俞宜年（福建省中医药研究院福建 福州 350003）［摘要］文章从药理与临床阐述了内苁蒙在治疗性功能障碍上的阴阳两搜之长，须有见解。［关键词］内苁蓉：性功能障码：中医药疗法［中图分类号｜R698［文献标识码］B［文章编号］1672-951X（2008）02-0046-02性功能障碍多与肾虚有关。肾虚有阴虚、阳虚之分，临床上滋阴则虑碍阳，壮阳则虑伤阴，颇费踌躇，笔者认为，欲觅滋阴壮阳两擅其长之良药，则非肉苁蓉莫属。1 益阴壮阳 两擅其长肉苁蓉具有补益肾阳的功效，无庸细说，但若仅仅视之为“补阳”，则又未免有失偏颇。本草学的经典著作《神农本草经》指出“（肉苁蓉）主五劳七伤.补中，除茎中寒热，养五脏，强阴益精气，多子。”强调肉苁蓉具有强阴益精气的功效，其说对后世中医学者有着相当大的影响，如李时珍《本草纲目》记载，本品“峻补精血”，主治“男子绝阳不兴，女子绝阴不产，润五脏，男子泄精，女子阴痛。”明·张景岳说本品“味重阴也······补阴阳。””清·张秉成说本品“壮阳滋肾”，黄宫绣说本品“滋肾润燥””。近人叶橘泉先生也称许本品“为强壮补精药，治遗精、阳痿、暖腰膝，催情欲。全国名老中医颜德馨教授认为本品“既能温通肾阳，又能滋养精血。”笔者认为，阴精是阳气机能活动的必要物质基础。阳气依靠阴精的资助得以生生不息，肉苁蓉既善于滋补阴精，则正如黄宫绣所说“阳随阴附而阳自见兴耳.”2 制法讲究 药性和缓再从肉苁蓉的性味分析，它性味甘咸温，甘温补阳气，咸属阴且其肉质柔润丰厚，自然有益于阴精。《本草正义》论说“苁蓉为极润之品，市肆皆以盐渍。乃能久藏，古书皆称其微温，而今则为咸味久渍，温性已化除净绝·....·”是从实际而言，自然令人信服。今人张炳鑫研究指出，肉苁蓉生者甘而微温，咸而质润：酒制者则变为甘辛咸温，增强了温补之性！”，其说可从.现代药理研究也表明，盐制者补肾功效比淡苁蓉为强。肉苁蓉古称从容，可见古人很早就认识到本品功力和缓的特点，确实，本品温而不热，补而不峻，暖而不燥，滑而不泄，补阳而不燥，滋阴而不腻。肉苁蓉这些性味特点，与其他药性温燥的助阳药如仙茅、阳起石等，有着鲜明的区别，亦惟其如此，若论壮阳，它不及鹿茸、仙茅；若论滋阴，它不及熟地、龟板.3 配伍得当 疗效益彰基于以上认识无论肾阳亏虚、肾阴亏虚引起的性功障，均可应用肉苁蓉，而关键在于配伍应用，以扬其长避其短，充分发挥其滋阴补阳的作用，如：同鳝鱼为末，黄精汁为丸服之，力增十倍····.合菟丝子，治尿血泄精，佐精羊肉，治精败。”（《得配本草》）属肾阴亏证，常与熟地、龟板等配伍应用；肾阳虚证。常与鹿茸、仙灵脾等配伍应用，选方方面，在辨证施治的基础上，针对阳痿、性欲低下、高潮缺乏，可参考《医心方》肉苁蓉丸、《金要方》苁蓉散、陈士铎扶命生火丹和壮火丹、名老中医陈树森经验方，还有些古方如全鹿丸、赞育丹、铁钩丸等（以上各方均含肉苁蓉）也很有临床参考价值；若针对早泄、不射精症。可参考《普济方》四精丸、张子琳先生内补鹿茸丸（鹿茸、肉苁蓉等）若是精子减少、精子活力低下症，可参考赵锡武先生经验方（天雄、肉苁蓉、淫羊藿、枸杞）等。刘沈秋先生生精五子汤（补骨脂、肉苁蓉、枸杞等）生精赞育丸（仙茅、仙灵脾、肉苁蓉、枸杞筹，妇女性高潮缺失，可参考罗元恺先生临床经验，选用龟鹿二仙胶加肉苁蓉，笔者临床观察，近年来由于心理因素导致的性功障有逐渐增多的趋势，思虑伤神者，可酌配柏子仁、酸枣仁等；恐惧伤肾者，可酌配熟地黄、制首乌等；怫郁伤肝者，可酌配白蒺藜、合欢皮等。4 食疗为辅 通补两用性功障患者尚可酌选古代食疗名方羊肾（或羊肉苁蓉粥、平补酒、保真酒作为辅助治疗。由于本品具有良好的润肠通便功效，对性功障兼有便秘者，我临床上通常作为首选药，临床常用量为15～20号大量可用至30多笔者经长期临床观察，未发现不良反应。

[ 摘要] 目的:vwin.com 临床进展情况。方法:复习有关文献进行总结。结果:肉苁蓉有良好的临床应用价值, 体现在强壮作用, 抗氧化抗衰老作用, 可调节免疫功能, 有雄性激素样作用, 以及通便作用。结论:肉苁蓉是阴阳两补之品, 可广泛防治多种疾病。[ 关键词] 肉苁蓉;化学成分;药理作用　肉苁蓉为我国名贵的补益壮阳中药, 本文通过对肉苁蓉化学成分及药理作用方面的研究作了归纳整理。1 　化学成分研究进展中药肉苁蓉为常用中药之一, 由于特殊功效及作用效果明显等特点, 被誉为补药圣品。《中国药典》2 0 0 0 版收载的品种为肉苁蓉[ 1 ], 但近几年由于内蒙古的肉苁蓉产量下降, 不能满足全国的供应, 有些地区已用德赢vwin登录 代替肉苁蓉入药[ 2] 。我国学者针对肉苁蓉和德赢vwin登录 这两种植物进行了深入研究。徐文豪[ 3] 等人对正品肉苁蓉的化学成分作了系统的研究, 从中分离了1 9 个化合物, 并鉴定了1 6个, 其中肉苁蓉苷B.C.H 为本植物首次报道。徐朝晖[ 4 ] 等人从内蒙古阿拉善盟产肉苁蓉的乙醇提取物中分离得到苁蓉素, 梓醇, 丁香苷苷, 红景天苷, 2 、5 —二氧—4 —咪唑烷基—氨基甲酸, 甘露醇, β —谷甾醇、胡萝卜苷和甜菜碱1 0 个化合物。薛德钧[ 5] 从德赢vwin登录 乙醇提取物的正丁醇萃取部分得4 个化合物, 经鉴定为β —谷甾醇、D —甘露醇、胡萝卜苷, 琥珀酸。在其水母液中得到D —葡萄糖和D —果糖, 以上化合物均为该种植物中首次报道。宋志宏, 屠鹏飞[ 1] 等人对德赢vwin登录 的化学成分作了研究, 从中分离出4 个环烯醚苷,1 个木脂素苷和1 个单萜类化合物, 其中京尼平苷酸, 玉叶金花苷酸和丁香树脂葡萄糖苷为首次从本植物中分离得到, 8 —羟基香叶醇为首次从本属植物中分离得到。2 　药理学研究进展2.1 　强壮作用肉苁蓉类助阳药对动羟基脲所致“ 阳虚” 动物DNA 合成率有增加作用, 对动物阳虚症有明显强壮作用和治疗作用[ 6 ] 。2.2 　抗氧化及抗衰老作用孙云[ 7]等人利用肉苁蓉治疗臭氧损伤实验性肺衰老模型小鼠, 分别以每日5 0 、1 0 0mg kg 灌胃, 给药6 周。结果表明, 给药组小鼠耐受缺氧的时间延长, 对衰老小鼠血清和肺SOD 活力均有升高, 使MDA 含量下降, 可减轻臭氧所致的肺氧化性损伤而造成的结构和功能的改变, 延缓肺衰老。薛德俊[ 8 ]等人将肉苁蓉提取物制成抗衰老制剂, 对人体进行了消除血液中过氧化脂的研究。结果表明, 抗衰老冲剂能显著改善机体的衰老症状, 恢复中老年人精力、体力和活力, 具有较好的延缓衰老作用。2.3 　调节免疫作用肉苁蓉可明显增强生物体特异性和非特异性免疫功能[ 6 ～ 9 ] 。2.4 　雄性激素样作用肉苁蓉是历代补肾壮阳处方中使用频率最高的药物, 是著名的补益药物之一, 仅次于人参。张德俊[ 1 0] 等人用肉苁蓉水煎液对雄性小鼠灌胃2 ～ 3周, 发现其确能促进睾丸生精功能, 改善附睾的微环境。宋桂珍, 何伟[ 1 1 , 1 2 ] 等人测定肉苁蓉中的麦角甾苷和甜菜碱具有雄性激素作用。2.5 　通便作用肉苁蓉类药物的水煎剂具有明显的通便作用,改善肠蠕动, 抑制大肠的水分吸收, 缩短排便时间。对老年习惯性便秘, 体虚便秘和产妇产后便秘疗效显著。3 　临床应用中药肉苁蓉味甘咸, 性温质润多液, 归肾、大肠经。益精血, 润肠通便之功效, 为阴阳两补之品。常用于治疗男子阳痿, 女子不孕, 腰膝冷痛, 便秘等症[ 1 3 , 1 ] 。临床上应用兴阳火治疗肾虚性阳痿[ 1 4 ], 应用五子衍宗丸[ 1 5] 治疗男子不育症, 调补肝肾治疗不孕症, 应用当归补血汤加肉苁蓉, 当归首乌汤, 益气润肠液等治疗习惯性便秘。此外, 还应用含肉苁蓉的药物治疗老年多尿症, 糖尿病、耳聋、主动脉赫依症及延缓衰老等。[ 参　考　文　献][ 1] 　宋志宏, 莫少红.德赢vwin登录 化学成分的研究[ J] .中国中药杂志, 2 0 0 0 , 2 5 ( 1 2 ) :7 2 8.[ 2] 　何松春, 施大文.中药肉苁蓉的资源及原植物鉴别[ J] .上海医科大学学报, 1 9 9 5 , 2 2 ( 3 ) :1 8 6.[ 3] 　徐文豪, 邱声祥.肉苁蓉化学成分的研究[ J] .中草药, 1 9 9 4 ,2 5 ( 1 0 ) :5 0 9.[ 4] 　徐朝晖, 杨峻山.肉苁蓉化学成分的研究[ J] .中草药, 1 9 9 9 ,3 0 ( 4 ) :2 4 4.[ 5 ] 　薛德钧.德赢vwin登录 化学成分的研究[ J] .中国中药杂志,1 9 9 7 , 2 2 ( 3 ) :1 7 0.[ 6] 　黄琳芸.肉苁蓉研究现状[ J] .新疆中医药, 1 9 9 6 , ( 4 ) :5 4.[ 7] 　孙云, 王德俊.实验性衰老小鼠肺功能和超微结构变化及肉苁蓉多糖的影响[ J] .中国药理学通报, 2 0 0 0 , 1 8 ( 1 ) :8 4.[ 8] 　薛德钧, 刘能俊.肉苁蓉提取物对人体抗衰老作用研究[ J] .中国现代应用药学, 1 9 9 7 , 1 4 ( 5 ) :1 6.[ 9] 　张英.肉苁蓉的药理与化学成分研究概况[ J] .新医学学院学报, 1 9 9 7 , 1 4 ( 4 ) :4 1 3.[ 1 0] 　王德俊, 盛树青.肉苁蓉对小鼠睾丸和附睾形态学及组织化学的影响[ J] .解剖学研究, 2 0 0 0 , 2 2 ( 2 ) :1 0 1.[ 11 ] 　何伟, 宋桂珍.肉苁蓉中雄性激素样作用活性成分的初探[ J] .中国中药杂志, 1 9 9 6 , 2 1 ( 9 ) :5 6 4.[ 1 2] 　屠鹏飞, 何燕萍.肉苁蓉资源调查及资源保护[ J] .中草药,1 9 9 4 , 2 5 ( 4 ) :2 0 5.[ 1 3] 　彭家柱.浅淡叶士天用肉苁蓉的经验[ J] .四川中医, 1 9 9 8 ,1 6 ( 6 ) :9.[ 1 4] 　王和天, 刘殿池.兴阳丸治疗肾虚湿阻型阳痿的临床与实验研究[ J] .北京中医药大学学报, 1 9 9 9 , 2 2 ( 5 ) :3 2.[ 1 5] 　李泰荣.五子衍宗丸治疗男子不育症[ J] .新中医, 1 9 9 5 , 增刊:7 5.

【摘 要】 近年来肉苁蓉的药理作用研究有较大进展，该文对其化学成分和部分药理作用进行了综述，为相关研究及临床应用提供参考。【关键词】 肉苁蓉；化学成分；药理作用肉苁蓉为列当科植物苁蓉或德赢vwin登录 的干燥带鳞叶的肉质茎，主产于我国内蒙古、新疆、甘肃和宁夏等地，有补肾阳、益精血、润肠通便的功效，常用于治疗阳痿、不孕、腰膝酸软、筋骨无力及肠燥便秘等。近年来肉苁蓉的研究、开发及利用成为中医药领域热点之一，肉苁蓉主产于内蒙古、甘肃、新疆、青海等地[1]，分为：肉苁蓉Cistanche deserticola Y. C. Ma、盐生肉苁蓉Cistanche salsa（C. A. Mey）G. Beck、德赢vwin登录 Cistanche tubulosa（S ch renk）R. Wight、沙苁蓉Cistanchesinensis G. Beck、迷肉苁Cistanche am 2bigua（B ge）B Beck和白花盐苁蓉Cistanche sa lsavar. albifora P. F. Tu et Z. C.Lou[2]。《中国药典》（2005 年版）收录荒漠肉苁蓉Cistanchedeserti2colo Y. C. Ma 和管花肉苁Cistanchetubulosa（S chrenk）R. Wight为正品药材[3]。国内常使用的肉苁蓉除了肉苁蓉和盐生肉苁蓉外，还有德赢vwin登录 及白花盐苁蓉。本文就近年来关于肉苁蓉的化学成分和药理作用研究作一综述，为相关研究和临床应用做一参考。1 化学成分近年来，国内外对肉苁蓉的化学成分进行了许多分析研究，已分离出多种类型的物质，如苯乙醇苷类、环烯醚萜类、挥发性成分、木脂素类、多糖、生物碱等。1.1 苯乙醇苷类苯乙醇总苷是肉苁蓉中的主要活性成分，具有壮阳、抗氧化、抗衰老、提高免疫力、增强记忆力等多种功能。日本小林弘美（Hiromi Kobayashi）等[4]对我国内蒙产的C. salsa 进行了系统分析研究，先后从中离得到10 种苯乙醇苷类成分：肉苁蓉苷A（Cistanoside A）、肉苁蓉苷B（Cistanoside B）、松果菊苷（Echinaco2side）、肉苁蓉苷C（Cistanoside C）、肉苁蓉苷D（Cistanoside D）、类叶升麻苷（Acteoside）、2’-乙酰类叶升麻苷（2’- Acetyacteoside）、肉苁蓉苷E（Cistanoside E）、肉苁蓉苷F（Cistanoside F）、Osman2thusjde B。曹振杰等[5]采用LC2MS 法对肉苁蓉中的几种苯乙醇苷类化合物（麦角甾苷、肉苁蓉苷A、2’-乙酰麦角甾苷）进行定性分析和含量测定，研究了不同采收季节肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物的含量差别。陈敏等[6]采用高效液相色谱法，建立了测定德赢vwin登录 野生种和栽培种以及人工种植不同寄主、不同大小药材的有效成分松果菊苷和毛蕊花糖苷含量的方法，为评价德赢vwin登录 的药材质量提供了一定的依据。1.2 环烯醚萜类环烯醚萜苷是肉苁蓉属物主要化学成分类别之一，此类化合物广泛存在于植物界中，有多种生物活性，在植物分类学上具有重要作用。小林弘美[7]对我国内蒙古产的肉苁蓉进行了系统研究，从中分得8-表马钱子酸、8-表去氧马钱子酸、京尼平酸、苁蓉素等化合物。罗上夙等[8]从荒漠肉苁蓉中分离出了8-表钱子酸葡萄糖苷。徐文豪等[9]从荒漠肉苁蓉中分离得到8-表钱子苷酸。1.3 挥发性成分马熙中等[10]利用超临界流体萃取技术测定了肉苁蓉中挥发性组分中的30 多个化合物，并将其分为3 类：正构烷烃C16-C28、酯类化合物和含氧含氮化合物。其中酯类化合物中3 个主要成分是邻苯二甲酸二丁酯、癸二酸二丁酯和邻苯二酸二异辛酯；含氧含氮化合物以丁子香酚为主，其次为香草醛和异丁子香酚等。1.4 其他类肉苁蓉中还含有木脂素类、生物碱、单萜苷、多糖，此外，还有氨基酸、无机微量元素。齐誉等[11]报道了应用AAS300型火焰原子吸收分光光度计研究测定肉苁蓉中微量元素锰及铜含量的方法。龚立冬[12-13]等建立了毛细管电泳电化学检测肉苁谱—蒸发光散射检测法，测定了中药材肉苁蓉中甜菜碱含量。高建萍等[14]建立了中药肉苁蓉中各种氨基酸含量的测定方法。李斌[15]等采用分光光度法，建立了测定盐生肉苁蓉中甘露醇含量的方法。2 药理作用肉苁蓉最主要的作用是补肾壮阳和改善学习记忆即通常所说的治疗老年痴呆，此外还有抗疲劳、抗氧化、保肝等十几种作用。国内外对这些方面的研究已经有了很大的进展。2.1 补肾壮阳作用肉从蓉为一传统中药，具补肾益精壮阳功效，历代药书均有记载。《神农本草经》列为上品，《药性论》称之益髓，悦颜色，延年，壮阳，大补益。《本草经疏》称之为滋肾补精血之要药⋯ ⋯久服则肥健而轻身，益肾肝补精血之效也。肉苁蓉对人体神经内分泌系统的调节和控制中心-下丘脑的老化有调整作用，改善阳虚动物的营养、体重、耐力和抗寒力等。对阳虚患者具有明显的强壮作用和治疗作用王德俊[16]等用肉苁蓉水煎液灌胃雄性小鼠2～3 周后，小鼠精子数量、活率明显增多，精子运行速度增快，而精子畸形率有所下降；组织形态学观察显示，用药组睾丸生精功能增强，附睾管的微环境得到改善，果糖含量增加；组织化学研究表明，琥珀酸脱氢酶（SDH）及非特异性脂酶（NSE）反应呈强阳性。证明肉苁蓉确能促进睾丸生精功能，改善附睾的微环境，为肉苁蓉补肾壮阳作用的机理提供了可靠的形态学依据。现代研究表明肉苁蓉具有雄性激素作用和促性腺激素样作用，能发挥调节内分泌腺轴的功能，促进精子发生，使睾丸生精功能增强[17]。2.2 改善记忆能力作用罗兰等[18]观察了肉苁蓉总苷对AlCl3 致小鼠拟Alzheimer病（AD）模型小鼠学习记忆障碍的保护作用，结果肉苁蓉总苷能改善三氯化铝所致学习记忆障碍，增加脑组织中SOD 活性，降低MDA 含量，并使脑重系数增加。肉苁蓉总苷（GCs）从肉苁蓉中提取，其主要成分为苯乙醇总苷。在动物实验中肉苁蓉总苷对多种Alzheimer 病鼠模型有提高学习能力的功效。如刘凤霞等在肉苁蓉总苷对喹啉酸所致AD小鼠学习记忆的影响实验中发现GCs可提高喹啉酸所致AD小鼠学习记忆水平，对喹啉酸造成的脑损伤有保护作用；其机制可能与其增强自由基清除酶活性，减轻脂质过氧化反应，降低脑组织钙含量，抑制喹啉酸诱导的脑细胞凋亡有关[19]。罗兰等在对AlCl3所致AD鼠模型中发现肉苁蓉总苷能提高其学习能力，作用机制可能与其增加自由基清除酶的活性，防止脂质过氧化，防止脑萎缩，保护神经功能有关[20]。王虎等[21]观察肉苁蓉提取物对帕金森病的神经保护作用及其作用机制，发现肉苁蓉提取物明显提高了MPP＋作用48h 后的SH-SY5Y 细胞的生存率，降低了GADD153mRNA与蛋白表达，对MPP＋介导的细胞损伤有保护作用，其作用机制可能与GADD153 的mRNA 和蛋白水平的表达有关。采用血清药理学的方法，用肉苁蓉含药血清孵育多巴胺能神经细胞，经MPP＋处理后，用TUNEL 染色、流式细胞仪检测，结果表明肉苁蓉含药血清对神经毒素MPP＋诱发的多巴胺能神经细胞凋亡具有一定的保护作用[22]。刘凤霞等还在对β2淀粉样肽所致AD小鼠模型中发现GCs能提高其学习记忆能力，GCs能降低AD小鼠脑组织丙二醛含量，提高超氧化物歧化酶活性，说明GCs可增强自由基清除酶活性，有神经保护功能[23]。王新源等[24]观察D2 半乳糖（D2ga1）脑老化模型小鼠海马超微结构，结果肉苁蓉总苷（GCs）大剂量组（125mg/kg）与正常对照组的形态结构较接近，小鼠海马CA1区神经细胞核圆，细胞器增多，染色质分布均匀。超微结构的研究表明，肉苁蓉能够延缓脑组织衰老退化。薛德钧等[25]将肉苁蓉提取物制成抗衰老制剂，对人体进行了清除血液中过氧化脂质的研究，结果表明抗衰老制剂能降低人体血液中的LPO值（P<0.01），同时能够显著改善机体的衰老症状，恢复中老年人的精力、体力和活力，延缓衰老。2.3 利尿通便作用沈连忠等[26]考察了肉苁蓉对大鼠排尿进程的影响，发现它可明显增加大鼠的排出尿量，减少残余尿量，而对总尿量和排尿时膀胱压力阀值无明显影响，表明肉苁蓉有益于膀胱尿液的排空，改善排尿功能。另外，屠鹏飞等[27]研究发现荒漠肉苁蓉、盐生肉苁蓉和德赢vwin登录 均可明显地促进小鼠大肠蠕动、抑制大肠水分吸收、缩短排便时间，三者作用强度相似。张百舜等[28]为寻找肉苁蓉的通便有效成分，采用不同溶剂提取、分离及重结晶等方法将肉苁蓉分为半乳糖醇组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组和剩余水溶物组4 个组份，进行了对小鼠通便时间的影响实验，结果表明半乳糖醇具有显著的缩短通便时间作用，而其他三个组份作用不显著，这说明半乳糖醇为肉苁蓉的主要通便有效成分。2.4 抗疲劳作用肉苁蓉可降低LDH5 活性，上调NOS3的表达，促进肝糖原合成，具有保护肝脏和促进体能恢复的作用。龚梦鹃等[29]观察肉苁蓉对阳虚小鼠体重、自主活动、游泳时间、运动后血乳酸（LAC）和尿素氮（BUN）的影响，发现肉苁蓉水煎液能明显增加阳虚小鼠体重、自主活动次数，还能显著延长游泳时间、降低运动后的LAC、BUN，具有抗疲劳作用。2.5 抗辐射作用观察肉苁蓉总苷（General Cistanosides，GCs）对小鼠经Coγ射线照射后胸腺、脾、睾丸超微结构变化的影响，结果表明辐射损伤后小鼠胸腺、脾、睾丸生物膜及细胞器受到不同程度的损伤，GCs可促进其恢复；可推断出GSs对受照小鼠敏感器官超微结构有保护作用，且其机制可能与抗氧化、促进DNA、RNA 合成有关[30]。邹利娅•伊明等[31]发现GCs 能增强受照射小鼠迟发型超敏反应，增加胸腺指数，增强T 淋巴细胞增殖反应和IL-2 的活性，这表明GCs对辐射损伤小鼠的T 淋巴细胞功能具有较强的保护作用。2.6 其他作用毛新民等[32]研究发现盐生肉苁蓉苯乙醇总苷能提高小鼠缺血再灌注心肌SOD 和硒谷胱甘肽过氧化酶的活性，降低LPO含量，减轻心肌超微粒结构损伤；明显改善心肌缺血大鼠的心电图，减小心肌梗死面积，提高心肌组织中磷酸肌酸激酶活力，具有保护缺血心肌作用。肖莉等[33]发现肉苁蓉提取物可以增强ATP 酶活性，维持细胞线粒体膜电位，对败血症休克时胸腺细胞，肝细胞有保护作用。陈志伟等[34]观察了肉苁蓉多糖对骨髓抑制贫血小鼠造血功能的影响，发现肉苁蓉多糖可能通过促使骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞细胞周期的转化，促进骨髓造血功能的恢复。3 结 论以上药理研究的成果证实，肉苁蓉除具有补肾阳、益精血、润肠通便等传统功效外，还具有抗氧化、抗辐射、改善记忆等作用，对心、脑、肺、肝、肾及免疫系统等也有保护作用。由此可预测，肉苁蓉有良好的临床应用前景，同时尚需加强其有效成分及其制剂的研究，以更好地维护人类健康。对肉苁蓉的药理作用和化学成分的研究近年来取得了很大进展，成果颇为显著，在此基础上，我们应对其药理作用的有效成分及其作用机理进行深入研究，充分了解各成分的具体功效，在保证药效的前提下，改进中药传统制剂，提高质量控制水平，发展疗效确切、使用安全、质量可控、性价比优良的中药新产品。近年来我国西北各省区先后开展了肉苁蓉的人工栽培工作，经过近20 年的发展，在繁育技术、规模化栽培等方面也取得一定进展。但目前对栽培品的基础研究相对滞后，有关其化学成分、药理活性及野生品之间的内在质量对比等方面的报道较少。因此对肉苁蓉属植物进行全面的考察，选择有效成分高、药理活性强的品种进行人工引种，培育更优良的品种也是今后研究的主要方向。参考文献：[1]雷载权.中药学[M].上海:上海科学技术出版社,2001:292[2]罗廷彬,陈亚宁,任崴,等.肉苁蓉研究进展[J].干旱区研究,2002,19(4):56-58[3]中国药典委员会.中国药典[M].北京:化学工业出版社,2005:90[4]Hiromi Kobayashi, Hiroko Karasawa, ToshioMiyase, etal. 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摘要: 目的对肉苁蓉的食用安全性进行毒理学研究。方法利用急性毒性试验、骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames 试验和90 d 喂养试验进行毒理学研究与评价。结果急性毒性试验结果表明肉苁蓉对雌、雄小鼠急性经口最大耐受量( MTD) 均＞ 20 g /kg 体重，其剂量大于人体推荐量的600 倍，说明受试物属于无毒级物质; 骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames 试验3 项遗传毒性试验的结果皆为阴性，未显示出致突变性; 90 d 喂养试验表明，肉苁蓉2 g /kg、4 g /kg、8 g /kg 体重3 个剂量组动物的身体、脏器的生长发育及血液生化指标等均无明显不良影响。结论在本研究条件下，未见肉苁蓉有明显的毒副作用。关键词:肉苁蓉;毒性研究;食品安全肉苁蓉( Cistanche Deserticola) 是列当科肉苁蓉属植物肉苁蓉干燥带鳞叶的肉质茎，又名精笋、地精，始载于《神农本草经》［1］，主要产于内蒙古、甘肃、新疆、青海等地［2］。近年来国内外学者对肉苁蓉的化学成分、药理作用进行了广泛研究，结果表明肉苁蓉在增强机体免疫力、提高机体耐力、抗氧化以及调节神经系统和内分泌系统作用等方面都表达出了很好的活性［3 ，4］。当前肉苁蓉在医药和保健食品等领域的应用已越来越广泛，但长期食用是否会对机体产生一些不良影响，国内还鲜有报道。本文对其急性毒性试验、3 项遗传毒性试验( 骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames 试验) 和90 d 喂养试验等进行了研究，以期为肉苁蓉其他临床试验的安全剂量设计和主要观察指标、靶器官提供参考，并为其临床安全应用提供毒理学依据。1 材料与方法1． 1 受试物肉苁蓉粉，成人日推荐量为2 g。1． 2 动物选用上海斯莱克实验动物有限责任公司提供的清洁级健康ICＲ 小鼠及SD 大鼠。许可证号:SCXK( 沪) 2012 － 0002。1． 3 菌株与试剂菌株: 组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100 和TA102 菌株4 株; 试剂: 溶血素( 2448612) 、谷丙转氨酶试剂盒( 利德曼210232I) 、谷草转氨酶试剂盒( 利德曼211093J) 、甘油三酯试剂盒( 利德曼211142J) 、葡萄糖试剂盒( 利德曼301101K) 、总胆固醇试剂盒( 利德曼211061J) 等。1． 4 主要仪器日立7060C 全自动生化分析仪、奥林巴斯中国OLYMPUS BX － 51 显微镜、美国雅培CELL － DUN3700 雅培血球分析仪、上海诺顶仪器设备有限公司PSH － 200 生化培养箱等。1． 5 试验方法1． 5． 1 急性毒性试验选取18 g ～22 g 小鼠20 只，雌雄各半。试验前禁食16 h，不禁水。设剂量为20 g /kg体重， 24 h 内按0． 02 ml /g 体重容量经口给予3 次，后连续观察14 d，并记录动物中毒的表现和死亡情况。1． 5． 2 Ames 试验采用鉴定合格的组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100 和TA102 菌株，以多氯联苯诱导的大鼠肝匀浆作为体外代谢活化系统，设5000 μg /皿、1000 μg /皿、200 μg /皿、40 μg /皿、8 μg /皿5 个浓度，同时设自发回变组、溶剂对照组和阳性对照组，每剂量3 个平皿。在顶层琼脂中加入0． 1 ml测试菌株增菌液、0． 1 ml 受试物溶液和0． 5 mlS － 9 混合液( 当需要代谢活化时) ，混匀后倒入底层培养基平板上，37 ℃ 培养48 h，计数每皿回变菌落数。1． 5． 3 骨髓细胞微核试验选取体重25 g ～ 30 g 小鼠50 只，雌雄各半，按体重随机分成5 组: 2． 5 g /kg、5． 0 g /kg、10． 0 g /kg 体重剂量组、蒸馏水对照组和40 mg /kg体重环磷酰胺阳性对照组。按0． 03 ml /g 体重容量间隔24 h 经口给予2 次，6h 后取胸骨骨髓涂片、染色，每只动物计数1000 个嗜多染红细胞、200 个PCE，计算微核发生率、PCE /NCE 值。1． 5． 4 小鼠精子畸形试验选用体重25 g ～ 30 g 雄性小鼠25 只，按体重随机分成5 组: 2． 5 g /kg、5． 0 g /kg、10． 0 g /kg 体重剂量组、蒸馏水对照组和40 mg /kg体重环磷酰胺阳性对照组。按0． 03 ml /g 体重容量经口给药，连续5 d。末次给药后30 d 取小鼠双侧附睾尾涂片、染色，每只动物观察1000 个完整精子，记录各类畸形精子数，计算精子畸形发生率。1． 5． 5 90 d 喂养试验各性别大鼠按体重随机分成4 组，每组10 只。试验设2 g /kg、4 g /kg、8 g /kg 体重3 个剂量组及基础饲料空白对照组。饲料摄入量以动物体重8%折算，分别将受试物均匀拌入饲料中经辐照灭菌供试，每月配制。试验期间动物单笼喂养，自由进食饮水，每天观察动物形态，记录饲料洒漏量，每周称1 次体重和2 次食物摄入量。第45 d 采血检测血常规及生化指标; 第90 d 采血检测血常规及生化指标，取肝、肾、脾、睾丸称重，并对肝、肾、脾、胃肠、睾丸、卵巢作病理学检查。1． 6 数据统计χ2 检验和方差分析采用SPSS 11． 0统计软件进行分析。2 结果2． 1 急性毒性试验试验期间动物未见异常，MTD＞ 20 g /kg 体重( 相当于成人日推荐量的600 倍) ，属于无毒级。2． 2 Ames 试验各剂量组的回变菌落数均未超过溶剂对照组回变菌落数的2 倍，Ames 试验结果为阴性。2． 3 骨髓细胞微核试验各剂量组PCE /NCE 未少于溶剂对照组的20%，提示骨髓红细胞系统的增殖无明显抑制，对嗜多染红细胞微核的观察无明显影响。阳性对照组微核率( 雄性2． 32%，雌性2． 26%) 明显高于溶剂对照组( 雄性0． 08%，雌性0． 08%)( P ＜ 0． 01) ，而各剂量组( 雄性均为0． 1%，雌性0． 04% ～ 0． 08%) 与溶剂对照组比较差异均无统计学意义( P ＞ 0． 05) ，提示受试物未表现出使微核率上升的致突变效应。2． 4 小鼠精子畸形试验阳性对照组畸形率( 9． 30%) 明显高于溶剂对照组( 1． 78%) ( P ＜ 0． 01) ，而各剂量组畸形率( 1． 60% ～ 1． 84%) 与溶剂对照组比较未产生明显改变，提示试验结果为阴性。2． 5 90 d 喂养试验试验期间，各组动物生长活动正常，试验结束时各剂量组动物体重、体重增重、进食量、食物利用率及脏体比与对照组比较，差异均无统计学意义( P ＞ 0． 05) 。在喂养45 d 和90 d 时，个别动物血常规、生化指标与对照组比较，差异有统计学意义( P ＜ 0． 05) ，但均在正常范围内，其他各剂量组大鼠的血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数、白细胞分类、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆固醇、甘油三酯、尿素、肌酐、血糖、总蛋白、白蛋白与对照组比较，差异均无统计学意义( P ＞ 0． 05) ( 表1) 。动物解剖时大体检查未见异常，病理学改变仅在个别个体中发生，各组标本病理变化无明显差异，因此认为被检脏器未见与受试物有关的病理学改变。3 讨论近年来因中药材应用领域的不断扩大，所引起的不良反应事件发生率也不断提高，而且个别药材的成分复杂，可能含有的毒性因子不明、毒性机制不清，致使开发应用受阻。阐明中药材作用机制，并采取有效措施预防不良反应事件的发生是急需解决的问题。肉苁蓉作为一种名贵的中药材，长期以来大家对其药效作用等研究取得很大进展，现代药理学研究表明，肉苁蓉除在作为传统的补肾壮阳中药外，更兼具抗衰老、增强记忆、提高免疫力等多种功能［5］。为了深入vwin.com 毒性和食用安全性的状况，本文从急性、遗传性和亚慢性等方面对其毒理学的表现进行了一系列研究。急性毒性试验是用于评价材料短期经口服用后对机体的毒副作用; Ames 试验主要是针对生物的基因突变进行评估; 骨髓细胞微核试验主要是对染色体结构完整性的变化进行评估; 小鼠精子畸形试验所反映的遗传学终点主要是对生殖细胞的遗传毒性进行评估; 90 d 喂养试验是通过较长时间喂受试材料，来了解其可能对动物引起有害效应的剂量、毒作用性质和靶器官，估计亚慢性摄入的危害性。本研究结果表明在肉苁蓉急性毒性试验过程中，未见动物出现明显的运动机能减退、呼吸困难、腹泻、眼睑下垂、震颤、虚脱及死亡等现象，对雌雄小鼠的MTD 均＞ 20 g /kg 体重，属于无毒级; 3 项遗传毒性试验结果皆为阴性，未表现出致突变性; 90 d 喂养试验中，动物生长活动及饮食正常，个别动物的血常规、生化指标与对照组的差异有统计学意义，但这些变化未见明显的时间相关性和剂量相关性，是属于正常范围内的波动性变化，其余血液学、生化检查及组织病理学检查结果与对照组的相比未见特征性改变。参考文献［1］ 国家药典委员会． 中华人民共和国药典( 一部) ［M］． 北京: 化学工业出版社，2005: 90．［2］ 雷载权． 中药学［M］． 上海: 上海科学技术出版社，2001: 292．［3］ 孙朝晖． 中药肉苁蓉的药理活性研究进展［J］． 赤峰学院学报，2010，26( 2) : 70 － 71．［4］ 程齐来，陈君． 肉苁蓉属植物研究概况［J］． 中药材，2004，27( 10) : 789 － 791．［5］ 吴晓春，史颖． 肉苁蓉的研究与临床应用［J］． 甘肃中医，2007，20( 12) : 49 － 51．

肉苁蓉又称肉松蓉、大芸, 为列当科一年寄生草本植物肉苁蓉的肉质茎, 素有“沙漠人参”的美誉。主产于内蒙古西部、甘肃等地。肉从蓉具有极高的药用价值, 关于它的药效, 民肉间至今还流传着一个美丽警的传说。相传, 金明昌元年, 成吉思汗的结拜兄弟扎木合因嫉妒其强大, 联合其他部落进攻成吉思汗。双方大战, 成吉思汗失利, 被围困于一片长满梭梭林的山上, 饥渴难忍, 筋疲力尽。扎木合当众残忍地将俘虏分口大锅煮杀, 激怒了天神, 天神派出神马, 跃到成吉思汗面前, 仰天长啸,将精血射至梭梭树根上, 然后用蹄子刨出像神马生殖器一样的植物根块。成吉思汗与将士们吃了根块, 神力涌现, 冲下沙山,一举击溃了扎木合部落, 这为统一蒙古奠定了基础。从此, 成吉思汗开创了一个征服欧洲大陆的新时代。从肉苁蓉这一美丽的传说, 对其功效可见一斑。肉苁蓉的功效与应用肉苁蓉性温, 味甘酸咸, 质润多液。入肾、大肠经。肉苁蓉具有补肾壮阳的功效。用于肾阳不足引起的阳凄、遗尿、腰膝冷痛等症, 常配伍兔丝子、熟地黄、五味子等同用。肉苁蓉质润滑肠, 故能通便。用于老肠的功效外, 《本草汇言》还记载“肉苁蓉养命门, 滋肾气,补精血之药也。男子丹元虚冷而阳道久沉, 妇人冲任失调而阴气不治, 此乃平补之剂, 温而不热, 补而不峻, 暖而不燥,滑而不泄, 故有从容之名。”年人体弱血虚、津亏的肠燥便秘, 常与柏子仁、胡麻仁、当归等同用。肉苁蓉除具有补肾、益精、润燥、润《神农本草经》亦谓其“养五脏, 强阴, 益精气” 。可以治疗男子阳疾, 女子不孕、带下、血崩以及腰膝冷痛、血枯便秘等症。肉苁蓉的现代科学研究现代科学研究表明, 肉苁蓉含有氨基酸、微量元素等成分。同时发现, 肉苁蓉中富含锰元素。锰能提高人体内'生激素的合成, 可激活一系列酶, 提高机体的免疫功能, 有延缓衰老的作用。又据药理研究显示, 肉苁蓉对虚证血尿有止血作用, 并有降低血压的作用。肉苁蓉的采集和炮制肉苁蓉春秋均可采集, 春季采集的,通常半埋于沙土中晒干, 称“淡苁蓉” 秋季采集的, 因水分太多, 不易晒干, 因此,必须将其投入盐水中一年后, 取出晒干, 称“咸苁蓉”。肉苁蓉炮制方法简单, 除净杂质后, 用清水浸泡, 每天换水一次, 如系咸苁蓉必须泡净盐分, 润透切片晒干后即入药。肉苁蓉作为饮片用于汤剂, 常用量一克。右床常用验方方一肉苁蓉、兔丝子、远志、续断、杜仲、五味子及蛇床子各克。以上共研细末,炼蜜为丸梧子大, 每次口服丸, 日服次, 白开水送下。本方可治男子五劳七伤, 阳屡不举,小便淋沥等症。方二肉苁蓉、鹿茸、怀山药及白获菩各克。以上共研细末, 米糊为丸如梧子大, 每服丸, 枣汤送下。本方专治肾虚白浊。方三肉苁蓉、蛇床子、远志、五味子、防风、炙附子、冤丝子、巴戟天及杜仲各克,共研为细末, 炼蜜为丸如梧子大。每曰空腹服丸, 温黄酒或淡盐汤送服。本方专治虚损, 暖下元, 益精髓, 利腰膝。方协灯肉苁蓉90克, 以白酒浸泡小时,加入适量白汤以文火煮烂, 顿服。本方专治老年人血液枯稿, 大便秘结, 胸中作闷。方三艺西洋参、黄花菜、肉苁蓉、枸杞子、何首乌、佛手、合欢皮各克, 放入度米酒毫升内浸泡个月。每次一毫升, 日饮次。本方有补益强壮、抗老驻颜、增强体力、增进食欲、改善睡眠的功效。温馨提醒服用肉苁蓉应注意凡阴虚火旺、脾虚便溏者忌用。

肉苁蓉系列当科植物带鳞叶的肉质茎，有补肾壮阳之功效。我们用醋酸氢化考的松制成小白鼠“阳虚”动物模型［1］，以小白鼠的肾脏、肾上腺形态结构变化为指标，观察肉苁蓉醇提物对肾脏、肾上腺功能的保护作用，总结如下。1 材 料醋酸氢化考的松注射液（ 由山东新华制药厂生产） 肉苁蓉醇提物为当地药材公司药用肉苁蓉生药饮片，用醇提法制成肉苁蓉结晶物。实验动物为解放军第148医院动物房饲养的试验用小白鼠，雌雄不拘，体重22～28g。2 实验方法小白鼠35只，将其中30只制成阳虚动物模型（15只单用醋酸氢化考的松为试验组，15只用醋酸氢化考的松加肉苁蓉醇提物为药物组） ，另5只为正常对照组。试验组与药物组臀部肌肉注射醋酸氢化验考的松，剂量为每只0．7mg／d。药物组同时经胃管给予肉苁蓉醇提物，剂量为每只15mg／d。3组动物（ 试验组、药物组及正常对照组） 每天均喂以同容量的生理盐水，试验持续15d（ 试验组死亡7只，药物组死亡1只，正常对照组无死亡） ，3组动物分别取5只小白鼠处死，立即解剖取出肾脏、肾上腺，组织块以福尔马林液固定，常规做病理检查。3 结 果试验组肾上腺皮质均有萎缩现象，束状带细胞体积缩小。肾脏的肾小管上皮细胞肿胀，远曲小管内可见管型。药物组肾上腺皮质均未见萎缩现象，束状带细胞的厚度接近正常，肾脏亦未见异常。正常对照组肾上腺皮质与肾脏均正常。试验结果表明，动物在较长时期使用皮质激素的同时，加用补肾壮阳的中药肉苁蓉醇提物，可防止单用激素所引起的肾上腺皮质萎缩。肉苁蓉醇提物对肾功能亦有一定的保护作用。

堵年生  王泓（新疆医学院药学系 乌鲁木齐 830054)易杨华（上海第二军医大学药学院 上海 200433）摘 要 从列当科药用植物肉苁蓉（Clstanche deserticola）中分得四个苯乙醇甙类成分，经光谱分析，确定这四个成分是海胆试（echinaconide），内苁蓉试A（cistanoside A），麦角甾甙（acteoside）和2-乙酰麦角甾贰（2-acetylacteoside），以上成分在该植物中属首次分得。关键词 肉苁蓉，海胆贰，肉苁蓉式入，麦角甾式，乙酰麦角淄试中国药典收载的肉苁蓉是列当科植物肉苁蓉（Cistanche deserticola）的干燥肉质茎，是中医常用的补肾助阳药。肉苁蓉的品种较多，文献对盐苁蓉C.salsa和德赢vwin登录 C.tubulosa的研究报道较多，而对药典收载之品种研究较少。罗尚凤等曾从C．deserticola分得甘露醇、8-表马钱子试酸和氨基酸成分。为了进一步开发研究肉苁蓉，我们对其水溶性成分-苯乙醇甙类成他进行了提取分离，结果共分得和鉴定出四种成分，它们是海胆甙，肉苁蓉甙A，麦角甾试和2＇-乙酰麦角甾甙。以上成分具有助阳、抗衰老等药理作用。实验部分实验药材购自乌鲁木齐药材公司，精河县产，品种由新疆民族药研究所李佳政副研究员鉴定。大孔树脂型号为AB-B型，南开大学化工产品。柱层用硅胶为青岛海洋化工厂产品，Sephan-dex LH-20为上海长征制药厂产品。紫外分光度仪为岛津UV-360。红外分光光度仪为岛津1R-440．H-NMR和C-NMR仪器型号为Bruker MSL-300型（300兆周）。一、提取分离肉苁蓉10kg，乙醇回流提取三次，合并提取液并减压浓缩至膏状，加少量水混悬，经乙酸乙酯脱脂后，用正丁醇萃取，合并萃取液，减压浓缩至干，加少量水溶解，先后通过大孔树脂柱和聚酰胺柱（先以水洗，后用甲醇洗），收集并浓缩甲醇部分得苯乙醇总甙。总甙经硅胶柱层，以CHCl3-EeOH（10：3-→10：5）梯度洗脱，共收集78流份（每流份约300ml）。其中16-23流份得粗化合物N（2.1g），28-42流份得粗化合物【（5.4g），48-61流份得粗化合物I（3.2g）．65-78流份得粗化合物1（5.1g）。以上组份再用硅胶柱层析纯化一次（洗脱条件同上），然后再分别通过葡聚糖凝胶LH-20柱纯化，以CH3OH：H2O（1：1）洗脱，收集甲醇部分，得单体化合物N(1.3g)、(3.5g)、1(1.8g)、1(3.5g).二、鉴定化合物1 淡黄色无定形粉末，PeCl3反应和a一萘酚试验阳性，硅胶薄层层析R，值为0.3（CHCI1：MeOH：H2O-6：4·1展开，20％H，SO，喷雾检出），UVλMO：244,292,333。1R cm-:3360,1690,1625,1598,1518.'H-NMR(Methanol-d,)δ:1.08(3H,d,J=6Hz,CH3),2.79 （2H，t，J＝7Hz，Ar-CH1-CH：-），4.29,4.39（各1H，d，J＝8Hz，两个葡萄糖基端基质子），5．18（1H，d，J＝1Hz，鼠李糖基端基质子），6.28（1H，J＝16Hz，Ar-CH＝CH-），6.5-7.1（6H．芳H），7.59（1H，d，J＝16Hz，Ar-CH＝CH-）．C-NMR数据见表1．以上化学反应和光谱数据与文献海胆甙的报道一致（），故鉴定化合物1为海胆试（echinacoside）。 2:R-CH3                         4:RCOCH图1 化合物1-4的结构Fig.1 Structure of 1-4化合物1 淡黄色无定形粉末，FeCl2反应和a-萘酚试验均阳性，硅胶薄层层析R，0.35（展开和检出条件同上）。它的紫外、红外光谱与海胆甙非常相似，但＇H-NMR出现53.84（3H．s）信号，C-NMR出现556.5信号，提示结构中含1个甲氧基．UVnm：246,290,333.1Rycm-：3350,1685,1620,1596,1508．＇H-NMR（methanol-d3）5：1.08（3H，d，J＝6Hz，鼠李糖中的 甲基），2.86（2H，t，J＝7Hz，Ar-CH1-CH1-），3.81（3H，s，OCH3），4.28,4.39（各1H．d．J＝ 8Hz，两个葡萄糖端基质子），5.18（1H，s，鼠李糖的端基质子），6.27（1H，d，J＝16Hz，Ar-CH＝CH-），6.65-7.1（6H，芳H），7.60（1H，d，J＝16Hz，Ar-CH＝CH-）．C-NMR数据见表1。以上光谱数据，与肉苁蓉甙A的文献值一致（，故鉴定化合物1为肉苁蓉甙A（cistanoside A）。示为二糖甙，UVnm：247,292,334．IRcm-：3350,1690,1625,1600.1515。H-NMR （methanol-d，）5：1.10（3H，d，J＝6Hz，鼠李糖的甲基），2.79（2H，t．J＝7Hz，Ar-CH2-CH2-），4.38（1H，d，J＝8Hz，葡萄糖端基质子），5.19（1H，d，J＝1Hz，鼠李糖端基质子），6.28（1H．d．J＝16Hz，Ar-CH＝CH-），6.5-7.1（6H，芳H），7.59（1H，d，J＝16Hz．Ar-CH＝CH-），C-NMR 数据见表1。以上光谱数据，与麦角甾甙的文献值一致，故确定化合物1为麦角甾甙(acteoside)。化合物N 淡黄色无定形粉末，硅胶薄层层析R40.42（展开和检出条件同上）。它的光谱数据与麦角甾甙非常相似，红外光谱多一个1735cm-吸收峰，H-NMR出现51.98（3H．s）的乙酰基质子信号，C-NMR出现5171.5和20.9的羰基和甲基信号，根据糖甙化位移规律，乙酰化位于2位糖羟基上，UVAMnm：247,292,333.1Rcm-：3430,1725,1700,1630.1605． 1525．＇H-NMR（methanol-d，）＆ ：1.08（3H，d，J＝6Hz，鼠李糖上甲基），1.98（3H，s．OAc），2.70（2H，t，J＝7Hz，Ar-CH1-CH1-）．4.50（IH，d＝8Hz，葡萄糖端基质子），5.19（1H，d，鼠李糖端基质子），6.28（1H，d，J＝16Hz，Ar-CH＝CH-），6.5-7.1（6H，芳H）．7.60（1H，d．J＝16Hz，Ar-CH-CH-）．C-NMR数据见表1．以上光谱数据，与2-乙酰麦角留甙的文献值一致，故确认化合物N为2＇-乙酰麦角甾甙（2＇-Acetylacteoside）。参考文献[1] 中华人民共和国药典，第一部，1990：110[2] H.Kobayashi,et al.,Studies on the Constiteents of Catanchis Herba.1.Chem.Pharm.Bull.1984:32 000[3] H.Kobayashi,et al.,New Phenylethanoid glycosides from C.Tubulosa.Chem.Pharm.Bull.,1987:35; 3309.[4] 罗尚凤等，肉苁蓉化学成份的研究，中药通报，1986；11（11）：41[5] 佐藤 调等，肉苁蓉的药理研究（第一报），国外医学中医中药分册，1987；9（6）：23 表1 化合物1-4的C-NMR化学位移（甲醇中）Table 1 C-NMR Chemical Shifts of 1--4 in Methanol-d.碳序海胆试内苁蓉甙A麦角甾贰2＇-乙醇麦角甾甙1131.5131.6131.5131.72116.5113.8116.5117.13144.6148.8144.6145.94146.0145.9146.1144.5Aglyoone moiety 5117.1116.1117.1116.26121.3122.4121.3121.3⑩72.072.072.072.5836.536.736.536.2-127.6127.6127.6127.62- 114.7114.7114.7115.23149.8149.8149.7149.7Caffeic ackdl 4146.8146.8146.8146.7molety 5116.4116.5116.3116.5CP-Coumarie)123.3123.3123.2123.20168.5168.5168.3168.2일115.3115.3115.2114.7Y148.2148.2148.0148.11104.1104.2104.1101.6276.176.176.075.1Glucose molety 381.681.681.680.5Inner )70.470.470.470.7574.674.776.176.0669.369.462.362.3-103.0103.1103.0103.2272.372.372.372.3Rhamnose moiety372.372.372.271.8473.773.873.873.6570.570.670.6

王丽楠＇，陈 君＇，杨美华＇，陈士林，石钱，齐云，刘同宁（1．中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所，北京 10009442．宁夏永宁县甘草种植场，宁夏 永宁 750100）摘要：目的 建立肉苁蓉中苯乙醇苷的含量测定方法。方法 选用测定波长333nm，以松果菊苷为对照品，采用大孔树脂-紫外分光光度法对内苁蓉中苯乙醇苷的含量进行了测定。结果 松果萧苷在8-40mg＊L-1范围内具有良好的线性关系，回归方程为Y＝2.3010X-0.0041（r＝0.9991），平均回收率为99.1％，RSD为0.4％，结论 该方法操作简便，结果准确，重复性好。可用于肉苁蓉的质量控制。关键词：内苁蓉：苯乙醇指；大孔树脂-紫外分光光度法；含量测定中图分类号：1927.2   文献标识码：A   文章编号：1004-2407（2008）02-067-03Quantitative determination of total phenylethanoid glycosides in Cistanche desertiolaWANG Linan,CHEN Jun',YANG Mehua',CHEN Shiln,SHI Yue,QI Yun',LIU Tongning'(L Institite of Medidnal Plant Development,Chinese Academy of Medical Sdence,Peking Union Mediaal College,Beijing 100094,China:2.The Gly-yrrhea Bases of Yongning County of Ningia.Ningxia 750100)Abstract Objective To establish a quantitative method for the determination of total phenylethanoid glyeosides in Cistanche desertiok.Method Using detection wavelength at333nm and cchinacoside as standand.macroporous resin-U V spectrophotomatry was developed to determine total phenylethanoid glycosides in Cistanche desertiok.Results The asbration cuve was in good linur rity over the range of 8-40mg*L-'with the mgression espuationY=2 3010X-0.004 1r=0.999 1).The average recovery wan 99.1% with RSD-0.4%.Conclusion The method is simple,accurate and reproducible.It can be used to control the quality of Cstanche desertiola.Key words Cistanche desertiola:total pheny lethanoid glycosides macropors resh-UV spectrophotometry quantitative deter-mination肉苁蓉（Gistanche desertiola）为列当科多年生寄生植物，是补肾壮阳、润肠通便之要药，始载于《神农本草经》，列为上品，主治阳痿、不孕、腰膝酸软、筋骨无力、肠燥便秘等，是临床常用中药之一，由于它生长在沙漠环境中，又具有沙漠“人参”的美誉”。现代研究表明，肉苁蓉具有壮阳、抗衰老、提高免疫功能、增强记忆力、降血脂和通便等作用，其主要活性成分是苯乙醇苷类。据文献报道，苯乙醇苷类具有抗不良刺激，增强学习记忆力和助阳等多方面的功能。肉苁蓉中苯乙醇苷的含量测定方法有硝酸铝-比色法”、重氮盐-比色法＂、紫外分光光度法，在硝酸铝-比色法中，以海胆苷为对照品，由于海胆苷中有两个邻二羟基，故可与铝盐络合形成稳定的有色化合物，在510nm波长处可进行比色测定，但肉苁蓉中其它非苯乙醇苷类的邻二羟基物质对本法测定有干扰，故造成结果偏高，在重氮盐-比色法中，应用苯乙醇苷类中的酚性基团与重氮盐能生成有色物质的原理，在486nm处进行测定，但肉苁蓉中其它非苯乙醇苷类含酚性基团的物质对本测定方法亦有干扰，影响结果的准确性。目前文献报道的紫外分光光度法，均是采用大孔树脂除去糖等杂质，富集纯化苯乙醇苷类有效成分，测定方法较比色法准确，但其样品前处理要经过多次回流提取、萃取等步骤，操作烦琐。针对上述问题，笔者对样品前处理方法进行了改进，并对最佳提取时间和提取溶剂等进行了考察。1 仪器与试药1.1 仪器 紫外-可见分光光度计（岛津2550型）；电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9143BS-III无锡市苏嘉实验设备厂）。1.2 试药 D-101-1型大孔树脂购于天津市海光化工有限公司；松果菊苷对照品（批号111670-200502，供含量测定用）购于中国药品生物制品检定所；所用试剂均为分析纯。肉苁蓉药材由宁夏永宁县肉苁蓉种植场提供，初加工方法为：新鲜药材切成厚约2mm的小丁状，置干燥箱内干燥至干（60℃约12h），粉碎。2 方法和结果2.1 对照品溶液的制备 精密称取松果菊苷对照品适量，置棕色量瓶中，用甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得。mL使溶解，放冷，通过D-101-1型大孔树脂柱（柱长20cm，内径2cm），以水50mL洗脱，弃去水液，再用体积分数20％乙醇50mL洗脱，弃去洗脱液，继用体积分数70％乙醇80mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至10mL量瓶中，精密量取0.5mL置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。2.3 线性关系考察 精密量取对照品溶液0.2.0.4，0.6.0.8和1.0mL，分别置于10mL棕色量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，以甲醇为空白对照于333nm处测定吸光度，以溶液质量浓度为横坐标，吸收度值为纵坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程：Y＝2.3013X-0.004 1，r＝0.9991．结果表明松果菊苷质量浓度在8～40mg＊L范围内与吸收度具有良好的线性关系。2.4 精密度试验 取一定质量浓度对照品溶液连续测定5次，测定吸收度，其RSD为0.14％，表明仪器精密度良好。2.5 稳定性试验 取对照品溶液于室温放置0.1，2,3.4和5h测定吸收度，RSD为1.60％，表明对照品溶液在5h内稳定。2.6 重现性试验 精密称取同批样品6份，按上述含量测定方法进行测定，平均含量为0.83％，RSD为1.50％，表明重现性良好。2.7 回收率试验 精密称取已知含量的肉苁蓉药材粉末5份，分别精密加入松果菊苷对照品适量，各份均按上述含量测定方法进行测定，平均回收率99.1％，RSD为0.4％（n＝5）．2.8 样品测定 按2.2项下制备供试品溶液，对8批肉苁蓉药材进行苯乙醇苷的含量测定，结果见表1（均以干燥品计算）。表1 8批肉苁蓉含量测定结果（-3）样品批号苯乙醇苷含量％200603250.81200604030.72200604022.10200604150.70200604160.66200604170.70200604190.36200604200.553 讨论结果表明：苯乙醇苷类有效成分主要富集在体积分数70％乙醇洗脱液中，其紫外吸收图谱与对照品溶液完全一致，且均在333nm处有最大吸收，故选择333nm为测定波长。②提取时间的考察 取本品粉末约1g，6份，分别精密称定质量，各精密加入体积分数50％乙醇50mL，密塞，称定质量，分别回流提取2,3,4,5,6和7h．取出，放冷，照2.2项下供试品溶液的制备方法进行处理，分别制得供试品溶液，以甲醇为空白对照，各供试品溶液在333nm处测定吸收度，并分别计算含量（均以干燥品计算），结果见表2．结果表明，提取时间5h，提取效果最佳。表2 提取时间的考察结果回流提取时间/h 234567含量／％0.480.570.720.820.790.58③提取溶剂的考察 取本品粉末约1g，4份，分别精密称定质量，各精密加入体积分数30％，50％，70％和90％乙醇溶液50mL，密塞，称定质量，照2.2项下供试品溶液的制备方法进行处理，分别制得供试品溶液，以甲醇为空白对照，在333nm处测定各供试品溶液吸收度，并分别计算含量（均以干燥品计算），结果表明，以体积分数50％乙醇提取效果最好，含量最高。④洗脱体积的考察 取本品粉末约1g，精密称定质量，照2.2项下供试品溶液的制备方法进行处理。分别以蒸馏水，体积分数20％乙醇各50mL洗脱，弃去洗脱液，继用体积分数70％乙醇，依次以50,20.10和10mL洗脱，分别收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并分别转移至10.5.2和1mL量瓶中。以甲醇为空白对照，各洗脱液分别在333nm处测定吸收度。结果表明，体积分数70％乙醇80mL即可洗脱完全。从样品测定结果来看，8批不同时间采收的肉苁蓉药材中苯乙醇苷的含量差别较大，其中最高1批的含量（批号20060402）和最低1批的含量（批号20060419）相差近6倍。由于肉苁蓉中苯乙醇苷是其主要的活性成分，因此，建立准确可靠的苯乙醇苷含量测定方法是十分必要的，本实验简便快速，重现性好，结果准确，为肉苁蓉的质量控制提供了依据。

1.3 已鉴定成分从20世纪70年代开始，国内外学者对中药肉苁蓉的化学成分进行了大量研究，其中荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 的研究较为深入和系统，其他品种亦有研究报道“。至今，从肉苁蓉中明确分离鉴定出苯乙醇苷类成分已近40种。北京大学屠鹏飞课题组在这方面做了大量工作，并在2003年雷丽等总结报道国内外学者已从肉苁蓉属植物中分离得到了22个苯乙醇苷类成分，包括1个单糖苷，14个双糖苷和7个三糖苷。2008年姜勇等5叫进行了进一步系统介绍，总结发现从肉苁蓉属植物中共分离鉴定出苯乙醇苷类化合物30多种，其中肉苁蓉12种，德赢vwin登录 19种，盐生肉苁蓉10种，沙苁蓉13种。此外，还开发了来源于德赢vwin登录 的苯乙醇总苷，以松果菊苷和毛蕊花糖苷为主要成分，其苯乙醇苷含量＞90％，松果菊苷含量＞40％。宋海龙等还报道从国产德赢vwin登录 中分离得到19个苯乙醇苷类化合物。后来，又有4个苯乙醇苷类成分从肉苁蓉中被分离鉴定出来，分别是 kankanosidesJ1、2、K1和K2。2 提取分离工艺苯醇苷类化合物多为无定形粉末，具有良好的水溶性和湿性，易溶于甲醇，可溶于丙酮，性质较为稳定。目前已有研究报道的提取分离方法包括乙醇回流提取、大孔树脂吸附法、多种有机溶剂萃取法、微波萃取法、超声萃取法、絮凝水提法，其中以大孔树脂吸附法的应用研究最广泛，报道最多。2.1 乙醇回流法孟庆艳等四用多指标综合评分正交设计法筛选德赢vwin登录 中苯乙醇苷的乙醇回流提取工艺，得到的最佳提取工艺为：采用20倍量的40％乙醇，提取1次，2h，提取液减压浓缩至无乙醇味，浓缩液于60℃干燥，得德赢vwin登录 的苯乙醇苷类粗品。吴海虹等四对盐生肉苁蓉中苯乙醇苷乙醇回流提取工艺的各因素进行考察，发现反应温度为40～70℃，对苯乙醇苷类化合物的提取无明显影响。但提取温度在超过70℃时，随着反应温度升高，提取液中苯乙醇苷类化合物浓度明最降低，建议提取温度以70℃为宜。2.2 大孔树脂吸附法大孔吸附树脂具有选择性强，吸附容量大，再生简单，吸附迅速，解吸容易等多重优点，近年来在中药有效成分的分离方面倍受青睐，在肉苁蓉的苯乙醇苷类成分分离中被广泛应用，并且已经产业化。任璐等門根据肉苁蓉中苯乙醇苷类活性成分的极性特点，对D290、D3520、NKA、AB-8、D-100、NKA-II、S-8等7种大孔树脂进行吸附性能比较研究，发现AB-8对苯乙醇苷类成分的吸附量较大。陈新萍等通过对比8种树脂的吸附和解析性能，选择适于分离松果菊苷和毛蕊花糖苷的吸附剂，并从吸附率、解析率、吸附时间、酸度的控制、再生性等多个方面进行比较研究，为工业化生产提供重要参考依据。2.3 有机溶剂萃取分离法张凯叫选用乙醇对肉苁蓉进行粗提，然后依次用乙酸乙酯、正丁醇分别萃取，得到较高浓度的苯乙醇苷类化物，并对乙醇提取工序各因素影响进行考察，结果发现各因素的影响顺序为：提取时间＞粉碎度＞乙醇用量＞乙醇浓度，得到了最佳提取工艺条件。2.4 絮凝水提法王英姿等以松果菊苷、β-谷甾醇、总糖及干浸膏得率为指标，在药材粒度、药材量、滤过、浓缩等条件相同的前提下，对超声提取法（USE）、絮凝水提法（WFE）、醇提法（AE）3种方法进行比较研究，实验结果表明，累凝水提法优于其他2种方法，为肉苁蓉苯乙醇苷类化合物提供了又一较佳提取分离工艺。2.5 其他提取法早期，肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物常采用硅胶或葡聚糖凝胶柱层析进行单体化合物的分离和制备。但由于这类化合物分子中含有酚羟基基团，极易吸附在固体色谱柱上，所以采用柱层析分离制备这一类化合物收率较低，且需消耗大量的有机溶剂門。雷丽等用高速逆流色谱技术提取德赢vwin登录 中的苯乙醇苷类化合物，并作了分离鉴定，为苯乙醇苷类化合物的分离提供了一种简单、快速的方法。3 药理作用目前，国内外很多学者对肉苁蓉中苯乙醇苷类成分的药理活性进行了大量研究，主要集中在苯乙醇总苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷，其他成分的药理活性报道较少。研究发现肉苁蓉中的苯乙醇苷类成分有提高记忆力、抗衰老、免疫调节作用、抗中脑神经细胞调亡、心肌缺血保护、改善性功能多种药理活性。3.1 抗衰老作用肉苁蓉总苷灌胃能明显提高D-半乳糖所致的亚急性衰老小鼠超氧化物歧化酶（SOD）的活性，显著降低脑、肝中的脂质过氧化物含量，显示较强的抗氧化作用及抗衰老作用严。匡荣等門利用H202损伤的PC12细胞模型研究松果菊苷对H202损伤的PC12细胞的存活、凋亡、坏死和乳酸脱氢酶（LDH）渗漏的保护作用，并从细胞凋亡通路之一线粒体通路角度研究其作用机制，为松果菊苷开发利用于防治阿尔茨海默病（AD）等神经退行性疾病提供了重要的理论依据。3.2 提高记忆力研究表明，该类成分不但对失忆模型小鼠及对正常小鼠均具有改善学习记忆的功能。朴景华等叫研究发现毛蕊花糖苷能拮抗东莨若碱所引起的大脑皮层乙酰胆碱酯酶的增高及皮层、纹状体M受体最大结合力降低，能改善东莨菪碱所致的记忆力障碍。胡余明等四使用水迷宫实验、跳台法、避暗法观察了苁蓉总普对正常小鼠学习记忆功能的影响。实验结果均显示苁蓉总苷可以明显降低其水迷宫实验到达终点的时间，2 min内到终点的动物数是著增多；可以使跳台的潜伏期明显延长，5min内的错误次数明显减少。显示苁蓉总苷可以提高正常小鼠的学习记忆功能，为其开发成为用于健康人群的辅助改善记忆力的新资源提供依据。3.3 免疫调节作用肉苁蓉总普给小鼠灌胃能增强受60CO-Y 照射的迟发型超敏反应，增加胸腺指数，增加T淋巴细胞增殖反应和提高白介素2（IL-2）的活性P。口服给药能显著增加小鼠血中巨噬细胞的能力及免疫器官的重量，显示肉苁蓉总苷类化合物具有促进免疫调节作用”。3.4 改善性功能肉苁蓉是传统的补肾壮阳中药，毛蕊花糖苷、多糖和甜菜碱是肉苁蓉产生雄激素样作用的主要活性成分之一。一项功能测试表明，德赢vwin登录 中的麦角甾苷（即毛蕊花糖苷）能缩短去势大鼠阴茎勃起潜伏期、增加去势大鼠包皮腺、精囊腺等副性器官的重量和指数，并增加正常大鼠性器官重量和副性器官指数，显示雄性激素样作用，从而产生改善性功能作用叫。国内学者对肉苁蓉补肾阳药理作用进行研究，结果表明2种肉苁蓉（肉苁蓉及德赢vwin登录 ）的水提液，均能让氢化可的松引起的肾阳虚模型小鼠耐寒时间明显延长，补肾阳作用显著，并提示已被证明产生补肾壮阳的成分包含多糖和甜菜碱等叫。3.5 心肌缺血保护实验研究发现，对大鼠静脉注射给药肉苁蓉总苷后5min再结扎冠脉，与未给药组相比，肉苁蓉总苷可明显改善缺血心电图，减小心肌梗死面积，提高心肌组织中肌酸磷酸激酶（CPK）的活力，显示出保护缺血心肌的作用。王晓雯2．到等研究表明，肉苁蓉总苷可清除体外自由基，产生抗氧化作用从而具有心肌保护作用。3.6 中枢神经系统保护蒲小平等研究发现，德赢vwin登录 的苯乙醇苷类成分通过抑制半胱氨酸门冬氨酸特异蛋白酶-3（caspase-3）的活性，具有抗中脑神经细胞凋亡的作用。肉苁蓉总苷灌胃可明显缩小局灶性脑缺血大鼠小脑梗死范围，升高脑组织SOD和谷胱甘过氧化物酶（GSH-Px）的活性，显著降低丙二醛（MDA）含量，具有神经保护作用39。3.7 其他实验研究表明，毛蕊花糖苷对氯仿引起的肝损伤有显著的保护作用。此外，国内学者总结松果菊苷具有神经保护、防止肝损伤、抗炎、抗肿瘤、抗衰老、影响免疫调节、改善记忆力等多种药理作用四。4 结语肉苁蓉是我国传统的名贵中药，在历代补肾阳处方中使用频度最高，也是目前珍贵的野生资源，已被我国列为二级保护物种，并被收入《国际野生植物保护名录》。目前已在我国新疆和内蒙古等地区成功大面积人工种植。其中主要成分苯乙醇总苷已被证实并开发应用于治疗老年痴呆等多种方面。随着科学技术的不断发展和研究的不断深入，苯乙醇苷及其单个成分的新的药理活性也将逐渐被发现，并将为肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物的中药现代化研究和开发奠定坚实基础。

中药肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉 Cistanche deserticolaY.C.Ma或德赢vwin登录 Cistanche tubulosa（Schrenk） Wight 干燥带鳞叶的肉质茎，别名大芸，是传统的补肾阳中药，最早记载于《神农本草经》，列为上品，具有补肾阳、益精血、润肠通便的功效。主治男子阳痿、女子不孕、血枯便秘等症，有“沙漠人参”之美誉。据《肉苁蓉及其人工种植》中记载，目前在我国境内发现8种和1变种，包括德赢vwin登录 （Cistanche tubulosa（Schrenk）Wight）、肉苁蓉（C. deserticola，Y.C.Ma），盐生肉苁蓉（C.salsa（C.A.Mey.） G.Beck）、兰州肉苁蓉（C.lanzhouensis ZYZhang）、沙苁 蓉（C.simensis G.Beck）、迷肉苁苁蓉（C.ambigua（Bge.） G.Beck），深裂肉苁蓉（Cfissa（C.AMey）G.Beck），宁夏肉苁蓉（C．ningxiaensis D．Z．Ma et A．Duan）和1个变种来源（白花盐苁蓉C.salsa varalbifora P.F.YU etZ.C.Lou）：其 中德赢vwin登录 产量最大，主产于新疆塔里木盆地，该地区已成功大面积引种，是日前中药肉苁蓉最重要的来源。自20世纪70年代起，国内外学者开始系统研究肉苁蓉属植物的化学成分和药理活性。至今，已从肉苁蓉中分离并鉴定了近百种化学成分及微量元素，主要包括苯乙醇苷类。环烯醚萜苷、木脂素苷、单糖、双糖、多糖、氨基酸、多肽、蛋白质、三萜、甾醇、多元醇等，其中苯乙醇苷类成分在原药材中含量最高，是肉苁蓉属植物的主要活性成分之一，也是中国药典“肉苁蓉”项下鉴别和含量测定的指标性成分，具有抗氧化、促进物质代谢、改善学习记忆、增强性功能等作用日。本文结合国内外文献，对肉苁蓉中苯乙醇苷类成分的化学结构、提取分离方法、药理作用的研究概况予以综述。1 苯乙醇苷类成分的化学结构1.1 结构特点苯乙醇苷类（phenylethanoid glycosides.PhGs）成分是 一类由苯乙醇苷元与糖基结合而成的苷类化合物，其中，由于多数化合物糖上都连有咖啡酰基或阿魏酰基，国内外学者又称其为苯丙素类化合物（phenylpropanoid glycosides）。肉苁蓉中的苯乙醇苷类化合物成分大多具有通式结构（见图1），其构成糖多为葡萄糖和鼠李糖2种；与苷元直接相连的中心糖为葡萄糖：除单糖苷外，中心葡萄糖的3位均连有鼠李糖：三糖苷中第二个葡萄糖常连在中心葡萄糖的6位：在中心葡萄糖的4或6位常与咖啡酰基、阿魏酰基或香豆酰基等苯丙烯酰基成酯。1.2 代表性成分松果菊苷（化学结构式见图2）和毛蕊花糖苷是肉苁蓉中的主要指标性成分。其中，松果菊苷是文献记载的首个苯乙醇苷类化合物叫，从狭叶紫锥（Echinacea angustifolia）中分离纯化得到，也是紫锥菊提取物中的指标性成分之一。从中国药典2005年版开始，松果菊苷和毛蕊花糖苷即被作为肉苁蓉的指标性成分对药材质量进行控制。              图1 苯乙醇苷类化合物的基本母核图2 松果菊苷的化学结构Figl Structure of echinacoside