王晴（浙江省临海市临海市第一人民医院临海317000）摘要：目的 对内其容总普胶囊治疗阿尔美海规病的效果进行临床研究，方法 将124例患者随机分为两组，对照组给予安理中5mg＊d-每晚1次，治行组给于内其营总巷．1次2粒，每日3次口脱，两组疗程均为12周，结果 两组12周后CDB．ADL均明星下降，MME均明星升高，但两组相比无统计学意义（P0.05），不良反应治行组少于对照组 差异显蛋（P＜0.05）。结论 内其您总普对AD患者具治疗作用，且价格造中，不良反应少，值得橡广应用。中图分类号：R969 4 文献标识码：A 文章编号：1006-3765（2009）-03-0103阿尔茨海默病（AD）是一种以进行性痴呆为表现的神经变性病，65～69岁的人群约1％患AD85岁以上老人的患病率将近20％印，中国目前的AD患病率是4.8％．21世纪中国将步入老年社会，随着平均寿命的延长，阿尔茨海默病患病率将明显增加给社会和家庭带来沉重负担。我们用内苁蓉总苷胶囊治疗AD取得良好效果，特报道如下：1 对象和方法1.1 对象 所有病例均为50-80岁男性和绝经后女性，所有患者均符合美国国立神经病语言障碍卒中研究所和阿尔茨海默病及相关疾病协会（NINCIS.ADRDA）中的可能AD标准及诊断6与统计学手册第四次修订版（DSM-IV-R）标准，出现认知功能和日常生活能力下降至少6个月：汉密尔顿抑郁量表（HAM-D）评分≤14分和改良Hahinski缺血评分＜6分，分别除外中，重度抑郁和血管性痴呆痴呆严重程度则根据DSM-IV-R诊断为轻，中度痴呆且简易智能状态检查量表（MMSE）评分界于10～26分门诊AD患者，排除标准：除AD以外患有其他可能导致痴呆的疾病：严重或极轻微痴呆即MMSK10分或＞26分：HAM-I＞15分有明显抑郁症状的患者：有其他严重和不稳定疾病的患者，患者和照料者自愿参加本试验，并在知情同意书上签字。1.2 剔除标准 按上述条件严格选择病例 并刷除符合以下要求的病例：“违反合法性”，即指病例选择违反了入组标准。不应当进行随机化，未曾使用试验用药；在随机化之后没有任何数据。资料统计分析前，由统计人员和主要研究者讨论判断病例是否刷除。1.3 一般资料 患者均来自我科门诊，数字表法随机分为两组，治疗组63例男30例女33例年龄（68±5）岁；对照组61例男30例女31例年龄（田士3）岁，两组在年龄、病程资料上无统计学差异，具有可比性。1.4 方法 对照组患者给予安理申5mg＊d-，每晚1次治疗组给予肉苁蓉总普，1次2粒每日3次口肌两组疗程均为12周。疗程结束后评价疗效。1.5 疗效判定 用药前和用药后每4周检查1次方法：（1）MMSE筛查AD.检测患者的认知功能（定向力、记忆力，计算力、语言能力，视空间段运用能力等：（2）临床痴呆程度量表（CDB）检测患者的痴程度（3）日常生活自理量表（ADL）检测患者的日常生活自理能力。1.6 临床试验资料 经育态审查后，由统计学专业人员盲志输入电脑，结果采用2次接盲法。应用SPSS13.0统计分析软件对结果进行处理，符合正态分布的数据均以均数士标准差（X士の表示不符合正态分布的数据，经自然对数转换正态化分析。各组同比较采用：检验。2 结果2.1 表1显示治疗12周后两组 CDR．ADL均有明显下降（P＜005）但两组相比无统计学意义（户0.05）；两组MMSE均有明显升高P＜0.05），但两组相比无统计学意义（0.05)。 2.2 不良反应 在我们的试验中未发现有死亡或严重不良反应63例安理申服用者中17例（27.0％）出现头晕，恶心食款不振、轻度腹泻、便秘、疲劳、激越不良反应，但仍然维续用药。治疗组中61例AD患者中2例（3.3％）出现轻度腹四、仍然继续用药，经统计学分析，治疗组和对照组差异有显著意义（P＜005）。两组治疗期间，所有患者生命体征平稳血，尿常规及血生化检查在治疗前后均无明显变化（P＞0.05)。 表1两组治疗前后MMSE．CDR．ADL评分变化组别MMSECDRADL治疗组 治疗前 63 18.4±2.819±0649.88±1.31治疗后 63 24.3±5.6*1.2±0.4°40 01±1.28*Δ对照组 治疗前 61 17.9±3.218±0719.89±1.42治疗后 61 233.1±6.3° 1.1±0.5＊20.63±139＊与治疗前“P＜0.05．与对照组治疗后比较p＜0.053 讨论3.1 AD是一种伴有特殊病理及生化改变的神经系统变性疾病，老年班及神经纤维缠结是AD的主要病理特征。AD的临床表现与中枢神经系统乙酰胆碱能神经元的功能障碍有关。认知功能相关区域，如海马，颐叶、顶叶、额叶皮质及AD病理部位均发现有乙酰胆碱转移酶活性及乙酰胆碱浓度降低。相关区域的乙酰胆碱水平下降造成学习、记忆等认知功能衰退。乙酰胆碱是通过乙酰胆碱酯酶降解的，神经细胞变性可导致脑局部乙酰胆碱水平下降，临床上表现为痴呆安理申是第二个经FDA批准的一种可逆的，相对特异性乙酰胆碱酯酶抑制剂（AehE1），它可有效地选择性抑制中枢神经系统中乙酰胆碱的降解，增加神经细胞突触间隙乙酰胆碱的浓度，改善AD患者的认知功能障码，该类药价格昂贵且许多患者难以耐受这类药物。3.2 肉苁蓉（Herha Cistanches）是寄生草本植物，是名贵的中药林，为列当科植物肉苁蓉（Gistanche deerticnla Y.C.Ma）的干燥带鳞叶的肉质茎，又名金笋、地精、习称大芸。性温、味甘.咸。归肾、肠经。为补肾壮阳，润肠通便之要药，始载于《神农本草经》，列为上品。有补肾阳、益精血、润肠、通便之功效，主治阳痿、不孕、腰膝酸软、筋骨无力、肠燥便秘等，是临床常用中药之一的。由于它生长在沙漠环境中，又具有沙漠“人参”的美誉。3.3 现代药理学研究表明肉苁蓉有增强免疫，补肾壮阳，增强机体抗衰老能力，保护肝脏，抗氧化等多种功效。肉苁蓉总苷（GC3）从肉苁蓉中提取，其主要成分为苯乙醇总苷。在动物实验中肉苁蓉总苷对多种Abheimer病（AD）鼠模型有提高学习能力的功效。如刘风霞等在肉苁蓉总苷对喹啉酸所致AD小鼠学习记忆的影响实验中发现GC，可提高喹啉酸所致AD小鼠学习记忆水平，对喹啉酸造成的脑损伤有保护作用；其机制可能与其增强自由基清除酶活性，减轻脂质过氧应降低脑组织钙含量，抑制喹啉酸诱导的脑细胞调亡有关（7。罗兰等在对三氯化铝所致AD鼠模型中发现肉苁蓉总苷能提高其学习能力，作用机制可能与其增加自由基清除酶的活性，防止脂质过氧化，防止脑萎缩，保护神经功能有关。刘凤霞等还在对β-淀粉样肽所致AD小鼠模型中发现GC.能提高其学习记忆能力，GCs能降低AD小鼠脑组织丙二醛含量提高超氧化物歧化酶活性，说明GC3可增强自由基清除酶活性，有神经保护功能。王新源等［a］观察D-半乳糖（Dgal）脑老化模型小鼠海马超微结构 结果肉苁蓉总苷（GC）大剂量组（125mg＊kg＇）与正常对照组的形态结构较接近，小鼠海马CAI区神经细胞核圆，细胞器增多，染色质分布均匀。超微结构的研究表明，肉苁蓉能够延缓脑组织衰老退化。薛德钧等）将肉苁蓉提取物制成抗衰老制剂，对人体进行了清除血液中过氧化脂质的研究，结果表明抗衰老制剂能降低人体血液中的LPO值（P＜001），同时能够显著改善机体的衰老症状 恢复中老年人的精力.体力和活力，延缓衰老，综上所述 肉苁蓉总苷对AD患者具有治疗作用，能延缓痴呆的进展，效果与安理申相仿，并且价格适中，明显低于安理申，不良反应少，值得推广应用。参考文献[1)Fratighioni L.De Rene li D AgieturTartes H.Werklwide prevalener and incifence of de mentia[jl Drug Agine 1999.15,365-375. [2)Zhang ZX Zaber GE.Romam CG.et al Dementia subtypes in chim pesalence in Bijing Shanghai and Chengd(lAreh Neml 2005. 62447-453 3)Miler M M.Monjm AA Buckhol NS. Eatrigen replae ment therapy for thepotential treat ment or preveation of Alahrimerdiae(]Am N Y Acal Sei 2001.949 223 [4Mekhunn G.Drachman D. Fobtein M.et al. Clinkal diagnnsb of Alhrimer S diseang Report of the NINCDSADRDA work grosp ur derthe ampices of departerment of beath and man servios task force on Aabrimr.sdk aw[i]Nerulogy 1984.34(7),939 [5]Danis KL.Polbk WR Paney WRetal Chalne ge markers ineber ly patients whh ranly sigms of Alahrimer dswae(j).JA MA 1999. 281:1401-1406 ［6］杨翠平，苏薇薇，肉苁蓉研究进展（J）．中药林，2001.24（12）：907-909 ［7）刘风霞，王晓雯，王雪飞，肉苁蓉总苷对哇啡酸所致Alzhimer病小鼠学习记亿的影响及其作用机制（1），新疆医科大学学报2005.12.28(12):1131-1137 ［s］罗兰，王晓雯、刘风霞，等，肉苁蓉总苷对三氯化铝致小鼠学习记忆障码的保护作用（）中国新药与临床杂志 2007.26.33-36（9］刘风霞，王晓雯、罗兰等，肉苁蓉总苷对β-淀粉样肽所致阿尔采末病小鼠模型学习记忆的影响及其机制（j）.中国药理学通报。2006.22(5),595-599 （10］王新源，王晓雯，王雪飞等，肉苁蓉总苷对D-半乳糖脑老化模型小鼠海马超微结构的影响［1］中国行为医学科学，2005.14(11):966967. （11）薛德钧，胡福泉，肉苁蓉提取物对人体抗衰老作用研究G），中国现代应用药学 1997.14（5）：16-17．

王晓雯＇，蒋晓燕，邬利娅＊伊明，王雪飞，阿不都热衣木＊玉苏甫（1．新疆医科大学药理教研室，新疆乌鲁木齐．830054.2．新疆维吾尔医研究所自由基室，新疆乌鲁木齐830001）摘要：目的 研究肉苁蓉总苷体外清除自由基作用及对OH＊引起的INA损伤的保护作用。方法 采用现代生物化学发光技水，检测内苁蒙总苷对OZ，OHHO2＇O2等自由基的清除作用。并通过G22＋-Hhen-H2OrViC-DNA发光体系 研究肉 苁蓉总苷对OH＊引起的INA氧化损伤的保护作用，结果 内苁蒙总并对O2OH，H2O2O2活性氧自由基均有清除作用，其50％抑制浓度（ICo）分别为0.0731.7.031.0.098.0.1254mg＂ml，对INA化学发光的ICo为0.4211＂gmL，结论 实验结果表明，肉苁蓉总苷能有效地清除各种活性氧自由基能保护CH＊引发的DNA氧化损伤。关键词：内苁蒙总苷：自由基：DNA损伤中图分类号：R966：文献标识码：A：文章编号：1001-2494（2001）01-0029-04肉苁蓉 Cistanche salsa（C.A.Mey）G.Beek.有 补中益气、益精、壮阳之功效，据文献报道肉苁蓉可增强机体免疫力，有延缓衰老等作用，我室研究发现肉苁蓉总苷（glycosides of Cistanche，GCs）对小鼠组织的抗氧化作用及显著降低组织脂褐质含量：对大鼠心肌缺血的保护作用；并具有抗脂质过氧化和抗辐射作用，作者用化学发光法检测GCs的体外清除自由基作用及对OH·引发的DNA氧化损伤的保护作用，以探讨其抗心肌缺血和抗辐射作用的机制.1 材料和方法     1.1 材料1.1.1 药物 肉苁蓉总苷由新疆医科大学药学院植化室按日本文献（公开特许公板（A）昭63-198627）方法。从北疆产盐生肉苁蓉［Cstunche sulsa（C.A.Mey）G.Beek］中提取，主要成分为苯乙醇苷类1.1.2 试剂 黄嘌呤氧化酶，次黄嘌呤，酵母多糖。鲁米诺（hmnol）.小牛胸腺DNA、邻菲罗啉（Phen）均为Signa公司产品，其余所需试剂均为国产分析纯。1.1.3 仪器 SHG-1型生物化学发光测定仪（上海市检测技术所检测仪器厂）．HY-4调速多用振荡器（江苏医疗仪器厂），PHHS-25型pH计（上海雷磁仪器厂）。1.2 方法1.2.1 超氧阴离子自由基（O）的测定 以黄嘌呤氧化酶-次黄嘌呤-鲁米诺发光体系产生O2，按文献19方法测定，向各测量管中分别加入不同浓度的样品液100，空白对照管加100磷酸钾缓冲液。然后各管加入次黄嘌呤8004，鲁米诺50凡测本底发光强度10-最后注入黄嘌呤氧化酶50L启动发光反应，连续测定扩增的发光强度10s至出现峰值，根据各样品的抑制率求出抑制发光强度50％的样品浓度，即Coo值。1.2.2 羟自由基（OH-）的测定 以ViC-CasO：-酵母悬液-HO2发光体系产生OH：按文献方法测定，由测量管中分别加入0.3mg＊mlViC 2000.45mg＂mlCusO：4004．酵母菌200円（加时摇匀），然后分别加入不同浓度的样品液600L空白对照管加600川磷酸钠缓冲液，分别测定各管本底发光浓度10s最后注入1％的H202600摇匀，启动发光反应，连续测定发光强度10～至出现峰值，求出1Co值。1.2.3 过氧化氢（HO2）的测定 以血红蛋白-鲁米诺H：O2发光体系，按文献6］方法测定，向各测量管加入双蒸水650円，空白对照管加双蒸水700円。再分别加入不同浓度的样品液50円，混匀，加鲁米诺100后，测定各管的本底发光强度10s，最后加0.03％H2O2100L 启动发光反应，连续测定反应强度10s至出现峰值，求出样品的ICso值。1.2.4 单线态氧（O2）的测定 以NaOC1-HbO2-鲁米诺发光体系 按文献［6］方法测定，向各测量管加入pH 8.0.5mmolLNaOH 400（空白管加500 D，鲁米诺504，不同浓度的样品液100＃1．上机测本底发光后，加NaOC1 100，再立即加HO2300円。快速混合，测出10s发光强度，找出发光峰值，反应体系的总体积为950LpH8.0．求出样品的Cm值。1.2.5 对OH·引起的DNA的化学发光测定 以Gn2-hen-HO2-ViC-DNA发光体系 按文献［7］方法测定，根据要求设管，向各管加入不同浓度的样品液50円（空白管加入等体积的蒸馏水），再加入2mmd-L-＇的Phen 50L，2mmol·L-＇VaC 201.0.2 mnd-L-Cas0250＃10.1mol-L-＇磷酸缓冲液（pH 5.5）730＃1.100g“mL＇小牛胸腺DNA 50，测定本底发光强度6s后，最后加入0.5％的H2O250L启动反应（反应终体积为1mL），测定6s的发光强度，获得发光动力曲线，以抑制发光50％的浓度。表示样品对DNA的保护效果。1.2.6 数据处理 GC按4-6个不同稀释浓度检测，每个浓度5个样管，取其均数计算化学发光（CL）抑制率，用抑制最大发光强度的半数药物浓度Co表示药物清除自由基作用。2结果2.1 对OT的清除作用按O自由基产生的发光体系用SHG-1型生物发光测量仪，采用R程序立即并连续测出发光强度，以CP 10s最高，依次加入不同浓度的GC，测其对发光峰值的影响，根据峰值计算CCs各浓度的抑制率，求出抑制率与浓度之间的回归方程，再计算C，结果见表1．表1 CC对O了的清除作用Tabl The meaging dfeet of CCa on 0 浓度／l-发光峰值／cgi0。抑制率／％空白管68224±15140.38--0이x2910.3699.7%X10%7397±887.8695.6Dx1071678±516.4590.055x.10*80096士9850.5950.002x100089±1185.022.08-01x1158345±1193.170.00出y-277.69＋3.5hr．-0.858＜0.05.1Cm-7.382x10＊g＊- 结果表明，GCs对O有明显的清除作用。2.2 对OH的清除作用按OH·自由基产生的发光体系，测量方法同前。求ICo结果见表2．结果表明，GCs具有清除OH·自由基作用，2.3 对O2的清除作用按产生O2的发光体系，测量方法同前，求C结果见表3．结果表明，GCs明显清除O2自由基。2.4 对H2O2清除作用表2 GC、对CH＊的清除作用Tab 2 The cavenging efleet d GCsonOH* 浓度／g＊-L-1发光峰位／0抑制＊／％空白管16535±14%.5-0.060301577.6071.3959601786.7663.961.2x10-264291699.3361.126X36791806.6759.64X1300805.533.43女11344士28.8631.391.2x10-11502±579.6030.44注：y-05.66＋11.43s-0.8％P＜00.0-2.01x0-1 (7.031mg*ml-) 表3 GC、对C2的清除作用Tab 3 The maenging effeet d GCs en b 浓度／gt-发峰信／epd0。笑空自管247545120668.96-S803±950.4997.4552917±480.978.621.43x-48361197.8867.13IP-143989111822.1641.836.67x0-3194535119546.6721.415X0-5242089117541.502.20注：y-28.55＋42.14mmr-0.967P＜00．-1.250x0＊- (0.1254mgm-) 按血红蛋白-鲁米诺-H：O2发光体系，测量方法同前，求ICso，结果见表4．表4 GC对H：O2的清除作用Tab 4 The cawnging cflect of CCaen H20 浓度／a-1发光单值／cp0控制率％空白管29221±2050.39-X7341217.9699.31A19968士2MR．％92.021.67x0-*7075±718.2370.53-81387913086.7444.780.5x10-18276011687.78

薛海燕，焦婵媛，姚军（1．新疆产品质量监督检验研究院，乌鲁木齐830011：2．新疆医科大学 药学院，乌鲁木齐830011：3．新疆乌鲁木齐市食品药品监督管理局，乌鲁木齐830063）摘要：肉苁蓉总苷作为肉苁蓉主要活性成分，具有抗氧化和抗衰老、神经保护、缺血再灌注、提高免疫力、保肝护肝、治疗生精障碍等作用。本文主要对肉苁蓉总苷的药理学研究进展做一综述，为今后的研究和临床应用提供一定的参考依据。关键词：肉苁蓉总苷：药理作用：研究现状DOI:10.13699/j.cnki.1001-6821.2018.04.026 中图分类号：R28 文献标志码：A文章编号：1001-6821（2018）04-0486-03 Abstract:Glycosides of cistanche(GCs)are active ingrelients,which exet antioxidant and anti-aging, neuroprotection, ischemia reperfusion,immunity improvement,hepatoprotective,dyszoospermia treatment In this article,the pharmacological effects of GCs are reviewed to provide a reference for related research and clinical application. Key words:glycosides of cistanche:phamacological effeets:research status 肉苁蓉总苷（GC）是从肉苁蓉中提取得到的一类由咖啡酸、糖基和苯乙醇苷元这3个部分构成的化合物。研究表明，GCs具有改善学习认知功能、保护心肌缺血、抗氧化、体外清除自由基、增加人体免疫能力、延缓衰老等多种功效。本文就近年来关于GCs的药理作用研究作一综述，为相关研究和临床应用做为参考。1 肉苁蓉总苷来源肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉的干燥带鳞叶的肉质茎，为多年生寄生种子植物，俗称大芸。其性温，味甘、咸，归肾、大肠经，具有补肾阳、益精血、涧肠通便的功效。现代药理学研究表明，肉苁蓉具有提高性功能，调节神经内分泌，提高机体免疫功能，抗氧化，促进物质代谢，抗阿尔茨海默病，抗帕金森病等多种功能。对肉苁蓉化学成分进行分析研究，分离出了多种类型的物质，例如多糖类、苯乙醇苷类、环烯醚萜类、木脂素类、生物碱、挥发性成分等。而苯乙醇苷是肉苁蓉的主要有效活性成分，也是肉苁蓉质控的主要检查指标。2 肉苁蓉总苷的药理作用2.1 抗氧化和抗衰老近年的研究认为衰老与自由基引起的生物膜脂质过氧化有密切关系。王晓雯等指出CCs具有清除体外自由基和对OH引起损伤的DNA损伤的保护作用，并推测由于苯乙醇苷类物质分子内含有的多个酚羟基能结合体内的自由基，抑制血清、脑中超氧化物歧化酶活力的降低，抑制肝、血清丙二醛含量的升高，减轻自由基在体内的大量积累，从而使机体免受过氧化损伤。进一步的研究结果表明，苯乙醇苷总苷可以通过调节衰老小鼠机体氧化／抗氧化功能的平衡，而起到延缓衰老小鼠的衰老作用，推测这与其对SOD的保护作用和脂质抗氧化作用有关网。2.2 神经保护中枢神经退行性疾病的发病机制复杂，自由基、细胞凋亡学说是目前公认的衰老学说。GCs能够促进神经干细胞的增殖，而连娟琦认为是GCs通过改善突触形态的可塑性和维持椎体细胞数量来实现的。GCs对快速老化小鼠海马神经元突触形态可塑性的改善作用，进而改善小鼠学习认知能力障碍。GCs可以提高小鼠海马CA1区正常椎体细胞数、增加突触树突棘数量，改善突触的形态可塑性。GCs还可以降低脑组织丙二醛含量，提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性，保护细胞免受损伤，抑制B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）相关蛋白X（Bax）的表达，促进Bcl-2表达，进而提高海马区椎体细胞的存活率。GCs对多种AD鼠模型有提高学习能力的功效。能够明显改善帕金森模型小鼠的神经行为，抑制大鼠海马组织中乙酰胆碱酯酶活性和Ca＊含量，维持脑内乙酰胆碱的正常水平并提高大鼠的学习和记忆能力，提高大鼠学习记忆能力，抑制脑黑质多巴胺神经元的数量减少，增强自由基清除酶活性、防止脂质过氧化，抑制β-淀粉样肽在脑内的沉积，抑制脑细胞凋亡0。2.3抗高原肺水肿、脑水肿慢性缺氧引起缺氧性肺血管收缩、肺血管内皮功能失调和肺血管重塑，进而引发高原肺动脉高压。陶义存给与大鼠灌胃肉苁蓉苯乙醇苷10d，第8天建立大鼠高原肺水肿模型，观察各组大鼠肺组织病理改变。结果表明肉苁蓉苯乙醇苷能够改善高原肺水肿大鼠肺水肿病理改变，降低肺组织含水量，降低肺匀浆中炎症因子、丙二醛含量，提高超氧化物歧化谷胱甘肽过氧化物酶活力，提示肉苁蓉苯乙醇苷可能是通过抗氧化应激和抗炎作用改善大鼠肺水肿病症。此外，肉苁蓉苯乙醇苷还可以明显改善高原肺动脉高压大鼠的高血压症状，提示其具有一定治疗高原肺动脉高压的作用。肉苁蓉苯乙醇苷对大鼠高原脑水肿同样具有防治作用。骆新等给大鼠灌胃给药十天，第八天模拟高海拔环境72h造高原脑水肿模型，检测脑组织含水量、脑组织匀浆中炎症因子含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶含量和谷胱甘肽过氧化物酶活力，提示肉苁蓉可以作为具有预防高原脑水肿的潜在药物。2.4 缺血再灌注研究表明，缺血再灌注是常见的术后肾功能损害病理生理现象。朱军等建立大鼠缺血性休克复苏模型，腹腔注射肉苁蓉中提取的苯乙醇苷类化合物后，大鼠肾脏组织中X-染色体连锁凋亡抑制蛋白的表达明显提高，抑制肾脏细胞调亡进程。肉苁蓉醇提物还可以减轻激素所引起的肾上腺皮质萎缩，肾小管上皮细胞肿胀，保护肾功能的正常活动，提高心肌中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化酶的活性，减轻心肌超微粒结构损伤，降低过氧化脂质（LPO）含量；明显改善心肌缺血大鼠的心电图，减小心肌梗死面积，提高心肌组织中磷酸肌酸激酶活力。与此同时，在脑缺血再灌注模型中，CCs能够降低脑组织中兴奋性氨基酸的表达，对SD大鼠脑组织起到了保护作用。2.5 提高免疫力蒋晓燕等 观察GC.对经Coy射线照射后小鼠的胸腺、脾、睾丸的超微结构变化的影响。结果显示，CC可明显促进小鼠辐射后胸腺、脾、睾丸生物膜及细胞器的损伤。提示CCs通过抗氧化、促进DNA、RNA合成，保护受照小鼠敏感器官超微结构。邹利娅·伊明等发现CC还能增强受照射小鼠迟发型超敏反应，增强T淋巴细胞增殖反应和白介素2的活性，增加胸腺指数，从而维持T淋巴细胞功能的正常。2.6 保肝护肝肝纤维化是肝脏遭受反复或慢性损伤后的一种损伤与修复的过程，各种肝病多数经肝纤维化最后发展为晚期肝硬化，研究发现，CCs通过对血小板源性生长因子（PDGF）／细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）信号通路表达的调控，抑制血小板衍生生长因子-BB介导的大鼠肝星状细胞增殖活化作用0，进而抑制肝纤维化进程。2.7 治疗生精障碍赵东海等给与小鼠注射环磷酰胺造生精障碍小鼠模型后，灌胃给药肉苁蓉苯乙醇苷，结果表明肉苁蓉苯乙醇苷能够促进各剂量组小鼠精子密度和精子活率，升高睾丸组织匀浆中睾酮水平，睾丸结构清晰，生精细胞排列整齐、紧密、规则。梁华伦等建立体外精子氧化损伤模型，通过拉曼光谱技术检测精子核部DNA的变化，探讨肉苁蓉苯乙醇苷对精子氧化损伤的作用。研究结果表明，氧化损伤的精子细胞核拉曼光谱强度及光谱峰位移发生显著变化，给与肉苁蓉苯乙醇苷后，拉曼光谱强度及光谱峰位移变化得到明显抑制，证明肉苁蓉苯乙醇苷可以在一定程度上抑制强氧化剂对人精子DNA造成的氧化损伤作用。2.8 其他GC。作为肉苁蓉提取物的主要活性成分，还具有镇痛、消炎、抗疲劳、提高性能力等作用。3 讨论随着我国人口老龄化和人们对健康需求的增加，肉苁蓉作为名贵的补益类中药材具有较高的药用价值，无论在药品还是保健食品的开发利用方面都有广阔的前景和意义。近年来，对肉苁蓉的药理作用和化学成分的研究取得了很大进展，而肉苁蓉苷类成分作为其主要的活性成分，药理作用及机制也受到越来越多的重视。在此基础上，应对其具体作用机理进行更加深入研究。参考文献：[1] 孟胜喜·霍清萍，肉苁蓉有效成分对神经系统作用研究进展0、中国中医药信息杂志，2016.23（10）：123-126．[2] 国家药典委员会、中华人民共和国药典（一部）、DM］、北京：化学工业出版社，2010：126D] 陈诗雅，覃戒，杨莎莎，等，肉苁蓉的临床应用及其行效机制研究进展、海峡药学，2017.29（5）：1-4．[4] 胡佳琦-冯佳媛，肉苁蓉的化学成分和药理作用。中医临床研究-2012.4（15）26-28． [s] 王晓雯，蒋晚燕，邬利娅·伊明，等，肉苁蓉总苷体外清除自由基及对OH·引发的DNA损伤的保护作用D］。中国药学杂志，2000.36（1）：29-33． [6] 邬利娅·伊明·王晓雯，吾布力艾山，等，肉苁蓉总苷对小鼠脑缺氧的保护作用，药理通讯，2003.20（1）：73．[7] XIAO Q.YAN P.MA X.ad.Enhancing c bwme iegonenis facileates AB cearance and aats anybid plape psthogenei [.JNowmd,2014.34(29):9607-9620. [8] 连娟琦，王璐，赵军，等，肉苁蓉总苷（GG）对快速老化小鼠突触形态可蟹性的影响0］．包头医学院学报，2017.33（8）：78-80 

朱军，赵希敏（上海市宝山区中西医结合医院外科-上海 201900）【摘要】目的 建立大鼠失血性休免复苏模型，现容肉苁蓉总苷（cistanche total ghycomiles，CTG）对缺血再灌注骨损伤的保护作用。方法 将SD大鼠随机分为3组：假手术组、实验组（休免复茶组），CTG处理组，每组各10只。实验组和CTG处理组建立肾缺血-再灌注模型，治疗组大鼠给予CTG400mg／kg腹腔注射，实验组和假手水组注射生理监水。分刷检测各组血肌酐含量、尿素氮含量，就抑素C以测定管功能，流式细胞分析技术检测肾脏细胞调亡本；酶联免疫法（ELISA）检测大鼠骨组织X-染色体连锁调亡抑制蛋白（X-4inked inhibiter of apoplosis protein．XIAP）表达。结果 CTG组与实验组比较，血Cr．BUN和胱神素C均明显降低（P＜0.01），肾脏细胞调亡减少（P＜0.05），CTG可足著提高XIAP的表达（P＜0.05）。结论 内苁蓉总普对大鼠缺血再灌注肾报伤具有保护作用，可能与促进XIAP的表达有关。【关键词】肾；缺血再灌注损伤；肉苁蓉总符；染色体连锁调亡抑制蛋白；细胞凋亡；大鼠缺血再灌注（ischemia-reperfusion，1／R）损伤是失血性休克、严重创伤及肾移植、肾肿瘤手术等过程常见的肾功能损害的病理生理现象。研究表明细胞凋亡是1／R损伤所致的肾功能损伤的重要环节。X-染色体连锁凋亡抑制蛋白（X4inkedinhibitor of apoplosis protein，XIAP）是迄今发现的 最强的内源性凋亡抑制因子之一切。有关XIAP在I／R损伤后肾组织的抗凋亡研究较少。肉苁蓉总苷（cistanche total glycosides，CTG）是从列当科 植物肉苁蓉中提取分离出来的苯乙醇苷类化合物，生物功能多样，有关它在1／R损伤后的肾保护作用的研究尚少。本研究通过建立大鼠失血性休克复苏模型，建立全身性I／R损伤模型，探讨肉苁蓉总苷预处理对1／R损伤肾脏的保护作用并探讨其可能的作用机制1 材料与方法1.1 动物及分组由上海中医药大学实验中心提供的清洁级健康雄性大鼠30只，体质量（320±30）g，随机分为3组：假手术组、实验组（休克复苏组）、CTG组，每组各10只。1.2 主要试剂和仪器肉苁蓉总苷（批号：20081516）购自浙江杭州杏辉天力药业有限公司：戊巴比妥钠，Hoechst 33258、碘化丙啶，购自美国Sigma公司：鼠X染色体连锁凋亡抑制蛋白测定试剂盒（XIAP）.ELISA Kit购自上海科敏生物科技有限公司：酶标仪购自美国Thermo 公司；多参数生理检测仪购自日本 NihonKohden 公司：流式细胞仪 BDFACSAria 购自美国Becton-Dilkinson公司：24G套管针购自山东洁瑞医疗器械公司。1.3 实验方法1.3.1 动物模型的制备 SD大鼠实验前12h禁食，戊巴比妥钠（50mg／kg）腹腔注射麻醉，将大缺血再灌注（ischemia-reperfusion，1／R）损伤是失血性休克、严重创伤及肾移植、肾肿瘤手术等过程常见的肾功能损害的病理生理现象。研究表明细胞凋亡是1／R损伤所致的肾功能损伤的重要环节。X-染色体连锁凋亡抑制蛋白（X4inkedinhibitor of apoplosis protein，XIAP）是迄今发现的 最强的内源性凋亡抑制因子之一切。有关XIAP在I／R损伤后肾组织的抗凋亡研究较少。肉苁蓉总苷（cistanche total glycosides，CTG）是从列当科 植物肉苁蓉中提取分离出来的苯乙醇苷类化合物，生物功能多样，有关它在1／R损伤后的肾保护作用的研究尚少。本研究通过建立大鼠失血性休克复苏模型，建立全身性I／R损伤模型，探讨肉苁蓉总苷预处理对1／R损伤肾脏的保护作用并探讨其可能的作用机制1 材料与方法1.1 动物及分组由上海中医药大学实验中心提供的清洁级健康雄性大鼠30只，体质量（320±30）g，随机分为3组：假手术组、实验组（休克复苏组）、CTG组，每组各10只。1.2 主要试剂和仪器肉苁蓉总苷（批号：20081516）购自浙江杭州杏辉天力药业有限公司：戊巴比妥钠，Hoechst 33258、碘化丙啶，购自美国Sigma公司：鼠X染色体连锁凋亡抑制蛋白测定试剂盒（XIAP）.ELISA Kit购自上海科敏生物科技有限公司：酶标仪购自美国Thermo 公司；多参数生理检测仪购自日本 NihonKohden 公司：流式细胞仪 BDFACSAria 购自美国Becton-Dilkinson公司：24G套管针购自山东洁瑞医疗器械公司。1.3 实验方法1.3.1 动物模型的制备 SD大鼠实验前12h禁食，戊巴比妥钠（50mg／kg）腹腔注射麻醉，将大鼠仰卧位固定，左下腹部作3cm的切口，分离股动脉，置入24G的套管针，连接多参数生理检测仪，测得大鼠平均血压为（113±15）mmHg，20ml注射器肝素化接三通器放血，血压降至40mmHg（1mmHg＝0.133 kPa），认为休克开始，维持该血压90min，放血量为（13±3）ml，然后将注射器内的自体血缓慢回输，需要30min左右，血压恢复至基础值的90％以上，认为复苏成功。将套管针拔出，结扎股动脉，缝合切口。待大鼠清醒后放回饲养笼观察，自由进食水。在复苏后24h用戊巴比妥钠（50mg／kg）腹腔注射麻醉、剖腹，下腔静脉采血5ml，立即处死大鼠，取出左右双侧肾脏备用。1.3.2 用药方法 CTG处理组在大鼠放血前2h给予CTG，按400mg／kg的剂量注入腹腔。实验组放血前2h予3ml生理盐水腹腔注射：假手术组仅行麻醉、剖腹和分离股动脉置套管针以及缝合切口等，不行放血以及复苏，其余同实验组。1.4 检测指标及方1.4.1 血BUN、Cr、胱抑素C含量的测定 其抑胱素C是一种肾小球滤过率变化的内源性标志物，当肾功能受损时，肾小球滤过率下降，胱抑素C在血液中浓度可增加10倍，胱抑素C的诊断准确性明显优于血清肌酐。血BUN、Cr、胱抑素C含量交本院检验科测定。1.4.2 细胞凋亡率测定 流式细胞仪检测肾脏细胞凋亡率。取肾脏用刀片切碎，加少许PBS移入试管中。加入0.3％胰蛋白酶在37℃水浴箱中消化，孵有20min，待试管内物质变浑浊即加2倍的PBS以终止消化，用300目尼龙网过滤，弃去杂质，以低温离心机离心，离心半径8cm，12000 r／min，离心5 min，弃去上清液，调细胞浓度为1～1.5x10／ml，取以上细胞悬液0.4ml，加入1.2 ml Hoechst 33258（10μl／ml），避光37℃水浴箱孵育，试管加盖，5 min后加PBS漂洗，离心半径8cm，12000r／min离心5min，弃去上清液，同法再漂洗1遍。加PI0.4ml，染色5min后上机检测肾脏正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞的百分率。依据各类细胞对此两种染料的亲和力得知：仅有PI着色的为死亡细胞，仅有Hoechst 33258着色的为凋亡细胞，两者均不着色的为正常活细胞。1.4.3 酶联免疫法（ELISA）检测大鼠肾组织内XIAP表达 取各组肾脏，用组织裂解液处理新鲜肾组织。低温离心机12000r／min离心5min，取上清按XIAP ELISA Kit试剂盒说明书操作，由上海交大丰核科技有限公司负责检测。1.5 统计学处理各组实验数据用±s表示，采用SPSS 17.0软件进行统计学分析，P＜0.05为差异有统计学意义。2结 果肾脏功能指标Cr、BUN和胱抑素C值3组间差异均有统计学意义（P＜0.01）：实验组较假手术组均明显升高（P＜0.01），说明大鼠肾脏I／R 模型制备成功：CTG组与实验组比较，Cr.BUN和胱抑素C值均明显降低（P＜0.01）。肾脏细胞凋亡率：假手术组肾脏组织只有极少数细胞发生凋亡，凋亡细胞占0.42％±0.08％，实验组细胞凋亡明显增多，占18.22％±5.32％（P＜0.01），CTG组与实验组比较，细胞凋亡数减少，为12.71％±3.81％（P＜0.01）。CTG对I／R损伤肾组织XIAP表达的影响：假手术组仅有较微弱的XIAP的表达，实验组XIAP表达显著增加，（P＜0.01），与实验组比较，CTG组可显著提高XIAP的表达（P＜0.05），见表1。表1 各组大鼠肾脏功能指标Cr．BUN和胱抑素-C值Tab.1 Renal function indeses in three groups 组别BUN/(mmal*L-')Cl(mmol+L.-)脱神素C／（mg＊L-）调亡细胞率／％(-TH)/dVIX假手术组1.18=0.2365.1*6.200.78±0.110.42±0.080.125±0.013实验组4530.41131.4=12.72.23.*0.63°18.22x5.320.435±0.029*CTG处理组2.37=0.59*81.3+5.71*1.10x0.21*12.71*3.81*0.652±0.031与假手术组相比，P＜0.01：与实验组相比，P＜0.05，＊P＜0.013讨 论缺血再灌注肾损伤的机制十分复杂，是多种因素作用下通过许多途径发生的病理过程，诸如钙离子超载、脂质过氧化损伤、细胞凋亡和坏死等，其中caspase 依赖的细胞凋亡是1／R肾脏损伤诱导的肾小管上皮细胞损坏的主要形式之一0。凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein，IAP）家族是至 今发现的哺乳类细胞中唯一的内源性半胱天冬酶（caspase）抑制物，能有效阻止细胞凋亡的发生。XIAP是IAP家族中对caspase 抑制作用最强的成员，可抑制多种病理刺激引起的细胞凋亡，对损伤器官起到保护作用。目前肾1／R 损伤动物模型的建立方法多为切除一侧肾脏，夹闭另一侧肾蒂或肾动脉，模拟肾移植的状态。本研究采用的是失血性休克／复苏模型，更加接近临床的创伤休克时出现的全身性缺血再灌注的病理生理过程，本实验中，SD大鼠的血BUN、Cr、胱抑素C量显著提高，肾功能严重受损，是较理想的研究1／R肾损伤等的动物模型。CTG是中药肉苁蓉的重要药用成分，肉苁蓉，性温，味甘、咸，归肾、大肠经，始载于神农本草经。《本经》：主五劳七伤，补中，养五脏，强阴，益精气：《本草汇言》：肉苁蓉，养命门，滋肾气，补精血之药也。肉苁蓉在我国使用已有两千年，在历代增力配方中居第1位，在滋补配方中仅次于人参居第2位，研究表明肉苁蓉具有提高性功能，调节神经内分泌，提高机体免疫功能，抗氧化，促进物质代谢，保护缺血心肌等多种功能。作为肉苁蓉主要药用成分，CTG的作用是多方面的。在脑缺血再灌注模型研究发现，CTG能够降低缺血再灌注后脑组织的兴奋性氨基酸对SD大鼠脑组织起到保护口。CTG对小鼠组织有抗氧化作用，对小鼠急性脑缺氧和小鼠心肌损伤有一定保护作用。CTG能够显著改善帕金森模型小鼠的神经行为、抑制脑黑质多巴胺神经元的数量减少例。通过增强自由基清除酶活性、防止脂质过氧化、抑制β-淀粉样肽在脑内的沉积以及抑制脑细胞凋亡，CTG 显著提高β-淀粉样肽所致阿尔采末病小鼠的学习记忆能力［］。本研究显示，应用CTG预处理后，大鼠血BUN、Cr、胱抑素C含量显著下降，肾功能损害减轻，CTG 使得1／R 损伤肾组织中调亡抑制蛋白XIAP增加，阻断细胞凋亡的发生，对损伤肾脏起到了保护作用。【参考文献】[1] Cassis P. 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朱军，赵希敏（上海市宝山区中西医结合医院外科·上海201900）【摘要】目的 建立大鼠失血性体免复苏模型，观察内放装总并（cistanche total glycosides，CTG）对缺血再灌注肾损伤的保护作用。方法 将SD大鼠随机分为3组：假手术组、实验组（休充复茶组），CTG处理组，每组各10只。实验组和CTG处理组建立肾缺血-再灌注模型，治疗组大鼠给于CTG 400mg／kg 腹腔注射，实验组和假手术组注射生理盐水，分刷检测各组血凯研含量、尿素氮含量、就抑素C以测定骨功能，流式细胞分析技术检测肾脏细胞调亡率；酶联免疫法（ELISA）检测大鼠肾组织X-染色体连锁调亡押制蛋白（Xlinkel inhibitor of apoptosis protein，XIAP）表达。结果 CTG组与实验组比较，血Cr．BUN和胱抑素C均明显降低（P＜0.01），肾脏细胞调亡减少（P＜0.05）．CTG可足著提高XIAP的表达（P＜0.05）。结论 肉苁蓉总普对大鼠缺血再灌注肾损伤具有保护作用，可能与促进XIAP的表选有关。【关键词】骨；缺血再灌注损伤；肉苁蓉总苷；染色体连锁调亡抑制蛋白；细胞凋亡；大鼠缺血再灌注（ischemia-reperfusion，1／R）损伤是失血性休克、严重创伤及肾移植、肾肿瘤手术等过程常见的肾功能损害的病理生理现象。研究表明细胞凋亡是1／R损伤所致的肾功能损伤的重要环节四。X-染色体连锁凋亡抑制蛋白（X-4inkedinhibitor of apoptosis protein，XIAP）是迄今发现的 最强的内源性调亡抑制因子之一口。有关XIAP在1／R损伤后肾组织的抗凋亡研究较少。肉苁蓉总苷（cistanche total glycosides，CTG）是从列当科 植物肉苁蓉中提取分离出来的苯乙醇苷类化合物，生物功能多样，有关它在1／R损伤后的肾保护作用的研究尚少。本研究通过建立大鼠失血性休克复苏模型，建立全身性I／R损伤模型，探讨肉苁蓉总苷预处理对1／R损伤肾脏的保护作用并探讨其可能的作用机制。1 材料与方法1.1 动物及分组由上海中医药大学实验中心提供的清洁级健康雄性大鼠30只，体质量（320±30）g。随机分为3组：假手术组、实验组（休克复苏组）、CTG组，每组各10只。1.2 主要试剂和仪器肉苁蓉总苷（批号：20081516）购自浙江杭州杏辉天力药业有限公司：戊巴比妥钠、Hoechst 33258、碘化丙啶，购自美国 Sigma公司：鼠X染色体连锁凋亡抑制蛋白测定试剂盒（XIAP）、ELISA Kit购自上海科敏生物科技有限公司；酶标仪购自美国Thermo公司：多参数生理检测仪购自日本 NihonKohden公司：流式细胞仪 BDFACSAria 购自美国Becton-Dilkinson 公司：24G 套管针购自山东洁瑞医疗器械公司。1.3 实验方法1.3.1 动物模型的制备 SD大鼠实验前12h禁食，戊巴比妥钠（50mg／kg）腹腔注射麻醉，将大鼠仰卧位固定，左下腹部作3cm的切口，分离股动脉，置入24G的套管针，连接多参数生理检测仪，测得大鼠平均血压为（113±15）mmHg，20ml注射器肝素化接三通器放血，血压降至40mmHg（1mmHg＝0.133 kPa），认为休克开始，维持该血压90min，放血量为（13±3）ml，然后将注射器内的自体血缓慢回输，需要30mn左右，血压恢复至基础值的90％以上，认为复苏成功。将套管针拔出，结扎股动脉，缝合切口。待大鼠清醒后放回饲养笼观察，自由进食水。在复苏后24h用戊巴比妥钠（50mg／kg）腹腔注射麻醉，剖腹，下腔静脉采血5ml，立即处死大鼠，取出左右双侧肾脏备用。1.3.2 用药方法 CTG处理组在大鼠放血前2h给予CTG，按400mg／kg的剂量注入腹腔。实验组放血前2h予3ml生理盐水腹腔注射：假手术组仅行麻醉、剖腹和分离股动脉置套管针以及缝合切口等，不行放血以及复苏，其余同实验组。1.4 检测指标及方法1.4.1 血BUN、Cr、胱抑素C含量的测定 其抑胱素C是一种肾小球滤过率变化的内源性标志物，当肾功能受损时，肾小球滤过率下降，胱抑素C在血液中浓度可增加10倍，胱抑素C的诊断准确性明显优于血清肌酐。血BUN、Cr、胱抑素C含量交本院检验科测定。1.4.2 细胞凋亡率测定 流式细胞仪检测肾脏细胞凋亡率。取肾脏用刀片切碎，加少许PBS移入管中，加入0.3％胰蛋白酶在37℃水浴箱中消化，孵育20min，待试管内物质变浑浊即加2倍的PBS以终止消化，用300目尼龙网过滤，弃去杂质，以低温离心机离心，离心半径8cm，12 000 r／min，离心5min，弃去上清液，调细胞浓度为1～1.5x10／ml，取以上细胞悬液0.4ml，加入1.2 ml Hoechst 33258（10μl／ml），避光37℃水浴箱孵育，试管加盖，5min后加PBS漂洗，离心半径8cm，12000r／min，离心5min，弃去上清液，同法再漂洗1遍。加PI0.4ml，染色5min后上机检测肾脏正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞的百分率。依据各类细胞对此两种染料的亲和力得知：仅有1着色的为死亡细胞，仅有Hoechst 33258着色的为调亡细胞，两者均不着色的为正常活细胞。1.4.3 酶联免疫法（ELISA）检测大鼠肾组织内XIAP表达 取各组肾脏，用组织裂解液处理新鲜肾组织。低温离心机12000t／min离心5mim，取上清按XIAP ELISA Kit 试剂盒说明书操作，由上海交大丰核科技有限公司负责检测。1.5 统计学处理各组实验数据用±s表示，采用SPSS 17.0软件进行统计学分析，P＜0.05为差异有统计学意义。2结 果肾脏功能指标Cr、BUN和胱抑素C值3组间差异均有统计学意义（P＜0.01）：实验组较假手术组均明显升高（P＜0.01），说明大鼠肾脏1／R模型制备成功：CTG组与实验组比较，Cr、BUN和胱抑素C值均明显降低（P＜0.01）。肾脏细胞凋亡率：假手术组肾脏组织只有极少数细胞发生调亡，凋亡细胞占0.42％±0.08％，实验组细胞凋亡明显增多，占18.22％±5.32％（P＜0.01），CTG组与实验组比较，细胞凋亡数减少，为12.71％±3.81％（P＜0.01）。CTG对I／R损伤肾组织XIAP表达的影响：假手术组仅有较微弱的XIAP的表达，实验组XIAP表达显著增加，（P＜0.01），与实验组比较，CTG组可显著提高XIAP的表达（P＜0.05），见表1。表1 各组大鼠肾脏功能指标Cr．BUN和胱抑素-C值Tab.1 Renal function indexes in three groups 组别BUN/(mmol·L-1)Cal(ml+L-1)胱抑素C／（mg＊L-1）调亡细胞率／％XIAP/(pg·L-り)假手术组1.18+0.2365.1+6.200.78-0.110.42-0.080.125-0.013实验组4.53±0.411314=12.7*223.0.63°18.22+5.320.435+0.029*CTG处理组2.37+0.59*81.3.5.71*1.10*0.21*12.71+3.81*0.652x0.031与假手术组相比：P＜0.01：与实验组相比，AP＜0.05．＊P＜0.013讨 论缺血再灌注肾损伤的机制十分复杂，是多种因素作用下通过许多途径发生的病理过程，诸如钙离子超载、脂质过氧化损伤、细胞凋亡和坏死等，其中caspae 依赖的细胞凋亡是1／R肾脏损伤诱导的肾小管上皮细胞损坏的主要形式之一。凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein，IAP）家族是至 今发现的哺乳类细胞中唯一的内源性半胱天冬酶（caspuse）抑制物，能有效阻止细胞调亡的发生。XIAP是IAP家族中对 caspase 抑制作用最强的成员，可抑制多种病理刺激引起的细胞凋亡，对损伤器官起到保护作用目前肾1／R损伤动物模型的建立方法多为切除一侧肾脏，夹闭另一侧肾蒂或肾动脉，模拟肾移植的状态。本研究采用的是失血性休克／复苏模型，更加接近临床的创伤休克时出现的全身性缺血再灌注的病理生理过程，本实验中，SD大鼠的血BUN、Cr、胱抑素C量显著提高，肾功能严重受损，是较理想的研究I／R肾损伤等的动物模型。CTG是中药肉苁蓉的重要药用成分，肉苁蓉，性温，味甘、咸，归肾、大肠经，始载于神农本草经。《本经》：主五劳七伤，补中，养五脏，强阴，益精气：《本草汇言》：肉苁蓉，养命门，滋肾气，补精血之药也。肉苁蓉在我国使用已有两千年，在历代增力配方中居第1位，在滋补配方中仅次于人参居第2位，研究表明肉苁蓉具有提高性功能，调节神经内分泌，提高机体免疫功能，抗氧化，促进物质代谢，保护缺血心肌等多种功能。作为肉苁蓉主要药用成分，CTG的作用是多方面的。在脑缺血再灌注模型研究发现，CTG能够降低缺血再灌注后脑组织的兴奋性氨基酸对SD大鼠脑组织起到保护。CTG对小鼠组织有抗氧化作用，对小鼠急性脑缺氧和小鼠心肌损伤有一定保护作用0。CTG能够显著改善帕金森模型小鼠的神经行为、抑制脑黑质多巴胺神经元的数量减少院。通过增强自由基清除酶活性、防止脂质过氧化、抑制β-淀粉样肽在脑内的沉积以及抑制脑细胞调亡，CTG显著提高β-淀粉样肽所致阿尔采末病小鼠的学习记忆能力。本研究显示，应用CTG预处理后，大鼠血BUN、Cr、胱抑素C含量显著下降，肾功能损害减轻，CTG 使得1／R 损伤肾组织中调亡抑制蛋白 XIAP增加，阻断细胞凋亡的发生，对损伤肾脏起到了保护作用。【参考文献】[1] Cassis P. Azzollini N.Solimi S. e al. Both datepotinalfa and carlamylated pevent kidncy graft dysfuntion due to ischemia mperfusion in ats 0]. Transplantation,2011.92:271-279. [2] WetT,Stump M.Lodygenaky G. et ad.lack of X- linked inhibior of apoptosis protein leads to incmaned apoplosis and tissue loss following nemnaal brain injury 0].Asmre,2009.1(1):43-52. [3] Xiaobing B.Huiming T.Deiven W.e al Multiple organ injuries and failres caused by shock and reperfusion D].J Trama,1996.40:135439. [4] Padanilam BJ. Cell death indared by acute renal 

木合布力·阿布力孜，毛新民，热娜·卡斯木，马淑燕，LeinhgeMukrB，G me SESP（1新疆医科大学药学院，新疆 乌鲁本齐 830054 2法国南锡第一大学药物研究中心-NSERMU525 Conte de Medianent法国 54000） 摘要：目的 观察肉苁蓉总苷（Benem）cimmosiles GC在HL60细胞中的抗氧化生物活性，方法 CC从新疆盐生肉苁蓉中提取得到：利用HL-60细胞中的氧化系统，对GC的抗氧化活性进行测定研究，HL-60细胞中自由基诱发程度由探针物 DXHH-DA的氧化产物DCF的浓度来检测，银杏叶提取物 ECB761用作阳性对照物，结果 GC以025050L-和0758·1-浓度，对自由基的抑制率分别为58％．62％和6％。其抗氧化活性与BGB761类似，结论GC在HL-60细胞氧化系统中具有很强的抗自由基氧化活性关键词：盐生肉苁蓉：肉苁蓉总苷（GC，HL60细胞抗氧化活性肉苁蓉（Cistanh ly又名大芸，是传统中药。具有补中益气，补肾益精等功效。据文献报道肉苁蓉可增强机体免疫力、延缓衰老1”，肉苁蓉总苷（Beneral cpstanosides GC5是从肉苁蓉中提取的活性成分，其有效成分是苯乙醇总苷，现代药理研究表明，GC具有抗氧化、抗脂质过氧化作用，对结扎冠脉所致心肌缺血具有保护作用”，并能保护羟基（OH）引发的DNA氧化损伤＂。近期GC对脑损伤的保护作用及老年痴呆症的防治功能等方面的实验研究成为热点。孟新珍等发现 GC对清醒小鼠脑缺血／再灌注损伤有保护作用，可以使脑组织丙二醛（MDA）含量降低和SDD活性提高，刘风霞等发现，GC可改进β-淀粉样肽和喹啉酸（QA）所致 Akheime病（AD）模型小鼠学习记忆水平，对β锭粉样肽和 QA造成的脑损伤有保护作用.Gm等＂报道，盐生肉苁蓉中提取的苯乙醇苷类总成分在（57小鼠体内对神经毒素 MPTH所致的脑神经损伤也有保护作用，有研究报道，脑内 ROS可能是 AD产生的原因之-1-m，但GC树人类 HL-60细胞内 ROS的影响尚未见文献报道。本研究采用人类 HI-60细胞为体外抗氧化实验模型，以银杏叶提取物标准品为阳性对照物2，观察 GC对 HL60细胞内 ROS的影响。1 材料与方法           1.1 主要试剂和仪器 GC：由新疆医科大学药学院植化教研室堵年生教授按日本文献［公开特许公报（A）昭632198627］方法，从北疆产盐生肉苁蓉中提取，主要成分为苯乙醇苷类；体外药理实验用药品试剂有 PMA（ Photomyrme ncentg DCHH- DA2：7＇-dihpad hidrofuosceh dincen购自 Sang Fance，银杏叶提取物标准品 EGB761（从干燥的银杏叶中提取得到）由 Beaupur Ipan公司提供（Pare Fmncg，GC和 HGB 761提取物用超纯水配制成108浓度的母液备用，DCHH-DA用乙醇稀释成浓度为30mmo C＇的溶液备用。IMA用 DMSO配制成1.6mm아 ＇浓度的溶液并在-20℃保存备用，FL600 Mcoppe Fporescence Ronder型荧光检测仪（BiTek Hhlnd Patk USY.            1.2 细胞培养 人早幼粒细胞白血病 HL-60细胞株｜human prmyepeytk kukm Hl-60） cell ling 悬浮培养于含15％胎牛血清（SBna的 RIM11640介质（SBng和2mmo） ＇的谷氨酸盐（Si8mg的培养液（含100 U-mT＇青霉素和100mg-链霉素）中，37℃．5％ CQ条件下培养传代 实验用细胞处于对数生长期，初始密度为25x10cell-1-的HI-60细胞株在含有RIM11640介质和1.3％的DMSD（二甲亚砜 Sikng的75㎡培养盒里分化4细胞计数利用锥虫蓝（Topan blue）进行，在12孔板中以每孔 2x10cell放在含 RPMI1640介质，其中含有980＃IPBS和20＃lPMA（10μm和0.758L＇）的样品溶液进行处理并培养4b然后细胞通过离心分离，PBS洗涤。细胞球在冰浴里保存直至配制要检测自由基诱发情况的混合液和测定蛋白密度为止。1.3 抗氧化活性测定1.31 样品处理 GCs和 HGB761溶液分别稀释成3个不同浓度（0.25,0.50 8-＇和 0.758＇），分别置于总体积为200的96孔板容器内。其它成分按文献所述的方法依次放入反应板内，DCFH-DA用作探针物，具体试验方法同我们前期所发表论文。1.32 自由基（ROS）活性和蛋白质密度的测定系统内 ROS诱发情况通过探针物 DCFH-DA被氧化成其强荧光产物 DCF（2,7＇-dkhbofucroscein）的定量方法来检测，即在孔板内精密加入20＃细胞悬浮液（被样品溶液处理过的25x10个细胞），20＃IDCHH-DA（40＃m-C＇）和缓冲液，37℃培养30 min 然后迅速用 FL600荧光检测仪分别在4851m的激发光和530m的发射光谱进行检测和定量，蛋白质密度用 LowD方法用胎牛血清白蛋白配制标准溶液并做标准曲线来测定，检测结果由Pmol DCF产生 minmg＇蛋白质来计算，并换算成剩余荧光强度（residua）vaue of fuorescence nansi 可来表示，即剩余荧光强度越小，对自由基的抑制活性就越强。2 结果HI60细胞用样品处理以后系统内 ROS变化结果在FB1中表示，GC在0.25 8·＇的浓度下，能抑制细胞内 MRO／HCD／HQ氧化系统所诱发的自由基浓度56％（以探针物 DCHI-DA被自由基氧化而产生的强荧光物质 DCF的剩余荧光浓度来表示，剩余荧光浓度为44％）。当GC的浓度提高到050和0.751＇时，它分别能抑制系统中自由基浓度为62％和67％（剩余荧光强度分别为38％和33％），抑制自由基活性强度与银杏叶提取物EGB761类似（在相同条件下，EGB761分别能抑制系统中自由基浓度为39％ 78％．81％）(MannWhiney tost FB1). 3 讨论本实验中发现 GC在人类 HL60细胞中的氧化系统中，显示明显强的抗氧化作用，其自由基抑制活性强度与阳性对照组 HGb761类似（活性差异无统计学意义．P＞0.05，如FB1）．由于 HL-60细胞中具有较强的 ROS系统，即MPO／HQ／HCD因此，H-60细胞现作为较新的一种体外实验模型，用于天然产物中具有抗氧化潜能物质的自由基清除能力测定，本研究利用已具有一定的防治 AI槽能的两种天然药物-银杏叶和肉苁蓉总苷提取物作为实验对象，初步观察了其在人类 Hl-60细胞中的抗自由基活性，结果表现 两种物质均具有抗 ROS作用，这可能是其抗Aheme病的机制之一，关于 GCs与此系统的作用机制和对整体动物体内 MRO氧化系统的影响有待今后进一步研究证实。EGB761 HL-60 cellline,mon iored by resun]N 参考文献：11 张涛，柳朝阳，王建杰，等，肉苁蓉总苷对 D半乳糖所致衰老模型小鼠免疫功能的影响11，中国老年宇杂志，2004 24（5）441-214.ChnLoumGemj2004 24(5):441-2李琳琳，王晓雯，毛新民，等，肉苁蓉总试的抗脂质过氧化作用和抗辐射作用11中国中药杂志，1997.23 364-2

杨波  刘曙艳河南焦作市第二人民医院 焦作 454000【关键词】肉苁蓉总苷：血管性痴呆【中图分类号】R749.1＋3 【文献标识码】B 【文章编号】 1673-5110(2010)23-0068-02我院2008-03～2010-04应用肉苁蓉总苷治疗轻、中度认知功能障碍的VD患者37例，现报告如下。1 资料与方法1.1 病例选择 70例患者均为我科 2008-03～2010-04住院患者，随机分为肉苁蓉总苷治疗组和脑复康对照组，后期经门诊随访。治疗组37例，男20例，女17例：年龄55～81岁，平均72岁：脑梗死29例，脑出血8例，对照组33例，男18例，女15例：年龄53～82岁，平均73岁：脑梗死23例，脑出血10例。所有患者均详细询问病史、严格体格检查，经影像学证实有不同程度的脑梗死、脑出血等，符合中华医学会神经病学分会制定的我国关于《血管性痴呆诊断标准草案》中的VD诊断标准，经简易精神状态量表（MMSE）测定评分为10～27分，临床痴呆程度量表（CDR）及日常生活能力量表（ADL）检测证实有瘫呆，日常生活能力下降。并在人院时均进行神经功能缺损评分和认知功能评估。排除标准：（1）卒中前已有痴呆表现：（2）卒中后有严重抑郁症：（3）意识障碍：（4）严重失语。1.2 给药方法 2组均口服肠溶阿司匹林100mg，1次／d．尼莫地平30mg／次，3次／d。治疗组加服肉苁蓉总苷．2粒／次，3次／d，服药共16周。对照组加服脑复康800mg，3次／d，服药共16周，试验过程中不服用其他改善认知功能的药物。1.3 行效评价 用药前和用药后每4周检查1次，用MMSE检测患者的认知功能，CDR检测患者的痴呆程度，ADL 检测患者的日常生活自理能力。1.4 安全性和耐受性的评价 安全性和耐受性评价每4周进行1次，直到第16周研究结束。包括不良反应、相应的体格检查与神经系统检查、生命体征检查（体温、血压、脉搏和体质量）、实验室检查（血尿常规、肝功能和血生化）、心电图。治疗前、后相比较。1.5 统计学分析 治疗前后及肉苁蓉总苷与对照组均采用检验、卡方检验。2 结果21 治疗前MMSE．CDR，ADL评分 见表1．表1 2组治疗前各量表评分结果比较 （7土s，分）组别#MMSECDRADL治疗组 3716.3±271.8±0144.4±58对照组 3317.1±2219±0247.0±5522 2组认知功能（MMSE评分）比较 治疗后肉苁蓉总苷组较对照组 MMSE评分差异有统计学意义（P＜0.01）．见表2．自身对照组治疗16周后较治疗前差异有统计学意义（P＞001）．见表3。表2 2组治疗后16周各量表评分比较 )组别MMMSECDRADL治疗组 3723.7±211.2±0239.7±5.1对照组 3319.2±3.01.6±0.343.2±4.9注：2组 MMSE．CDR．ADL比较均P＜Q 01表3 肉苁蓉总苷组治疗前后各量表评分结果 （7士s．分）量表名称治疗前治疗4周治疗16周MMSE16 3±2718.3±1.923 7±21CDR1.8±011.6±0.21.2±0.2ADL44 4±5.842.7±4.639.7±5.123 痛呆程度（CDR评分） 治疗后肉苁蓉总苷组较对照组CDR评分减低（P＜Q．05），见表2：自身对照组治疗16周后较治疗前有显著减低（P＞0.05），见表3。24 日常生活自立能力（ADL评分）治疗后肉苁蓉总苷组较对照组ADL评分减低（P＞Q05），见表2：自身对照组治疗后较治疗前明显减低（P＞0.05）。见表3。25 安全性 治疗前后血常规及肝功能血生化无明显变化，治疗组中1例出现腹泻，与药物关系不确定。3 讨论随着人们生活水平的提高，脑血管病发病率也在不断攀升。影响脑血管病患者生存质量的主要问题有两类：神经功能缺损和血管性痴呆。有研究表明，脑卒中后血管性痴呆的发病率约为20％，因此，血管性痴呆机制的研究也成为重要课题。目前，脑卒中后引起人高级智能损伤的神经生化、细胞和分子机制尚未阐明，目前存在的主要理论有：（1）胆碱能传导通路受损。（2）神经元间的接触点及突触的改变，认为突触损伤是神经功能障碍性疾病的早期的，共同的病理改变，与认知损害的联系最密切。（3）钙调素（CaM），CaM依赖性蛋白激酶II（CaMPKII）作为海马参与记忆的最重要分子在缺血时受损。（4）炎症反应在急性脑缺血后继发性神经损伤中起重要作用，（5）持续的氧自由基损伤。氧自由基在脑缺血损伤中起看重要作用。正常机体氧自由基产生与清除处于动态平衡，脑缺血时防御系统受损，氧自由基生成增加，攻击生物膜，发生脂质过氧化，多价不饱和脂肪酸被破坏，生成毒性中间产物（如脂氢过氧化物）及终末产物丙二醛等。丙二醛可交联蛋白质和磷脂上的氨基，降低膜流动性，致细胞变形，功能受损。离子，抑制并清除羟自由基的作用。本文证实，苁蓉总苷可以明显改善血管性痴呆患者的认知功能、降低痴呆程度和提高日常生活能力。其可能机制就是通过升高脑组织抗氧化酶活性，抑制脂质过氧化反应来保护脑组织免受缺血的损伤。具体的作用机制，尚有待于临床的进一步研究。

刘德华，朱咏华（1．湖南农业大学食品科学技术学院，湖南长沙 410128：2．湖南中医学院药学院，湖南长沙 410007）摘要：为了探讨用组织培养的方法生产肉苁蓉药用成分的可行性，以肉苁蓉的茎片段、花为外植体进行了组织培养试验，结果表明，茎片段，子房外植体在添加2.4-D的培养基上诱导的愈伤组织分别呈块状、颗粒状，都为白色：而在添加KT的培养基上诱导的愈伤组织都呈颗粒状，黄绿色-添加KT，NAA的MT培养基对肉苁蓉愈伤组织的诱导及其生长效果最好，愈伤组织在从外植体母体上分割继代培养前，使愈伤组织与培养基接触培养15d后，有利于愈伤组织的生长。关键词：肉苁蓉：愈伤组织：诱导中图分类号：Q949.778.3     文献标识码：A肉苁蓉 Cistanche salsa（C.A.Mey·）G-Beck是 列当科肉苁蓉属的寄生植物，有人统计，在中医历代增力处方中出现率占第1位肉苁蓉能增强人体免疫力，提高机体耐力，具有较高的药用价值·近几年来，肉苁蓉野生资源遭到了严重破坏，已列为国家2级保护植物；是国家组织种植培养、集中开发的5种中药材之一·通过生物技术方法生产肉苁蓉生理活性成分是生产肉苁蓉药用成分的途径·目前，在肉苁蓉组织培养上，已对Cistanche Deserticda的肉质茎上幼芽、鳞片与Cistanche tubulosa Wight的种子培养进行了培养基的组分、培养环境条件等的研究，但愈伤组织的诱导率较低，生长速率较慢。笔者于2001至2002年着重对青海产肉苁蓉愈伤组织的诱导进行了初步研究，现将结果报道如下。1 材料与方法1.1 材料盐生肉苁蓉取自青海，以MT培养基的无机成分（无机成分与MS相同，再加入V-B10mg／L，V-Ba 5mg／L，烟酸5mg／L，肌醇100mg／L，甘氨酸2mg／L）为基本成分，添加不同种类、不同质量浓度的固化，pH5.7．所有培养在温度25℃，每天光照时间12h，光照度1500k下进行表1 培养基组成Table 1 Composition of media      mg/L 培养基BA KT数素2.4p NAAGAS其他添加物CH活性岚MTe 0.172.00 1.000.550030.00MT51150030.00MT:10150030.00MT5150030.00MT10150030.00MT41MT411MT41MT51MT40.211.2方法1.2.1 愈伤组织诱导培养肉苁蓉经灭菌消毒洗净，切取花作为外植体F：将茎横切成长约1cm，并纵切成4～8份，取厚约0.5cm的皮层及皮下组织（含鳞片）作为外植体T：在Mo培养基上预培养．20d后，将外植体F纵切成2～4块，作为外植体F1，将外植体F：及外植体T分别置于MTo～MT，培养基上培养，每隔7d观察、记载愈伤组织诱导、生长情况。1.2.2 愈伤组织继代培养按照外植体上诱导的愈伤组织在生长过程中是否自然接触培养基生长，将外植体F，T 诱导的愈伤组织各分为2组：由外植体F上诱导的，愈伤组织在生长过程中接触培养基的愈伤组织小颗粒作为外植体FA，不接触培养基生长的作为外植体FB-由外植体T诱导的愈伤组织分割成0.009cm左右的小块：外植体上的愈伤组织在生长过程中，由于体积增大已有部分愈伤组织自然接触培养基生长的，其分割后的小块作为外植体TA：愈伤组织始终在外植体上生长，其边缘也没有接触培养基的分割小块作为外植体TB．置于MTo～MT2．MT～MT，培养基上继代培养，每隔7d观察观察、记载愈伤组织生长情况2结果2.1 培养基对诱导愈伤组织的影响在M。培养基上培养20后，外鲨体T都出境不同程度的褐化，有些甚至变黑·少数外植体开始从皮层与木质部之间出现愈伤组织，呈白色；外植体F表面没有发现有愈伤组织发生，但大多数花蕾的子房都已膨大、呈白色-外植体Fr.T置于MTe～MT培养基上培养28d后，在MT3～MT；培养基上培养的外植体，其母体及外植体T在MT。培养基上预培养诱导的愈伤组织因褐变死亡，只有在MTo～MT2，MT～MT，培养基上培养的外植体，愈伤组织继续生长或诱导出新的愈伤组织-外植体F1的愈伤组织在子房的内表面发生，都呈颗粒状，表面光滑，在MT。～MT：培养基上诱导的呈白色：；在MT～MT：培养基上诱导的呈浅黄绿色：随着培养的进行，外植体母体逐渐变黑，但愈伤组织继续生长：在外植体母体完全变黑软化后，愈伤组织逐渐褐化·外植体T转至MTo～MT2，MT～MT，培养基上培养后，在MT。培养基上预培养诱导出的愈伤组织继续生长，无愈伤组织的外植体从皮层与木质部之间诱导出了愈伤组织，呈块状；在MTo～MT2培养基上诱导的呈白色：在MT4～MT，培养基上诱导的呈粒状堆积、黄绿色·外植体F1．T都以MT，培养基的愈伤组织生长量最大（表2）表2 培养基对不同外植体愈伤组织诱导及生长的影响Table 2 Effects of the media on callus induction and growth in different explant 培养基外植体类盒伤组织形状,诱导率 愈伤组织色注/%牛长速度MT년块状、白色50慢T块状、白色33.39块状白色100MT:T块状、白色50慢LK년块状、白色33.3备T块状、白色50MT년粒状，黄绿色001较快T粒状黄绿色33.3년粒状黄绿色50MT1粒状、黄绿色66.7较快MTMT년粒状、黄绿色001最快较快TT粒状、黄绿色粒状、黄绿色66.733.32.2 愈伤组织继代培养将MT．～MT2．MT～MT，培养基上诱导、生长的愈伤组织转接或分割后分别接至原同样组分的培养基上维代培养，培养6周后的结果表明，外植体FA，TA生长量都不同程度地增加，以MT培养基的生长量最大（表3）-外植体FB．TB在上述培养基上培养28d后，都出现褐化，至42d全部褐化死亡但在对比试验中发现，将原外植体母体连同愈伤组织原封不动转至上述培养基上培养，即使培养时间较长，下部愈伤组织褐化死亡，上部愈伤组织仍继续生长表3 培养基对愈伤组织生长的影响Table 3 The influence of the media on callus growth 培养基外植体类型

摘要 对三种产地的肉苁蓉的游高还原糖及抗衰老活性成分多糖体进行了定性和定量分析。结果表明，不同产地的肉苁蓉的糖类组成及含量都不相同。关能词 肉苁蓉、抗表老、糖类、定性分析、定量分析中药肉苁蓉为列当科一年生寄生草本植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma的带满叶的肉质 茎，具有补肾阳、益精血、涧肠通便之功效＂。近年来研究表明，肉苁蓉的总提物具有提高机体免疫功能及抗衰老作用-”。我们的研究表明，内其蓉中的多糖类成分是抗衰老的主要活性成分（药理研究另文报进）。肉苁蓉主产于我国的内蒙、新種等地。其糖类成分的研究未见报道。本文对三种产地的肉苁蓉（产于内蒙古阿拉善盟、新疆天山以南、以北）的糖类成分进行了定性和定量测定。1 材料及仪器三种肉苁蓉分别由内蒙古阿拉善盟医药公司药材资源研究所、新疆乌售木齐中药饮片厂提供，由本院中药鉴定学、生药学教授范进生鉴定为肉苁蓉Ciatanche ceserticola Y.C.Mn. 721型分光光度计（上海）层析滤纸：新华冰纸展开刻：①正丁醇一毗啶一水（3：2：1.5）②吡啶一醋酸一水（3：2：1.5）显色剂：硝酸银一氢氧化铵（Tollenis-Zaffaroni）试剂。5％苯酚液：取苯酚100g，加铝片0.1g与碳酸氢钠0.05g，燕信收集182℃请分，将此信分配成6％溶液，放入棕色瓶中备用。葡萄糖标准液1mg／ml2 实验方法糖类成分预试验水浸液称取三个产地的肉苁蓉粉末各1g，分别置于100ml画底烧瓶中，加蒸信水30ml，在100℃水浴中加热约1h后过津，滤液浓结至10ml 左右。与下列试剂反应：a-萘酚Molish；垦紫红色费林 Febling 试剂：产生红色沉淀·国家自然科学基金资助项目硝酸银一氢氧化铁Tollens-Zaffaroni 试剂样品点层析纸上，喷酒试剂，在100℃加热5～10分钟，呈褐色。通过上述反应，证明三种产地内苁蓉中含有还原糖成分。酸水解液称取三个产地样品粉末各1g，首先用85％乙醇在50℃水浴中湿漫三次，合并滤液，浓缩作单糖成分纸层析鉴定用。残流用6MHC110ml，蒸馏水15ml，在沸水浴中加热1.5h，过滤，滤液用10％NaOH中和。浓缩，与下列试剂反应均呈阳性。Mollsh 试剂，Fehling 试剂、Tollen＇s-Zaffaron 试剂纸展析试验85％乙醇提取液及酸水解液经两种展开剂①②展开，用硝酸银一氢氧化铵试剂喷酒，于105℃烘烤显色，斑点与标准品对照，三种产地肉苁蓉所含游离单糖及多糖水解后单糖成分结果见表1。3 糖的含量测定还原糖的提取精确称取三个产地的肉苁蓉粉末各0.2g，分别置于50ml圆底烧瓶中，加入85％EtOH s0ml，在50℃匯温水裕中温浸30分钟，过滤，再加入85％乙醇如此提取3次，合并提取液，定容为100ml，摇句，待测定游离还原糖用。总糖的提取精密称取肉苁蓉粉末0.2g，置于50ml圆底烧瓶中，加入6MHC1 10ml，蒸馏水15ml，在沸水浴中水解1.5h，过述，用蒸谊水冲洗残渣，以酚酞为指示剂，用10％NaOH中和至微红色，最后定容至100ml，待比色测定总错。比色测定采用硫酸一苯酚显色法测定肉苁蓉中游离单糖及多糖成分的含量，多糖含量为总情含量减去游离单糖含量，结果见表1。4 结论我们首次发现肉苁蓉的主要抗衰老活性成分之一其中所含的多糖类成分，故对其糖类成分进行了研究。实验结果表明，产地不同的肉苁蓉所含的游离单糖的种类不尽相同、多糖的含量不同、且组成多糖的单糖成分也不同。至于这些多糖中单糖的连接方式及其构效关系，我们正在进一步研究中。

摘　要:在单因素实验的基础上,通过正交实验优化了德赢vwin登录 药渣中多糖的提取工艺,并对其体外抗氧化活性进行了初步研究.结果表明,最佳提取工艺条件为:提取温度９０℃、料液比１∶５０(g∶mL)、提取时间２．０h,在此条件下,德赢vwin登录 多糖提取率为５．７６％;德赢vwin登录 多糖具有较高的抗氧化活性,其对DPPH 自由基、羟基自由基具有清除能力,对铜离子有较强的还原能力.该提取方法简便易行,节能环保,适用于德赢vwin登录 多糖的提取.关键词:德赢vwin登录 ;多糖;提取工艺;正交实验;体外抗氧化活性德赢vwin登录 (Cistanchetubulosa)为列当科德赢vwin登录 Cistanchetubulosa(Schenk)Wight的干燥带鱗叶的肉质茎,又称南疆大芸、硬大芸.德赢vwin登录 生长于海拔８００~１４００m 的沙地或半固定沙丘、干涸老河床、湖盆低地等,常寄生于柽柳和梭梭的根部.德赢vwin登录 具有补肾壮阳、润肠通便、保肝、抗衰老、抗疲劳、增强免疫力及益智等功效[１Ｇ４],主治肾阳不足、精血亏虚、阳痿不孕、腰膝酸软、筋骨无力、肠燥便秘等症[５Ｇ６].国内外对德赢vwin登录 的研究热点主要集中于醇提取的苯乙醇苷类成分[７Ｇ８],其指标性成分为松果菊苷和毛蕊花糖苷.荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 是«中华人民共和国药典»(２０１５年版)收载品种,均以松果菊苷和毛蕊花糖苷为指标成分进行质量控制.研究发现,荒漠肉苁蓉多糖具有抗衰老、抗肿瘤、调节免疫力、改善人体造血功能等功效,且毒副作用小[９].德赢vwin登录 主产于新疆和田地区,已实现大面积人工栽培,其产量占全国的７０％.截至２０１７年上半年,于田县德赢vwin登录 种植面积达１１７００hm２,接种德赢vwin登录 面积为１０３００hm２,年产量突破１００００t,已作为肉苁蓉的新基原进入市场[１０].和田地区肉苁蓉企业采用醇提法提取德赢vwin登录 中的苯乙醇苷类成分,进行中成药和保健品的研发,已上市产品有苁蓉总苷胶囊、复方苁蓉益智胶囊、肉苁蓉黑米保健酒等[１１],但醇提后的药渣一般作为废物处理.作者所在课题组在实验中发现德赢vwin登录 药渣中的多糖含量较为丰富,但有关多糖有效成分含量[１２]、药理药效的报道较少.为此,作者对德赢vwin登录 多糖的提取工艺及体外抗氧化活性进行研究,拟为德赢vwin登录 多糖的综合利用奠定理论基础,促进德赢vwin登录 加工产业技术升级.１　实验１．１　材料、试剂与仪器德赢vwin登录 药渣,新疆win德赢官方 .无水乙醇、浓硫酸,天津富宇精细化工有限公司;蒽酮,上海科丰实业有限责任公司;无水葡萄糖,天津致远化学试剂有限公司;抗坏血酸,天津天新精细化工开发中心;二苯代苦味酰基(DPPH),上海梯希爱化成工业发展有限公司;新亚铜试剂、过氧化氢、硫酸亚铁、水杨酸等均为分析纯.AB１３５ＧS型分析天平,瑞士梅特勒公司;SHBＧⅢ型循环水式多用真空泵,郑州长城科工贸有限公司;EYELAOSBＧ２１００型油浴锅、EYELANＧ１００１型旋转蒸发仪,上海爱郎仪器有限公司;UVＧ２５５０型紫外可见分光光度计,日本岛津公司.１．２　方法１．２．１　溶液的配制葡萄糖溶液:精密称取１０．０８mg葡萄糖于１００mL容量瓶中,加蒸馏水溶解并定容至刻度,摇匀,即得０．１００８mg