肉苁蓉 Cistanche deseticola Y.C.Ma是列当科 Ombanchaceae 植物肉苁蓉带鳞叶的肉质茎，又名大芸、纵蓉、肉松蓉、地精、金笋。《中国药典》将其列为正品，药用品种还有：盐生肉苁蓉（C-salsa（C-A.Mey）G.Beck）和迷生肉苁蓉（C-amhigua（Bge-）G-Bedk）以及德赢vwin登录 （C-tubulosa（Schenk）Ruighht），具有补肾壮阳、填精补髓、养血润燥、悦色延年等功效，主治男子阳痿、女子不孕、带下、血崩、腰膝冷痛、血枯便秘等证。《本经》最早记载肉苁蓉能“主五劳七伤、补中、除茎中寒热痛，养五脏、强阴、益精气，妇人瘢瘕”。《花性论》称之“益髓、悦颜色、延年”。《日华子本草》谓其-治男子绝阳不兴，女绝阴不产，润五脏，长肌肉，暖腰膝，男子泄精”。可见，历代医家视肉苁蓉为补肾延年之良药。近年来，随着现代科学技术的发展，其抗衰延年作用已被科学研究所证实，作者就肉苁蓉延缓衰老研究作一综述。1 对果蝇寿命的影响肉苁蓉对果蝇寿命有明显的影响。将1％、5％、10％（生药量）的肉苁蓉加入基本培养基中，对照组为基本培养基。结果．3种给药组的果蝇的最高寿命含：70d、74d、75d，早，71d、73d、76d．明显高于对照组念：66d，¥65d，半数致死天数，60.254,61.00d，62.00d． 早：60.50d，61.454,62.25d，亦高于对照组含，58.75d，早58.50d，平均寿命延长，有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01）円。2 对小鼠生存能力的影响将体重20～40雄性昆明小鼠随机分为4组，二个用药组分别服用二种肉苁蓉水煎液。0.02ml／g（每ml相当于生药lg），连续14d。用药组小鼠体重明显增加，与空白对照组相比，肉苁蓉、盐生肉苁蓉、德赢vwin登录 均有显著性差异（P＜0.01．P＜0.01．P＜0.05），常压耐氧能力亦显著优于对照组（P＜0.01．P＜0.01．P＜0.05），负重游泳时间显著延长（P＜0.01．P＜0.01．P＜0.05）。对可的松引起的“阳虚”小鼠肉苁蓉0.5ml-d服用亦有明显增重作用（P＜0.01），耐冻时间显著延长（P＜0.01），且能改善小鼠“阳虚”体征。对d一半乳糖所致衰老模型组和三个给药组小鼠均造成严重自由基（0.9x10-70；浓度）损伤，对照组不进入03环境。结果20、40g＊kg（生药量）给药组小鼠游泳时间明显长于模型组（P＜0.05．P＜0.01）·冻僵时间显著高于模型组（P＜0.01），常压耐缺氧存活时间给药组显著提高，与对照组相比差异显著（P＜0.05．P＜0.01）円。实验证明，肉苁蓉不但对正常小鼠有延长寿命的作用，而且能显著延长“阳虚”及自由基损伤小鼠在恶劣环境中的生存能力。3 对免疫系统的影响随着年龄、老年人免疫功能减退和失调、特别是T细胞功能明显降低。观察肉苁蓉对人淋巴结细胞E花结形成和a一醋酸萘酯酶（ANAE）活性的影响，发现肉苁蓉水煎液低浓度（5mg＊ml）能明显提高人外周血淋巴细胞Ea花结率（P＜0.05），但对E花结率无影响，高浓度（50mg＊ml-＇）则抑制Ea和E花结率（P＜0.01），肉苁蓉高浓度或低浓度均降低ANAE＋淋巴细胞百分率，50mg＊kg-，100mg＊kg水提液给小鼠灌胃，两种给药剂量组均明显增加脾脏和胸腺重量（P＜0.01．P＜0.05）。使绵羊红细胞（SRBC）致敏的小鼠迟发性超敏反应（DTH）增强（P＜0.01），显著增加小鼠外周血中淋巴细胞渗入量，且随剂量的增加作用增强，显著增加空斑形成细胞（PFC）值（P＜0.01），且溶血素值高于对照组（P＜0.05，P＜0.01）。还可明显增加腹腔巨噬细胞吞噬百分率（P＜0.05）和吞噬指数（P＜0.01）。使巨噬细胞内cAMP含量升高（P＜0.01），cGMP含量降低（P＜0.01），cAMP／CGMP 比值明显升高（P＜0.01），这可能是增强巨噬细胞吞噬功能的机理之一句。4． 对自由基损伤及相关酶的影响近年来研究表明，衰老与自由基引起的生物膜脂质过氧化，与导致膜结构损伤和功能失活有密切关系。正常情况下，超氧化物主要由SOD清除，随着年龄增大，衰老机体SOD活性减弱，抗氧化剂减少，自由基损伤因素（OFR-MDA）增加-，导致机体衰老。为观察衰老与自由基及相关酶的关系，d一半乳糖所致小鼠早麻模型组与给药组构造成自由基（0.9100浓度）损伤。结果：20.40g／kg两个剂量组小鼠脑组织单胺氧化酶（MAO-B）活力升高受到明显抑制（P＜0.05．P＜0.01）：血浆、脑、肝组织脂质过氧化物（IPO）明显下降（P＜0.01）［3］。2.5,12.5、31.25g·kg（生药量）肉苁蓉水溶液可明显增加小鼠红细胞SOD活性（P＜0.05，P＜0.05．P＜0.01），显著降低心肌脂褐质含量。能使可的松所致“阳虚”小鼠降低的SOD活性和血红蛋白（Hb）含量恢复［。肉苁蓉水煎液80mg·（kg·d）-（12％煎液）连续给小鼠灌服30H，红细胞膜Na＋-K＋-ATP酶活性显著增高（P＜0.01．n＝6），这可能是补益作用的机理之一門。5 对性功能及单胺类物质的影响性功能减退是机体衰老的重要标志。肉苁蓉所含苯丙醇甙类化合物麦角甾甙、肉苁蓉甙A和C对悬吊应激所致雄性小鼠的学习和性功能低下有对抗作用，所含海胆甙有对抗性功能低下的作用。肉苁蓉能增强下丘脑一垂体一卵巢的促黄体功能，提高垂体对黄体生成素释放激素的反应和卵果对黄体生成素的反应［．1］。下丘脑一垂体一性腺轴功能与脑内单胺类神经递质有密切关系。肉苁蓉（生药lg／d）可使可的松所致“阳虚”大鼠去甲肾上腺素（NA）升高（P＜0.01）．并使下降肾上腺素（A）回升（P＜0.05）。“阳虚”及正常大鼠多巴胺（DA）均升高（P＜0.05，P＜0.01），3.4二苯羟乙酸（DOPAC）下降（P＜0.001），并使正常大鼠5羟色胺（5-HT）升高（P＜0.001），用药后，“阳虚”及正常大鼠都表现为DA／DOPAC及5-Hr／5-羟吲哚醋酸（5-HAA）比值升高（P＜0.01～0.001）［，肉苁蓉乙醇提取物（100.200mg·kg，每日2次）可增加下丘脑NA含量，大剂量组NA升高呈极显著差异（P＜0．01），对DA／DOPAC比值有显著升高作用（P＜0.05）．使纹状体（DA）／DOPAC，NA水平呈一定升高趋势。可见，肉苁蓉及其醇提物可通过影响脑内单胺类神经递质含量而增强垂体一性腺功能，从而起到延衰作用。6 对蛋白质、核酸合成的影响肉苁蓉对“阳虚”和“阴虚”动物的肝脾核酸含量下降和升高有调整作用，能显著提高羟基脲所致“阳虚”小鼠肝脾DNA合成率，促进RNA合成，提高蛋白的核酸代谢，使小鼠体重增加，但与正常组对照无显著差异，其机理可能是肉苁蓉含有一种激活核苷酸还原酶的生物活性因子．］。肉苁蓉煎液3g·kg（15％煎液）灌服小鼠可拮抗因负重运动而引起的蛋白质的分解，血清尿素氮（BUN）含量明显减少（P＜0.05．n＝10），小鼠负重运动后，对照安静组小鼠肝内质网有明显的核蛋白体“脱粒现象”，而实验运动组则无“脱粒现[]衰老是人体正常的生理过程。但其衰老生理变化涉及到全身多功能系统，引起气机体代谢紊乱，造成机体各系统功能失调，进一步加剧衰老过程。肉苁蓉对免疫系统功能具低浓度增强，高浓度抑制的双向调节nc避德到章明、三种肉放蓉糖成分的分析［］：中药材19947net作用，对“阳虚”大鼠下丘脑NA有增强作用，同时对下降的A有回升作用，使NA和A浓度恢复至正常水平，纠正机体功能紊乱，具扶正复元的特点。肉苁蓉又对“阳虚”小鼠DNA合成率下降有提高作用，但不能增加正常动物DNA合成率，证明肉苁蓉具有调节机体物质代谢平衡的作用，具补而不峻的特点。肉苁蓉还可通过影响体内单胺类神经递质含量达到增强性功能的作用，提高在恶劣环境中的生存能力，显著清除衰老动物体内自由基的增加，增强体内保护因素（SOD等）。总之，肉苁蓉可通过多种途径拮抗致老因素对机体的损伤而达到抗衰延年的作用。近年来对肉苁蓉活性成分的研究发展较快。现已证明、肉苁蓉甙A和C，化合物麦角甾甙对学习和性功能有增强作用，海胆甙对性行为低下有对抗作用1，多糖类成分有延缓衰老作用”）。可见，肉苁蓉延缓衰老的作用与其多种活性成分有密切关系。进一步研究其活性成分对肉苁蓉作为保健品的开发推广十分重要。

从荒漠肉苁蓉冷水提取物中分离出的α-（1-4）-D-葡聚糖和RG-1多糖，前者对B细胞增殖有活性，后者对T细胞和B细胞增殖均有促进作用。机体的衰老过程包括生理功能弱化和与年龄相关的记忆力降低，与氧化损伤的日益累积、免疫系统的衰退有直接关系。在果蝇成年早期开始喂饲添加德赢vwin登录 的玉米粉提高了果蝇对氧化应激的抵抗力，减缓了衰老引起记忆力降低的进程，有助于延长果蝇的寿命。苯乙醇苷能显著抑制D-半乳糖致衰老模型小鼠血清、脑SOD活力的降低，小鼠脾脏系数显著升高叫。肉苁蓉可通过对抗免疫衰老，显著延长小鼠的寿命。对衰老模型小鼠（SAM-P8）喂饲肉苁蓉提取物可显著延长小鼠的生存期，且呈剂量依赖性关系。利用D-半乳糖建立亚急性衰老模型小鼠，分别给药肉苁蓉多糖和德赢vwin登录 麦角甾苷，结果发现两种处理均降低了小鼠组织中的丙二醛含量，淋巴细胞增殖反应、腹腔巨噬细胞吞噬功能和外周血IL-2含量明显升高。这些结果说明，肉苁蓉多糖和麦角甾苷能拮抗自由基损伤，增强衰老小鼠心和脑组织端粒酶活性和机体免疫功能2。以上结果说明肉苁蓉可通过增强机体抗氧化能力、增强端粒酶活性和提高机体免疫功能而延缓衰老，对降低年老相关疾病的易感性、提高人类寿命具有潜在的利用价值。2.3 对神经系统的保护及学习记忆能力的改善近年来，肉苁蓉在神经保护、提高记忆力等方面的作用被渐渐挖掘出来。肉苁蓉总苷及毛蕊花糖苷对东莨菪碱所致的小鼠学习记忆障碍均有明显的改善作用。肉苁蓉水煎剂能显著缩短小鼠悬尾试验的不动期，在Morris水迷宫试验中改善小鼠空间学习记忆能力。肉苁蓉水煎剂处理组的单胺氧化酶活性降低、脑内多巴胺浓度上调，表明肉苁蓉提高了神经兴奋性。肉苁蓉提取物能刺激小鼠脑记忆相关区域中神经生长因子的分泌，促进海马神经元的分化、轴突生长和突触形成，从而显著提高学习记忆能力。德赢vwin登录 醇提取物对缺氧／缺糖再灌注（OGD／R）所致的PC12细胞损伤具有较好的保护作用，其潜在机制可能是通过抑制线粒体氧化应激及相关凋亡信号通路实现的D。氧化应激是阿尔茨海默症（AD）的一个重要致病因素。肉苁蓉提取物作为一种抗氧化剂，在治疗阿尔茨海默病中的药理作用成为研究人员关注的热点。苯乙醇苷类物质管花苷B可以维持线粒体正常的膜电位，降低caspase-3活性、减少过氧化氢的毒性作用，抑制神经细胞凋亡。松果菊苷可加快氧自由基的清除能力和降低大鼠脑内氧化应激水平，降低Aβ25-35引起的AD大鼠的学习与记忆能力的损伤四。利用D-半乳糖和三氯化铝联合诱导小鼠产生类AD病变，毛蕊花糖苷处可显著增加海马神经元和Nissl小体，缩短AD模型小鼠的跳台潜伏期，减少错误次数。进一步研究表明毛蕊花糖苷显著增加了海马中神经生长因子和原霉素受体激酶的基因表达水平，从而减轻D-半乳糖所致小鼠脑损伤。德赢vwin登录 提取物给药处理可通过阻断淀粉样蛋白沉积、逆转Aβ1-42引起的胆碱能和多巴胺能神经元损伤，改善Aβ1-42诱导AD大鼠的认知能力。以上结果表明肉苁蓉及其提取物对治疗阿尔茨海默病具有重要意义。2.4 对骨质疏松的防治作用骨质疏松症是一种以骨质减少和骨微结构退化为特征的代谢性疾病。破骨细胞是降解骨基质的主要效应细胞，其功能异常容易导致骨质疏松症的发生。活性氧积累易导致破骨细胞增殖和分化，在骨质疏松过程中发挥着重要的作用，肉苁蓉多糖通过增强抗氧化酶的表达降低活性氧的生，抑制破骨细胞分化因子的活性，从而降低破骨细胞分化和骨吸收。使用绝经后雌激素缺乏所致骨质疏松症的啮齿类动物模型进行研究表明，荒漠肉苁蓉提取物显著增加去势大鼠的骨密度，改善骨微结构，骨矿物质含量及血液抗氧化酶活性等有显著的剂量依赖性，表现出显著的抗骨质疏松活性。进一步机理研究发现，肉苁蓉提取物可以抑制 RANKL／RANK诱导的下游NF-KB和P3K／AKT通路的激活，抑制破骨细胞关键生成蛋白NFAT2和e-Fos的活性，从而抑制破骨细胞活性．28。这些结果提示肉苁蓉可以作为治疗女性绝经后骨质疏松症的候选药物。2.5 对肝脏的保护作用四氯化碳（CCI，）处理大鼠会产生严重的肝损伤，表现为血清ALT、AST水平显著升高，ROS和MDA浓度增加，肝脏SOD活性和GSH含量显著降低，病理组织学改变包括肝细胞坏死或凋亡、出血、脂肪变性等。从盐生肉苁蓉中提取的松果菊苷可显著减轻CC1，引起的肝脏损伤，这可能与其抗氧化作用有关。肉苁蓉苷A对CC1，诱导的肝中毒小鼠也具有保护作用，能改善肝功能的多项指标，如增加自由基清除活性、减轻脂质过氧化损伤、改善线粒体呼吸链功能、减轻脂肪变性和炎性细胞浸润等m］。肉苁蓉苷A对酒精引起的肝伤害也有保护作用，其机理是促进细胞凋亡抑制因子基因的表达，抑制早期快速反应基因的表达，提高细胞存活率，从而实现对酒精诱导的小鼠原代培养肝细胞的保护作用40。荒漠肉苁蓉的多糖提取物和苯乙醇苷均能改善酒精诱导的肝损伤模型小鼠的血清和肝脏指标的恢复，提高HepG2细胞的存活，减轻模型动物肝组织中脂肪微泡和坏死细胞，可能是通过影响氧化酶类的活性和丙二醛的形成实现的［u．4。这些结果表明，多糖提取物和苯乙醇苷对乙醇诱导的慢性肝损伤具有显著的保护作用。2.6 对心脏和血管的保护作用肉苁蓉甲醇提取物能提高心肌ATP的生成能力，并能减轻大鼠心肌脑缺血再灌注损伤（1／R）的影响。经苯乙醇苷类提取物处理的I／R诱导大鼠心肌梗死面积明显减小，由于氧化物清除酶类活性的提高，减轻了再灌注心肌的氧化应激反应，并抑制线粒体介导的调亡通路，从而对心肌损伤起到保护作用。肉苁蓉提取物具有调节血脂、保护血管的作用。德赢vwin登录 乙醇提取物显著抑制高胆固醇饮食喂养小鼠的血清胆固醇积累。进一步研究发现，毛蕊花糖苷可提高HepG2肝细胞载脂蛋白 B、VLDL 受体和细胞色素P450 SCC基因的表达，从而影响胆固醇的转运和代谢。2.7 润肠通便和保护肠道的作用肉苁蓉因富含多糖类具有调理肠道菌群、润肠通便的作用。荒漠肉苁蓉中获得的一种中性多糖CDA-0.05可促进三种对小鼠生长有益的拟杆菌（Bacteroides thetaiataomicron，B.oratus 和B.fragilis）的生长，能促进对人体有益的乳酸菌的生长，如干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）、植物乳杆菌（lactobacillus plantarum）和罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）。因此，CDA-0.05有助 于维持肠道内环境的稳定。富含多糖的荒漠肉苁蓉提取物能通过激活免疫系统，减少小鼠的炎症性黏膜增生和肠道内幽门螺杆菌感染，具有预防结直肠癌、肠道炎症的作用。德赢vwin登录 提取物对斑马鱼肠蠕动有促进作用，且呈现浓度依赖性，最高促进率可达23.26％，可开发成预防或治疗便秘的保健食品或药品等。2.8 补肾阳和抗疲劳作用肉苁蓉一直作为补肾阳、提高性功能的滋补药材。近代医学研究表明，德赢vwin登录 乙醇提取物可诱导睾丸甾体生成酶的产生，提高大鼠的性激素水平、精子数和精子活力，增强大鼠的生殖能力。荒漠肉苁蓉提取物可使去势大鼠血清黄体生成激素浓度接近正常水平，对去势大鼠的勃起反应及反应潜伏期都有显著的改善作用。羟基脲是具有潜在生殖毒性的一种抗肿瘤药物，同时会引起睾丸衰竭、精子质量下降和血浆激素水平改变等负面作用。荒漠肉苁蓉水煎剂可对羟基脲引起的精原细胞变性有一定的缓解作用，并调节血清性激素水平［m。荒漠肉苁蓉的苯乙醇苷类提取物能提高ICR小鼠的抗疲劳能力。苯乙醇苷类物质可降低负荷运动后血清肌酸激酶的升高幅度，通过减少肌肉损伤、延缓乳酸积累和改善能量储存提高小鼠的游泳能力。D-半乳糖处理小鼠可导致小鼠肝组织SOD及GSH-PX活性降低，MDA积累增多。肉苁蓉多糖能降低血清BUN、LA含量，提高肝糖原、肌糖原含量、提高抗自由基能力，对D-半乳糖致衰老小鼠具有抗疲劳的作用。3 肉苁蓉的人工栽培随着大众对肉苁蓉作为药物和保健品效果的认可，肉苁蓉需求量不断增加，导致野生肉苁蓉的数量迅速减少。20世纪80年代起，我国开始了肉苁蓉的人工种植栽培技术研究，并在新疆、内蒙古等地区人工种植获得成功。对肉苁蓉及其寄主植物生长发育特性开展了系统研究，人工寄生技术不断优化，逐步形成了标准化栽培技术和操作规程［-］。采收一体化作业设备的成功研发，初步解决了机械化采收肉苁蓉的难题。该设备实现了开沟、种植、施肥、覆土一体化，基本取代了人工

撤种、种子纸和种子带等种植方式，有效提高了种植和接种效率］。尽管该技术还不能完全替代人工采挖的作业方式，但代表了肉苁蓉机械化采挖的发展方向。新疆和田地区、内蒙古阿拉善地区大力发展肉苁蓉产业化，目前已发展为国内德赢vwin登录 和荒漠肉苁蓉的主要种植基地屠鹏飞团队将肉苁蓉的人工种植与新疆、内蒙古地区治沙相结合，在这方面做了大量的研究和技术推广工作，通过肉苁蓉及其寄主植物的大规模栽培，创造了中国特色的沙漠治理新模式，实现了经济效益、生态效益、社会效益的共赢。德赢vwin登录 资源丰富、产量大、苯乙醇苷类成分含量高，其寄主柽柳在我国东部盐碱地区分布广泛，为德赢vwin登录 在盐碱地种植提供了条件。研究人员陆续将德赢vwin登录 引种到河北、北京、山东等地，优化栽培技术攻克了东部地区易腐烂的问题-。在这些地区种植德赢vwin登录 面临的主要问题是涝害和冻害导致的腐烂，经过多年的栽培技术研究，通过起垄覆膜、大棚设施栽培、提高土壤孔隊度、降低土壤含水率、改善土壤透气性，有效减少了华北平原因水分含量高、土壤透气性差引起的生长缓慢甚至腐烂的问题m。为解决冬季气温低导致的德赢vwin登录 腐烂问题，利用挖保温沟的方法，建立了防控德赢vwin登录 遭受冻害的栽培技术，有效解决了肉苁蓉在东部盐碱地种植不能越冬的问题。种植耐盐作物是有效利用盐碱地的重要途径。柽柳作为盐碱地的先锋植物，在改良盐碱地方面具有很大优势。盐碱地种植柽柳能有效降低土壤全盐含量、疏松土壤、改善土壤肥力，对盐碱地具有显著的生物改良作用。将德赢vwin登录 引入黄河三角洲地区开展人工栽培，德赢vwin登录 能在该地区正常生长、开花、结实，完成其生活史。该地区生产的德赢vwin登录 指标成分松果菊苷和毛蕊花糖苷含量完全符合药典要求。充分利用黄河三角洲地区丰富的柽柳资源，在保护原有盐碱地生态的基础上，发展德赢vwin登录 种植，实现生态效益和经济效益双丰收，为黄河三角洲盐碱地生态高效利用提供了新思路。4 肉苁蓉产品开发与产业发展现状随着人民生活水平的提高，肉苁蓉应用于各种保健品的开发，临床上以肉苁蓉为主药的药物制剂也日益增多。日本将肉苁蓉用于改善和治疗性机能障碍、健忘症、心身疾病等。美国将松果菊苷制成保健品，用来提高人体免疫力。我国新疆地区自古以来有食用肉苁蓉的传统，如民众常用肉苁蓉切片泡酒、添加肉苁蓉粉制作面食等。研制生产出用于补血益肾、抗疲劳功能的保健产品，如帝辰牌康咖片、疆芸牌苁蓉劲片等产品。在药物上则有用于治疗老年痴呆症的苁蓉总苷胶囊或制备中药复方苁蓉精纳米微粉制剂等D3-79。我国已经在临床上用肉苁蓉治疗老年慢性便秘和消除子宫肌瘤。肉苁蓉运动保健饮料正处在动物试验阶段。以松果菊苷为主成分的脑清智明片也获批临床试验D。这些新产品的开发将为肉苁蓉打开消费市场创造更多的机会。目前关于肉苁蓉产品的致毒性和安全性评价报道还不多，但仅有的几项研究均证明肉苁蓉可靠的安全性。荒漠肉苁蓉粉做成的一种新型食品喂饲大鼠并进行毒理学评估，没有发现其毒性和不良反应。通过体外和体内试验评估肉苁蓉总苷胶囊 Memoregain®的遗传毒性和口服毒性，均未发现明显的不良反应，证明其治疗阿尔茨海默病的有效性和安全性7。这些毒理学评估支持肉苁蓉对人类食用的安全性。目前，肉苁蓉作为药食同源物质的申请工作正在进行，有望通过国家卫生健康委员会的药食同源物质的增补。总体来说，市场上肉苁蓉相关产品较少，公众可选择范围较为狭窄，这与日渐充足的药材供给和日益增加的公众需求不符。新疆和田地区自发展人工种植德赢vwin登录 产业以来，产量快速上升，但近几年德赢vwin登录 价格却一路下滑D，根本原因就是产品选择面太窄，与日益增加的公众需求矛盾。因此，肉苁蓉相关产品的开发、市场的开拓、相关政策的引导，以及中医药科学的发展，都是肉苁蓉产业发展的重要决定因素。5 总结与展望近年来对肉苁蓉的人工种植、化学成分及药理研究都取得了较好的进展，但在药品、保健品、食品等领域中的开发还较为欠缺。对肉苁蓉提取物及各类成分仍需进行更广泛、更深入的药理作用研究，遴选新的生物活性物质，为产品开发提供材料基础和科学支撑：同时继续开展保健品、功能性食品、化妆品方面的应用研究，进行产品的精深加工，丰富产品种类，开拓下游市场，为肉苁蓉的规模化种植打通产业链。继续加强肉苁蓉的食品和药品安全性研究，阐明肉苁蓉保健品在长期使用下的安全性问题等。肉苁蓉栽培与治沙产业相结合的模式在西部地区获得成功，但在盐碱地利用方面的探索还处于初级阶段。黄河三角洲盐碱地区具有丰富的柽柳资源，尚未得到充分利用。立足保护盐碱地生态环境，营造肉苁蓉柽柳林，创新盐碱地高效生态利用新模式，对黄河三角洲盐碱地综合利用和治理具有重要意义。

侯蕾，王波2，厉广辉＇，王兴军2（1．山东省农业科学院生物技术研究中心／山东省作物遗传改良与生理生态重点实验室，山东 济南 250100：2．潍坊工程职业学院，山东 青州 262500）摘要：肉苁蓉作为著名的补益中药，具有补肾阳、益精血、润肠通便、抗衰老、提高记忆力、保护神经、保肝等多方面的作用，被称为“沙漠人参”，广泛应用于中医临床处方、中成药和保健产品等方面。本文从功能成分、药理作用、人工载培及产品开发等方面综述了近年来肉苁蓉的研究进展及产业化现状，可为肉苁蓉的规模化种植、临床应用、产业化开发提供参考，最后讨论了通过在盐碱地上种植肉苁蓉实现盐碱地高效生态利用的潜力和可行性。关键词：肉苁蓉：药理作用；人工栽培：盐碱地利用：产品开发肉苁蓉为列当科肉苁蓉属多年寄生性药用植物，具有极高的药用价值，素有“沙漠人参”的美誉。其寄主为护沙先锋植物梭梭、柽柳、盐爪爪等，在干旱的沙漠、戈壁滩、盐碱地均能生存，抗性极强。肉苁蓉主要分布在北非和亚洲国家的。在我国，肉苁蓉主要分布于新疆、内蒙古地区，甘肃和宁夏也有分布。《中国植物志》收录列当科肉苁蓉属植物5个种，包括肉苁蓉（Cistanche de-serticola，又称荒漠肉苁蓉）、德赢vwin登录 （C.mbu-losa）、盐生肉苁蓉（C.salsa）、沙苁蓉（C.sinen-sis）和兰州肉苁蓉（C.lanshouensis）。其中，荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 为官方认可作为中药肉苁蓉的基源植物收录入《中国药典》。本文对肉苁蓉的功能成分和品种差异、药效研究进展及其人工栽培、产品开发及产业发展状况进行综述，以期为肉苁蓉更系统深入地研究及产品开发提供参考。1 肉苁蓉的功能成分研究及品种差异从20世纪80年代开始，国内外学者对肉苁蓉属植物进行了系统的药用成分分离鉴定。迄今为止，已从该属植物中分离出100多种化合物，包括苯乙醇苷类、苯甲醇苷类、环烯醚萜类、低聚糖和多糖类、木脂素类、单萜类、氨基酸、黄酮类及挥发油类等多种成分，其中多酚类化合物苯乙醇苷类（phenylethanoid glycosides）含量最高，也是肉苁蓉的主要生物活性成分，包括松果菊苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、2＇-乙酰基洋丁香酚苷和肉苁蓉苷A等。松果菊苷和毛蕊花糖苷通常作为有效成分含量测定的指标性成分。不同品种肉苁蓉化学成分的含量和类型不同。肉苁蓉的紫蔵新苷II（campneoside II）异构体、肉苁蓉苷A和肉苁蓉苷C可作为化学标记物用来区分荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 。利用高效液相色谱发现，2-乙酰丙酮仅存在于荒漠肉苁蓉中，可作为鉴别荒漠肉苁蓉与其它肉苁蓉属植物的潜在化学标志。而花青素A和类胡萝卜素F是荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 的共同成分。此外，各成分的含量随地理来源的不同而不同，不同生长环境下肉苁蓉的化学成分也有显著差异，例如内蒙古地区的荒漠肉苁蓉中松果菊苷含量明显高于甘肃地区［0］。对盐碱地、草地、沙地三种生态环境中采集的肉苁蓉肉质茎分别进行转录组和代谢组分析，结果表明在盐碱地所产肉苁蓉中苯乙醇苷类成分高于草地和沙地产出的肉苁蓉，2＇-乙酰毛蕊花糖苷含量也表现出同样的趋势，表明盐碱地环境有利于肉苁蓉中活性成分的积累。肉苁蓉不同发育时期、不同部位中的活性成分含量也有差异。两年生德赢vwin登录 的多糖含量高于同期一年生，且年内变化趋势基本一致，均在10月份达到最高值。肉苁蓉肉质茎的基部苯乙醇苷类含量最高，越往顶部含量越低，上下差异可达到8倍以上，而松果菊苷在基部与顶部的含量差异可达22.4倍。2 肉苁蓉药用价值研究肉苁蓉的干燥肉质茎入药始载于《神农本草经》，肉苁蓉药材味甘、咸，性温，在传统医学中被广泛应用于治疗肾阳不足、精血亏虚、阳痿不孕、腰膝酸软和肠燥便秘。现代药理研究表明，肉苁蓉及其提取物具有多种生物活性，包括抗炎、抗氧化、提高免疫力、抗衰老、保护神经、提高记忆力、防治骨质疏松、保护心脏、调节血脂、保护肝脏、补肾阳和抗疲劳等多方面作用。国内外学者对肉苁蓉进行了广泛的药理活性研究，发现其活性成分主要为苯乙醇苷、多糖（低聚糖）和环烯醚萜类。2.1 抗炎和抗氧化作用肉苁蓉中的苯乙醇苷类、环烯醚萜类、多糖类均具有抗炎和抗氧化损伤活性。从荒漠肉苁蓉中分离到9种苯乙醇苷类物质，都具有显著的清除自由基和抗脂质过氧化作用，对大鼠肝微粒体脂质过氧化均有显著的抑制作用，其自由基清除活性比α生育酚还高。研究表明，毛蕊花糖苷通过降低NO等炎症因子的释放，抑制炎症相关蛋白的表达，显著降低细菌脂多糖诱导的BV-2小胶质细胞神经炎症反应。从荒漠肉苁蓉肉质茎中分离到的一个环烯醚萜类化合物，也能显著抑制BV-2小鼠微神经胶质细胞中脂多糖对炎症因子 NO的诱导 ㎡。肉苁蓉多糖对小鼠小胶质细胞中脂多糖诱导的NO也有抑制作用，起到抗炎、抗氧化的作用。荒漠肉苁蓉提取物中的低聚糖对雄性大鼠脊髓损伤后的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡有明显的抑制作用에。因此，肉苁蓉主要通过抑制NO等炎症因子的释放来起到抗炎的作用。2.2 提高免疫力及抗衰老作用肉苁蓉中的苯乙醇苷类和多糖均具有显著的增强免疫的作用。给衰老模型小鼠（SAM-P8）喂饲肉苁蓉提取物后，其血液和脾脏细胞中的T细胞和自然杀伤细胞数量显著增加，而外周记忆T细胞和血清中的促炎性细胞因子IL-6明显减

中国野生植物保护协会肉苁蓉保育委员会主任委员北京大学中医药现代研究中心主任  屠鹏飞整理 本报记者 王宁说到滋补养生品，很多人可能第一时间想到人参、西洋参、冬虫夏草之类的补品。其实，在历史上“西域”也进贡了不少珍稀滋补品，肉苁蓉便是其中之一。由于长期乱采滥挖，其野生资源已濒临枯竭，荒漠肉苁蓉已被列入《野生动植物种国际贸易公约》附录II：因为其资源紧缺，导致长期以来肉苁蓉产业停滞不前。1990年，笔者就在导师中国工程院院士楼之岑的指导下，开始肉苁蓉研究。这一做，就是30年。从“随风接种”到高产稳产栽培技术选定肉苁蓉作为研究对象，还有一条重要的理由就是“鲜有人做”。“鲜有人做”的原因是肉苁蓉多分布在西北沙漠和荒漠地区，研究首先要过的坎就是愿意扎根在那样的环境中。寄生植物是植物界中一类靠吸取其他植物的水分和养分生长的植物，约占世界上全部植物种的十分之一。肉苁蓉与锁阳、菟丝子、桑寄生、槲寄生、檀香等很多中药一样，都来自于寄生植物。肉苁蓉属植物属于典型的根全寄生植物，叶全部退化为鳞片，没有叶绿素，完全靠吸取寄主植物的水分和养分生长。对于肉苁蓉属植物的寄生机制、生长发育，人类至今研究很少，有大量的奥秘尚待揭开。在茫茫沙漠中，肉苁蓉的种子随风飘落在沙漠，随着沙子覆盖、掩埋，直接落在寄主的根上，甚或寄主根的附近才能萌发生长，但机会极其渺茫。由于对肉苁蓉属植物的寄生机制不了解，早年的接种都是先找到寄主的根，将肉苁蓉的种子撤在寄主的根上，或将寄主的根皮扒开，将肉苁蓉的种子撒在里面。这些方法不仅接种效率很低，而且接种率也很低，无法进行大面积推广。那么，肉苁蓉与寄主根是如何建立寄生关系的？我们经过长期的野外观察和实验室研究，发现肉苁蓉的种子能够诱导寄主根向其方向生长，寄主根部的信号物质诱导肉苁蓉种子萌发，在此基础上建立了肉苁蓉种子撒播模式。为了建立肉苁蓉及其寄主植物的高产稳产栽培技术，我们邀请中国农业大学郭玉海教授、阿拉善盟林业治沙研究所原所长田永祯高级工程师、上海交通大学李晓波教授等团队，组成肉苁蓉研究协作组，对荒漠肉苁蓉、德赢vwin登录 及其寄主梭梭和柽柳属植物的生物学基础、栽培技术、采收加工等进行了系统研究。研究结果表明，肉苁蓉种子萌发需要低温层积，氟啶酮能够诱导肉苁蓉种子萌发。在此基础上，我们建立了高产稳产型和沙漠治理型肉苁蓉及其寄主的人工种植技术，使肉苁蓉栽培从“仿野生”栽培发展成为“种子处理-接种寄生期-肉质茎生长期-现蕾开花期-裂果成熟期”全程管理的大田栽培，建立了分别适用于内蒙古、新疆产区的肉苁蓉优质高产栽培技术体系。而关键技术的突破，使肉苁蓉的田间接种率从不到20％提升到95％以上，亩产从不到18公斤提升到300公斤以上，实现了肉苁蓉人工种植高产稳产的目标。从“不被待见”到被收入《中国药典》根据本草考证，历史上作为正品肉苁蓉使用的基原植物包括现今的盐生肉苁蓉、荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 。《中国药典》（1963年版）收载的肉苁蓉的基原植物为列当科植物肉苁蓉，即现今的盐生肉苁蓉：《中国药典》（1977年版）将肉苁蓉的基原修订为肉苁蓉，即现今的荒漠肉苁蓉。由于长期乱采滥挖，荒漠肉苁蓉野生资源已濒于枯竭。基于本草考证和资源调查，我们发现德赢vwin登录 在历史上就曾作为肉苁蓉使用。但因其未收入《中国药典》，当销售到内地时，常被作为假药销毁。为了解决德赢vwin登录 的药用问题，20世纪90年代，我们开始对德赢vwin登录 和荒漠肉苁蓉进行化学成分、药效作用和安全性等方面的系统比较研究，发现二者的化学成分、药效作用基本一致，安全性很高，而且德赢vwin登录 的有效成分苯乙醇苷类成分含量明显高于荒漠肉苁蓉。于是，我们向国家药典委员会提出将德赢vwin登录 作为肉苁蓉药材的来源之一收入《中国药典》，并起草了德赢vwin登录 的质量标准。通过国家药典委员会组织相关药典委员评审，德赢vwin登录 作为肉苁蓉来源植物收入《中国药典》（2005年版）。这不但迅速缓解了当时肉苁蓉药材资源短缺问题，为新疆南疆地区发展肉苁蓉产业奠定了基础，还为中药产业乃至全球提供了一种苯乙醇苷类成分含量很高的中药材，为相关药品和健康产品开发提供一种优质原料。从经验用药到更精准的“处方”肉苁蓉的传统功效为补肾阳、滋肾阴、益精血、润肠通便，一般凭借经验用药。那么，目前临床用得比较多的荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 ，如何才能更好发挥疗效呢？为了弄清楚这个问题，我们对二者进行了全成分分析。结果表明，荒漠肉苁蓉中的寡糖类、甘露醇和甜菜碱含量较高：德赢vwin登录 中的苯乙醇苷类成分含量较高，寡糖类成分含量相对较低，且不含甜菜碱。结合其药效学研究结果发现，荒漠肉苁蓉在润肠通便方面作用较强，德赢vwin登录 在补肾、益精、抗衰老、抗阿尔茨海默病和帕金森病、保肝等方面效果更好。二者各有特点，为临床精准使用提供参考。值得一提的是，肉苁蓉的补肾作用不同于其他补肾药或壮阳药，其主要机制在于调控性激素的水平趋于正常。因此，不易引发激素紊乱进而产生毒副作用，更为安全有效。肉苁蓉提取物具有显著的通便作用，主要机制为提高肠内渗透压，抑制大肠对水分的吸收，促进肠道蠕动，特别适合于老年人以及体虚等便秘患者。从近10亿元到200多亿元的年产值2000年以前，由于肉苁蓉资源枯竭，产品开发和产业化一直处于低谷。经过20多年的发展，彻底解决了肉苁蓉资源短缺问题，保障了临床用药和200多个中成药和保健产品的原料供给，相关产业的年产值也从20世纪90年代的不到10亿元发展到今天的200多亿元，产业已初具规模。肉苁蓉产业发展前景光明，但仍然面临一些新情况、新问题，应在克服困难中发展壮大。一是各级政府对肉苁蓉产业发展的生态、经济和社会价值认识不够，对产业发展支持力度不够，建议从资金、政策、人才等方面给予更大的支持。二是当前专业从事肉苁蓉开发和产业发展的企业规模较小，技术、资本和管理较缺乏，尚不具备做强、做大肉苁蓉产业的能力，建议吸引大型企业进入肉苁蓉产业领域。三是肉苁蓉基础研究尚需进一步深入，尤其是肉苁蓉所含丰富化学成分的药理作用和保健功能尚需进一步挖掘。四是肉苁蓉相关产品开发仍然非常缺乏，科技含量多数较低，难以支撑肉苁蓉大产业的发展，建议利用肉苁蓉广泛的药效作用和保健功能，开发系列药品和保健品。五是宣传和市场开拓非常薄弱，未来应该加强与国际知名院校、科研单位合作，共同开展肉苁蓉研究和产品开发，为国际市场开拓提供科技保障。（本报记者王宁根据屠鹏飞教授在第十一届国际肉苁蓉暨沙生药用植物学术研讨会上的发言整理）

摘要　[ 目的]提取肉苁蓉多糖并测定其抑菌作用。[ 方法] 采用热水浸提法提取肉苁蓉多糖, 在单因素试验的基础上, 通过3因素3水平正交试验优化肉苁蓉多糖提取工艺。[ 结果] 各因素对多糖得率的影响依次为浸提温度>水料比>浸提时间。最佳提取工艺为以1∶15的料水比在85 ℃下浸提2 h, 利用该工艺提取肉苁蓉多糖的平均得率为6.785 7 mg/g。肉苁蓉多糖溶液对四叠球菌的抑制作用最强, 其抑菌圈直径为11.20 mm, 其次为枯草芽孢杆菌, 其抑菌圈直径为10.24 mm。肉苁蓉多糖溶液对啤酒酵母的抑制作用较强, 其抑菌圈直径为8.16 mm, 对黑曲霉和米曲霉的抑菌作用不明显。肉苁蓉多糖溶液对大肠杆菌、四叠球菌、枯草杆菌、啤酒酵母和橘青霉的最小抑菌浓度分别为0.437、0.109、0.218、0.437和0.874 mg/ml。[结论] 该研究为肉苁蓉在更多领域中的合理开发和利用奠定了基础。关键词　肉苁蓉;多糖;提取工艺;抑菌作用;最小抑菌浓度肉苁蓉(CistanchedeserticolaMa)为列当科肉苁蓉属多年生草本植物, 全世界约有20种, 我国有6种, 主要分布于内蒙古、新疆、甘肃和宁夏等地[ 1 -2] 。由于肉苁蓉生长环境严酷,气候极端干旱, 多生长在荒漠中, 具有极好的药用价值,素有“沙漠人参”之美誉[ 3 -4] 。文献报道肉苁蓉含有多糖、苯乙醇苷、生物碱、有机酸等多种成分[ 5] 。而多糖类成分在增强机体免疫功能、抗肿瘤方面的作用愈来愈受到人们的重视,其中对免疫增强作用的机理研究已深入到分子、受体水平。但对肉苁蓉多糖的抑菌作用研究还未见报道。笔者主要对肉苁蓉多糖的提取工艺及抑菌性能进行研究, 旨在使这种名贵、稀有的中药材在更多的领域得到更好的、更合理的开发和利用。1　材料与方法1.1　材料1.1.1　试验材料。肉苁蓉植株采于甘肃白银平川区野外。1.1.2　试验药品。葡萄糖、95%乙醇、浓硫酸、苯酚、正丁醇、三氯甲烷等试剂均为国产分析纯。1.1.3　供试菌种。枯草杆菌(Bacillussubtilis), 大肠杆菌(Escherichiacoli), 四叠球菌(Micrococcusterragenus), 啤酒酵母(Scerevisiaehensen),米曲霉(A.oryzae), 橘青霉(Penicilliumsp.),黑曲霉(Aspergillusnigers)。以上菌种均由河西学院生命科学与工程系微生物实验室提供。1.1.4　试验仪器。电子分析天平;超净工作台;复日菌落计数器;青岛-利勃海尔电冰箱;日本ALP全自动高压灭菌锅;DPX-9272B-1电热恒温培养箱;MJX智能霉菌培养箱;FGZX101-3S电热恒温鼓风干燥箱。1.1.5　培养基[ 6] 。PDA培养基:去皮马铃薯200 g, 琼脂20g, 蔗糖20 g, 水1 000 ml, pH自然, 121 ℃灭菌20 min。NA培养基:牛肉膏3 g,蛋白胨10 g, 氯化钠5 g, 琼脂15 ～ 20 g, 水1 000 ml, 121 ℃灭菌20 min。1.1.6　菌悬液。将相对应的试验菌种接种在斜面培养基上, 细菌37 ℃活化18 h,真菌32 ℃ 活化24 ～ 48 h。以无菌生理盐水配制成菌悬液(107 ～ 108 CFU/ml)备用。1.2　方法1.2.1　肉苁蓉多糖的提取。1.2.1.1　肉苁蓉多糖提取工艺流程。干燥肉苁蓉粉末※95%乙醇浸泡2 h※烘干※热水浸提※过滤除渣※醇沉24 h※离心去上清液※沉淀物溶解定容至50 ml※Ssevage法除蛋白※再次定容至50 ml※测吸光度。1.2.1.2　肉苁蓉多糖提取方法。准确称取肉苁蓉粉末3 g,加95%乙醇浸泡2 h后, 过滤, 取滤渣,于80 ℃烘箱内烘干。以提取温度、水料比和提取时间为试验因素, 在单因素试验的基础上按表1进行正交试验,提取多糖。每组提取次数均为2次, 然后合并滤液, 浓缩滤液至原体积的1 /5, 浓缩液中加入4倍体积的95%乙醇, 充分搅拌后置冰箱过夜沉淀。弃上清, 3 000 r/min离心10 min, 收集沉淀。沉淀用适量蒸馏水溶解并定容至100 ml, 置于分液漏斗, 按照1 ∶1 量加入Sevage试剂(氯仿∶正丁醇=4∶1), 振荡30 min, 静置,分离数次。直到没有乳白色变性蛋白质析出为止, 收集上清液, 定容至50 ml待用。1.2.1.3　多糖含量的测定。采用苯酚-硫酸法[ 7] 。取样品1 ml,加入1 ml蒸馏水再加入1 ml质量分数为5%的苯酚溶液和5 ml浓硫酸摇匀后于25 ℃静置20 min, 于波长490 nm处测其吸光值,根据标准曲线即得多糖含量。1.2.2　肉苁蓉多糖提取物抑菌性检测。1.2.2.1 　抑菌试验。将多糖提取物配制成浓度为1.748mg/ml的溶液, 采用圆纸片法测定其抑菌活性。分别刮取活化后的供试菌(7种)菌苔于50 ml生理盐水中, 振荡摇匀得菌悬液,分别用移液枪注入0.2 ml于培养基平板上,涂匀,取已消过毒的圆形滤纸(￠6 mm)用糖液浸泡过夜。捞出略干后贴于培养基平板上。在恒温培养箱中培养(细菌36 ～ 37℃, 18 ～ 24 h;真菌28 ～ 30 ℃, 48 ～ 72 h)后分别观察其抑菌性。以上步骤均按无菌条件操作, 每个样品设2个平行, 结果取平均值。1.2.2.2　最小抑菌浓度的测定。采用圆纸片法[ 8-9] , 方法同上,将多糖溶液稀释成1.748、0.874、0.437、0.218 5、0.109 25mg/ml的浓度梯度, 以未见抑菌圈的最高浓度为MIC[ 10 -11] 。2　结果与分析2.1　肉苁蓉多糖热水浸提法最佳条件的确定　肉苁蓉多糖热水浸提法浸提次数均为2次,影响热水浸提法的因素主要有浸提温度、浸提时间和水料比。试验在单因素试验的基础上采用3因素3水平正交法确定最佳浸提条件。由表2的极差分析结果可见, 影响肉苁蓉热水浸提法的因素主次顺序是A、C、B。由试验结果分析可知, 3个因素的最佳组合是A2B2C2,即浸提温度85 ℃,浸提时间2 h,加水量为1∶15。　试验结果表明,浸提温度对多糖获得量的影响最大。85℃浸提多糖获得量最多, 随着温度的升高得量反而下降。浸提温度过高, 可能破环了多糖的结构, 使多糖含量降低;浸提温度太低时, 不利于多糖的彻底溶出。溶剂的用量增大, 有利于多糖溶出, 水料比为15∶1时, 所得多糖最多, 表明这时多糖溶解较充分。水料比太小, 多糖不能完全溶解, 造成提取不完全;水料比太大, 在浓缩、回收时比较困难, 造成浪费。当浸提时间为2 h时所得多糖的量最多, 随着时间的延长, 多糖量反而减少。这可能是由于浸提时间过长, 多糖在水中的溶出趋于平衡,多糖量提高很少。2.2　肉苁蓉多糖提取物的抑菌作用　图1是肉苁蓉多糖溶液对四叠球菌、枯草杆菌、大肠杆菌和啤酒酵母的抑菌作用结果。由图1可见,肉苁蓉多糖溶液对供试菌种具有抑菌活性。　肉苁蓉多糖提取物对大肠杆菌、四叠球菌、枯草杆菌、啤酒酵母、橘青霉的抑菌圈直径分别为8.96、11.20、10.24、8.16、7.84 mm。由此可见,肉苁蓉多糖溶液对3种供试细菌都有抑制作用, 其中对四叠球菌的抑制作用最强,抑菌圈直径达11.20 mm, 其次为枯草芽孢杆菌,抑菌圈直径达10.24mm。供试的4种真菌中肉苁蓉多糖提取物对啤酒酵母、橘青霉有抑制作用,其中对啤酒酵母的抑制作用较强, 抑菌圈直径达8.16 mm,对黑曲霉和米曲霉的抑菌作用不明显。肉苁蓉多糖提取物抗菌活性结果表明,肉苁蓉多糖提取物对一些细菌与真菌都显示了不同程度的抑制作用, 说明肉苁蓉多糖在抗动植物病原菌方面有潜在应用价值。2.3　最小抑菌浓度(MIC)的测定　肉苁蓉多糖提取物对大肠杆菌、四叠球菌、枯草杆菌、啤酒酵母、橘青霉的MIC分别为0.437、0.109、0.218、0.437、0.874。由此可见,肉苁蓉多糖提取物对四叠球菌的最小抑菌浓度在所试菌种中浓度最小, 表明四叠球菌是测定肉苁蓉多糖MIC的较好指示菌,肉苁蓉多糖提取物对橘青霉的MIC最高。3　结论与讨论通过正交试验对肉苁蓉多糖的提取工艺进行研究, 确定肉苁蓉多糖提取结果的诸因素及其主次顺序为提取温度>水料比>提取时间, 肉苁蓉多糖的最佳提取工艺为:以蒸馏水为提取剂、提取温度85 ℃、提取时间2 h、水料比15∶1。在此条件下, 肉苁蓉多糖含量可达6.785 7 mg/g。用滤纸片法对肉苁蓉多糖提取物进行抑菌性研究, 结果表明肉苁蓉多糖具有一定的抑制细菌及真菌生长的作用。对细菌的抑制作用明显强于对真菌的抑制作用。在供试的3种细菌中肉苁蓉多糖提取物对四叠球菌的抑制作用最大, 抑菌圈直径达11.20 mm。肉苁蓉多糖的最小抑菌浓度(MIC)因菌种不同而不同。肉苁蓉多糖提取物对四叠球菌的最小抑菌浓度为0.109 mg/ml, 在供试菌种中浓度最小。所以四叠球菌可以作为测定肉苁蓉多糖MIC的较好指示菌。参考文献[ 1] 盛晋华,翟志席,杨太新, 等.肉苁蓉寄生生物学的研究[ J] .中国农业科技导报, 2004, 6(1):57 -62.[ 2] 程齐来,陈君.肉苁蓉属植物研究概况[ J] .中药材, 2004, 27(10):789 -791.[ 3] 王丽楠,陈君, 杨美华, 等.不同初加工温度对肉苁蓉有效成分含量的影响[ J] .中国工艺与制剂, 2007, 18(21):1620 -1623.[ 4] 朱咏华,罗泽民.肉苁蓉的研究进展及前景分析[ J] .湖南林业科技,2000, 27(4):19 -22.[ 5] 欧阳杰,赵兵, 王晓东, 等.肉苁蓉有效成分提取集成方法的研究[ J] .武汉植物学研究, 2003, 21(6):526 -530.[ 6] 姚新生.天然药物化学[ M] .北京:人民卫生出版社, 2001:356.[ 7] 唐彦君,王桂华,魏文毅, 等.红枣多糖提取工艺研究[ J] .黑龙江八一农垦大学学报, 2008, 20(4):64 -66.[ 8] 张宁, 曹光群.金银花叶的抑菌活性和抗氧化性研究[ J] .牙膏工业,2008(3):29-32.[ 9] 王金华,曾莹, 夏服宝.马蹄叶茎提取物及其抑菌性的分析检测[ J] .冷饮与速冻食品工业, 2003, 9(2):30-32.[ 10] 李国庆, 韩志国, 李佳,等.刺山柑叶子中黄酮的超声波提取及抑菌研究[ J] .食品工业科技, 2009, 30(1):195 -198.[ 11] 冯翠萍, 亚琴.桔皮抑菌作用的研究[ J] .食品科学, 2007, 28(12):105-108.

摘要：肉苁蓉是一种含有多种化学成分的传统补益中药，其中多糖是其主要活性成分之一。现代的药理研究表明，肉苁蓉多糖具有调节免疫活性、抗衰老、改善学习记忆能力、保护神经、抗肝损伤、抗病毒、抗肿瘤、影响肠道菌群等诸多药理作用，广泛应用于临床和保健类食品方面。此外，由于肉苁蓉多糖的组成多样性，对其生物活性也有一定影响。故该文综述了肉苁蓉多糖的药理作用，以期为相关研究和临床应用提供参考。关键词：肉苁蓉多糖；单糖组成；药理作用；研究进展在历代补益药中药处方中肉苁蓉的出现率占据第1 位，其中多糖作为主要的活性成分之一，具有多种药理作用，广泛应用于临床和保健类食品方面，随着科技的进步和相关研究的深入，肉苁蓉多糖在更多领域中的开发和合理利用也越来越受到人们的关注。1 概述肉苁蓉是中药临床常用的一种传统补益中药，又名苁蓉、地精、金笋等，俗称为大芸，具有“沙漠人参”的美誉[1]。在我国已有2000 多年的药用历史，在历代补益性中药处方中出现率占第1位[2]，主要分布于北纬36°~37°，东西横跨内蒙古、陕西、甘肃、宁夏及新疆等5个省区。据统计，全球肉苁蓉属的植物约有22 种，确定我国有5 种，原植物为荒漠肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉和沙苁蓉以及白花盐苁蓉[3]。据《中华人民共和国药典》记载，肉苁蓉是列当科（Orobanchaceae）肉苁蓉属（Cistanche）植物肉苁蓉的干燥带鳞片的肉质茎，性味为甘、咸、温，归肾、大肠经，功能与主治：补肾阳，益精血，润肠通便。肉苁蓉的药理作用主要有提高学习记忆能力[4]、提高性功能、抗衰老、抗疲劳、抗辐射、调节免疫功能、润肠通便、治疗骨质疏松、保肝等，还被描述有镇静、血管松弛的作用，广泛用于治疗不同的健康问题[5]。2 肉苁蓉多糖的研究肉苁蓉含有多种化学成分，主要包括苯乙醇苷类、多糖类、黄酮类、环烯醚萜类、木脂素类、低聚糖、半乳糖醇、生物碱及挥发性成分，此外，还有氨基酸、无机微量元素等[6]。其中多糖是其主要活性成分之一，主要由葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、果糖等单糖组成。常用的含量测定方法分为两类，第一类是利用多糖的单糖的缩合反应进行测定，例如蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法，另一类是直接测定多糖本身，例如高效毛细管电泳法、高效液相色谱法、气相色谱法和生物传感器法等。提取方式有传统浸提、超声提取、微波提取和酶法提取等。由于肉苁蓉的种类、产地、分离提取方法各异，肉苁蓉多糖在化学结构、组成和相对分子量上有巨大的多样性，对其生物活性具有很大影响。见表1。3 肉苁蓉多糖的药理作用3.1 调节免疫活性肉苁蓉多糖是肉苁蓉发挥免疫调节作用的物质基础，能促进淋巴细胞的增殖，改善机体免疫功能，激活免疫细胞，同时能显著提高巨噬细胞吞噬及分泌功能，从而活化巨噬细胞，起到调节免疫活性的作用。机制见图1。3.1.1 促进淋巴细胞的增殖淋巴细胞的增殖是机体细胞免疫反应的前提，反映了机体非特异性免疫的功能。白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）是在机体复杂的免疫体系中具有重要调节作用的细胞因子，肉苁蓉多糖能促进淋巴细胞IL-2 的释放及受体的表达，促进淋巴细胞的增殖与分化[16]。而白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）属于促炎因子之一，IL-6 表达的增高会加重炎症反应，引起免疫性病理损伤[17]。王翔岩[18]通过实验验证，肉苁蓉多糖可促进未活化的淋巴细胞增殖，也可促进刀豆蛋白A（concanavalinA，ConA）有丝分裂原受体活化的T 淋巴细胞和脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）有丝分裂原受体活化的B淋巴细胞增殖，并且对B淋巴细胞的增殖作用强于T 淋巴细胞。姚金茜等[19] 通过实验探讨了肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能的影响，发现肉苁蓉多糖通过改善T 细胞亚群的失衡及刺激机体IL-2 的分泌直接增强免疫活性，于此同时，也能够减少促炎因子IL-6 的释放减轻大鼠肺部的炎症反应，有利于肺部局部免疫功能的修复。ZHANGAilian 等[20] 从肉苁蓉中提取出的一种水溶性多糖，通过Toll 样受体4（Toll-like receptors4，TLR4）信号激活树突状细胞，诱导树突状细胞成熟，树突状细胞是重要的抗原递呈细胞，为启动免疫反应提供必要的信号，完全成熟的树突状细胞可诱导T 淋巴细胞增殖，实验表明肉苁蓉多糖可以作为疫苗佐剂，具有免疫调节作用。ZHAO Bin 等[21] 通过肉苁蓉水提物作为季节性流感疫苗多糖佐剂的应用研究中，发现肉苁蓉水提物和季节性流感疫苗联用可以增强HI抗体的产生，更快速的产生体液免疫反应，促进T 淋巴细胞的生长和分化，对季节性流感疫苗产生更加持久的免疫。曾群力等[22]通过噻唑蓝（MTT）比色体外观察法发现，推测肉苁蓉多糖调节免疫活性的作用机制是肉苁蓉多糖能促进小鼠胸腺淋巴细胞内钙离子释放，使细胞内钙离子浓度升高从而促进了IL-2基因的表达，促使T淋巴细胞增殖，同时也发现了肉苁蓉多糖在较高浓度时能对抗异丙肾上腺素（isoprenaline，ISO）、地塞米松（dexamethasone，DEX）对淋巴细胞增殖的抑制作用，及对抗高浓度肿瘤抑制因子-β对淋巴细胞增殖的抑制作用，协同低浓度肿瘤抑制因子-β对淋巴细胞的增殖有促进作用。3.1.2 增强吞噬细胞活性在免疫系统中，吞噬细胞是继上皮屏障之后宿主防御的第一道防线，在免疫功能中起着至关重要的作用[23]。王翔岩等[24] 发现肉苁蓉多糖可显著促进小鼠腹腔巨噬细胞或细胞株RAW264.7 的NO、IL-1、肿瘤抑制因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）释放。在免疫系统中，由吞噬细胞合成释放的NO 可杀伤微生物、寄生虫、肿瘤细胞等[25]，TNF-α不仅直接参与抗肿瘤作用，还可调节自然杀伤细胞（natural killer cell，NK）等免疫细胞的活性，IL-1 对机体的免疫反应具有启动、放大效应和正向调节作用，可活化淋巴细胞诱导免疫应答及协同刺激胸腺细胞增生等[26]。张涛等[27] 的研究显示肉苁蓉多糖可能通过增强单核巨噬细胞吞噬能力和促进细胞因子释放增强免疫活性。3.2 抗衰老衰老是指人体细胞及组织在结构和功能上出现的退行性变化的现象。肉苁蓉多糖通过不同途径影响机体，产生抗衰老作用。3.2.1 抗氧化肉苁蓉多糖是天然的抗氧化剂，可以清除超氧自由基、羟自由基等多种自由基，旨在保护机体过量产生自由基[28]。衰老自由基学说认为人类随年龄增长的退行性变化是由于自由基活性氧化损伤作用所致。王国卫等[29] 通过研究新疆肉苁蓉多糖清除活性氧自由基的实验结果表明新疆肉苁蓉多糖对超氧阴离子自由基、羟自由基、DPPH（1，1-二苯基-2-三硝基苯肼）· 自由基、单线态氧自由基均有明显清除作用，且清除作用与多糖浓度呈正相关性。吴波等[30] 建立D- 半乳糖小鼠亚急性衰老模型，发现灌服肉苁蓉多糖的衰老小鼠血液和肝脏组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）明显高于模型组，从而消除D- 半乳糖引起的自由基的增多，提示肉苁蓉多糖具有抗氧化作用从而起到延缓衰老的作用。线粒体是细胞内主要耗氧部位，是产生自由基的主要场所，徐辉等[31] 采用D- 半乳糖所致衰老模型大鼠的实验中发现，肉苁蓉多糖显著提高衰老模型大鼠肝脏Ca2+- 三磷腺苷（adenosinetriphophate，ATP）酶活性、肝线粒体膜流动性及呼吸链复合体的活性，显著降低肝线粒体丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量、磷脂酶A2 活性，表明肉苁蓉多糖可以提高肝线粒体的抗氧化能力，减少脂质过氧化产物，减轻线粒体氧化损伤，改善线粒体能量代谢，达到延缓衰老的目的。3.2.2 抗疲劳抗疲劳能力减弱也是衰老的一个典型特征[32]，血清尿素、乳酸及肝糖原、肌糖原是检测疲劳最常用的生化指标[33]，负重游泳实验是评价药物抗疲劳作用最直接、最客观的指标[34]。闫磊等[35] 研究肉苁蓉多糖对D- 半乳糖致衰老小鼠抗疲劳作用的实验中，表明肉苁蓉多糖可以提高衰老小鼠的运动耐力，并且低、高剂量肉苁蓉多糖能降低衰老小鼠血清尿素、乳酸水平，增加肝糖原、肌糖原含量，增强抗自由基损伤，结果表明低、高剂量肉苁蓉多糖均有抗D- 半乳糖致衰老小鼠疲劳的作用。3.2.3 改善呼吸系统退行性变化呼吸系统退行性变化和机体衰老是同步进行的。孙云等[36-37] 通过肉苁蓉多糖对衰老小鼠肺一氧化氮和细胞凋亡以及肺蛋白含量的影响中发现，肉苁蓉多糖可以明显提高机体血清和肺的SOD活力、降低一氧化氮浓度，明显抑制了肺组织细胞凋亡，使胶原蛋白增多和弹性蛋白减少，对肺组织细胞具有保护和改善的作用，从而达到了延缓衰老的作用。3.3 改善学习记忆能力阿尔兹海默症是一种神经退行性疾病。尹刚等[38] 建立阿尔兹海默病大鼠模型，观察肉苁蓉多糖对其学习记忆能力以及脑内海马神经元B淋巴瘤-2基因（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（cysteinyl aspartate specificproteinase-3，Caspase-3）表达的影响，发现肉苁蓉多糖能通过增强Bcl-2 的表达及抑制Caspase-3 的表达抑制海马神经元的凋亡，从而改善阿尔兹海默病大鼠的学习记忆能力。尹刚等[39] 通过实验也发现了肉苁蓉多糖增加了大脑皮质及海马乙酰胆碱酯酶的含量，提高皮质中乙酰胆碱转移酶的活性，提示肉苁蓉多糖可能通过影响机体胆碱能系统来改善学习记忆能力。尹若熙等[40] 研究表明肉苁蓉多糖可明显提高东莨菪碱所致学习记忆障碍模型小鼠突触可塑性相关蛋白的表达水平，促进突触的形成，增加突触的数量，增强了突触的可塑性，从而改善东莨菪碱造成的学习记忆障碍损伤。武燕等[41] 研究肉苁蓉多糖对改善学习记忆障碍的非抗氧化机制时发现，肉苁蓉多糖可通过上调CAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路，并且适度提高神经递质的释放来改善衰老小鼠的学习记忆能力。3.4 保护神经Bcl-2 基因是一种原癌基因，它通过抑制凋亡而延长细胞的存活，具有抑制细胞凋亡的作用[42]。蔡克瑞等[43] 探讨肉苁蓉多糖对 D- 半乳糖致衰老小鼠脑神经细胞的保护作用及其机制，发现灌服肉苁蓉多糖可提高SOD活性、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活力，降低MDA 含量，增强神经细胞DNA 损伤的修复能力，减少凋亡细胞数，增加Bcl-2 基因表达，具有改善衰老小鼠脑神经细胞损伤的作用。LIUYue 等[44] 研究肉苁蓉多糖保护肾上腺嗜铬细胞瘤（pheochromocytomaderived，PC12）细胞免受糖氧剥夺（oxygen and deprivation，OGD）的损伤，建立OGD损伤的PC12 细胞模型，通过肉苁蓉多糖和丝裂原依赖性癌基因（DJ-1）的相互作用，帕金森疾病有关的蛋白质DJ-1 是通过刺激抗凋亡和抗氧化基因的表达介导神经保护的[45]，发现肉苁蓉多糖抑制OGD 诱导的细胞损伤和凋亡，降低OGD 诱导的细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）的积累，同时肉苁蓉多糖能刺激DJ-1 的分泌，增强其DJ-1 的表达，结果表明肉苁蓉多糖通过抑制氧化应激和调节DJ-1通路对OGD 诱导的损伤具有神经保护作用。3.5 抗肝损伤王艳芳等[46] 通过肉苁蓉多糖对CCl4 所致小鼠急性肝损伤的保护作用试验中发现，肉苁蓉多糖各剂量组小鼠肝脏中的MDA 含量显著降低，SOD水平显著升高，表明肉苁蓉多糖可以改善脂质过氧化物对肝细胞的损伤，提高了肝细胞的抗氧化能力，从而维持肝细胞质膜的完整性，使肝细胞发挥正常的防御和代偿功能。GUO Yuanheng 等[47] 也证实了从肉苁蓉多糖中分离出来的一种多糖组分可以降低MDA、甘油三酯（triglyceride，TG）含量，调节相关酶的活性，从而起到对酒精性肝损伤的保护作用。3.6 抗病毒、抗肿瘤张洪泉等[48] 通过实验发现肉苁蓉多糖能明显增加自然杀伤细胞C（natural killer cellC，NKC）和白细胞介素IL-2 的活性，对Lewis 肺癌和S180 肉瘤有明显的的抑瘤作用。王成蓉等[49] 在实验中证实了肉苁蓉多糖能提高T 淋巴细胞活性，增加了血清中干扰素-γ 含量。干扰素-γ 不仅能与细胞表面相应受体结合，诱导细胞形成抗病毒蛋白，抑制病毒复制，还可通过增强或发动宿主对肿瘤细胞的免疫反应，杀伤肿瘤细胞，达到抗病毒、抗肿瘤的作用。3.7 影响肠道菌群王晓琴等[50] 对肉苁蓉多糖提取物进行大肠杆菌、四叠球菌、枯草杆菌、啤酒酵母、橘青霉的抑菌性实验中，表明肉苁蓉多糖具有一定的抑制细菌及真菌生长的作用，对细菌的抑制作用明显强于对真菌的抑制作用，此实验说明肉苁蓉多糖在抗动植物病原菌方面有潜在应用价值。ZENG Hui等[7] 也证实了从肉苁蓉中分离出来一种新型的均质中性多糖CDA-0.05 可促进多种益生菌的生长，有利于人类促进肠道菌群健康。3.8 其他作用陈志伟等[51] 在肉苁蓉多糖对骨髓抑制性贫血小鼠造血调控的实验研究中发现，肉苁蓉多糖在一定浓度范围均可促进巨核系、红系造血祖细胞的增殖与分化，减轻骨髓抑制，促进造血。高慧等[52] 通过不同浓度的肉苁蓉多糖对体外培养人纤维细胞的试验中，发现肉苁蓉多糖能明显促进体外成纤维细胞的生长，表明应用适当浓度的肉苁蓉多糖可促进创伤愈合。此外，肉苁蓉多糖能抑制核因子-κB受体激活配体（receptor activatornuclear factor-κB ligand，RANKL）诱导的破骨细胞分化和骨吸收[53]，而且能促进内分泌功能的改善，加速新陈代谢，从而改善更年期症状[54]。有试验[55] 证明，肉苁蓉多糖能提高大黄脾虚大鼠模型的胃蛋白酶和唾液淀粉酶的活性，改善脾虚导致的消化功能障碍。4 总结与展望多糖是肉苁蓉的重要活性成分之一，具有调节免疫活性、抗衰老、改善学习记忆能力、保护神经、抗肝损伤、抗病毒、抗肿瘤、影响肠道菌群等诸多药理作用，广泛应用于临床和保健类食品方面，但是相应的药理作用机制研究较少，也限制了对其深度开发与应用。多糖作为大分子物质在人体肠道难以被吸收，肠道微生物群可以将膳食多糖发酵成短链脂肪酸，促进人体肠道的消化吸收，但是肉苁蓉多糖在肠道内如何转化，以及对肠道菌群的影响机制目前仍不清楚，需要科研工作者进一步研究。另外，肉苁蓉多糖组成成分较多、结构较复杂，不同种及不同部位肉苁蓉多糖的药效之间也存在一定的差异，仍需进一步探讨。随着科技的进步和相关研究的深入，肉苁蓉多糖在提取分离、组分分析、构效关系、体内代谢、药理作用及生物学功能等方面的研究势必会更加深入，为肉苁蓉多糖在更多领域中的开发和合理利用提供理论基础和科学依据，发挥其最大的临床药用价值和经济价值。◆参考文献[ 1 ] 钟平. 沙漠人参肉苁蓉[ J ] . 森林与人类，2004 ( 11 )：25.[ 2 ] 朱晓玉，刘雄，高建德，等. 肉苁蓉资源概况及药理作用新进展[ J ] . 甘肃中医药大学学报，2016，33 ( 4 )：91-94.[ 3 ] 石婷婷，葛卫红. 肉苁蓉属植物的研究进展[ J ] . 中国民族民间医药，2009，18 ( 9 )：7-9.[ 4 ] 皋聪，王传社，巫冠中，等. 苁蓉总苷对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响及机制研究[ J ] . 中草药，2005，36 ( 12 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Herba Cistanche（RouCong-Rong）：One of the Best Pharmaceutical Gifts of TraditionalChinese Medicine[ J ] . Frontiers in pharmacology，2016，7：41.[ 6 ] 赖青海，王琳琳，丁辉，等. 肉苁蓉治疗骨质疏松症研究进展[ J ] . 辽宁中医药大学学报，2016，18 ( 3 )：102-104.[ 7 ] Z E N G H u i，H U A N G L u l i n，Z H O U L i s h u a n g，e t a l . Agalactoglucan isolated from of Cistanche deserticola Y. C. Ma.

关键词　肉苁蓉多糖；抗衰老；中药肉苁蓉是列当科植物肉苁蓉干燥带鳞叶的肉质茎，又名地精，大芸，是常用中药之一。始载于《神农本草经》，列为上品。李时珍曰：“此物补而不峻，故有从容之兮”。肉苁蓉味甘、咸，性温，具有补肾阳、益精血、润肠通便的功能。肉苁蓉在世界上约有１８种，我国约有４种１变种［１］，分别为荒漠肉苁蓉、盐生肉苁蓉、白花盐苁蓉、沙苁蓉和德赢vwin登录 。肉苁蓉具有良好的临床应用价值，体现在强壮作用，抗氧化抗衰老作用，可调节免疫功能，有雄性激素样作用，以及通便作用［２］等多种功能。本文着重从肉苁蓉的成分以及肉苁蓉多糖的抗衰老作用进行综述，以便交流学习。１　衰老机制随着年龄的增长，机体在形态结构和生理功能方面都必然要出现一系列退行性变化，这就是通常所说的“衰老”。它的宏观表现主要是细胞、组织、器官退行性改变，如细胞数量减少，组织弹性减低，脏器萎缩、变性等，从而导致机体多种生理功能逐渐减退。近年来在细胞生物学和分子生物学迅速发展的推动下，衰老机制的微观研究已取得了重大的进展，并提出了有关衰老的若干学说。在这些学说当中，最具有代表意义的有：①自由基；②线粒体ＤＮＡ 损伤学说；③衰老的端粒学说；④衰老的基因学说。２　肉苁蓉成分的研究Ｈａｙａｓｈｉ等通过甲醇提取，提取物用水混悬，并依次用乙醚，乙酸乙酯和正丁醇萃取，配合中压柱层析，凝胶过滤及制备ＨＰＬＣ，得到异苁蓉苷Ｃ。酸水解产物经薄层色谱得到葡萄糖，鼠李糖，咖啡酸。曲淑惠等［３］从肉苁蓉Ｃ．ｓａｌｓａ中分离得到Ｄ－甘露醇，β－谷甾醇，β－Ｄ －葡萄糖甙，琥珀酸，甜菜碱等化合物。陈妙华等研究表明，Ｃ．ｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａ除含有甘露醇δ－表马钱子葡萄糖甙外，尚含有胡萝卜甙、琥珀酸，毛蕊花甙，β谷甾醇，三十烷醇、甜菜碱及多糖等。堵年生等［４］从Ｃ．ｓａｌｓａ中分离得到４种苯丙醇甙类化合物，除陈妙华等人分离到的毛蕊花甙外，还有海胆甙，肉苁蓉甙Ａ 和Ｚ＇－ 乙酰基毛蕊花甙。最近徐朝晖等［５］从内蒙古阿拉善盟产肉苁蓉的乙醇提取物中分得１０个化合物，根据理化常数，光谱数据及Ｘ－衍射分别鉴定为苁蓉素（Ｃｉｓｔａｎｉｎ，Ｉ），梓醇（Ｃａｔａｌｐｏｌ，Ⅱ），丁香苷（Ｓｙｒｉｎｇｉｎ，Ⅲ），红景天苷（Ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ，Ⅳ），２，５－二氧－４－咪唑烷基甲酸［（２，５－ｄｉｏｘｏ－４－ｉｍｉｄａｚｏｌｉｄｉｎｙ１）－Ｃａｒｂａｍｉｃ　ａｃｉｌ，Ⅴ］β－ 谷甾醇（β－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ，Ⅵ），胡萝卜苷（ｄａｕ２ｃｏｓｔｅｒｏｆ，Ⅸ），甜菜碱（ｂｅｔａｉｎｅ，Ⅹ）。其中Ｖ为首次从自然界中分离得到的新天然产物，是无色透明块状结晶。Ｍｐ为２４４～２４６℃易溶于水，微溶于甲醇，与茚三酮试剂薄层反应显阳性。分子式Ｃ４Ｈ５Ｎ３Ｏ４，分子量为１５％，其中Ⅱ为首次从本属植物中分得。Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ为首次从该种植物中分得。孙萍等［６］通过微波提取［７］得到肉苁蓉多糖。他们之后又采用超声提取方法，得到的多糖速度加快，回收率又有提高。为目前提取肉苁蓉多糖较为理想的方法。３　肉苁蓉多糖对衰老模型的影响３．１　肉苁蓉多糖的抗氧化作用　①孙云等［７］在Ｄ－半乳糖造成小鼠实验性衰老模型中，观察到肉苁蓉多糖会使衰老小鼠的肺组织及红细胞中ＳＯＤ，ＧＳＨ－Ｐｘ活力不同程度的提高，肺及血浆中丙二醛含量有所降低。同时肺胶原蛋白含量减少，弹性蛋白含量增多。显示肉苁蓉多糖具有抗氧化性损伤和抗肺衰老的作用。②吴波等［８］观察肉苁蓉多糖对亚急性衰老小鼠血液和肝脏组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ），脂质过氧化物（ＬＰＯ）的含量的影响。结果显示灌服肉苁蓉多糖衰老小鼠血液和肝脏组织中ＳＯＤ明显高于模型组（Ｐ＜０．０５），ＬＰＯ明显低于模型组（Ｐ＜０．０５）的抗脂质过氧化功能，防止亚急性衰老小鼠的组织脂质氧化损伤。③王晓雯等［９］研究肉苁蓉总苷（ＧＣＳ）对小鼠组织的抗氧化作用。采用邻苯三酚自氧化、硫代巴比妥酸（ＴＢＡ）和荧光法，分别测定小鼠心、肝、脑、肾组织中ＳＯＤ 活性、ＭＤＡ 及脂褐质含量。结果显示ＧＣＳ组能显著提高脑、肾组织中ＳＯＤ活性，并显著降低各组织ＭＤＡ及脂褐质含量。表明能有效地提高机体组织抗氧化能力，防止组织脂质过氧化损伤。④孙云等［１０］研究肉苁蓉对臭氧造成的小鼠体力，御寒能力和对缺氧的耐受力降低，血浆及肝、脑脂质过氧化物含量增加，脑型单胺氧化酶活力提高，血清超氧化物歧化酶活力降低均有明显抑制作用。３．２　肉苁蓉多糖改善学习记忆能力　屠鹏飞等［１１］在观察肉苁蓉总苷（ＧＣＳ）对东莨菪碱所致的小鼠学习记忆获得障碍及亚硝酸钠所致小鼠学习记忆巩固障碍的影响中，使用跳台法观察小鼠的学习记忆能力。通过记录实验组与对照组小鼠的首次跳台潜伏期及５ｍｉｎ内的错误次数，结果表明肉苁蓉总苷（ＧＣＳ）对东莨菪碱所致的小鼠学习记忆获得障碍及亚硝酸钠所致小鼠学习记忆巩固障碍均有明显的改善作用。３．３　肉苁蓉多糖对毒性作用的研究　王德俊等［１２］探讨新疆肉苁蓉多糖对衰老小鼠大脑神经元形态学的影响过程中，应用组织化学方法和电子显微镜观察肉苁蓉多糖对臭氧造成衰老小鼠大脑皮质神经元的作用。观察到给药组对小鼠大脑皮质神经元内ＭＡＯ－Ｂ、ＬＤＨ、脂褐索明显下酶，尼氏小体、溶酶体增多，与对照组和模对小鼠大脑皮质神经元内ＭＡＯ－Ｂ、ＬＤＨ、脂褐索明显下酶，尼氏小体、溶酶体增多，与对照组和模型组比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。从细胞水平证明了肉苁蓉多糖对衰老小鼠具有抗神经元损伤和延缓衰老的作用。王新源等［１３］在探讨肉苁蓉总苷（ＧＣｓ）对Ｄ－半乳糖（Ｄ－ｇａｌ）脑老化模型小鼠的保护作用机制实验中，分别通过测定实验组和模型组小鼠５ｍｉｎ错误次数，潜伏期，脑组织ＳＯＤ的活性，ＭＤＡ，ＬＦ含量，并观察５０ｄ后海马ＣＡ１区组织结构形态的变化。结果表明实验组小鼠在５ｍｉｎ内的错误次数显著低于其他模型组；潜伏期长于模型组；ＳＯＤ活性比较中，实验组的远高于模型组；ＭＤＡ 含量比较中，实验组的ＭＤＡ 含量低于模型组；模型组的ＬＦ含量高于实验组。实验结果显示，肉苁蓉总苷（ＧＣＳ）能显著改善不同天数模型小鼠的学习、记忆功能，升高脑组织的ＳＯＤ活性，降低ＭＤＡ、ＬＦ含量，并对海马ＣＡ１区组织结构形态学改变有保护作用。提示ＧＣｓ可能是通过抗氧化的机制达到改善脑老化的作用。徐辉等［１４］在观察肉苁蓉多糖对Ｄ 一半乳糖致衰大鼠肝线粒体氧化损伤的保护作用过程中，采用Ｄ一半乳糖所致衰老模型大鼠，灌服肉苁蓉多糖６周，测定肝脏Ｃａ－ＡＴＰ酶活性、肝线粒体丙二醛（ＭＤＡ）含量、磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活性、膜流动性及呼吸链复合体Ⅰ＋Ⅲ、Ⅱ＋Ⅲ活性。结果得到肉苁蓉多糖显著提高衰老模型大鼠肝脏Ｃａ－ＡＴＰ酶活性、肝线粒体膜流动性及呼吸链复合体Ⅰ＋Ⅲ、Ⅱ＋Ⅲ活性，显著降低肝线粒体ＭＤＡ含量、ＰＬＡ２活性。可知肉苁蓉多糖能提高衰老模型大鼠肝线粒体抗氧化能力，改善线粒体能量代谢，具有抗衰老作用。４　总结综上所述，以往对于肉苁蓉抗衰老疗效的作用往往体现在肉苁蓉总苷（ＧＣＳ）上，此综述旨在突出肉苁蓉多糖也具有一定的抗衰老作用，进一步加深人们对肉苁蓉的认识，从而揭示其抗衰老机制，并可作为其合理运用的指导。５　参考文献　［１］　张雷红，堵年生．肉苁蓉化学成分的研究概况［Ｊ］．中成药，２００３，２５（４）：３２３－３２７　［２］　于芳．肉苁蓉的临床应用研究［Ｊ］．内蒙古医学杂志，２００３，３５（６）：５３５－５３６　［３］　曲淑惠，堵年生，武嘉林，等．新疆肉苁蓉的化学成分［Ｊ］．中草药，１９８８，１９（７）：２４　［４］　堵年生，王泓，易杨华．肉苁蓉中苯乙醇甙类成分的分离和鉴定［Ｊ］．天然产物研究与开发，１９９３，５（４）：５　［５］　徐朝晖，杨峻山，杨松松．肉苁蓉化学成分的研究［Ｊ］．中草药，１９９９，３０（４）：２４４　［６］　孙萍，李艳，王莉，等．肉苁蓉多糖的微波提取及含量测定［Ｊ］．数理医药学杂志，２００２，１５（２）：１７９－１８０　［７］　孙云，王德俊，祝瑾，等．肉苁蓉多糖对衰老小鼠肺蛋白含量与抗氧化功能关系的影响［Ｊ］．中国药理学通报，２００１，１７（１）：１０１－１０３　［８］　吴波，付玉梅．肉苁蓉多糖对衰老小鼠脂质过氧化的影响［Ｊ］．广州医学院学报，２００４，３２（４）：２７－２８　［９］　王晓雯，李琳琳，木胡牙提，等．肉苁蓉总甙对小鼠组织的抗氧化作用［Ｊ］．中国中药杂志，１９９８，２３（９）：５５４－５５５［１０］　孙云，林安平，张洪泉．新疆肉苁蓉抗自由基损伤的研究［Ｊ］．中国中药杂志，１９９４，１９（７）：４３３－４３５［１１］　屠鹏飞，皋聪，王传社，等．肉苁蓉总苷对小鼠学习记忆障碍的影响［Ｊ］．中药新药与临床药理，２００５，１６（３）：１６２－１６４［１２］　王德俊，孙红亚．肉苁蓉多糖对衰老小鼠大脑神经元影响的形态学研究［Ｊ］．实用医药杂志，２００１，１４（１）：１－３［１３］　王新源，王晓雯，王雪飞，等．肉苁蓉总苷对Ｄ－半乳糖脑老化模型小鼠的保护作用［Ｊ］．中国行为医学科学，２００４，１３（６）：６１３－６１５［１４］　徐辉，魏晓东，张鹏霞，等．肉苁蓉多糖对衰老大鼠肝线粒体保护作用的研究［Ｊ］．中国老年学杂志，２００８，２８（９）：８６６－８６７

摘 要：目的：建立肉苁蓉多糖的含量测定方法。方法：以精制肉苁蓉多糖测得肉苁蓉多糖对葡萄糖的换算因子，利用苯酚-硫酸法测定肉苁蓉多糖含量。结果：测得肉苁蓉生药中多糖含量12.0%，平均回收率为99.81%，RSD=2.67%（n =6）。结论：该方法简便，可行，可用于肉苁蓉多糖的含量测定。关键词：肉苁蓉多糖；苯酚- 硫酸法；含量测定肉苁蓉（Herba Cistanche） 是列当科（Orobanchaceae）肉苁蓉属（Cistanche）植物肉苁蓉干燥带鳞叶的肉质茎，又名地精、金笋、苁蓉、大芸。具有补肾壮阳、润肠通便的功效[1]。近年来，国内外对肉苁蓉多糖开展了大量的研究工作，表明其具有抗氧化、抗衰老、调节免疫功能及促进造血等药理活性。本文采用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量，为开发利用肉苁蓉多糖提供一定的依据。1 材料与实验仪器1.1 材料肉苁蓉药材来自内蒙古阿拉善，经张丽娟教授鉴定为荒漠肉苁蓉。葡萄糖对照品为分析纯。苯酚为重蒸酚，购自北京鼎国生物技术有限责任公司。其他试剂均为分析纯。1.2 实验仪器电子天平，梅特勒-托利多仪器有限公司（上海）；GL-21M高速冷冻离心机，湖南湘仪实验室仪器开发有限公司；DZKW-4电子恒温水浴锅，天津中兴伟业仪器有限公司；LGJ-10D型冷冻干燥机，北京四环科技仪器厂有限公司；旋转蒸发器RE-52AA，上海亚荣生化仪器厂；T6新世纪紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司；ZHWY-200H恒温培养振荡器，上海智城分析仪器制造有限公司。2 多糖的提取与精制[2]取经切片的肉苁蓉药材1000g，以95% 乙醇回流提取2次。残渣挥干溶剂后，再分别以12倍、10倍水各回流提取1次，每次2h，合并水提液并浓缩，离心去除不溶物。向肉苁蓉水提液中加入95% 乙醇，直至溶液中乙醇的体积分数为80%，置于4℃冰箱24h，离心并将沉淀以80%乙醇洗涤至上清液无色，真空干燥即得到肉苁蓉粗多糖。将肉苁蓉粗多糖配成5% 溶液，用sevag 试剂（氯仿∶正丁醇= 4 ：1）混合，充分振摇后静置离心，除去蛋白层，此过程反复多次，直至多糖溶液在280nm 处无紫外吸收。再将肉苁蓉粗多糖配成2% 溶液，加入双氧水使其浓度为7%，用NaOH 调pH=9，放入摇床55℃脱色5h。脱色液浓缩后用透析袋除盐，冷冻干燥得淡黄色固体。即得精制肉苁蓉多糖。3 多糖含量的测定3.1 标准曲线的绘制[3]3.1.1 标准系列溶液的配制精密称定105 ℃ 干燥至恒重的无水葡萄糖50mg，定容于50mL容量瓶中，摇匀，配制成浓度为1mg/mL的储备液。从储备液中分别精密移取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL 置于6 个50mL容量瓶中，定容，配制成0.01、0.02、0.03、0.04、0.05 和0.06mg/mL的葡萄糖标准系列溶液。3.1.2 苯酚溶液的配制称取苯酚20g，加入蒸馏水5g，即为80%的苯酚溶液，冰箱中密封避光长期保存。取密封避光保存的80%苯酚溶液，放置于室温，精密移取3mL置于 37mL蒸馏水中，即为6%的苯酚溶液，临用前现配。3.1.3 标准曲线的绘制精密移取葡萄糖标准系列溶液各1.0mL，空白取1.0mL水，分别置于试管中，各加6%的苯酚1.0mL后充分振摇，再迅速加入浓硫酸5.0mL，振摇，沸水浴加热5min，放置室温后于490nm处测定吸光度。以吸光度（A）对葡萄糖浓度（C）对进行线性回归，得回归方程A=11.30C-0.017。R2=0.998葡萄糖对照品在0.01~0.06mg/mL范围内的线性关系良好。3.2 换算因子的计算精密称定60℃干燥至恒重的肉苁蓉精制多糖25mg，定容于25mL容量瓶中，配制成浓度为1mg/mL的储备液。从中精密移取2mL置于100mL的容量瓶中，定容，配制成0.02mg/mL 的待测溶液。精密移取精制多糖的待测溶液1.0mL，按照测定标准曲线的方法测定其吸光度，根据标准曲线计算其中的多糖浓度。按f=C/C'D 计算换算因子，C为精制多糖浓度（mg/mL），C'为所测多糖浓度（mg/mL），D为样品溶液稀释的倍数，测得f=1.67（n =3）。3.3 粗多糖的含量测定精密称定60℃干燥至恒重的肉苁蓉粗多糖50.0mg，定容于50mL容量瓶中，配制成浓度为1.0mg/mL的储备液。从中取出1mL置于50mL 的容量瓶中，定容，配制成0.02mg/mL的待测溶液。精密移取粗多糖的待测溶液1.0mL，按照测定标准曲线的方法测定其吸光度，按照测定标准曲线的方法测定其吸光度，根据标准曲线计算其中的多糖浓度。多糖含量= f C'D/C，C'为所测多糖浓度（mg/mL），D为样品溶液稀释的倍数，C为样品的浓度，测得肉苁蓉粗多糖部位中多糖的质量分数为78%，相对标准偏差（RSD）为1.23%（n =6）。再乘以得率15.39%，得生药中平均多糖含量为12%。3.4 精密度试验精密移取肉苁蓉粗多糖待测液1.0mL，按测定标准曲线的方法测定其吸光度，平行测定6份，吸光度平均值为0.264，RSD为1.16%，表明此方法精密度良好。3.5 显色稳定性试验精密移取肉苁蓉粗多糖待测液1.0mL，按测定标准曲线的方法分别于0、1、2、3、4、5h测定其吸光度，吸光度平均值为0.264，RSD为0.43%，表明样品在5h内显色稳定。3.6 加样回收率试验精密移取已知含量的肉苁蓉粗多糖样品溶液0.5mL 6份，分别加已知含量的葡萄糖溶液0.5mL，摇匀，按照测定标准曲线的方法测定其吸光度，实验结果见表1。测定平均加样回收率为99.81%，RSD为2.67%（n =6），表明该方法的准确度良好。4 讨 论苯酚-硫酸法是测定多糖的常用方法，该方法的基本原理是：多糖在浓硫酸作用下水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，与苯酚结合生成有色化合物，在490nm处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系[4]。但是不同单糖与硫酸-苯酚试剂显色后的最大吸收波长在490nm附近有一定差异，对于杂多糖，单纯以某一含量较高的单糖作标准曲线来计算多糖含量仍与真实含量存在较大误差。本文参考了改进苯酚-硫酸法测定芦荟多糖含量的方法[5]。采用测定换算因子的校正方法，可有效消除用葡萄糖标准曲线计算多糖含量而带来的误差，测得值更接近真实值。本研究还考察了试验过程中水浴对试验结果的影响，结果表明加入浓硫酸后沸水浴加热5min，放置室温，可获得准确的吸光度和良好的重现性。多糖是荒漠肉苁蓉中重要组成部分，主要由葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、果糖等组成；具有多种生物活性如抗氧化、抗衰老、调节免疫功能及促进造血等，且毒副作用小，无论在临床应用还是保健类食品开发方面都有着广阔的前景。因此肉苁蓉中多糖含量测定结果的准确性，对开发和利用肉苁蓉多糖有一定的参考意义。本文采用苯酚-硫酸法操作简便、显色稳定、重现性好、灵敏度高，可作为肉苁蓉多糖及其他多糖的含量测定方法。◆参考文献[ 1 ] 李媛，宋媛媛，张洪泉.肉苁蓉的化学成分及药理作用研究进展[ J ] .中国野生植物资源，2010，29 ( 1 ) ：7-11.[ 2 ] 孙磊，乔善义，赵毅民.黑骨藤多糖含量测定方法研究[ J ] .中国中药杂志，2009，34 ( 10 ) ：1241-1244.[ 3 ] 程迪，于洁，董丽.河南产牡丹皮中多糖含量的测定[ J ] .安徽农业科学，2008，36 ( 2 ) ：518.[ 4 ] 张惟杰.复合多糖生化研究技术[ M ] . 上海：上海科学技术出版社，1987 ：6.[ 5 ] 钱和，张添，刘长虹.改进苯酚-硫酸法测定芦荟多糖含量[ J ] .江苏食品与发酵，2002，109 ( 2 ) ：3-6.

摘要　目的：研究肉苁蓉多糖（ｐｏｌｙｓａｃｃｈｒｉｄｅｓｏｆｃｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａＹ．Ｃ．Ｍａ‚ＰＣＤ）对亚急性衰老小鼠的抗脂质过氧化作用。方法：使用Ｄ-半乳糖造成小鼠亚急性衰老模型‚观察ＰＣＤ对亚急性衰老小鼠血液和肝脏组织中超氧化物岐酶（ＳＯＤ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）的含量的影响。结果：灌服肉苁蓉多糖衰老小鼠的血液和肝脏组织中ＳＯＤ明显高于模型组（Ｐ＜0．05）；ＬＰＯ的含量明显低于模型组（Ｐ＜0．05）。结论：肉苁蓉多糖具有明显的抗脂质过氧化功能‚防止亚急性衰老小鼠的组织脂质过氧化损伤。关键词　肉苁蓉多糖；衰老小鼠；脂质过氧化肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉（ｃｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａＹ．Ｃ．Ｍａ）以干燥带鳞片的肉质茎为正品入药‚是常用的补肾壮阳中药‚具有补肾益精、润燥的功能‚在历代抗老延年古方中出现的频率仅次于人参。现代医学研究表明‚肉苁蓉具有一定的抗衰老作用‚其总提取物在延长实验动物寿命、增强机体免疫功能和降低体内褐脂质堆积等方面都显示出一定的活性［1‚2］。为了深入探讨肉苁蓉抗衰老的活性成分及其作用机制‚我们制造了衰老小鼠模型并同时观察了肉苁蓉多糖对延缓小鼠衰老的作用。1　材料与方法1．1　药物及试剂肉苁蓉（ｃｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａＹ．Ｃ．Ｍａ）药材购自于广州市清平中药材专业市场‚并经广东省佛山医药集团黄敏高级工程师鉴定。肉苁蓉多糖的提取参照文献［3］‚用生理盐水配制成5ｍｇ／ｍＬ肉苁蓉多糖溶液。所用试剂均为国产分析纯‚试剂用去离子水配制。1．2　试验动物ＮＩＨ种健康小鼠‚雌雄各半‚体重18～22ｇ‚由广东省医学实验动物中心提供。1．3　亚急性衰老动物模型的制造［4］及给药将50只ＮＩＨ健康小鼠‚随机分为正常组（ＮＳ）、模型组（Ｍｏｄｅｌ‚阴性对照组）、给药组ＰＣＤ1、ＰＣＤ2‚维生素Ｅ组（ＶＥ‚阳性对照组）‚每组10只小鼠。然后将给药组ＰＣＤ1、ＰＣＤ2每天灌胃肉苁蓉多糖提取物‚剂量分别50ｍｇ／ｋｇ、100ｍｇ／ｋｇ‚维生素Ｅ组每天灌胃35ｍｇ／ｋｇ维生素Ｅ溶液‚其余二组每天灌胃10ｍＬ／ｋｇ的生理盐水；普通饲料常规喂养。同时取模型组、给药组ＰＣＤ1、ＰＣＤ2及维生素Ｅ四组小鼠‚各鼠每天颈背部皮下注射Ｄ-半乳糖50ｍｇ／ｋｇ‚连续近7周造成模型组出现亚急性衰老动物模型症状后‚即刻进行实验样本的采集。1．4　样本的采集与ＳＯＤ活性和ＬＰＯ含量的测定将小鼠采用断头取血法‚取0．5ｍＬ血液放入肝素抗凝的试管中加入生理盐水离心、沉淀；同时分离已取过血的小鼠肝组织‚用冷冻的生理盐水冲洗‚冰浴下制成匀浆后‚以3000ｒ／ｍｉｎ离心10ｍｉｎ‚取上清液备测‚采用邻苯三酚自氧化法［5］测定各样本中ＳＯＤ活性；运用ＴＢＡ比色法［5］‚在532ｎｍ波长下测量各样本中ＬＰＯ的含量‚实验结果用统计学处理。2　实验结果2．1　肉苁蓉多糖对亚急性衰老小鼠超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力的影响从表1结果可见：ＰＣＤ100ｍｇ／ｋｇ组与模型组相比均具有显著差异（Ｐ＜0．01）‚均能显著增加亚急性衰老小鼠血清及肝中ＳＯＤ的活性。2．2　肉苁蓉多糖对亚急性衰老小鼠过氧化脂质（ＬＰＯ）的作用结果表明‚肉苁蓉多糖组对亚急性衰老小鼠的血清、肝中的脂质过氧化物的含量明显低于模型组（Ｐ＜0．05）‚随着剂量的增加‚脂质过氧化物的含量也相应降低。3　讨　论随着全球老龄化日趋严重‚对衰老及抗衰老的方面的研究已成为各国科学家研究的热点。1956年‚ＤｅｎｈａｍＨａｍａｎ首次提出衰老自由基学说‚其主要论点是人类随年龄增大的退行性变化是由于自由基活性氧的损伤作用所致。脂质过氧化物是自由基作用于多饱和脂肪酸的产物‚含量与自由基的生成正相关‚由于机体有抗氧化作用的酶系及非酶系的保护作用‚使自由基不断产生又不断被清除。但随着年龄的增长‚体内抗氧化剂不断下降‚消除自由基的作用能力逐渐减弱‚脂质过氧化作用则增强‚脂质过氧化产物增多‚使体内主要脏器心、肝、脑、肾等受损‚因此测定脂质过氧化产物是评价抗衰老药物的重要指标之一。本实验研究结果显示肉苁蓉多糖（100ｍｇ／ｋｇ组）可显著提高亚急性衰老小鼠ＳＯＤ的活性；并明显降低亚急性衰老小鼠的血液和肝中的脂质过氧化物的含量。这说明肉苁蓉多糖具有调节衰老小鼠机体氧化／抗氧化平衡的功能‚消除Ｄ-半乳糖引起自由基产生的增多。提示肉苁蓉多糖具有抗氧化的作用及延缓衰老的作用。参考文献［1］薜德钧‚刘能俊‚胡福泉‚等．肉苁蓉提取物对人体抗衰作用研究［Ｊ］．中国现代应用药学．1997‚14（5）：16－18．［2］杨翠平‚苏薇薇．肉苁蓉研究进展［Ｊ］．中药材．2001‚24（12）：907－909．［3］曾群力‚霍亚楠‚毛俊浩等．肉苁蓉多糖的分离、纯化和鉴定［Ｊ］．中草药．2002‚33（12）：1057－1059．［4］龚国清．小鼠衰老模型研究［Ｊ］．中国药科大学学报‚1991‚22（2）：101．［5］徐叔云‚卞如濂‚陈修主编．药理学实验方法学［Ｍ ］．第三版．北京：人民卫生出版社‚2003．535－537‚430－434