不热，补而不峻，暖而不燥，滑而不泄，为平补之品。临床多用于肾阳不足，精血亏虚所致的阳痿，不孕，腰膝冷痛，筋骨软弱以及肠燥便秘等。此外，民间常用此药治疗妇人症瘕，笔者试用于临床，疗效颇佳。例1：王某某，女，25岁，已婚，1998年5月4日初诊。半年前发觉左下腹有块物，不痛不胀，月经周期无异常，经量中等，每次持续4天，唯经色暗黑有块，经前腰酸痛。右侧附件（一），左侧触及囊样组织约8cmx12cmx10cm大小，无压痛。B超示：左侧卵巢囊肿。舌淡，苔白，脉弦数。拟攻补兼施之法。药用：当归10g，赤芍12g，桂枝10g，茯苓10g，桃仁10g，牡丹皮10g，黄芪25g，萹蓄10g，干姜8g，水煎服。连用20天，附件检查依旧，上方加肉苁蓉50g，服药20天后，自扪症块日渐缩小，上方再服60剂，内诊检查子宫附件：两侧阴性，左侧囊性组织未触及，B超检查，未见异常。例2：陈某某，女，32岁，已婚，1997年4月20日初诊。患两侧卵巢囊肿1年。B超检查：右侧卵巢2.5cmx3cmx2cm大小，左侧卵巢5.6cmx4cmx 3.5cm大小，平素月经前后无定期，大抵相差7～10天，色量正常，近日右肋及小腹疼痛，眠差，舌淡苔白，脉弦滑。诊为症瘕。用攻补兼施法。药用：刘寄奴12g，萹蓄20g，茯苓15g，桂枝12g，牡丹皮12g，赤芍15g，桃仁12g，三棱12g，黄芪15g，水煎服。连用30剂，病情无明显好转，上方加肉苁蓉50g，服药30剂后，囊性块物明显缩小，再服40剂，B超检查未发现异常，自觉症状消失。1年后随访，无复发。症瘕，其病有形，在血分者为多。肉苁蓉治疗症瘕在《本经》有记载，如“除茎中寒热-··妇人症瘕”。现今少有报道，但民间常用之，笔者认为，肉苁蓉为补精血之要药，血盛则行，行则消症瘕；又入血分，咸能软坚，其性滑利，亦可消症痕，况本品又善温养阳气，气壮则血流畅，气血流利则痞塞通，症痕消。

3 肉苁蓉寄生过程与寄生机制寄生植物只有通过形成吸器（haustorium）才能完成与寄主的寄生过程，一般认为根寄生被子植物的寄生过程包括寄生植物种子萌发和寄生关系建立2个阶段，2个阶段相对独立面衔接。3.1 种子萌发 肉苁蓉种子极小、寿命长，具有未成熟未分化球形胚，无胚根、胚芽及子叶的分化，有胚乳吸器，这种特性与其寄生特性有关。种子存在着发芽抑制物质，一般条件下很难萌发，其种子特性与其在荒漠特殊生境下的生长相适应。肉苁蓉种子休眠受多方面影响，自然条件下只有经过胚后熟完成在寄主分泌刺激物后才能萌发：实践过程中往往通过物理与化学手段对其进行破除，提高肉苁蓉人工接种的发芽率。肉苁蓉种子萌发形成管状突起，形似胚根而无功能分化，一般称为芽管状器官（germ-tube-like organ），芽管状器官伸长顶端膨大为初生吸器，在无寄主植物根系存在条件下，初生吸器的生长直至消耗完种子胚乳可提供的营养为止叫，李天然认为寄主梭梭根穿入肉苁蓉种子内释放化学激素后，才能诱发肉苁蓉种胚细胞伸长形成芽管状器官：宋玉霞进一步研究则认为寄主关系的建立不是依赖钻入种子中的寄主根的刺激和诱导作用，而是在寄主梭梭根系分泌的诱导物刺激下使肉从蓉种子萌发并产生初生吸器，初生吸器与寄主幼根粘连后产生次生吸器。3.2 关系建立 吸器是连结寄生植物与寄主“运输线”的生理桥，是与寄主连接吸收水分和营养的特殊器官，当具有适合的寄主根时，肉苁蓉初生吸器前端进入寄主的内皮层，并由靠近寄主根的一端逐渐分化形成许多以螺纹式或环纹加厚为主的输导分子与寄主根的维管束相连，形成具备功能作用的次生吸器。次生吸器形成后，寄主根从维管组织接通部位被阻断，迅速发育增粗，以满足肉苁蓉寄生生长养分和水分的需求。大部分寄生植物对寄主植物的识别，还需要寄主植物释放的次生物质作为另一种化学信号，才能发育成能与寄主连接建立起寄生关系的功能性吸器4 种子休眠破除与信号物质Abou-raya等研究肉苁蓉属植物寄生关系，分别采用寄主（藜科植物和无叶柽柳）植株与根提取液对C.riolacea和C.phelypaea进行种子萌发诱导，其萌发率低。但如将种子靠近寄主植物，寄主须根向种子生长并透过种子，才能形成吸器，刺激胚形成瘤状物，共同作用建立寄生关系。寄主植物所释放的化感信号物质对根寄生植物种子萌发、吸器形成具有重要的刺激与诱导作用。实验体系，为肉苁蓉属植物营养的可控研究提供了重要基础，但肉苁蓉至今在非适宜产区的寄生体系的构建较为困难。现在肉苁蓉与寄主的营养元素研究主要通过采用ICP法元素分析手段等对肉苁蓉其寄主进行测定，可结合其土壤背景，应用稳定同位素与多元素在线分析技术，便于从土壤-梭梭-肉苁蓉大系统中研究其营养迁移规律。肉苁蓉进入生殖生长阶段后，肉质茎出土、开花、结实后营养消耗殆尽，失去药用价值，因此收获肉苁蓉药材与采收种子存在矛盾。明确肉苁蓉生殖生长期及其种子形成过程的营养和水分需求动态，对施肥、灌溉时期及其用量的选择具有科学的指导作用。［参考文献］[1] 中国药典，一部［］．2010：126．[2] 中华人民共和国族危物种进出口管理办公室·中华人民共和国濒危物种科学委员会，濒危野生动植物种国际贸易公约CITES）附录I［M］．2003：41[3] Xu R.Chen J.Chen S.et al Citanche deserticnla Ma cultivated sa new cup in China Dl.Genet Resour Cop Eval,2009.56 (1):137.[4] 王文采，潘开玉，张志耘，中国植物志，第69卷［M］、北京：科学出版社，1990：82[5] 张志耘，中国列当科的研究-［］，植物研究，1984.4(4):111.[6] 马毓泉，内蒙古肉苁蓉属（Citanche）植物的初步研究］。内蒙古大学学报：自然科学版，1960（1）：61[7] 马毓泉，内蒙古肉苁蓉属订正，内蒙古大学学报：自然科学版，1977（1）：69．[8] 居鹏飞，何燕萍，楼之岑，肉苁蓉类药源调查与资源保护田．中草药，1994.25（4）：205．[9] 屠鹏飞，何燕萍，楼之岑，中国宁夏产盐生肉苁蓉一新变种［1、植物研究，1994.14（1）：32．00] 马德滋，段金廠，宁夏肉苁蓉属一新种］，西北植物学报。1993.13(1):75.01] 张志耘，国产列当科肉苁蓉属的分类学研究口］，药学实践杂志，2000.18（5）：336．02] 温都苏，中国肉苁蓉属的分类学研究及其寄主植物的确定［］．呼和浩特：内蒙古农业大学，2008．03] 马琴，曹瑞，内蒙古肉苁蓉属肉苁蓉一新变种-扇形肉苁蓉，西北植物学报，2011.31（3）：639．04] 张勇，吴焕，王顺年，等，中药肉苁蓉商品药材和原植物资源调查［］，植物资源与环境，1993.2（1）：10．05] 陈君，谢彩香，陈士林·等，德赢vwin登录 产地适宜性数值分析1、中国中药杂志，2008.33｜5：496．06] 谢彩香，陈君，董梁·等，德赢vwin登录 产地适宜性之再分析［1．中国药学杂志，2011.46（12）：891．07] 陈士林，中国药材产地生态适宜性区划［M］北京：科学出版社，2011：397．

黄小方～，徐荣＇，陈君”，于晶＇，刘赛＇，刘同宁（1．中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所，北京100193：2．江西中医学院，江西 南昌330006；3．宁夏永宁县本草苁蓉种植基地，宁夏银川750100）［摘要］肉苁蓉为传统名贵中药，近年其原植物野生资源急刷减少，亟需进行资源可持续利用研究，肉苁蓉为全寄生植物，生理生态及营养传输极具特殊性：经系统查阅并整理国内外对肉苁蓉的生境特征、寄生机制、营养传输等方面研究，进行综述并展望：以期进一步为肉苁蓉的营养传输、种质资源、药材质量及农业生产等基础性与应用性研究提供参考。［关键词］肉苁蓉：梭梭：生境特征：寄生机制：营养传输肉苁蓉 Cistanche Herba，又名苁蓉、大芸，为传统名贵中药，始载于《神农本草经》，其应用历史悠久，药用价值较高，具有补肾阳、益精血、润肠通便之功效，被誉为“沙漠人参”。2010年版《中国药典》“规定肉苁蓉药材来源于列当科肉苁蓉 Cistanche desenicola Y.C.Ma或德赢vwin登录 C.nbulosa （Schrenk） Wight的干燥带鳞叶肉质茎。肉苁蓉属植物被认为是远古地中海子遗植物，在长期的进化过程中寄生于其他植物的根部。肉苁蓉属全世界分布20余种，分布于北半球中纬度区域的地中海沿岸、中东地区、中亚、南亚北部、我国西北部、蒙古温暖干燥沙漠地区，肉苁蓉在我国内蒙古、新疆、宁夏、青海荒漠地区曾有广泛自然分布，近年因肉苁蓉及其寄主被滥采滥伐等原因，野生肉苁蓉资源急剧减少，肉苁蓉也已被列入《濒危动植物种国际贸易公约》（CITES）附录二㎡。为了肉苁蓉资源的可持续利用，我国在内蒙古、宁夏、新疆等地建立了肉苁蓉栽培基地。肉苁蓉是多年生肉质草本全寄生植物，本身不能进行光合作用，所需的各种营养物质与水分必须从寄主获取，生理生态极具特殊性。因此，vwin.com 的生长生境特征、寄生机制、营养传输特征及其对种子形成的影响，能更好地指导肉苁蓉资源保护与栽培生产，同时，掌握其营养传输规律对括：盐爪爪属 Kalidium、驼绒藜属 Ceratoides、假木贼属Anabasis、碱蓬属 Suaeda、滨藜属 Atriplex和红沙属 Reamuria植物以及珍珠柴 Salsola passerine Bunge、白刺 Nitraria sibirica Pall.、四合木 Tetraena mongolica Maxim.等植物。白花盐苁蓉寄生于盐爪爪属植物，迷苁蓉与扇形肉苁蓉寄主与肉苁蓉相同，兰州肉苁蓉和宁夏肉苁蓉与沙苁蓉的寄主相同，深裂肉苁蓉寄主为藜科小蓬 Nanophyton erinaceum（Pall）Bunge，蒙古肉苁蓉寄主为蒿属Artemisia中的半灌木或小灌木植物。2 肉苁蓉及其寄主的生境条件2.1 生境与分布 肉苁蓉属植物及其寄主适宜生长在荒漠地区，为典型温带大陆性气候，其特点为，冬冷夏热，年温差大，昼夜温差大，年降雨量较少，蒸发量大。包括梭梭与柽柳在内的寄主均为我国西北荒漠地区耐干早的防风固沙小乔木，是典型的荒漠植被类型。肉苁蓉与其寄主植物的分布范围基本一致，但德赢vwin登录 仅自然分布于新疆南疆地区，与其寄主柽柳属植物分布却不同步 ，有柽柳属植物分布的地方不一定就有德赢vwin登录 。梭梭喜生于轻度盐渍化、地下水位高的固定或半固定沙地、荒漠沙地，其生长的土壤多为棕钙土、灰漠土、灌漠土等各类荒漠土：柽柳喜生于水分较为充足的沙丘地，其生长土壤多为黄棕壤、棕壤、褐土等。谢彩香等认为冬季低温是限制德赢vwin登录 分布的关键因子，我国南疆独特的气候条件是德赢vwin登录 在该地区形成道地性的主要原因。陈士林 采用生态适宜性数值分析，结合自然社会条件，建议选择我国内蒙古、新疆、甘肃、宁夏一带作为肉苁蓉人工栽培引种适宜地区，内蒙古、新疆、甘肃、宁夏等地作为德赢vwin登录 引种适宜地区。2.2 土壤条件 肉苁蓉及其寄主适宜生长的土壤为含盐分较高的中细砂土，土壤水溶性盐分中钾（K）、钠（Na）、钙（Ca）、镁（Mg）、硅（Si），氮（N）、磷（P）、有机质含量低。人工栽培肉苁蓉和扶壮梭梭，需补充营养成分 ，陈君等 认为肉苁蓉适宜区受土壤因子影响最大，其适宜区分布随土壤类型不同发生明显变化，土壤因子对肉苁蓉产地适宜性分析具有重要的影响作用。黄培祐 调查新疆野生肉苁蓉寄生环境发现，不同土壤环境条件下寄主梭梭有显著差异，对肉从蓉寄生产生相应影响，潮湿盐地特别适宜梭梭与肉苁蓉生长，黏土和砾石坡则有一定的限制作用，肉苁蓉的生长特征主要与土壤质地和土壤剖面结构有关，在沙质土壤中生长的肉苁蓉，具有生长快、植株直立、茎的大小较为均一等特点·提高药材产量与品质，促进肉苁蓉产业的良性发展具有重要意义。本文拟对近年来国内外关于肉苁蓉寄生体系内营养传输研究进行回顾，并进行展望，以期为肉苁蓉进一步的基础性与应用性研究提供理论依据。1 肉苁蓉植物分类与寄主植物1.1 植物分类 1809年Hoffmonnsogg和Link 建立肉苁蓉属Cistanche，当时仅记载模式种：1930年奥地利学者G．Beck发表列当科植物专著，记载肉苁蓉属植物18种《中国植物志》列当科专论中载我国肉苁蓉属植物包括5种和1存疑种：肉苁蓉C．deseticola、德赢vwin登录 C.tubulosa（Schrenk） Wight-沙苁蓉C.sinensis G.Beck、盐生 肉苁蓉C.sala（CA Mey.）G.Beck、兰州肉苁蓉C.lanzhouensis ZY.Zhang 及存疑种蒙古肉苁蓉C.mon-golicn G.Beck。屠鹏飞经调查认为国内分布有肉苁蓉、德赢vwin登录 、沙苁蓉、盐生肉苁蓉和新变种白花盐苁蓉C.salsa(C A.Meyi G.Beck var.albiflora P.E.Tu et Z.C.Lou. 1993年马德滋发表新种宁夏肉苁蓉 C．mingrinensisD.Z Ma et J. A.Duan，张志耘“提出应归入兰州肉苁蓉：温都苏认为兰州肉苁蓉可归为沙苁蓉，并在中国植物志》的基础上确认了蒙古肉苁蓉在国内的分布，并认为应增加迷肉苁蓉C.ambigua（Bge） G.Beck 和深裂肉苁蓉C.fissa（C. A.Mey.｜G.Beck：近年国内报道的新变种还有扇形肉苁蓉 C deserticola Ma var.flabellata R.Cao et Q.Ma容重＞全氮＞有机质＞全钾＞全盐＞含水量。