血管性痴呆（vascular dementia，VaD）是一种多发于中老年人的脑血管疾病，以学习和记忆功能障码为主要临床表现，包括缺血性脑血管病，出血性脑血管病以及急性或慢性缺氧性脑血管病引起的痴呆。据有关资料显示，我国VaD患病率为1.1％～3.0％，严重影响患者的生活质量。随着全球老龄化时代的到来，VaD发病率呈不断上升的趋势，防治VaD一方面可以提高老年人的生活质量，减轻家庭和社会的负担，另一方面可以实现世界卫生组织提出的“健康老龄化”。VaD属中医学“痴呆”范畴，其发生主要与痰、瘀、浊、毒、虚等因素有关，临床治疗多以填精益智、补益气血、活血化瘀、化痰开窍为法。近年来，随着扶阳学术流派在中医学术界的崛起，运用温阳法治疗VaD取得了一定的成果，现综述如下。1 理论探源《素问·阴阳应象大论》曰“阴阳者，天地之道也，万物之纲纪，变化之父母，生杀之本始，神明之府也，治病必求于本”，这体现了治病求本当属阴阳，辨病的本质应从阴阳的角度出发，故痴呆的论治亦离不开阴阳。《素问·四时刺逆从论》载“阳气竭绝，令人善忘”。《灵枢·大感论》亦载：“人之善忘者，何气使然？岐伯曰：上气不足，下气有余，肠胃实而心肺虚，虚则营卫留于下，久之不以时上，故善忘”。说明痴呆的发生与阳气不足密切相关。郑钦安于《医法圆通·卷二》中日“健忘一症，固有阳虚阴虚之别，统以精神不足为主，人禀二气以生（二气即阳精阴精），固曰精气神，二气于周身，精气足，则神自聪明，精气衰，则神昏，此病老年居多”。孙思邈于《备急千金要方·养性》中指出痴呆之发病责之于”肾精竭乏，阳气日衰。《灵枢·天年》曰：“六十岁，心气始衰，苦忧悲，血气懈惰，故好卧······八十岁，肺气衰，魄离，故言善误”。王清任于《医林改错·脑髓脱》曰：“小儿无记性者，脑髓未满：高年无记性者，脑髓渐空”。进一步阐明了年事渐高、机体虚衰、阳气亏虚、阴阳不和等是导致痴呆，健忘的病机所在。卢崇汉在《扶阳讲记》中有言“心无阳则血不行，脾无阳则水谷不化，肝无阳则疏泄不行，肺无阳则宣降失司，肾无阳则浊阴凝闭。4”五脏阳气衰微，气血津液推动无力，可导致瘀血痰浊等阻滞机体，使气血难以上输脑络；而长期五脏阳气虚者，在产生瘀血、痰浊的同时，又影响着气机的条畅及气血津液的生化，从而导致阳气更虚《素问·生气通天论》日“阳气者，若天与日，失其所，则折寿而不彰”，说明了阳气的重要性。著名医家祝味菊有云“今人体质，纯阳者少，可温之证多，而可凉之证少.·····宜温者多，可清者少”国，其针对“阳常不足”的体质特点，重用桂附对于应用温阳法具有十分重要的现实意义。正如扶阳学派创始人清代医家郑钦安曰“阳行一寸，阴即行一寸，阳停一刻，阴即停一刻”，无不强调着阳气在人生命活动中的重要性。近承郑钦安一脉，由卢氏三代（卢铸之、卢永定、卢崇汉）及唐农教授薪火相传，发展并形成鲜明的扶阳思想，其理论核心“生命以火立极”-1本着“阴平阳秘，精神乃治”的观点，在治疗上以“病在阳者，扶阳抑阴：病在阴者，用阳化阴”为思路，最终实现“阳密乃固”的治疗思想。加上后世扶阳学术派的继承与发展，郑氏的扶阳思想日渐成熟及完善。2 临床应用2.1 中医治疗 VaD病位在脑，根于五脏，病性本虚标实，多发于老年患者，其虚以阳气亏虚为主，故临床选方用药以温阳立法，根据辨证的不同佐以填精补髓、补益气血、活血化瘀·泻火逐痰等方法，可取得满意疗效。罗莎等认为，现代人因生活习惯等因素多属阳虚体质，故VaD多以阳虚为主，为VaD的辨证论治和治疗提供了新的思路与方法。张瑞杰认为，温阳与化痰均是治疗VaD的关键，其将60例VaD患者随机分为2组，对照组服用尼莫地平片，每次40mg，每天3次：治疗组服用温阳化痰汤（干姜、巴戟天，桂枝、制半夏、石菖蒲、茯苓各15g，炮附子（先煎）12g，陈皮、制碱能神经功能而改善记忆。

肉从蓉补肾益精男子五劳七伤，阳痿不起、阴囊痒、小便淋沥、溺时赤时黄，可取肉苁蓉5克、杜仲3克、菟丝子3克、五味子3克、续断3克、红茶5克煎煮。取汁泡茶饮用，冲饮至味淡。1、五红汤补气养血取10粒红枣（去核）、20颗枸杞、2勺红糖、20颗红豆、20颗红衣花生。将红枣、枸杞、红豆和红衣花生洗净，放入砂锅或煲汤的罐子中。加适量水，大火烧开后用小火慢慢煲30分钟左右，煲至各原料熟烂即可。以上用量为一个成年人一天的量，温热时早晚各食用一次。此汤可补气养血，对贫血和气虚者有显著的食疗功效，还有帮助孕妇或产妇调理身体的作用。五红汤还可以作放化疗病人的辅助调理汤。因身体虚弱而痛经的女性也可以经常饮用五红汤来调理，能增强体质和明显缓解痛经的症状。2、 消渴茶调理糖尿病消渴症（糖尿病）症见：口渴欲饮，食后易饥，全身疲乏，小便次数偏多，或伴大便干结，形体日渐消瘦。或经尿糖、血糖检测，二者指数均高于正常，诊断为糖尿病的患者。可取黄芪、茯神、栝萎根、甘草、麦冬各90克，千地黄150克，研 成粗末儿备用。每日取100克～150克，放入保温瓶中，冲入沸水大半瓶。盖闷20分钟～30分钟后即可饮用，从早饮至晚，不拘次数。如饮用需量大，可以再次冲入沸水。此茶可连续饮用，待消渴基本消失，尿糖、血糖检测近于正常，可改为隔日饮用1瓶，以巩固疗效。此茶益气补中，养阴生津。3、天麻钩藤饮巧治头痛眩晕取天麻9克，川牛膝、钩藤各12克，石决明18克，山栀、杜仲、黄芩、益母草、桑寄生、夜交藤、朱茯神各9克，水煎，分2次～3次服。可平肝熄风，清热活血，补益肝肾。主治肝阳偏亢，肝风上扰证。头痛，眩晕，失眠多梦，或口苦面红，舌红苔黄，脉弦或数。眩晕头痛剧者，可酌加羚羊角、龙骨、牡蛎等，以增强平肝潜阳熄风之力；若肝火盛，口苦面赤，心烦易怒，加4、龙胆草、夏枯草，以加强清肝泻火之功；脉弦而细者，宜加生地、枸杞子、何首乌以滋补肝肾。夏日消食可饮神曲丁香茶若有胃寒食滞而纳差纳呆、胃脘饱胀、呕吐呃逆等症，可取神曲15克，丁香1.5克，放入茶杯中，沸水冲泡。代茶饮用。此茶可温中健胃、消食导滞。方中神曲为辣蓼、苍耳、杏仁、青篙、赤小豆等药、食加入面粉或麸皮共6味混合后，经发酵而成的曲剂。又名“六神曲”。其味甘辛而性温，入脾胃二经，具健脾和胃、消食调中之功，正如《本草经疏》所言：“其气味甘温，性专消导，行脾胃滞气，散脏腑寒冷”，因此神曲尤其适用于胃寒食滞的治疗。丁香“暖胃，去中寒”（《医林纂要》），现代研究也证实能排除肠内积气、促进胃肠蠕动与胃液分泌，从而有健胃开胃、消胀止痛的作用，所以可缓解脘腹胀痛，增强消化功能，减轻恶心呕吐。两者合用，共奏温中散寒、健胃消食的作用，主治胃寒食滞证。

二十世纪80年代以来，科学家们对植物多糖，特别是对中草药中的多糖研究产生了浓厚的兴趣＂，本文对五种中药单味提取物进行研究，表明五种中药均具有显著的免疫增强作用，其有效成分为多糖或糖缀合物（glycoconjugates），包括糖肽、蛋白多糖等5-4。中药可通过影响机体的免疫功能来达到防治疾病的目的。1 材料            1.1 动物 昆明健康小鼠，우含各半144只，体重18-23g（由北京肿瘤防治研究所提供）。            1.2 药物 黄芪 Astragahas memtranaces（Fisd．） Bge.var mangholicus（Bge）产于内蒙古，枸杞 Lycim barhunm L.产于宁夏，蒲公英 Taruzacum mangoliam Hand.-Mazz.产于内蒙古，苦参 Sqphara finesans AL 产于内蒙古，         肉苁蓉Cistanche deseticob Y.C.Ma产于内蒙古，水煎醇提取，提取物得率分别为：苦参175g／1000g、蒲公英 215g／1000g，黄芪310g／100g，枸杞275g／1000g，         肉苁蓉235g／1000g（由内蒙古医学院微免教研室提供）。五种药物提取物分别制成400gmL＇的初始浓度，巴氏消毒后备用。为控制制剂的质量，对黄芪、枸杞、蒲公英、苦参、肉苁蓉         进行了薄层色谱鉴别，用薄层扫描法进行了含量测定。            1.3 仪器与材料 CS-9301薄层扫描仪（日本岛津公司）：939型薄层制版器（重庆南安贝尔德仪器技术厂）；分析天平（德国赛多利斯BP211D）；硅胶G（青岛海洋化工厂，化学试剂均为分析纯；         单克隆抗体试剂盒为美国PHARHINGEN 公司产品：刀豆蛋白A和MTT分别购自Sigma公司和Fluka 公司。2 实验方法              2.1        T淋巴细胞转化反应 参照唐波等＂介绍的方法，取6～8周龄健康우含各半昆明小鼠，按体重随机分为6组（每组6只，自由取食，饮水），分别给黄芪、枸杞、蒲公英、苦参、肉苁蓉五种中药125／g＊1kgd，        灌胃给药，正常对照组给与药物等体积的PBS，连续7H，第8d取小鼠脾细胞以0.83％ Tris-NH，CI破坏 RBC，脾细胞浓度调整为5x10°＊mL-＇培养细胞后，采用适量ConA（浓度12.5g／mL）为刺激剂，用甲基                            H-胸腺嘧啶核苷（H-TdR）掺入法测定对小鼠ConA 诱导的淋巴细胞增殖反应的影响，结果以刺激指数（SI）表示，S1＝实验孔cpm均值／对照孔cpm均值。              2.2        对小鼠腹腔巨噬细胞生成IL-1的影响 取36只小鼠，分成6组，每组6只，于实验前3d ip 6％巯基乙醇酸钠2ml／只，实验时脱颈处死，ip 8ml．Hank＇s液，按文献［2］在24孔板中无菌制备和培养单层巨噬细胞，        五种中药单味提取物以无血清的 RPMI-1640液配制成125g＊ml，分别加入单层巨噬细胞1mL／孔，对照组为无血清RPMI-1640液，按文献［2］制备巨噬细胞培养上清，储存于-20℃备用，另取小鼠6只，脱颈处        死后，无菌制备小鼠胸腺细胞并加入96孔板中，0.1ml／孔，含胸腺细胞1x10个，将含有IL-1的经不同药物作用的培养上清液用培养液作14稀释，分别加入上述培养孔中，每孔504，然后每孔加入Conl        使其终浓度为11g＊ml7，另设ConA 对照孔，按文献2］所述的方法测定每孔的放射量，本方法可进行超微量分析，敏感性高，根据11-1的含量对放射量的标准曲线测定IL-1的含量。结果以pg“ml-表示。              2.3      对小鼠脾淋巴细胞生成IL-2的影响 取6-8周龄健康昆明小鼠108只，分为6组（每组18只雌雄各半，自由取食．饮水）．2-6组分别给黄芪、枸杞、蒲公英、苦参、肉苁蓉五种中药125g＊kg＇f＇，1组为       对照组，每天给与药物等体积的PBS：给药后的第5.10.15d，分别取上述6组中的每组6只小鼠摘眼球放血，脱颈处死，无菌制备、培养脾细胞收集上清，离心，除菌后，分别作112稀释，按文献［2］       测定稀释液中小鼠胸腺细胞的放射量，根据IL-2含量对放射量的标准曲线测定IL-2的含量，结果以“ml＇表示。             2.4       对小鼠脾脏NK细胞活性，T淋巴细胞亚群的影响 取36只昆明小鼠，上述水煎醇提取的中药按400g＊ml-＇-kg-＇灌胃，每日1次，疗程101，取脾研磨经200目过滤后平铺于淋巴分离液上，                         4000r／min离心20min，吸取中间云雾状细胞即可，T淋巴细胞亚群采用ABC法，用生物素-亲合素-过氧化物酶复合物作为指示剂，组成一新的生物放大系统进一步提高检测的敏感度。       它是通过生物素标记抗体连接免疫反应系统，同时借助生物素化酶或酶标亲合素引入酶与底物反应系统，NK细胞活性测定采用MTT法，MTT是是细胞线粒体脱氢酶的底物，活细胞特别       是增殖细胞通过线粒体水解，将MIT分解为兰紫色的甲簪（6muzan）结品而显色，其光密度值能够反应细胞的增殖活性。具体操作均参照试剂盒说明。             2.5       统计学方法 数据均以x土，表示，采用组间！检验进行统计比较。3 结果              3.1 对小鼠T淋巴细胞转化反应的影响 见表1．              3.2 对小鼠巨噬细胞生成L-1的影响 见表2．              3.3 对小鼠脾淋巴细胞生成IL-2的影响 见表3．              3.4 对小鼠脾脏NK细胞活性，T淋巴细胞亚群的影响 见表4．          T淋巴细胞是机体细胞免疫应答的核心，T细胞受抗原或丝裂原刺激后，从成熟的终末细胞转化为具有分化、增殖能力的免疫活性细胞。表现为T细胞数目增多、活性增强。分泌多种细胞因子，特别是11-2表达，通过自分泌作用自身T淋巴细胞使其克隆扩增和旁分泌作用作用其他的T.B淋巴细胞及NK细胞，提高机体的免疫作用。T细胞表面标志CD3．CD4．CD8表达有利于淋巴细胞识别抗原启动免疫应答。I1-1是由巨噬细胞活化后产生是T淋巴细胞活化的重要细胞因子，NK细胞是体内重要的自然杀伤细胞，特别对肿瘤的杀伤更为重要。本试验证明上述五种中药可激活巨噬细胞产生 IL-1，激活T淋巴细胞产生IL-2，活化NK细胞．使T淋巴细胞增殖及CD3．CD4．CD8表达增高，表明可提高机体的细胞免疫功能。为今后临床应用一步提供参考依据。

“一所大学最大成果就是教授们的研究成果写在祖国大地上。”正是在校长黄达人这种理念感召下，中大科学家们格外钟情边远地区特别是西部荒漠，近日，继中山大学青藏高原特色资源科学工作站建立之后，中大又与新疆和田地区墨玉县共建了“中山大学西部荒漠改造与特色资源科学工作站”。2006年成立的青藏高原特色资源科学工作站致力于在高寒地带种植贵过黄金的冬虫夏草，经过科研团队的攻关，目前已取得明显成效。而在新疆，中大科学家们将推广种植柽柳生态林寄生德赢vwin登录 及精深加工产业化。据全国政协委员、中大教育部食品与健康工程研究中心主任刘听教授介绍，德赢vwin登录 是寄生于柽柳根部多年寄生药用植物，是十分贵重的寄生药材，具有补肾、益精血、强记忆、润肠通便等功效，为历代中医使用频度最高的补肾助阳药物。现代研究发现，肉苁蓉富含的苯乙醇苷类化合物对防治血管性痴呆症具有显著疗效，尤其是具有补肾助阳及增强记忆力的药用功效，近年来迅速成为国际药理学研究的热点，市场对苯乙醇苷类活性物质含量高且稳定的优质中间产品需求量极大。但是近几年来由于对荒漠上寄主柽柳的大量砍伐及对肉苁蓉的过度采挖，肉苁蓉野生资源濒临枯竭，被国家列为二级保护植物。人工种植肉苁蓉是实现肉苁蓉资源可持续利用的根本途径，但当地人由于在人工种植过程中，对相关植物的生物学、生理学、生态学特性了解和掌握甚少，且种植过程管理落后，目前仍存在着种植柽柳成活率低、德赢vwin登录 接种率低、收获的德赢vwin登录 产量低及功效成分含量低等问题，收获的肉苁蓉平均亩产尚不足20公斤，加上传统加工过程中有效成分的严重降解和酶解，严重制约了推广种植柽柳生态林寄生德赢vwin登录 及精深加工产业化的发展。中大教授们要出手的地方就是在荒漠上推行宽窄行密植种植寄主柽柳寄生德赢vwin登录 系统集成技术，形成一套成熟完善的技术体系以及易于大面积推广的稳定、高产、优质的栽培管理模式。同时，研究团队已攻克肉苁蓉加工过程中活性成分显著降低的关键技术，提出先进的肉苁蓉精深加工核心技术，使肉苁蓉富含的活性成分苯乙醇苷类化合物含量在加工前后保持稳定，所生产的优质中间产品，可以直接作为中药饮片使用，亦可作为中间原料进一步获取松果菊苷及毛蕊花糖苷单体化合物以及肉苁蓉提取物。现在，中山大学西部荒漠改造与特色资源科学工作站已建立起 300 亩德赢vwin登录 良种示范基地、3300亩柽柳生态林寄生德赢vwin登录 高产优质GAP示范基地，优质中间产品及精深加工产业化基地工地正在建设中。

   张筱军   （陕西中医学院，陕西 成阳 712083）摘要 本文对近年来中医药治疗习惯性便秘从分型治疗、辩证论治、基本方加减、专方治疗和单味药治疗5个方面进行了总结，本病在治疗上多从益津润肠入手，以扶正为主，兼以祛邪。择药时多选用肉苁蓉、何首乌、当归、生地黄、熟地黄、蜂蜜等滋阴润肠药，以补之体作泻之用，寓泻于补，补泻兼顾。但亦可看出尚缺乏统一的临床分型、辨证施治及疗效评定标准和前瞻性、科学的、多中心的、大样本的规范研究。关键词 便秘，习惯性／中药疗法；综述中图分类号：R256.35  文献标识码：A   文章编号：1004-6852（2006）09-0054-03习惯性便秘是指原发性持续性便秘，是临床常见病，多发病，常见于中老年人。不良的饮食习惯，如食物中纤维素摄入不足、不良的生活习惯、睡眠不足、精神紧张、滥用强泻药或洗肠等常可诱发。症状常反复发作，经久不意。西医对本病多采用对症治疗，且常用泻药，多有副作用，久之易形成泻药依赖的顽固性便秘。中药因其安全，副作用少，不易附药而广受医患双方的欢迎。笔者就近年来中医药治疗习惯性便秘的概况综述如下。1 分型治疗1.1 从肝论治 李淑彦叫认为本病由多种原因导致，而肝气郁滞之病机常可见于各种证型之中。因而治疗本病应疏肝解郁，理气通腑，并由此将本病分为3型：①肝郁气滞型：药用柴胡、香附、陈皮、大黄、白芍、川芎、积实、甘草；②肝火旺盛型：药用黄芩、栀子、柴胡、丹皮、大黄各、龙胆草、薄荷、郁金、芒硝、甘草；③肝气乘脾型：药用柴胡、当归、陈皮、白芍、白术、薄荷、甘草。1.2 从肺论治 王天瑞四从肺入手将本病分为2型：①肺气虚弱型：黄芪、党参、当归、紫窕、桑白皮、杏仁、火麻仁、桔梗、枳实；②痰热阻肺型：麻黄、杏仁、石膏、甘草、紫菀、瓜萎仁、莱菔子、天花粉、枳实、肉苁蓉。1.3 从肾论冶 项风英等国认为本病病位虽在大肠，但与肾关系最为密切，由此将本症分为3型：①肾阳虚弱型：药用枳壳、附片、川芎、升麻、肉桂、熟地黄、山茱萸、当归、鹿角胶、杜仲、肉苁蓉、牛膝、怀山药、生白术、益智仁；②肾阴亏虚型：药用生地黄、熟地黄、白芍、枸杞子、麦门冬、火麻仁、山茱萸、元参、黑芝麻、枳壳、阿胶、北沙参、牛膝、怀山药、何首乌、炙甘草；③脾肾两虚型：肉苁蓉、桑椹子、生首乌、熟地黄、生黄芪、牛膝、怀山药、当归、党参、生白术、升麻、积壳、白蜜。1.4 从瘀论治 许立涛等回认为本病多为血瘀所致，因而：①气虚便秘者宜补气化瘀，药用：黄芪、白术、党参、当归、麻子仁、桃仁、牛膝、土鳖虫；②证属阴血不足者宜滋阴养血活血，药用：熟地黄、当地、麦门冬、沙参、麻子仁、牛膝、川芎、桃仁、红花；③证属阳虚，宜温阳活血，药用附子，干姜、牛膝、肉苁蓉、桃仁、土鳖虫。1.5 从气论治 高克俭国认为本病与五脏之气机关系尤为密切，从调气入手治疗，可取得良好效果：①宜发肺气，通调大便，药用麻黄、白术、杏仁、陈皮、枳壳、甘草；②疏肝理气，润肠通便，药用川棟子、柴胡、当归、川芎、槟榔、枳壳、陈皮；③补益中气，宽肠通便，药用党参、黄芪、白术、陈皮、当归、升麻、柴胡、枳壳；④温补肾气，润肠通便，药用附子、肉桂、熟地黄、丹皮、茯苓、山药、山茱萸、肉苁蓉、胡桃仁.1.6 从五脏论治 本病病变部位虽在大肠，但与五脏功能失调密切相关。王丹等回将本病分为5型：肠胃积热型，治以清热润汤通腑，药用火麻仁、郁李仁、枳实、厚朴、杏仁、生地黄、白芍、甘草、生大黄；气机阻滞型：治以理气行滞，药用木香、沉香、乌药、槟榔、枳实、莱菔子、香附、火麻仁：阴虚肠燥型，治以滋阴润肠通便，药用沙参、麦门冬、生地黄、何首乌、当归、火麻仁、郁李仁；气血不足型，治以益气养血，润肠通便，药用黄芪、太子参、白术、茯苓、当归、生地黄、何首乌、肉苁蓉、火麻仁、桃仁、枳壳；脾肾阳虚型，治以温阳通便，药用肉苁蓉、牛膝、当归、升麻、肉桂、党参、白术、火麻仁，何爱玲亦将本病分为5型：肠胃积热型，治宜清热生津润肠，药用麻子仁丸加减：肝脾郁结型，治宜行气导滞，润肠通便，药用六磨汤加减；肾虚阳衰型，治宜温阳补肾，润肠通便，药用济川煎加减；血虚阴亏型，治宜养血滋阴，润肠通便，药用润肠丸合左归丸加减：瘀血阻滞型，治宜活血祛瘀，润肠通便，药用血府逐瘀汤加减。2 辩证论冶2.1 补肾活血润肠法 黄克明自拟补肾活血润肠方（熟地黄、生首乌片、肉苁蓉、桑椹子、当归、丹参、桃仁、枳实、麦门冬、瓜萎、决明子、山楂、神曲）治疗本病 45例，总有效率为91.1％。2.2 养阴益气润肠法 王秋生例应用润燥通（熟地黄、玄参、火麻仁、升麻、牛乳）治疗本病38例，结果总有效率为100％．谭红［回自拟益气养阴汤 太子参、党参、沙参、麦门冬、熟地黄、女贞子、玄参、牛腺、积实、厚朴）治疗本病36例，总有效率达95％。2.3 益津润肠法 王怀吉叫自报益津润肠丸（肉苁蓉。当归，生首乌、火麻仁、瓜菱仁、白芍、生地黄、麦门冬、元参、杏仁、炙升麻、大黄、厚朴、枳实、炙黄芪、炙甘草）治疗本病85例，总有效率97.65％。2.4 增液润肠法 叶成德叫自拟增液润肠饮（党参、火麻仁、郁李仁、柏子仁、肉苁蓉、当归、炙甘草）治疗本病105例，总有效率达92.4％。2.5 化痰通腑法 张燕回采用化痰通腑法自报方（白术、苏子、枳实、半夏、芜活、柴胡、厚朴、防风、甘草）治疗本病60例，总有效率为96.7％。2.6 益气滋肾法 邵丽黎回以益气滋肾为治疗原则，采用调肝平秘法（白术、苍术、枳壳、黄芪、肉苁蓉）、益气增液法（白术、炙升麻、甘草、黄芪、当归、党参、柴胡、桑椹、生地黄），滋肾润便法（白术、生地黄、熟地黄、肉苁蓉、女贞子、麦门冬、当归、火麻仁、柏子仁、苦杏仁）、润肠通结法（当归、熟地黄、肉苁蓉、川芎、桃仁、枳壳、厚朴、紫嵬、瓜萎子、火麻仁）治疗本病50例，结果总有效率为92％。2.7 温阳益气法：王根荣等叫选用温阳益气的方剂（大黄、附子、人参、干姜、黄芪、肉苁蓉、当归、甘草）治疗本病403例，并与大黄苏打片对照，总有效率达90.08％，明显优于对照组的70.15％。2.8 补肾健脾法 宋海波等叫以补肾健脾为法组成通便灵1号方（白术、肉苁蓉、生首乌、瓜萎仁、当归、生地黄、黄精）治疗本病117例，并与西药西沙比利片对照，结果治疗组总有效率为98.3％，对照组总有效率为86.7％．2组比较有显著性差异（P＜0.05）。2.9 肃肺补肾法 简波自拟肃肺补肾汤（葶苈子、杏仁、熟地黄、山药、茯苓、柏子仁、黄芪、酸枣仁、制首乌、肉苁蓉）治疗本病 52例，总有效率为90.3％。2.10 活血养血法 王奎平明采用活血养血法自报调便汤（生地黄、熟地黄、当归、生首乌、火麻仁、肉苁蓉、积壳、桃仁、红花、皂角刺）治疗本病83例，总有效率为97.6％。3 基本方加减余守雅［用《金匮要略》枳术汤加减治疗老年习惯性便秘患者68例，总有效率为93％．高玉祥等叫用丹相道通散加味治疗本病83例，并与西沙比利对照，结果治疗组总有效率为95.2％，明显高于对照组的69.5％（P＜0.05）。肖天宝等］用五磨饮子加味治疗本病42例，对照组30例服用通便灵，结果治疗组总效率97.6％，对照组76.70％，2组比较，治疗组明显优于对照组（P＜0.01），聂桂宁回采用增液汤加味治疗本病50例，并与用麻子仁丸治疗同类病例45 例进行比较，结果治疗组总有效率为100％，对照组为84.4％．2组疗效有显著性差异（u＝3.12，P＜0.05）．张延敏等四认为本病的病机关键为肝气部结，肺胃气逆所致，治疗当以疏肝理气，肃降肺胃，《伤寒论》四逆散恰为治疗肝气郁滞之基本方剂，因面采用四逆散加减治疗本病取得了理想的效果，明红国采用平胃散加味治疗本病77例，总有效率为88.2％．赖崇杰四认为本病是由于机体阴虚血燥，火盛水亏，致津液不生，传导失职而生，治以养血滋阴，方用芍药甘草汤加味治疗本病50例，取得通便的预期效果，未见任何不良反应。4 专方治疗李秀娟叫将确诊为本病的患者79例随机分为治疗组45例（服用六味能消胶囊），对照组34例服用麻子仁丸），结果治疗组总有效率为97.78％，明显高于对照组82.35％（P＜0.05）。刘海叫采用秘得康冲剂治疗老年习惯性便秘90例，并与同期采用西沙必利治疗的45例做对比观察，结果治疗组有效率为95.56％，对照组为84.44％．2组比较有显著性差异（P＜0.05）。马伟明等叫将确诊为本病的92例患者随机分为观察治疗组（32例），对照1组（30例），对照2组（30例）。观察治疗组口服益气润肠口服液，对照1组口服麻子仁丸，对照2组口服苁蓉通便口服液，结果观察治疗组治总有效率96.9％，对照1组总有效率86.7％，对照2组总有效率90.0％，观察治疗组与对照1组．2组的治怠率比较有显著性差异（P＜0.05）。沙建飞回认为气虚气滞为本病的主要病理机制，采用习合剂治疗本病288例，并与60例服用西沙比利者作对照，结果治疗组总有效率为98.9％，对照组总有效率为85.0％．2组比较有显著性差异（P＜0.05），苏全胜回采用纯中药制剂保肾片治疗老年习惯性便秘60例，结果总有效率达95％，未发现不良反应，周瑞球等把300例确诊为本病的患者随机分通便合剂治疗组（治疗组）200例与果导片治疗组（对照组）100例。结果治疗组总有效率为96.5％，对照组总有效率为69.0％，经统计学处理有显著性差异（x72.56，P<O.01. 5 单味药治疗5.1 草决明 李树标国采用单味草决明冲泡代茶饮治疗本病86例，结果总有效率达96.51％。兰翠等回用炒草决明治疗本病亦取得了良好的疗效。5.2 菜菔子 李晨等叫采用单味炒菜菔子冶疗本病67例，总有效率达98.5％。5.3 大黄 苗风岗等国用大黄粉治疗本病50例，并与单纯用西药（西沙比利）进行对照，结果治疗组总有效率为98％，对照组为88％．2组比较有显著差异（P＜0.05）。5.4 番泻叶 王东用单味番泻叶冲泡当茶饮治疗本病64例，结果总有效率达96.6％。5.5 车前草 孙荣跃等阿用车前草鲜叶治疗本病100例，结果总有效率达95％，且未发现明显不良反应。5.6 鱼腥草 姜美香国以鱼服草用白开水浸泡后代茶饮治疗本病61例，结果总有效率达100％。5.7 牛劳子 李贯彻罓单用牛劳子用开水泡后代茶治疗本病40例，总有效率90％，疗效优于对照组便秘通组（总有效率87.5％）。5.8 蔓荆子 董俊峰回采用蔓荆子60g煎汤200ml，口服，3次／d，治疗本病，疗效显著。6 结语综上所述，视观近10a来发表的治疗习惯性便秘的文章，我们可以看出：①在治疗上多从益津润肠手，以扶正为主，兼以祛邪。认为津亏肠燥是本病发生的关键所在，择药时多选用肉苁蓉、何首乌、当归、生地黄、熟地黄、蜂室等滋阴润肠药，以补之体作泻之用，寓泻于补，补泻兼顾。②单味药的治疗作用已经得到肯定。如草决明，菜藤子等已从临床、实验、药理等多方面证实其治疗本病的良好作用，从而为利用现代化科技手段开发中药新药提供了思路和方向。③剂型多为传统的汤剂、丸剂、散剂、冲剂、胶囊剂等，缺乏用于急诊的现代化的射剂。④缺乏统一的临床分型，辨证施治及疗效评定标准；缺乏相应的基础研究及实验研究，临床与实验结合者更少。⑤多为回顾性研究，缺乏前瞻性、科学的、多中心的、大样本的规范研究。因此，只要总结前人经验，克服上述不足，定能开发出治疗本病的优质、高效、科学的新型中药新药。参考文献[1] 李淑彦，习惯性便秘从肝论治体会（J】.河北中医药学报，2003.18(11)23-24. 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[29] 沙建飞．习格合剂治疗习惯性便秘288例［J］，中国中西医结合脾胃杂志，2000,8（0：236．[30】 苏全胜，保肾片治疗老年习惯性便秘患者60例疗效观察【JI．中成药，1998.20（3）：27．【31] 周瑞球，黄成初，通便合剂治疗习惯性便秘300［J］．中国中西医结合杂志，1998.18（6）：377．【32] 李树标，草决明治疗习惯性便秘86J］，浙江中西医结合杂志，2004,14（3）：174．兰军，王建芹，岳淑玲，炒草决明治疗习惯性便秘［J］，山东中医杂志，2003.22（3）：145．【34] 李瑟，李全梅，炒菜单子治疗习惯性便秘的临床观频 J1。对珍国医国药，2003.14（8）：455【35] 苗风岗，李颖，大黄治疗习惯性便秘50例J1，实用中医药余志，2004.20（1）：16-17王东，香西叶泊疗习惯性便秘64例体会［J］．现代中西医结杂志，2001.10（12）：1184．【371 孙荣跃，林建江新鲜车前草治疗习惯性便秘100例效果观察［J1．浙江中西医结合杂志，2000.10（3）：183．[38] 姜美香．鱼腥草治疗习惯性便械］．山东中医杂志，1995，14(8):373 【39] 李贯彻．单味牛子治疗习惯性便税［J］．中医杂志，1997，38(12):709. [40] 董俊峰，蔓子治疗习惯性便税J1．中医杂志，2000.41(12):713. （收稿日期 2006-02-16）

高建德！，刘雄”，魏舒畅！，金辉2，范凌云2（甘肃中医学院，甘肃，兰州730000）摘要目的；研究纤维素酶提取肉苁蓉中苯乙醇苷的工艺。方法：以肉苁蓉中苯乙醇苷作为评价指标，分别考察体系酶用量、酶解温度、料液比，酶解时间，并采用正交优化最佳工艺。结果：纤维素酶解肉苁蓉中苯乙醇苷最佳工艺参数为：纤维素酶0.1％、酶解温度为55℃，酶解时间为2.5h；结论：本方法简便有效，肉苁蓉有效成分提取率高，为对肉苁蓉深入研究奠定基础。关键词 内苁蓉 苯乙酵苷 纤维素酶 提取工艺肉苁蓉 Herba Cistanches 为肉苁蓉属植物干燥带鳞叶的肉质茎，始载于《神农本草经》，列为上品，具有补肾阳、益精血、润肠通便之功效，主治男子阳痿、女子不孕等证，有“沙漠人参”之称，列为国家二级保护植物，并收入《国际野生植物保护名录》四。其有效成分主要为苷类化合物、黄酮、多糖等，而苷中苯乙醇苷类成分，为目前研究的热点，主要作用是调节内分泌，促进代谢和强壮作用以及清除自由基和抗衰老作用。纤维素是植物细胞壁的主要成分，也是胞内有效成分溶出的主要屏障，纤维素酶可以破坏细胞壁，有利于有效成分的溶出［21，本文首次采取纤维素酶法结合水煎提取肉苁蓉中苯乙醇苷，并采用正交实验优化了其酶解提取条件，为肉苁蓉药材资源及工业化生产提供了初步的理论依据。1 材料与仪器肉苁蓉购于甘肃省安宁医药公司，经甘肃中医学院鉴定教研室杨扶德老师鉴定为列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma的干燥带鳞叶的肉质茎。（略）2 实验方法与结果2.1 方法（略）2.2 提取条件单因素考察2.2.1 不同料液比的影响 准确称取肉苁蓉药材10g，取20mg纤维素酶，于45℃条件下酶解2h，设置5个不同的料液比分别为1：6、1：8、1：10、1：12、1：15，酶解后迅速加热至90℃灭酶活10min，其他工艺同2.1项下。随着料液比的增加，苯乙醇苷得率也相应增加，料液比为1：8之后，增幅相对不大，料液比为1：10、1：12时苯乙醇苷得率影响甚小。2.2.2不同温度的影响 准确称取肉苁蓉药材10g，取20mg纤维素酶，加8倍量水，分别在 40、45、50、55、60℃下处理2h，酶解后迅速加热至90℃灭酶活10min，其他工艺同2.1项下。苯乙醇苷测定按2.3.4项下，结果见图2。酶解温度对肉苁蓉中苯乙醇苷含量的影响较大，从40℃开始，随着温度的升高，肉苁蓉苯乙醇苷显著增加，当温度为55℃时，苯乙醇苷的得率达到最大值。当温度超过55℃以后，苯乙醇苷得率开始下降，表明肉苁蓉中苯乙醇苷的最佳酶解温度为55℃。2.4.3 不同时间的影响 准确称取肉苁蓉药材10g，取20mg纤维素酶，加8倍量水，于55℃条件下酶解，设置5个酶处理时间分别为1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h，酶解后迅速加热至90℃灭酶活10min，其他工艺同2.1项下。苯乙醇苷测定按2.3.4项下。   

 1．新疆生产建设兵国林业工作管理总站，乌鲁木齐830013：    2．塔里木大学 植物科学学院，新疆阿拉尔 843300：    3，新疆生产建设兵国 第八师149团，新疆 石河子832052；    4，新疆生产建设兵团第十二师西山农牧场农业发展服务中心，乌鲁木齐830089）摘 要：天然分布并主要栽植于南疆地区的德赢vwin登录 具有重要药用价值。针对其我植技术尚不完备的问题，在实践经验基础上，提出了北疆地区德赢vwin登录 栽培技术，包括寄主植物和土地选择，适宜寄主多枝柽柳、多花柽柳育苗及造林技术，接种时间与方法，接种后寄主施肥、湿溉、病虫及杂草控制技术，产品收获与处理技术等，可为北疆地区德赢vwin登录 栽培推广提供技术参考。关键词：德赢vwin登录 ：栽培技术；接种：寄主：新疆北部德赢vwin登录 （Cistanche tubulosa）为列当科（Orobanchaceae）肉苁蓉属多年生寄生草本植物，因具有重要药用价值而受到广泛重视［1-】，新疆南部既是其天然分布区0，也是主要的人工大面积栽培区，受客观条件限制，栽培模式、规模化高效栽培技术不成熟。为此，在第八师149团生产实践基础上，总结提出新疆北部德赢vwin登录 人工栽培技术，以期促进德赢vwin登录 规模化产业化发展。1 寄主植物的选择与造林技术1.1 寄主植物的选择 1.2 寄主育苗柽柳属植物是德赢vwin登录 的寄主，我国现有19种，其中新疆分布有15种［］，试验成功接种者有多枝柽柳、多花柽柳、蜜花柽柳、异花柽柳、甘肃柽柳、中国柽柳、紫杆柽柳、塔里木柽柳、白花柽柳、垂枝柽柳等，其中接种率较高者有多枝柽柳、多花柽柳、蜜花柽柳。原生于重度盐碱土壤的长穗柽柳、短穗柽柳、细穗柽柳、短毛柽柳等，不但接种率低，而且栽植在盐碱度较低的地段反而生长发育不良，影响德赢vwin登录 产量5-刀，不宜作为寄主植物选择利用，北疆地区德赢vwin登录 栽培寄主应主选多枝柽柳、多花柽柳。月中旬进行育苗，事先用机械铺好1.2m地膜和双毛管代用，选择多枝柽柳，多花柽柳当年生枝条截取长10～15cm，粗0.8～1cm插穗并捆扎成小捆，浸泡生根粉12h后插入铺好的滴管毛管两侧，芽眼向上，地面露高5～8cm，行距30～40 cm，株距5～8cm，及时滴水灌溉：依据生长发育节律全年滴水灌溉6～8次，9月前控水确保技条木质化，浇足冬灌水，确保冬牙饱满：施肥（以N肥为主）4次，施肥量全年600 kg·hm；生长发有期间定期抹芽2次：精细管理扦插育苗成活率可达到90％～95％，每公顷优质苗木产苗量8.2万～9.0万株，最多可达10.5万株。1.3 寄造林与管理1.3.1 灌溉设施布置 以滴灌造林方式为主，滴灌管网铺设根据寄主株行距配置而定，采取行距1m，3.5m宽窄行，滴灌管网按一行寄主一条滴灌毛管布设，滴灌管与条田方向一致，南北向布置，滴头流量为2.0L·h”，毛管为黑色PE压力式补偿管，管径18mm，滴头工作压力0.15 MPa，滴灌带长度50～80m，一块条田可双向布置滴灌带。支管垂直于毛管，主管和支管用闸阀连接，支管上打孔连接毛管，毛管间距窄行之间1m，滴头间距1m，宽行之间3.5m。寄主株行距配置相应是1mx1m．1mx3.5m，以提高土地利用率和接种率，便于机械化作业。1.3.2 寄主苗木定植 培育德赢vwin登录 应选择沙层厚度在60～80cm以上的沙土地，采用人工植苗造林，春秋两季皆可，春植宜早不宜迟，解冻后立即进行，秋植安排在苗木落叶后，封冻前必须栽完，选用1a生优质大苗、壮苗，严格按技术要求操作，裁植与灌水同步进行：定植前用保水剂溶液蘸苗木根系，定植于每个滴灌管滴头处，每穴定植1株，定植穴直径，深度为30cmx40 cm，深度不得低于40cm，把苗木根系垂直平坦放入定植穴中，定植深度以根系以上5～10cm处为标准，覆土后踩实以免跑墒，随栽随滴水。寄主成活率高低是影响德赢vwin登录 产量的关键因素之一，生产中寄主成活率一般必须达到85％以上。1.3.3 寄主定植后接种前管理（1）灌水与施肥节水滴灌，全年灌水4～5次，每次灌水量690㎡·hm-3，为确保肉苁蓉绿色环保，不可施化肥，条件的可在定植前施农家肥做底肥。（2）病虫害及杂草防治为确保肉苁蓉品质，病虫害及杂草防治不能采取化学药剂，宜采取物理、生物、人工等方法，防治鼠、兔啃食，定期清除沙拐枣、琵琶柴、芨芨草等田园杂草，保持田园干净透风透光，减少土壤养分和水分损耗，促进寄主健壮生长。2 人工接种肉苁蓉2.1 人工接种前接种纸制作德赢vwin登录 种子寿命非常长，可埋入沙土中数十年而不失去生命力，种子细小而繁多，千粒重0.09g左右，每克种子9000～11 000粒［0-8］，接种前将种子和吸水纸用高锰酸钾消毒待用，先将吸水纸一面刷上消过毒的粘性土，并将处理好的种子均匀撤在吸水纸上，再用同等大小的吸水纸覆盖在上面，晾干待用。2.2 人工接种方法2.2.1 接种时间 春、夏、秋季都可接种肉苁蓉，最佳时间为春季，寄主苗木根系复苏生长迅速，可大大提升接种率。接种年份有2种方式，一是寄主定植时接种，二是寄主造林成活后1～2a内接种。寄主定植时接种肉苁蓉：首先挖定植坑，长60 cm，宽40cm，深40～60cm，将长方形坑的一头做成斜面（45＊左右），横放上种子纸，吸水纸面向上，回填适量土，在另一头裁植寄主，回填土，踩实，及时滴水，滴水管铺设在窄行中间。寄主造林成活后1～2a内接种方法有三种。（1）穴式接种在窄行中间距寄主50cm处选择接种坑位置，长、宽、深为40、40.40～60 cm，将接种坑底部做成面向寄主的斜面（45°左右），种子纸铺在斜面上，吸水纸面向上，回填土，为提高集约化条件下单位面积产量，也可在种子纸上回填适量土，撒上100粒左右的种子（经处理），并与沙土拌匀，将接种坑填平，（2）开沟接种在窄行寄主行间，距寄主50cm处开沟，沟宽40 cm．深40～60cm，先将接种沟底做成面向寄主的斜面（45°左右），铺上种子纸（吸水纸面向上），回填土（也可在沟内撤上经处理的种子，平均每株对称100粒左右，每米沟长300粒左右，与回填的适量沙土拌匀），将沟填平，滴水管铺设在寄主与接种穴中间，利用植物根系趋水性，促进寄主根系向种多次寄生，一次寄生多次采割，连续收获3～4a．气温降至-15℃时，德赢vwin登录 就会发生冻害，而北疆冬季最低气温可降至-38℃，为避免冻害，一般应在11月上中旬采收。鲜德赢vwin登录 产量，接种当年一般900～1500kg·hm-，第二、三年为高产稳产期，一般3.000～3800 kg＊hm-，第四年以后产量下降，采收后应复播滴水，灌透灌足，将收获的德赢vwin登录 采取机械或人工方法切片，厚1～1.5cm，摊平晾晒在通风避雨处，切忌暴晒，以免肉苁蓉片卷曲，影响品质。参考文献：［1］刘国库，居鹏飞，杨太新，等，德赢vwin登录 的物学研究进展D］．中国现代中药·2015.17（4）：399-405．[2] 马东明·杨太新，陈庆亮，等，德赢vwin登录 与柽糖试管苗离体接种的研究［］．植物学通报，2005,22（6）：687-691．[x] 陈虞超，张丽，巩福，等，德赢vwin登录 人工控制寄生技术研究［］．时珍国医国药-2017-28（10）：2507-2510．[4] 尹林克，中亚竞溪生态系统中的关键种一杨柳［J］千旱区研究，199.12（3），43-47．[s] 孙永强·那兴国·陆中元，等，新疆内苁蓉资源及人工种植研允初保［J］．千旱区资源与环境，2003.17（3），123-127。[6] 居鹏飞，阵庆亮，委勇，等，德赢vwin登录 及其奇主柽柳裁培技本［］．中药农业，2015-17（4）：349-358．[2] 刘国库，居鹏飞，杨太新，等，管花内苁蓉的生物学研究进展［］．中国现代中药，2015.17（0,399-405．[K] 张汝民，自静，昌春玲，等，变温层积处理诱导内苁蓉种子的南发［1林业科学，2008.44（9）：170-173[6] 徐荣，周峰，陈君，等，肉苁蓉种子质量评价技术与分级标准研究［］．中药材，23009,32（4），475-478．[10] 姚国族·王峰，张军，等大芸精量播种机［P］.中国21.201220727527.0.2013.08.21 [11] 汤小面，孙平飞，管花肉苁吞的研究进展，中医药导报，2009.15(5):101-104 

党荣理，马永红＇，吴霞2，刘庆华（1新疆军区卫生防疫大队，乌鲁木齐 830011；2．新疆药物研究所，乌鲁木齐 830000）摘要 通过19个10碱基随机引物对新疆中药肉苁蓉（Cistanche）3个不同种进行PCR扩增，用人工栽培品种作为对照，共扩增出153个多态位点，建立了它们的基因组DNA指纹图谱。通过计算遗传相似性系数，建立UPGMA聚类图。结果表明：不同之间存在一 定差异，但差异不大；人工栽培种与同一产地野生种之间基因图谱完全一致，具有相似的遗传特性。关键词 肉苁蓉；RAPD；遗传多样性；新疆中国分类号：S567  文献标识码：A  文章编号：1005-8915（2003）01-0048-03肉苁蓉习称大芸，有补肾壮阳、益精、润燥、润肠通便之功效，常用于治疗男子阳痿、女子不孕、带下、血崩、腰膝冷痛和血枯便秘等症，为常用中药材（1。《中国药典》收载的中药肉苁蓉正品为列当科植物肉苁蓉（Cistanche deserticola Ma）干燥肉质茎，新疆还有2种即德赢vwin登录 （C．tubulosa）和盐生肉苁蓉（C.salsa），它们均可人药，具有相同的功效。对肉苁蓉的化学成分研究的比较多，但基因组DNA的RAPD分析还未见报道。作者通过3种肉苁蓉基因组DNA的RAPD分析，同时用人工裁培的德赢vwin登录 作为对照，探讨其种间及人工栽培种的遗传多样性。RAPD技术自20世纪90年代产生以来，广泛应用于遗传图谱的构建、基因克隆、分子系统学及植物群体遗传结构等研究领域。由于RAPD分析是完全随机扩增，不需要对所研究物种的分子遗传学背景有所了解，因为可供选择的随机引物数十分巨大，所检测的位点在基因组中随机分布，可以较为客观地说明群体遗传多样性的水平（2）。1 材料和方法1.1 材料来源研究材料均采自于新疆本地，具体见表1。Tab 1 The origin of material No.SpecicsOriginNo.of plantaTime1C.salUlmqi102001.52C.daerioolaMulei152001.734C.tubulosaC.tubulosa(cultivateYutiand) Yutian16202001.72001.71.2 研究方法1.2.1 基因组DNA提取 取同一物种的10-20株的新鲜肉质茎叶混合后，称取3g，液氮下粉碎处理提取基因组DNA，基因组DNA的提取方法采用高盐低pH值法。1.2.2 引物选择 选取40个10碱基长度的寡核苷酸随机引物（购自上海生物工程公司），对4个DNA样品进行预扩增，从中筛选出重复性好、多态性高的19个引物（引物序列见表2），用于肉苁蓉样品基因组DNA的扩增。1.2.3 PCR反应 PCR扩增反应在PE公司5700型定量PCR仪上进行，反应总体积为25pd。扩增体系为：10xPCR buffer 2.5 l（购自大连TaKaRa公司），25 mmol／L MgCl，2 ul，10 mmol／L dNTP 1μl，25ng／l模板DNA 1 pl，10 μmol／L引物1 pμl，5 U／pl TaqDNA聚合酶0.3μ（购自大连TaKaRa公司），ddH，O17.3d。扩增程序为：首先，95℃预变性2min，然后进行40个循环：94℃变性 40 sec，36℃退火60sec，72℃延伸120 sec，最后于72℃下延伸7min。取10u回扩增产物在1.5％琼脂糖凝胶中电泳，EB染色后，在Alpha Imager 2200 型凝胶成像系统上观察并保存结果。Tab 2 The arbitray primers which producod polymorphic bands PrimerSequencesTotalPolymorphicbandsbandsISGTTTCGCTCC116S2TGAGCOCTGG9SS4GGACIGGAGT65SSTCCCCCCTTC125S7GGTGACGCAG95S8GTCCACACGG96S11CTAGACCCGT67S16TTIGCOCGGA98S17AGGGAACGAG108S18CCACAGCAGT1510S20GGACCCTTAC148S23AGTCAGCCAC65S24AATOGGGCTG115S28GTGACGTAGG106S30GTGATCGCAG124S32CTGATCGCAG84S33CACCACCCAC85S35TICCGAACCC109S40GTIGCGATCC62Total0611011.2.4 数据处理 电泳图谱中的每一条带可记为1个位点，根据分子质量与标准对照根据反应产物在胶上的对应位置，计算扩增产物的分子质量大小，有带的记为1，无带的记为0，形成0／1矩阵，进行带数统计。计算遗传系数F（F＝2Nab／Na＋Sb）和遗传距离D（D＝1-F），利用UPCMA法进行聚类分析。2 结果和分析2.1 RAPD产物的多态性在所采用的40条引物中，有19条引物在对肉苁蓉3个野生种和1个栽培种的DNA样品进行RAPD分析中得到良好的结果，图1列举了s28、8302条引物扩增产物的电泳图谱。通过分析发现19条引物共检测到190个条带，范围在200 bp～2500 bp之间，德赢vwin登录 最多，共计148个，盐生肉苁蓉最少，仅123个。在所有位点中多态性位点104个，占总位点的54.74％，平均每条引物扩增出5.47条多态位点。这说明肉苁蓉具有一定的遗传多样性。将产物多态性结果均用于分析，并分别将它们看作是不同的性状，即4个供试肉苁蓉有190个性状，其中104个性状呈多态性分布。 M.XDNA/Hind  Mader;1,C.sal:2.C.doiricla;3.C.tululos; 4. C.tubulona(culivated) Fig 1 RAPD pradacts from templates of iur species in Citanche using primer a28 and.30 2.2 种间遗传关系分析据F＝2Nab／Na＋Sb（Nab为它们两共同的带数，Na、Nb分别为它们两特有的带数）计算相似系数，遗传距离D为（1-F），列出遗传距离矩阵（表3）。并画出遗传关系聚类图（图2）Tab3 Matrix of genetic distanoes  通过图2聚类分析结果表明，不同种之间有一定差异，但差异不大；人工栽培种与同一产地的野生种之间基因图谱完全一致，这说明同一产地肉苁蓉的遗传性比较稳定。3讨论在中医药长期医疗实践中，道地药材一直是评价药材品质的独特的综合性指标。本研究结果表明，用同一引物扩增，不同种间总有共同带，这是肉苁蓉属的特征带，但每一个种均有自己的独特带，这就是种间差异。同时，同一地方样品 RAPD基因图谱差异较小，不同地方样品图谱差异则较大。提示RAPD技术不仅能正确鉴别肉苁蓉不同种间群体，作为本属药用植物的分类鉴定的新手段，而且可为道地性评价提供分子水平的支持依据。参考文献[1] 果鹏飞，王分，出山武，等，内苁蓉类生药中苯乙醇贰类成分的RP-HPLC分析［J］．药学学技，1997.32（4）：294．[2] 郭宝林，戴放，中药材DNA分子标记研究的技术问题I．RAPD实验技术和方法学论述［J］，中平码，2002.33（2）：178 [3] 王培训，黄丰，周联，等，植物中药材总DNA提取方法的比较［J］．中药新药-临床药理，1999,10（1）：18．

肉苁蓉，习称大芸、紫芸、黑司令，是常用的贵重中药材，性温，味甘咸。有补肾壮阳、养血润燥、润色延年一、肉苁蓉的种类及产地         1、荒漠肉苁蓉，分布于北疆准葛尔盆地的额尔吉斯河、乌伦古河、艾比湖支流、玛纳斯河等沙丘的梭梭林中高80-120厘米，花期5-6月，果熟期为7月。 2．速肉苁蓉 生长在海拔500～800米，分布于布尔津、哈巴河、福海、   3．盐生肉苁蓉 喜生于荒漠草原带，海拔700～2650米的地方，高20～45厘米，花期为4月，果期为5～6月。   4．管肉苁蓉 为多年生避早专性寄生草本植物，只寄生在一怪柳属的根端，喜冷气候。花期为4月，果期为5月。主要分布于南疆三地州。（二）肉苁蓉的生产资源及购销情况1．生产资源 新疆野生肉苁蓉的总面积达273万亩·蕴藏量5283吨，年收购量约500吨以上。北疆地区的梭梭大芸以昌吉州，博乐产景最大。盐生大芸瘦小质差，原则上是不收购做药材的。南疆的红柳大芸十分受欢迎，每年三、四百吨销售一空，并供出口之用。肉苁蓉出土后，当年开花结果.药用部位中空，不采自烂，应尽力采收。好处是可掉下一些种子。有利于来年继续长苗2．购销情况 新疆肉苁蓉从1959年开始销售6吨．1960年销50吨，1962年82吨，1974年增加到182吨，1980年224吨，现在每年300～500吨。新疆本区自用的肉苁蓉只有一吨左右。新疆大芸的出口。以民丰县的红柳大芸为主，从1970年开始每年10吨左右。其增幅不大的原因是：三种大芸混装，外观、质地、大小、颜色各不相同，商品规格低，名牌意识差。特别是盐生肉苁蓉，植株细小，花茎较长，决不能出口，肉苁蓉的收购价也是逐年上升的，1962年每千克干货才2元多，1975年为4元．1980年12元，1990年28元，1997年40元，1999年50多元，盒装每干克90元。

尹刚王贵林余万贵（长江大学医学院‚湖北‚荆州‚434023）【摘要】目的：研究大黄和肉苁蓉提取物对败血症休克模型大鼠急性肺损伤的影响‚探讨败血症休克治疗方法。方法：采用盲肠结扎穿孔术（ＣＬＰ）复制败血症休克模型大鼠‚通过大黄和肉苁蓉提取物灌胃观察其对败血症休克模型大鼠肺组织病理学、肺湿干重比、肺泡灌洗液中性粒细胞比例、蛋白含量及肺泡通透指数‚肺毛细血管通透性肺组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、髓过氧化物酶（ＭＰＯ）的影响。结果：生理盐水组大鼠肺间质水肿‚肺泡腔内可见大量细胞浸润和血浆蛋白渗出‚肺血管内皮细胞损伤．肺湿干重比、肺泡灌洗液中中性粒细胞比咧蛋白含量及肺泡通透指数、肺毛细血管通透性、肺组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、髓过氧化物酶（ＭＰＯ）均显著升高。大黄和肉苁蓉给药组上述指标较生理盐水组显著降低。结论：肉苁蓉及大黄对败血症休克模型大鼠急性肺损伤具有良好保护作用‚其机制可能是通过抑制中性粒细胞在肺组织的浸润‚减少氧自由基对肺组织的损伤实现的。【关键词】肉苁蓉；大黄；感染性休克模型大鼠；急性肺损伤败血症休克是临床急危重症‚1／3患者死于急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征‚临床除采用大剂量抗生素和激素疗法外‚尚无其他有效治疗措施。国内学者开始把目光转向中医药‚有报道大黄有保护肺血管内皮细胞‚对内毒素诱导的急性肺损伤有明显的保护作用［1］‚肉苁蓉能抗膜酯质过氧化和减轻自由基造成的组织细胞损害［2］‚这些功能在败血症休克肺损伤中能发挥针对性治疗作用。1 材料和方法1．1 药物、试剂与仪器戊巴比妥钠（中国医药集团上海化学试剂公司‚批号008104）‚丙二醛（ＭＤＡ）试剂盒‚超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）试剂盒‚髓过氧化物酶（ＭＰＯ）试剂盒（南京建成生物工程研究所‚批号20080108）‚肉苁蓉（经长江大学医学院中医系潘丰满博士鉴定）水煎剂‚大黄（经潘丰满博士鉴定）水煎剂‚伊文思蓝。仪器：日立Ｈ一600型透射电镜‚721型分光光度计。1．2 动物及分组健康雄性ＳＤ大鼠40只‚华中科技大学实验动物中心提供‚体重200～250ｇ‚质检号（ＴＪＩＡ一2008一Ｉ67）‚随机分为4组‚生理盐水组（8只）‚大黄组（8只）‚肉苁蓉（1ｇ／ｍＬ）组（12只）．肉苁蓉（3ｇ／ｍＬ）组（12只）。各组分别灌胃15ｄ。生理盐水5ｍｌ／ｋｇ·ｄ一大黄水煎剂1ｇ／ｋｇ·ｄ；肉苁蓉水煎剂1ｇ／ｋｇ·ｄ（含生药1ｇ／ｍＬ）；肉苁蓉水煎剂3ｇ／ｋｇ·ｄ（含生药3ｇ／ｍＬ）；盲肠结扎穿孔术法［3］：实验前2周大鼠饲养于实验室‚室22℃‚造模前12ｈ禁食水‚第15天晚8：00进行手术。戊巴比妥钠30ｍｇ／ｋｇ体重麻醉后‚常规消毒腹部‚皮肤正中切口‚长约3ｃｍ‚打开腹腔后小心分离盲肠‚避免损伤肠系膜血管‚寻找盲肠与小肠及大肠交界处‚然后1－0号丝线结扎盲肠2／3‚在结扎端盲肠用7号针头均匀穿刺6次．将盲肠还纳于腹腔‚关闭腹腔‚逐层缝合。术后将大鼠放回笼内‚保持呼吸道通畅‚给足饮水、饲料‚注意保暖。各组按前述剂量进行灌胃‚每日1次‚连续15ｄ。各组均于第16天灌胃后30ｍｉｎ采血‚取肺泡灌洗液。常规称取大鼠肺组3ｇ制备肺组织匀浆液．清洗分离肺组织表面血块、气管后．眼科剪剪碎肺组织‚按1：10加入匀浆液（蔗糖250ｍｍｏｌ‚Ｎ一乙羟乙基哌嗪Ｎ2乙基磺酸（Ｈｅｐｅｓ）2ｍｍｏｌ‚乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）0．1ｍｍｏｌ‚ｐＨ7．4）‚机械匀浆至管中无肺组织块为止‚尽量缩短匀浆时间‚以免肺组织变性‚全部过程均在0～4℃的条件下进行。全部样本均在取样后于－20℃冰箱保存‚1周内行全部指标测定。1．3 败血症休克模型大鼠肺组织学检查每组各取动物肺脏左叶少许‚经10％甲醛固定‚石蜡包埋切片‚ＨＥ染色后‚用普通光学显微镜观察‚并在此基础上再取肺组织制成1ｍｍ。大小‚用25％戊二醛溶液固定‚然后固定于四氧化锇液中‚乙醇、丙酮脱水‚经环氧树脂包埋‚制备超薄切片后‚行铀一铅双重染色‚用透射电镜观察。1．4 大鼠肺组织湿／干重比、及肺泡灌洗液中细胞计数比、蛋白含量测定开胸取出肺脏左叶‚称湿重后‚置烤箱（80℃‚20ｈ）烤至衡重‚称干重‚计算湿／干重比。开胸后肺右叶取肺泡灌洗液在显微镜下计细胞总数和细胞分类数。考马氏亮蓝法测定蛋白含量‚计算肺通透指数（肺泡灌洗液蛋白／血浆蛋白）。1．5 大鼠肺血管通透性（ＰＶＰ）变化按照Ｚｈｏｕ等的方法‚各组动物均在作盲肠结扎穿孔术同时股静脉注射伊文思（Ｅｖａｎｓ）蓝（50ｍｇ／ｋｇ）‚将动物开胸取出肺脏‚剪去周围组织‚将肺浸泡在甲酰胺溶液中‚甲酰胺用量按动物体重（20ｍｇ／100ｇ）置45～50℃温箱中温育72ｈ‚待组织中色素全部浸出‚取出组织‚离心‚取上清液‚用721型分光光度计620ｎｍ进行比色。根据标准曲线计算Ｅｖａｎｓ蓝含量来测定ＰＶＰ的变化。1．6 大鼠肺组织丙二醛（ＭＤＡ）的测定采用硫代巴比妥酸（ＴＢＡ）法［4］测ＭＤＡ活性‚本法微量、快速、简便、准确。主要根据ＭＤＡ可以与ＴＢＡ结合生成红色产物在532ｎｍ处有最大吸收峰的原理。50ｍｌ待测标本加4ｍｌ1．67ｍｏｌ／Ｌ的硫酸‚0．5Ｍｌ10ｍｏｌ／Ｌ磷钨酸‚混匀‚3000ｒ／ｍｉｎ离心10ｍｉｎ‚沉淀再同上处理一次‚然后加1ｍｌ双蒸水‚1ｍｌＴＢＡ溶液‚95℃水浴60ｍｉｎ‚用5ｍｌ正丁醇提取‚四乙氧基丙烷作为标准品‚终浓度为1ｎｍｏｌ／Ｌ‚荧光分光光度计532ｎｍ处测定吸光值。1．7 大鼠肺组织超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的测定采用黄嘌呤氧化酶法测定ＳＯＤ活性。1．8 大鼠肺组织髓过氧化物酶（ＭＰＯ）测定取肺组织于等渗盐水中尽量洗净残血．置于含0．5ｍＬ十六烷基三甲基溴化铵的磷酸缓冲液（ｐＨ6．0）中制成匀浆‚按试剂盒说明书操作。1．9 统计学方法实验数据均以均数±标准差（﹣ｘ±ｓ）表示ＳＰＳＳ软件进行单因素方差分析和相关分析。2 结果2．1 肉苁蓉和大黄提取物对败血症休克肺组织湿干重比及肺泡灌洗液中细胞计数比、蛋白含量的影响（见表1）。生理盐水组肺湿干重比显著高于肉苁蓉给药组‚肉苁蓉给药组肺泡灌洗液中细胞计数‚蛋白含量明显低于对照组‚且随着给药浓度增加呈现显著降低。2．2 肉苁蓉和大黄提取物对大鼠肺组织形态学改生理盐水组肺脏体积明显增大。呈暗红色．表面可见不同程度充血水肿‚边缘部分大量肺梗死灶光镜下肺泡‚肺间质充血水肿。肺泡腔内大量弥漫性中性粒细胞浸润‚部分有脓肿形成‚可见不同程度的肺不张‚坏死‚代偿性肺气肿。血栓及类似透明膜形成。电镜下肺泡上皮细胞肿胀‚板层小体排空现象明显‚形成大空泡。毛细血管内皮细胞肿胀‚内皮细胞之间连续损伤‚细胞间隙增宽‚毛细血管及肺泡基底膜疏松、增宽‚不规则增厚‚厚薄不均。大黄和肉苁蓉给药组：肺脏呈浅红色‚表面轻度充血水肿‚未见明显肺梗死灶。光镜未见明显肺泡肺间质充血水肿‚中性粒细胞浸润和脓肿形成及肺不张‚代偿性肺气肿。透明膜形成。电镜肺泡上皮细胞肿胀不明显‚板层小体排空减轻‚形成空泡数量少‚毛细血管内皮细胞之间连接接近正常基底膜轻度疏松。不规则增厚。3ｇ／ｍＬ肉苁蓉组较1ｇ／ｍＬ肉苁蓉组肺组织形态学改变范围更小‚损伤程度更轻。2．3 肉苁蓉和大黄提取物对大鼠肺通透指数（ＬＰＩ）和血管通透性（ＰＶＰ）的影响见表2。生理盐水组肺通透指数和血管通透性明显高于给药组‚肉苁蓉治疗组肺通透指数和血管通透性较对照组明显降低‚且有显著量效关系。2．4 肉苁蓉和大黄对大鼠肺组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、髓过氧化物酶（ＭＰＯ）活性的影响见表3。对照组肺组织中丙二醛含量显著高于治疗组‚而肉苁蓉给药组肺组织中超氧化物歧化酶活性和髓过氧化物酶活性显著增高。（与对照组比较‚Ｐ ＜0．01）。3 讨论大鼠在行盲肠结扎穿孔术后‚肺水含量和肺伊文思蓝渗出量明显增加‚说明肺毛细血管通透性明显增加‚肺组织形态学改变及中性粒细胞计数显大量中性粒细胞浸润‚肺充血水肿明显‚符合急性肺损伤的病理改变。可见采用盲肠结扎穿孔术可复制明显的败血症休克急性肺损伤模型。败血症休克急性肺损伤的主要病理生理机制是大量中性粒细胞在肺组织内聚集和活化‚与血管内皮细胞黏附的同时转移单电子的还原型辅酶氧化酶浓度增高而引起呼吸爆发‚产生大量氧自由基‚通过较强的氧化作用引起细胞膜和膜性结构的损害和功能障碍。大黄属攻下药‚具有泻下攻积、清热泻火、解毒活血祛瘀的功效‚现代医学研究证明其具有退热‚抗感染消炎‚并能排除肠道及体内多种有害物质等作用‚李春盛等研究表明大黄可通过抑制一氧化氮和一氧化氮合酶活性保护肺泡上皮和血管内皮。本实验中大黄组肺湿／干重比‚肺泡灌洗液中中性粒细胞计数‚伊文思蓝和蛋白渗出量显著低于生理盐水组‚证明大黄对肺泡上皮和血管内皮的良好保护作用‚同时大黄组肺组织匀浆液中丙二醛较生理盐水组降低‚超氧化物歧化酶活性升高。因此‚大黄可能通过减少中性粒细胞的聚集和渗出‚减轻膜酯质过氧化和自由基损害而保护肺组织。肉苁蓉具有增强免疫功能‚抗衰老‚增强细胞核酸合成率等广泛的药理作用。实验结果表明‚肉苁蓉给药组肺系数、肺通透指数、肺泡灌洗液中性粒细胞比例、肺血管通透性均显著下降。肺组织丙二醛活性下降（Ｐ ＜0．01）‚超氧化物歧化酶显著上升（Ｐ ＜0．01）‚髓过氧化物酶活性下降。同时形态学观察发现肺组织损伤程度明显减轻‚中性粒细胞浸润减少‚且3ｇ／ｍＬ肉苁蓉给药组较1ｇ／ｍＬ肉苁蓉给药组肺损伤程度更轻‚存在良好的量效关系。提示肉苁蓉对肺损伤具有良好的保护作用。该实验结果为临床败血症休克急性肺损伤治疗提供了实验依据。展示了中医药在败血症休克肺损伤治疗中的良好前景。参考文献［1］ 李春盛‚桂培春‚何新华‚等．大黄对内毒素诱导急性肺损伤大鼠的保护作用［Ｊ］．基础医学临床‚2007‚21（1）：65－68．［2］ 李琳琳‚王晓雯‚王雪飞‚等．肉苁蓉总甙的抗脂质过氧化作用及抗辐射作用［Ｊ］．中国中药杂志‚2007‚22（6）：364－367．［3］ 金惠铭．盲肠结扎穿孔术后的败血症模型［Ｊ］．中国病理生理杂志‚1990‚6（2）：126－127．［4］ 汪谦‚朱晓峰‚赵西龙‚等．现代医学实验方法［Ｍ ］．北京：人民卫生出版社‚2007：508