周奕嘉，陆 敏，骆前飞，李西林”（上海中医药大学1．中药学院；2．科技实验中心，上海201203）摘要 目的：对《中国药典》规定的2种肉苁蓉的花粉进行形态学研究，为肉苁蓉属植物的分类鉴别建立实验依据。方法：采用扫描电镜观察荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 的花粉形态并进行测量。结果：两种肉苁蓉的花粉粒在形状，萌发孔及外壁纹饰等方面具有其各自特殊的形态结构特征。结论：孢粉学研究可作为鉴别肉苁蓉属植物的分类鉴别依据。关键词 荒漠肉苁蓉；德赢vwin登录 ；花粉形态；扫描电镜肉苁蓉属植物在全世界共有22种［1，分布于欧、亚洲温暖的干燥地区。在我国有5个种，主要分布于内蒙古、宁夏、甘肃、青海以及新疆等地。肉苁蓉具有补肾阳、益精血、润肠通便的功效，是历代补肾壮阳的方剂中使用频率最高的一味药［2，有“沙漠人参”的美誉。肉苁蓉属于寄生植物，通常寄生于梭梭、柽柳等沙漠植物的根部。2020版《中华人民共和国药典》收载的药材，来源于肉苁蓉属的两种植物，即荒漠肉苁蓉（Cistanche deserticola Y.C.Ma）和德赢vwin登录 （Cistanche tubulosa（Schenk）Wight）的干燥带鳞叶 肉质茎国。长期以来，肉苁蓉属植物形态结构相似，其分类一直处于较为混乱的状态［。目前对肉苁蓉的分类研究报道主要集中在两种方法上，一种是采用性状和生物显微鉴别法，通过观察其肉质茎横断面维管束及其排列方式来进行判断［，另一种是采用高效液相色谱法，通过对不同来源物种的化学成分进行分离鉴定，以苯乙醇苷类、寡糖酯类、环烯醚萜及其苷类等主要化学成分的差异进行判断例。花粉作为携带遗传信息的维性生殖细胞，在长期的进化过程中往往形成独特的形态特征，并具有很强的遗传保守性和稳定性，因此可作为植物分类、鉴定的重要依据［-］，但迄今为止对肉苁蓉的孢粉学研究报道较少。本研究从产地采集到两种肉苁蓉植物的新鲜花，采用扫描电镜，对其花粉形态进行观察、测量并加以分析总结，以期为肉苁蓉属其他植物的分类和鉴别提供科学依据。1 实验技术与方法1.1 仪器EM ACE600 离子溅射镀膜仪（德国，Leica）、Quanta FEG250场发射扫描电镜（美国，FEI）。1.2 材料荒漠肉苁蓉采自内蒙古阿拉善盟，德赢vwin登录 采自新疆于田县，原植物经北京大学药学院屠鹏飞教授鉴定，所有实验材料均留存于本校科技实验中心电镜室。1.3 方法取新鲜花粉直接涂抹于贴有导电胶的样品台上，用洗耳球吹尽多余松散的花粉，再将样品台放人Leica EM ACE600 离子溅射镀膜仪中喷金镀膜，厚度为22nm，之后用FEI Quanta FEG250场发射扫描电镜进行观察，加速电压为10 kV。分别选取具有代表性的视野观察花粉粒整体、赤道面、两极的局部形态及纹饰特征，并进行拍摄。花粉粒极轴长和赤道轴长的测量：在3000倍的放大倍率下选取30粒花粉粒进行大小测量，以极轴长和赤道轴长（PxE）表示，极轴长和赤道轴长之比（P／E）表示花粉粒形状：P／E＞1.6为长椭球形；P／E在1.3～1.6之 间为椭球形；P／E＜1.3为类球形例。统计分析：采用SPSS 17.0对所得到的数据进行统计分析，结果以平均值±标准差（i＊s）表示，p＜0.05代表具有显著性差异。2 结果2.1 荒漠肉苁蓉花粉形态观察镜下可见荒漠肉苁蓉的花粉呈长椭球形，两极较尖，赤道面观长椭圆形，极面观呈3裂圆形：大小为36.7（31.0-38.7）pumx19.4（15.5-22.5） jumc 3 沟，沟膜具颗粒状突起，常聚集成困：外壁具皱波融合形成的细网状纹饰，并具有直径约0.35μm的小穿孔（见表1，图1）。表1 花粉形态特征测量结果Table 1 Measurement rsuls of pefkn morpbobgkal characteristics 大小PxE值P／E值萌发沟长萌发沟种名花粉粒花检粒赤道轴1m长／极轴极轴P／am113荒肉苁蓉367*2.819.4+2.6712.8=125.75732.6+4.00.89管花肉苁特40.602.220.6+2.1836.36122.61.034.6+3.50.85注2种肉苁蓉极轴比较。”pc0.06。P-报轴长；E-赤道输长。图1 董漠内苁蓉花粉形态。．花粉形态，Bar＝200 μm；b．花粉赤道面观，Bar＊50 cc花粉外壁纹饰，Bar＊20 p；d．花粉板面观，Bax＊20．gμmFig.1 Olaenation of pallien mplelgy of cidanche desrtirla under scanning chctron micposrape. 2.2 德赢vwin登录 花粉形态观察镜下可见德赢vwin登录 的花粉粒呈长椭球形，两极较平，赤道面观长柄圆形，极面观3裂圆形，在界沟极区突起，大小为40.6（35.2-44.4）μmx20.6（19.0-22.5）μm；3 沟，沟膜具分布不均匀的颗粒状突起，常不聚集成团；外壁具细网状纹饰，穿孔小且不明显（表1．图2）。药用肉苁蓉的两个基源种植物的花粉形态进行观察，结果表明两种植物的花粉粒形态结构相似，赤道面观均呈长椭圆形，极面观呈3裂圆形，均具3沟，沿极轴方向分布，沟长几手达两极，外壁可见额粒状突起，表面均具细网状纹饰，但两者之间也具有明显的种间特异性。从花粉粒形状上看，荒漠肉苁蓉更趋向于纺锤形，两极较为尖锐；德赢vwin登录 多呈椭圆形，两极较为平坦。观察萌发沟可以发现，荒漠肉苁蓉的萌发大多近闭合，故赤道面观呈三裂状圆形，裂深较浅；德赢vwin登录 的萌发沟两端开口，由此可见其内部成片的颗粒状纹理，且赤道面观的裂深较深。比较两者的外壁纹饰，荒漠肉苁蓉外壁表面可见较多的小穿孔，呈直径约0.35μm的类圆形，或呈短轴0.35-0.53 μm．长轴0.53-0.70μm的类长稀圆形，偶见2-3个小穿孔聚集而成的不规则形穿孔，沟膜处有时可见聚集成团的颗粒状突起：德赢vwin登录 外壁表面较致密，穿孔极小面密集，常连接成“人”字形线状凹陷，表面具有分布不均匀的颗粒状突起，且多为散在。通过SPSS17.0分析显示，德赢vwin登录 极轴明显长于荒漠肉苁蓉，p值为0.013，c0.05．统计学显示两者具有显著性差异。但统计两者在赤道长。PIE值、萌发沟长等数据，分别为0.398,0.301，0.542，均＞0.05，无明显差异，不具有统计学意义。这些结果表明两种不同来源的肉苁蓉花粉在形状。前发孔及外壁纹饰等方面具有其各自特殊的形态结构特征，本实验通过采用扫描电镜对肉苁蓉属中的二种药用植物的花粉形态研究，为进一步建立并阐明肉苁蓉属近缘种植物的分类提供一种方法借鉴。除了中国药典》收载的两种肉苁蓉之外，在我国还分布者同属的三种植物：盐生肉苁蓉（C.sahoCA.Mey.G.Beck），白花盐苁蓉（C.sala ear. albijlora P.F.Tu et Z.C.Lnu）和沙苁蓉（C.sinensis G.Beck），但因其资源稀少，产量不足，尚不能作为药用，本研究将搜集该三种肉苁蓉花粉粒进行进一步比较研究，为其种的分类和鉴定提供孢粉学实验依据［-㎡。

郭卫红【摘要】目的测定同属肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉及其不同产地药材中麦角甾苷含量。方法采取麦角甾苷稀甲醇溶液予200 ～ 400 nm 波长扫描，以332 nm 为检测波长。精密吸取对照品溶液1、2、4、6、8 μL 进样，按拟定的色谱条件测定。分别以乙酸乙酯、氯仿、石油醚、乙醚脱脂，然后以甲醇提取，测定含量。精密称取已测知含量的样品适量，添加适量麦角甾苷对照品并测定。结果麦角甾苷在0． 1 ～ 0． 8 μg 范围内与峰面积呈良好的线性关系。不同地区肉苁蓉麦角甾苷含量差异巨大。结论中药产地因素不可忽略，检测样品越多，含量变异程度越大。【关键词】肉苁蓉; 生品; 麦角甾苷肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉( Cistanche deserticolaY． C． Ma． ) 的带鳞叶的肉质茎。主产于内蒙古、青海、甘肃、新疆等地。中医认为本品甘、咸、温，归肾、大肠经，《神农本草经》记载肉苁蓉“主五劳七伤，补中，除茎中寒热痛，养五脏，强阴，益精气，妇人癥瘕。久服轻身。”药效学研究表明［1 － 3］肉苁蓉通过干扰机体免疫功能、老化代谢产物、老化相关酶而延缓衰老，可延缓脾、脑、肺、肝等组织器官的衰老与退化。肉苁蓉通过麦角甾苷、苯乙醇苷、松果菊苷、甜菜碱、肉苁蓉苷A、甘露醇等活性成分发挥抗衰老作用［4］。本文测定了同属三种肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉及其不同产地药材中麦角甾苷含量，希冀有助于评价肉苁蓉药材的质量优劣。实验材料一、仪器与试剂国产YWG － C18色谱柱( 4． 6 × 250 mm) ，日本岛津LC － 3A 高相液相色谱仪，日本岛津UV － 3000紫外分光光度计，甲醇为优级纯，醋酸等试剂均为分析纯。麦角甾苷对照品( 山西中医学院中药鉴定室) 含量98%以上。二、实验药物所有药物经山西中医学院中药鉴定室鉴定为正品。方法与结果一、色谱条件1． 选择检测波长: 取麦角甾苷稀甲醇溶液，予200 ～ 400 nm 波长扫描，确认其最大吸收波长为332nm，作为检测波长。2． 流动相选择: 对照品和样品溶液在不同浓度的乙酸和甲醇组成的流动相中进行分析试验［5］，选择分离度满意的流动相为甲醇－ 1% 乙酸( 35∶ 65) ，流速为1 mL·min － 1。二、线性关系考察精密称取麦角甾苷对照品5 mg，置50 mL 量瓶中，加流动相( 或优级纯甲醇) 溶解并定容，摇匀，为对照品溶液。精密吸取对照品溶液1、2、4、6、8 μL 并进样，按拟定的色谱条件测定，以麦角甾苷的峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，得一直线，回归方程为Y = 299 492X +1 165，r = 0． 999 9。麦角甾苷在0． 1 ～ 0． 8 μg 范围内与峰面积呈良好的线性关系。三、精密度试验精密吸取上述对照品溶液4 μL，重复进行5 次含量测定，测定峰面积ＲSD ＜ 2%。四、样品测定1． 提取方法选择: 药材( 过20 目筛) 置索氏提取器，分别以乙酸乙酯、氯仿、石油醚、乙醚脱脂，然后以甲醇提取，测定含量［6］，发现以上脱去溶液均含麦角甾苷，只是数量不同，可能和药材中含一定量水分有关。直接以甲醇提取，结果表明麦角甾苷能完全溶出，其他成分能与基线分离。2． 样品液置备: 称取待测样品( 过20 目筛) 5 g，精密称定，置索氏提取液中，加入甲醇60 mL，提取至无色，滤过，定容于50 mL 棕色量瓶中，制成每1mL 溶液含0． 1 g 样品的样溶液。同时称取3 g 待测样品粉末，进行水分测定。按上述色谱条件进行分析，数据处理机计算峰面积，用外标法计算麦角甾苷含量，9种样品测定结果见表2。五、回收率试验精密称取已测知含量的样品适量，添加适量麦角甾苷对照品，测得五次平均加样回收率98． 83%，ＲSD 为1． 68%。讨论文章测定了肉苁蓉三个主产区( 内蒙古、新疆、甘肃) 所产肉苁蓉、德赢vwin登录 和盐生肉苁蓉中主要活性成分麦角甾苷的含量。实验结果表明: 肉苁蓉在不同地区成长，含量差异甚大( 0． 078 ～ 0． 71%，约差10倍) ; 德赢vwin登录 在不同产地间含量差别高达12 倍( 0． 27 ～3． 38%) ; 盐生肉苁蓉只测一个产地不明的样品，与前两种相比偏多。初步看出德赢vwin登录 麦角甾苷含量较高，在肉苁蓉资源紧缺时，可代替正品入药［7］。研究结果表明，肉苁蓉的产地因素不可忽略，测的样品越多( 产地离散程度越大) ，含量变异程度越大，这对于选择优良种质和道地产区是非常重要的［8］。参考文献［1］刘晓明，姜勇，孙永强，等． 肉苁蓉化学成分研究［J］． 中国药学杂志，2011，46( 14) : 1053 － 1057．［2］Yang FＲ，Wen DS，Fang BW， et al． Prevention of Cistanche salsa extracton hepatic fibrosis induced by carbon tetrachloride in rats［J］．Chin Herb Med， 2013，5( 3) : 199 － 204．［3］陈靖，李宁，张秀兰，等． ＲP － HPLC － DAD 法测定酒制肉苁蓉中松果菊苷含量［J］． 宁夏医科大学学报，2010，32( 8) : 931 － 933．［4］吴爱芝，林朝展，赵小宁，等． 肉苁蓉苷F 与牛血清白蛋白相互作用的光谱学研究［J］． 中国中药杂志，2012， 37( 10) : 1392 － 1397．［5］蔡鸿，鲍忠，姜勇，等． 不同影响因素下肉苁蓉3 种活性成分的定量分析［J］． 中草药， 2013，44( 22) : 3223 － 3330．［6］麻景梅，宋新波，张丽娟，等． 肉苁蓉多糖含量测定［J］． 辽宁中医药大学学报，2012，14( 8) : 100 － 101．［7］李丽，王晶，桂语歌，等． 应用高效离心分配色谱技术分离肉苁蓉中苯乙醇苷化合物［J］． 时珍国医国药，2011，22 ( 7 ) : 1549－ 1551．［8］王伟义，薛瑞明． 浅析中医院中药制剂的生存与发展［J］． 世界中西医结合杂志， 2013，8( 11) : 1168 － 1169．

毕天琛，杨国宁，王素香，赵丹彤，，刘延娟1. 菏泽市食品药品检验检测研究院，山东 菏泽 274000；2. 青岛科技大学 化工学院，山东 青岛 266000；3. 山东中医药大学 药学院，山东 济南 250355[摘要] 目的：建立肉苁蓉饮片的高效液相色谱法（HPLC）指纹图谱，结合化学模式识别技术，为不同产地肉苁蓉饮片质量评价提供参考。方法：收集10 批不同产地肉苁蓉样品。色谱柱为Agilent ZORBAX C18；流动相为乙腈-0.5%乙酸（梯度洗脱）；流速为1.0 mL·min-1；检测波长为330 nm；柱温为30 ℃。采用“中药指纹图谱相似度评价系统（2012 A 版）”计算相似度，结合聚类分析和主成分分析对肉苁蓉饮片进行模式识别。结果：建立了肉苁蓉饮片的指纹图谱，确定了17 个共有峰，并通过对照品比对指认了其中8 个峰。不同产地肉苁蓉饮片相似度＞0.94。10 批样品可聚为2 类，分析确定了4 个主成分。结论：建立的HPLC指纹图谱方法准确高效、灵敏度高，可为不同产地肉苁蓉饮片质量控制和评价提供参考。[关键词] 肉苁蓉饮片；指纹图谱；化学模式识别；主成分分析；聚类分析肉苁蓉为多年生草本寄生植物，为列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y. C. Ma 或德赢vwin登录 C. tubulosa (Schenk) Wight 的干燥带鳞叶的肉质茎[1]。肉苁蓉始载于《神农本草经》，为我国传统沙生名贵补益类中药，具有补肾阳、益精血、润肠通便的功能[1-3]。主要产地包括内蒙古、宁夏、新疆、甘肃和青海等地[4]。肉苁蓉的化学成分主要有苯苷类、环烯醚萜及其苷类、木脂素及其苷类、多糖及单萜苷类、生物碱等[4]。《中华人民共和国药典》2020 年版肉苁蓉品种含量测定项下仅规定了松果菊苷和毛蕊花糖苷总量，并未对其他成分做出相关规定。目前，已有关于肉苁蓉中管花苷A、肉苁蓉苷A、肉苁蓉苷C、异毛蕊花糖苷等成分含量测定和指纹图谱研究的报道[5-11]，但是只是对其中几种指标性成分进行研究，不能全面反映肉苁蓉饮片整体质量的优劣，本研究采用高效液相色谱法（HPLC）指纹图谱结合化学模式识别法对肉苁蓉饮片质量进行综合分析评价，为其质量标准研究提供切实可行的参考。1 材料1.1 仪器1260 型高效液相色谱仪（美国Agilent 公司）；XS105 型电子分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）；FRQ-1010T 型超声波清洗器（杭州法兰特超声波科技有限公司）； Milli-Q AdvantageA10 型超纯水仪（美国Millipore 公司）1.2 试药对照品松果菊苷、毛蕊花糖苷（中国食品药品检定研究院，批号分别为111670-201706、111530-201713）；对照品京尼平苷酸、肉苁蓉苷A、管花苷A、异毛蕊花糖苷、2’-乙酰毛蕊花糖苷和管花苷B（成都普菲得生物技术有限公司，批号分别为18112101、17062001、18032105、18102404、19011705、17052704）；甲醇、乙腈为色谱纯（德国Merck 公司）；乙酸为优级纯（德国Merck 公司）。10 批肉苁蓉饮片均购自市场，经菏泽市食品药品检验检测研究院马海春副主任中药师鉴定为列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y. C. Ma 的干燥带鳞叶的肉质茎，见表1。2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Agilent ZORBAX C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈(A)-0.5%乙酸(B)，梯度洗脱（0～7 min，10%～19% A；7～25 min，19%～22% A；25～35 min，22%～25% A；35～36 min，25%～10% A；36～40 min，10% A）；检测波长：330 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL；流速：1.0 mL·min-1。2.2 对照品溶液的制备分别精密称取各对照品适量，加入50%甲醇溶解制备成含京尼平苷酸0.980 mg·mL-1、松果菊苷1.052 mg·mL-1、肉苁蓉苷A 1.044 mg·mL-1、管花苷A 0.953 mg·mL-1、毛蕊花糖苷0.986 mg·mL-1、异毛蕊花糖苷1.078 mg·mL-1、2’-乙酰毛蕊花糖苷1.181 mg·mL-1、管花苷B0.986 mg·mL-1 的混合对照品储备溶液。精密量取上述储备溶液5 mL，置25 mL 量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液[12]。2.3 供试品溶液的制备取肉苁蓉样品粉末（过四号筛）1.0 g，精密称定，置于100 mL 棕色量瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，称量，超声提取40 min，放冷后加50%甲醇补足减失的质量，摇匀，用0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，即得[12]。2.4 方法学考察2.4.1 精密度试验 取编号为S1 肉苁蓉饮片制备的供试品溶液，按照2.1 项下色谱条件进行测定，连续进样6 次，记录峰面积和保留时间。以松果菊苷（4 号峰）为参照峰，分别计算其他16 个色谱峰相对峰面积和相对保留时间，并计算RSD。结果16 个色谱峰相对峰面积的RSD 均不大于0.58%，相对保留时间的RSD 均不大于1.45%，表明该方法的精密度良好。2.4.2 稳定性试验 取编号为S1 肉苁蓉饮片制备的供试品溶液，分别室温放置0、2、4、6、12、24 h 后，按照2.1 项下色谱条件进样测定，记录峰面积和保留时间。以松果菊苷（4 号峰）为参照峰，分别计算其他16 个色谱峰相对峰面积和相对保留时间，并计算RSD。结果16 个共有色谱峰相对峰面积的RSD 均不大于0.74%，相对保留时间的RSD 均不大于1.82%，表明供试品溶液在室温下放置24 h 内稳定。2.4.3 重复性试验 称取同一份肉苁蓉饮片样品（S1）粉末约1.0 g，精密称定6 份，按照2.3 项下方法制备供试品溶液，按2.1 项下色谱条件进行测定。以松果菊苷（4 号峰）为参照峰，分别计算其他16 个色谱峰相对峰面积和相对保留时间，并计算RSD。结果16 个共有色谱峰相对峰面积的RSD 均不大于0.26% ，相对保留时间的RSD 均不大于1.24% ，表明该方法重复性良好。2.5 指纹图谱的建立与分析2.5.1 HPLC 指纹图谱测定 取不同产地10 批次肉苁蓉饮片样品，按照2.3 项下方法制备供试品溶液，按照2.1 项下色谱条件进行测定，记录色谱图，结果见图1。2.5.2 共有模式的建立及共有峰确定将 2.5.1 项下条件下测定的色谱图导入“中药指纹图谱相似度评价系统（2012 A 版）”软件，以S1 样品为参考图谱，时间窗宽度设为0.1 s，中位数法生成对照指纹图谱（图2）。以4 号峰作为参照峰S，对不同肉苁蓉饮片的指纹图谱进行考察，共确定17 个共有峰。通过对照品溶液比对，指认了其中 8 个色谱峰，分别为1 号（京尼平苷酸）、4 号（松果菊苷）、8 号（肉苁蓉苷A）、9 号（管花苷A）、10 号（毛蕊花糖苷）、11 号（异毛蕊花糖苷）、16 号（2’-乙酰毛蕊花糖苷）和17 号（管花苷B）。结果见图3。2.5.3 相似度评价 采用“中药指纹图谱相似度评价系统（2012 A 版）”软件，以样品的HPLC 对照指纹图谱为对照，进行整体相似度评价。结果10 批次样品的相似度为0.941～0.999，见表2，说明各批次样品之间整体差异性较小。2.6 聚类分析以4 号峰为参照，以10 批次样品中17 个共有峰的相对峰面积为变量，采用SPSS 22.0统计学软件进行聚类分析，采用组间联接的聚类方法，以欧式距离为区间进行聚类分析，生成聚类树状图（图4）。10 批样品大致可分为2 类，S1、S3 聚为一类，其余为一类， S1、S3 中4、5、6、7、9、11、12 号峰面积均明显大于其余样品。S1、S3、S5、S9、S10 产地均为新疆，S2、S4、S7、S8 产地均为内蒙古，但均未聚为一类，说明同一产地肉苁蓉饮片质量存在差异。2.7 主成分分析采用SPSS 22.0 软件对10 批肉苁蓉饮片样品中17 个共有峰面积进行主成分分析。结果显示，共得到4 个主成分因子，特征值分别为8.148、2.852、2.461 和1.326，方差贡献率分别为47.927%、16.779%、14.474%和7.800%，累积方差贡献率为47.927%、64.705%、79.179%和86.979%（表3），提示主成分因子1、2、3、4 可作为评价不同肉苁蓉饮片的评价指标。根据因子载荷矩阵表和因子载荷图（表4 和图5）可以看出主成分因子1 与11 个共有峰相关性均较强，特别是峰4、5、6、7、9、11 和12；主成分因子2 与峰16、17 相关性较强；主成分因子3 与峰3、8、13 和14 相关性较强，特别是峰14；主成分因子4 与峰10 相关性较强。根据各主成分载荷向量乘以各主成分特征值的算术平方根计算各批样品的综合得分，结果见表5。其中S1、S3 综合得分较高，S5、S6、S9、S10 相对较低，与聚类分析结果一致。3 讨论本研究前期对液相条件进行了优化，考察了甲醇-水、甲醇-0.1%乙酸溶液、乙腈-水、乙腈-0.1%乙酸溶液、乙腈-0.5%乙酸溶液5 种流动相及8 个梯度洗脱条件，结果以乙腈-0.5%乙酸溶液为流动相时，梯度洗脱效果最好。采用二极管阵列检测器进行190～400 nm 全波长扫描，结果显示，在330 nm 波长下色谱峰较多，响应值较高，因此，采用330 nm 作为指纹图谱检测波长。综上，确定了2.1 项下色谱条件作为肉苁蓉饮片指纹图谱液相色谱条件。10 批肉苁蓉饮片样品指纹图谱共确定17 个共有峰，并指认了其中8 个成分，分别为京尼平苷酸、松果菊苷、肉苁蓉苷A、管花苷A、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、2’-乙酰毛蕊花糖苷和管花苷B。结果显示，不同样品之间相对保留时间相差较小，但相对峰面积有一定差异，说明不同样品之间部分成分含量存在差异。与对照指纹图谱的相似度为0.941～0.999，说明不同样品质量稳定，相似度较好。通过聚类分析和主成分分析发现，10 批样品可分为2类，S1 和S3 为一类，与其他8 批存在明显差异，同时确定了4 个主成分，筛选出7 个差异性成分，分别是峰4、5、6、7、9、11 和12。目前，《中华人民共和国药典》2020 年版选用松果菊苷和毛蕊花糖苷作为肉苁蓉饮片的含量测定指标成分，本研究发现7 种成分在各产地肉苁蓉饮片指纹图谱中起决定作用，包括松果菊苷、管花苷A、异毛蕊花糖苷，但不包括毛蕊花糖苷，为评价肉苁蓉饮片综合质量提供新方法。综上所述，本研究建立的肉苁蓉饮片HPLC 指纹图谱及聚类分析和主成分分析方法可以反映出不同产地的肉苁蓉饮片的质量水平，可用于肉苁蓉饮片质量控制及评价，为肉苁蓉饮片标准研究提供参考。参考文献[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典：一部[M]. 北京: 中国医药科技出版社， 2015:376- 377.[2] 张效东．《神农本草经》药物札记[J]．山东中医药大学学报，2011，35(4)：306-308．[3] 姜勇，鲍忠，孙永强，等．肉苁蓉片的炮制工艺研究[J]．中国药学杂志，2011，46(14)：1074-1076．[4] 毕萃萃，刘银路，魏芬芬，等．肉苁蓉的主要化学成分及生物活性研究进展[J]．药物评价研究，2019，42(9)：1896-1900．[5] 王力伟，曹瑞，房永雨，等．UPLC-QQQMS 法测定肉苁蓉中有效成分的含量[J]．中药材，2017，40(2)：295-300．[6] LI R Y， ZHAO M B， TU P F，et al．Simultaneous determination of five phenylethanoidglycosides in Cistanches Herba using quantitative analysis of multi-components by singlemarker[J]．J Chin Pharm Sci，2019，28(8)：537-546．[7] 马学琴，董彦红，郭琪，等．肉苁蓉药材中6 种苯乙醇苷类成分含量的一测多评法测定[J]．时珍国医国药，2018，29(10)：2309-2312．[8] 熊慧，刘宇琦，屈文佳，等．酒苁蓉HPLC 特征图谱及5 个苯乙醇苷类成分含量测定[J]．药物分析杂志，2019，39(2)：233-239．[9] 杨瀚春，夏鹏霄，黄居兴，等．肉苁蓉HPLC 指纹图谱研究[J]．药学服务与研究，2008，8(4)：255-257．[10] 马志国．沙苁蓉与肉苁蓉饮片HPLC 指纹图谱鉴别研究[J]．中国药学杂志，2011，46(12)：899-902．[11] 龚华梦，胡辉，刘源才．HPLC 测定肉苁蓉配方颗粒的含量及指纹图谱研究[J]．华西药学杂志，2018，33(6)：513-517．[12] 杨国宁，毕天琛，仝桂平，等．HPLC 法同时测定肉苁蓉饮片中8 种成分的含量[J]．中国药师，2020，23(7)：1442-1445．

摘要：目的：研究复方制剂补肾壮阳胶囊的定性鉴别方法。方法：采用高效液相色谱法对人参、肉苁蓉、鹿茸、山茱萸、淫羊藿、何首乌进行定性鉴别。结果：高效液相色谱鉴别人参、肉苁蓉、鹿茸、山茱萸、淫羊藿、何首乌的方法简便易行‚重现性好。结论：所建立的定性鉴别方法简便可行、重复性好‚可有效控制补肾壮阳胶囊的质量。关键词：补肾壮阳胶囊；高效液相色谱法；定性鉴别复方制剂补肾壮阳胶囊由人参、肉苁蓉、鹿茸、山茱萸、淫羊藿、制何首乌等12味中药组成‚具有补肾壮阳、填精益髓之功‚用于治疗腰膝酸软、阳痿、早泄等证。为有效控制该制剂的质量‚保证用药的安全有效‚采用高效液相色谱（TLC）法对主要药物肉苁蓉、鹿茸、山茱萸、淫羊藿、何首乌进行定性鉴别‚本研究建立的定性鉴别方法简便可行、重复性好‚可有效控制补肾壮阳胶囊的质量。1　仪器与试药高效液相色谱仪（日本岛津）、SPD－10Atvp 紫外检测器（日本岛津）、ODS C18柱（大连依利特公司）、KQ3200DE 型医用数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、人参皂苷Rg1对照品（批号：0703－200118中国药品生物制品检定所）、人参皂苷Re 对照品（批号：0754－200115‚中国药品生物制品检定所）、人参皂苷Rb1对照品（批号：0704－200120‚中国药品生物制品检定所）乙腈为色谱纯‚水为纯水‚其余试剂为分析纯。补肾壮阳胶囊由无锡正东药业有限公司提供（批号：041105、041106、041107）。2　方法与结果2．1　人参的鉴别取本品胶囊8粒‚倾出内容物‚加甲醇40ml 回流提取1h‚滤过‚滤液蒸干‚残渣加水20ml 使溶解‚转入分液漏斗中‚用水饱和的正丁醇提取2次‚每次20ml‚合并正丁醇液‚用1％NaOH 试液洗涤2次‚每次20ml‚弃去碱液‚正丁醇液再用正丁醇饱和水洗两次‚每次20ml‚弃去水液‚分取正丁醇液‚水浴上蒸干‚残渣加甲醇2ml 使溶解‚作为供试品溶液。取人参对照药材1g‚按照供试品溶液的制备方法制备‚作为对照药材溶液。分别取人参皂苷Rg1、Re 对照品适量‚精密称定‚分别加甲醇制成1ml 含1mg 的溶液‚作为对照品溶液。取缺人参药材的样品‚照供试品溶液条件同法制备‚作为阴性对照溶液。用薄层色谱法试验‚分别吸取上述供试品溶液、阴性对照溶液各10μl、对照药材溶液8μl、人参皂苷Rg1和Re 对照品溶液各4μl‚分别点于同一硅胶G 薄层板上‚以氯仿－甲醇－水（13∶7∶2）10℃以下放置的下层溶液为展开剂‚展开‚取出‚晾干‚喷以10％硫酸乙醇液‚105℃烘至斑点清晰。供试品色谱中‚在与对照药材色谱相应的位置上‚显相同颜色的斑点；在对照品色谱相应位置上‚显同一颜色的斑点。而阴性色谱中无相应斑点出现。结果见图1。2．2　肉苁蓉的鉴别取本品胶囊10粒‚倾出内容物‚加70％乙醇50ml‚超声处理30min‚滤过‚滤液挥至无醇味‚加40ml 蒸馏水使之溶解‚转移至分液漏斗中‚用醋酸乙酯洗涤2次‚每次20ml‚弃去醋酸乙酯液‚再用水饱和的正丁醇提取2次‚每次20ml‚合并正丁醇液‚用浓氨水洗2次‚每次20ml‚合并正丁醇液‚水浴上挥干‚残渣用甲醇1ml 使溶解‚作为供试品溶液。取肉苁蓉对照药材1g‚同法制成肉苁蓉对照药材溶液。取缺肉苁蓉药材的样品‚照供试品溶液条件同法制备‚作为阴性对照溶液。用薄层色谱法试验‚分别吸取上述供试品溶液、阴性对照溶液、对照药材溶液各4μl‚分别点于同一硅胶G薄层板上‚以氯仿∶甲醇（17∶3）为展开剂‚展开‚取出‚晾干‚喷以5％香草醛硫酸溶液显色。供试品色谱中‚在与对照药材色谱相应的位置上‚显相同颜色的斑点。而阴性色谱中无相应斑点出现。结果见图2。2．3　鹿茸的鉴别取本品胶囊8粒‚倾出内容物‚加稀盐酸5ml‚再加95％乙醇25ml 加热回流1h‚滤过‚取续滤液作为供试品溶液。取鹿茸对照药材0．4g‚同法制成鹿茸对照药材溶液。照薄层色谱法‚取缺鹿茸药材的样品‚照供试品溶液条件同法制备‚作为阴性对照溶液。用薄层色谱法试验‚分别吸取上述供试品溶液、阴性对照溶液各4μl、对照药材溶液6μl‚分别点于同一硅胶H 薄层板上‚以正丁醇∶冰醋酸∶水（3∶1∶1）为展开剂‚展开‚取出‚晾干‚喷以茚三酮溶液显色。供试品色谱中‚在与对照药材色谱相应的位置上‚显相同颜色的斑点。而阴性色谱中无相应斑点出现。结果见图3。2．4　山茱萸的鉴别取本品胶囊6粒‚倾出内容物‚加乙醚30ml‚超声处理15min‚滤过‚滤液挥干‚残渣用甲醇1ml 使溶解‚作为供试品溶液。取熊果酸对照品‚加甲醇制成每1ml 含0．4mg 的溶液‚作为对照品溶液。取缺山茱萸药材的样品‚照供试品溶液条件同法制备‚作为阴性对照溶液。用薄层色谱法试验‚分别吸取上述供试品溶液、阴性对照溶液各4μl、对照品溶液4μl‚分别点于同一硅胶G 薄层板上‚以环己烷－氯仿－醋酸乙酯－冰醋酸（20∶5∶8∶0．5）为展开剂‚展开‚取出‚晾干‚喷以10％硫酸乙醇溶液显色‚在105℃烘至呈现紫红色斑点。供试品色谱中‚在与对照品色谱相应的位置上‚显相同颜色的斑点。而阴性色谱中无相应斑点出现。结果见图4。2．5　淫羊藿的鉴别取本品胶囊10粒‚倾出内容物‚加乙醇30ml‚加热回流1h‚滤过‚滤液蒸干‚残渣加水20ml 溶解‚用醋酸乙酯提取2次‚每次10ml‚合并醋酸乙酯液‚挥干‚残渣用甲醇1ml 使溶解‚作为供试品溶液；取淫羊藿对照药材0．5g‚同法制成对照药材溶液；另取淫羊藿苷对照品适量‚加甲醇制成每1ml含1mg 的溶液‚作为对照品溶液。取缺淫羊藿药材的样品‚照供试品溶液条件同法制备‚作为阴性对照溶液。用薄层色谱法试验‚分别吸取上述供试品溶液、阴性对照溶液各4μl、对照药材溶液和对照品溶液各4μl‚分别点于同一硅胶H 薄层板上‚以醋酸乙酯－丁酮－甲酸－水（10∶1∶1∶1）为展开剂‚展开‚取出‚晾干‚喷以5％三氯化铁溶液‚供试品色谱中‚在与对照药材色谱相应的位置上‚显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上‚显同一颜色的斑点。而阴性色谱中无相应斑点出现。结果见图5。2．6　何首乌的鉴别取本品2 粒，倾出内容物‚加醋酸乙酯40 ml、盐酸0．5ml超声处理20min‚滤过‚滤液挥干‚残渣用醋酸乙酯1ml 使溶解‚作为供试品溶液；取何首乌对照药材0．2g‚同法制成对照药材溶液；另取大黄素、大黄素甲醚对照品‚分别加甲醇制成每1ml 含1mg 的溶液‚作为对照品溶液。取缺何首乌药材的样品‚照供试品溶液条件同法制备‚作为阴性对照溶液。用薄层色谱法试验‚吸取供试品溶液、阴性对照溶液各8μl‚对照药材2μl‚大黄素和大黄素甲醚对照品各2μl‚分别点于同一硅胶G 薄层板上‚以甲苯－醋酸乙酯－甲酸（20∶2∶1）的上层溶液为展开剂‚展开‚晾干‚置氨蒸气中熏至斑点显色清晰。供试品色谱中‚在与对照药材色谱相应的位置上‚显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应位置上‚显同一颜色的斑点。结果见图6。3　讨论人参、肉苁蓉、鹿茸、山茱萸、淫羊藿、何首乌的薄层色谱鉴别经试验‚供试品在与对照品色谱相应位置上‚显相同颜色的斑点‚阴性无干扰‚表明该方法简便可行‚可有效控制补肾壮阳胶囊的质量。其鉴别条件也可为其他药物工作者提供参考。参考文献：［1］国家药典委员会．中华人民共和国药典·一部［M ］．北京：化工出版社‚2005：7－8．［2］郑虎占．中药现代研究与应用［M］．北京：学苑出版社‚第一卷．［3］郑虎占．中药现代研究与应用［M］．北京：学苑出版社‚第二卷．［4］刘飞．人参质量控制的定性与定量方法研究［J］．药物分析杂志‚2002‚22（3）：173．

  当前，男性不有发生率呈现上升趋势。大约有％的有龄夫妇不能生有，而男性因素所致不有症比约为50％。引起男性不育的因素甚为复杂，而少精子症是男性不有的重要原因。目前治疗少弱精子药物主要有抗维激素类药物克罗米芬、L-肉碱类左尼汀、抗氧化剂维生素E等，临床上多联合使用，效率不高。近年来中医从补肾益精、健脾疏肝、活通络等治法入手，取得了良好的临床疗效，对其有成分及作用机制等基础研究也日益增多。现将近年来常用中药治疗少弱精子症的分子机制相关研究进展综述如下。一、中草药（一）巴载天巴戟天具有壮阳补肾、固精安神等功效，其提取物不仅能提高精子数量及存活率、降低精子畸形率，而且对睾丸微细结构和超微结构的损伤具有修复作用。环境污染、生殖道感染以及精索静脉曲张等因素均可使精液中活性氧（reactive oxygen specis.ROS）过量，过量的ROS造成氧化应激，不仅会损伤精子膜的结构和功能，还会进一步损伤精子DNA.导致精液质量下降。而巴载天提取物能增加率丸组织中超氧化歧化酶（superaxide dismutase，SOD）含量，通过SOD清除自由基，抑制细胞膜脂质过氧化反应，对精子氧化损伤具有保护作用甲。巴戟天提取物可作用于环磷酰胺诱导生精障碍大鼠睾丸支持细胞，提高支持细胞中卵泡刺激素受体（follicle stimulatinghormone receptor，FSHR）mRNA和雄激素结合蛋 白（androgen binding protein，ABP）mRNA表达， 其机制可能是增加卵泡刺激素（follicle-stimulatinghormone，FSH）与FSHR结合，通过cAMP-PKA、Ca 等通路，促进蛋白磷酸化，增加蛋白产物ABP的表达，ABP与率酮特异性结合，可维持生精小管内的事酮水平，为精子的发生和成熟提供适宜的环境”。巴收天还能直接作用于垂体，增加垂体质量，促进其合成和分泌FSH，进而促进生精；但部分研究发现各治疗组FSH水平差异并无统计学意义，可能是巴戟天并非直接作用于垂体，而是通过影响激素水平，通过反馈机制作用于下丘脑-垂体-聚丸轴”。此外，巴戟天含有在精子的发生、成熟、获能过程中均有重要作用的锌等微量元素，可能与其改善精子质量有关。（二）肉苁蓉肉苁蓉是治疗男性生殖功能障碍的常用组方药，其活性成分主要包括苯乙醇苷类、多糖类、黄酮等物质。肉苁蓉能保护小鼠睾丸组织，改善附睾管微环境，规范生精小管形态，增加睾丸间质细胞数量，提高睾酮水平，使睾丸生精功能增强。其作用机制可能是肉苁蓉能上调精子生成过程中能量代谢的关键酶-乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）及睾酮合成过程中起关键作用的SIAR、CYPIIAI、CYP17A1、CYP3A4、B-HSD及17β-HSD等类固醇 生成酶的表达，进而提高睾酮水平其叫。肉苁蓉苯乙醇苷可提高体外大鼠精子悬液SOD活力，降低丙二醛（malonaldchyde，MDA）含量，对ROS所致精子膜的氧化应激损伤具有拮抗作用，且中、大剂量组（0.25,0.5g／mL）肉苁蓉苯乙醇苷抗氧化活性明显优于维生素cm。（三）锁阳锁阳有补肾阳、益精血、润肠通便之功效。锁阳能显著提高少、弱精子症模型大鼠的精子数量和活力，增加率丸质量。其糖类、黄酮类、多酚类物质均具有良好的清除氧自由基作用，能防止过量ROS造成氧化应激而导致的精子数量及活力下降。锁阳中含有锌、锰等多种微量元素，对精子的形态及活力均有积极作用，锁阳可诱导大鼠睾丸支持细胞中胶质细胞源性营养因子（glial cdl line-derived neurotrophic Eactor，GDNF）的表达，GDNF与精原干细胞表面受体GFRa1特异性结合后，激活Ret蛋白酪氨酸激酶。随后激活PI3K／AKt、Src、Ras／ERK1／2等信号通路，引起通路下游相应转导因子表达上调，促进精原干细胞的增殖，进而促进精子发生过程：GDNF还能以自分泌方式促进支持细胞的分裂和成熟，参与睾丸的发百：此外，GDNF能以旁分泌形式作用于毛细血管内皮细胞，促进其增殖及形成紧密连接，参与血睾屏障的形成門。（四）黄芪黄芪的有效成分包括黄芪总酬（TFA），黄芪总多糖（TPA）、黄芪总皂苷（TSA）等。黄芪作为体外添加剂在辅助生殖技术如宫腔内人工授精（IUI）、体外受精（IVF）以及精子冻存技术中具有应用价值，加入黄芪注射液后的人精子活力、直线速度（VSL）、曲线速度（VCL）、平均路径速度（VAP）均明显升高，这可能与黄芪的抗氧化活性以及能增加精子内Ca＊浓度，增强精子线粒体活性有关。cAMP反应元件调节因子（cAMP-responsiveelement modulator，CREM）和睾丸特异性CREM激活 因子（activator of CREM in testis，ACT）在精子减数分裂后的细胞分化中起重要作用，黄芪还能通过增加大鼠睾丸中CREM和ACT蛋白的表达来促进精子发有回。此外，TPA具有抑制血小板凝集，促进纤溶活性、扩张血管的作用，还能提高抗氧化相关酶的活性，降低过氧化脂质含量，减轻自由基造成的氧化损伤，改善精子质量。（五）淫羊藿淫羊藿有增强精子活力、增加精子数量、刺激阴茎勃起等作用。淫羊藿苷是淫羊藿茎叶中提取的总黄酮，是淫羊藿的主要生物活性成分。寒丸生精小管内保持较高浓度的率酮对促进精子的发生具有重要作用，淫羊藿苷有性激素样作用，能直接刺激性腺使事酮分泌增加。此外，淫羊董苷还能通过调控在睾酮合成中起重要作用的外周型苯二氨卓受体（peripheral benzodiazepine receptor，PBR）和类固醇激素急性调节蛋白（steroidogenic acute regulatory protein.StAR）的表达，以及作用于下丘脑-垂体-性腺轴来调控率酮水平＂，淫羊藿苷能提高大鼠精子悬液SOD活力，降低MDA含量，有助于减轻精子DNA的氧化性损伤，保护精子的正常形态和功能回，有研究表明在腺嘌吟所效睾丸损伤的模型大鼠中，与甲基事酮相比，淫羊藿总黄酮抗氧化作用优于前者，但对血清单酮值的改善弱于前者：与维生素E相比，其对血清率酮值的改善优于前者，而抗氧化作用则于前者。此外，淫羊蕾苷还能通过激活ERK1／2信号通路促进支持细胞体外增殖”，而支持细胞有为生精细胞提供支架、参与血-睾屏障的形成，分泌多种精子分化、成熟所必须的物质等重要功能，这可能是淫羊藿苷改善生殖功能的作用机制之一，但其是否能促进体内支持细胞增殖，尚待进一步研究。             (六）构杞子枸杞子的主要活性成分为枸杞多糖（lyciumburbarum polysaccharide，LBP），LBP主要由木糖. 半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、甘露醇粗成。LBP可通过调节垂体性腺轴，维持T、TSH、LH之间平衡，维持正常的生精环境。LBP具有抗氧化活性，能提高辐射诱导的少弱精子症模型小鼠精子悬液SOD活力，降低MDA含量，减轻睾丸组织氧化损伤，促进生殖腺体的发育和恢复，提高精子数量和活力（3）。精子减少与生精细胞发生凋亡有关，调控生精细胞凋亡的基因主要有Fas／Fasl基因、Bel-2／Bax基因家族、P53基因、HSP基因等。研究发现，LBP可通过上调抑凋亡基因Bel-2、Bcl-w、Hsp70的蛋白表达，下调促网亡基因Bax、Fas、P53的蛋白表达，以及抑制细胞色素C（cytC）自线粒体的释放，减少Caspasc-3的表达，从而减少生精细胞的凋亡1Am。此外，有研究发现，在环磷酰胺诱导的少精子症小鼠模型中，枸杞煎提液各剂量治疗组较对照组睾丸中初级精母细胞（4C细胞）比例均有一定程度升高，因而推测枸杞子治疗少精子症的机制与其能促进精原细胞分裂和分化，进而促进4C细胞的增殖有关。（七）荒丝子菟丝子主要含黄酮类、糖苷、微量元素等，其中菟丝子黄酮为其主要药效成分，有促进生殖系统发有，改善精子活力、存活率的作用。菟丝子黄酮在妇科内分泌疾病中也有广泛应用，这表明菟丝子并非是某种激素的替代物，而是能够作用于下丘脑-垂体。性腺轴，具有促性腺激素样作用。菟丝子提取物有较好的抗氧化活性，且0.25g／mL生药的菟丝子提取物抗氧化性明显优于维生素C，能提高精子悬液SOD 活性，降低MDA含量，提高精子抗氧化能力，对精子膜结构和功能具有保护作用”。菟丝子黄酮可通过修复生精细胞S期，干预生精细胞的分裂周期，保护生精细胞的增殖能力，同时可通过下调减亡基因Fas与Fasd的表达来减少生精细胞的凋亡P阿。菟丝子提取物能增加大鼠睾丸中细胞色素P450芳香化酶（cytochromeP450aromatase，P450urom）和CYP19的表达， P450amom是睾丸合成達激素的限速酶，CYP19是丝激素合成的关键基因，而内源性雄激素水平异常可使输精管、附事和事丸网小管发生损害，导致生殖细胞凋亡和分化障碍，因此，菟丝子可能通过调控建激素的合成来影响精子的发生叫。适宜浓度的英丝子在有效的时间内能明品改善弱精子症患者体外精子活力、运动功能、增强受精过程中重要的蛋白水解酶-顶体酶的活性，利于精子对卵细胞卵丘的分解及对透明带的穿透，易于受精，这可能是其作用于弱精子症的机制之一、同时也表明菟丝子在体外受精技术中可能具有应用价值回。（八）五味子五味子是治疗男性生殖功能障碍的常用中药，其主要成分为多糖、木脂素、黄酮等。五味子多糖能使环磷酰胺诱导的生精障碍小鼠生精上皮层数增加、细胞层次分明、生精细胞排列整齐；较对照组精子浓度、精子存活率升高，精子畸形率降低，血清FSH和LH水平降低，睾丸组织中T含量升高，其机制可能与恢复下丘脑-垂体-性腺轴调控，调节生殖激素水平有关P門。此外，五味子多糖、木脂素均有较强的抗氧化作用，能提高SOD、GSH-PX等抗氧化酶活性，对超氧化阴离子自由基、羟基自由基及DPPH自由基均有一定的清除效果，可能与五味子保护生精功能有关队当。（九）丹参丹参为临床常用中药，目前主要在心脑血管疾病的治疗中广泛应用，而丹参类药物在男性不有、附睾炎、精索静脉曲张等男性生殖系统疾病中也有较好疗效。丹参水提液能改善由环磷酰胺损伤构建的少，弱精子小鼠模型的精子浓度、存活率、总活力，提高向前运动精子百分比（PR）、精子平均运动速度（CVP）及直线运动速度指标（VSL），且可以减少生精细胞早期染色体畸变与精子DNA损伤，这可能与其抗氧化活性有关习，此外，丹参对大肠埃希菌。金色葡萄球菌等均有抑制作用，复方丹参注射液能明显提高大肠埃希菌生殖系统感染小鼠的精子数量，精子存活率，降低精子畸形率m。二、中成药（一）五子树宗丸有“种子第一方”之称的五子衍宗丸是中医补肾益精经典名方，由枸杞子、英纹子、车前子、五味子、覆盆子5味中药组成。多项临床试验表明五子衍宗丸可品著改善少，弱精子症患者精液质量，提升精子浓度，提高精子总活力，降低精子畸形率。与左旋肉碱相比，五子衍宗丸对精子数量和浓度的改善优于左旋肉碱，而对精子总活力的改善则弱于左旋肉碱，两者合用具有协同作用。其作用机制有：（1）参与调节下丘·垂体-性腺轴，促进事酮的分泌：（2）提高精子胞浆中果糖及Ca浓度，增加精子线粒体膜电位，减轻精子线粒体结构损伤，维持精子正常的活力及运动能力吗：（3）有较强的抗氧化能力，可减轻辐射诱导的模型大鼠事丸及精子的氧化损伤，其抗氧化作用优于维生素EPM，（4）参与调控支持细胞线粒体自噬来维持支持细胞正常功能，以及抑制Cox7a2基因过表达米调控大鼠睾丸支持胞雄激素结合蛋白（ABP）、转铁蛋白（TF）、抑制素B（INHB）等分泌产物水平，进而改善生精功能門：（5）提高Bcl-2蛋白表达水平，降低Bax、Caspase-3、p-p53、p-p38蛋白的表达，减少生殖细胞（二）养精胶囊养精胶囊是益肾填精法的代表方药，成分包括淫羊藿、当归、黄精、熟地、紫河车等，可用于少弱精子症、物起功能障碍等男性生殖系统疾病。养精胶囊能通过引发PBK／AKT通路激活，上调POU3F1，促进GC-1精原干细胞增殖凹。养精胶囊还能通过cAMP／PKA通路，促进SIAR、CYPIIAI、HSD3B等类固醇生成酶mRNA和蛋白的表达，提高睾酮的合成。同时StAR还能下调促网亡因子Bax．Caspase-3的表达，提高抗凋亡因子Bd-2的表达，减少生殖细胞凋亡．39。养精胶囊除能促进精原干细胞增殖及减少生殖细胞凋亡外，还能改善睾丸微循环，维持适宜的生精环境，与其抗氧化活性及促进血管内皮生长因子分泌相关，但具体作用机制尚缺乏文献报道。（三）黄精贷育胶囊黄精赞有胶囊山黄精、淫羊蕾、菟丝子、丹参、枸杞子、五味子、熟地黄、续断等中药组方。黄精赞育胶囊能增加少弱精子症患者精子数量，提高精子活力，且与克罗米芬、左卡尼汀等药物联合应用疗效更佳。其改善精子活力及运动能力的机制可能与其能增强精子线粒体琥珀酸脱氢酶和乳酸脱氢酶能量代谢活性，提高精子ATP含量，以及增加与精子获能及运动能力相关的钙通道蛋白Catsperl的表达相关”。此外，黄精费有胶囊还能通过调控Bax，Caspase-3和Bcl-2蛋白和基因的表达来抑制生精细胞减亡。精子形态结构以及DNA完整性与精子质量密切相关，该药除能改善弱精子症患者的一般精液参数外，还能有效改善精于DNA损伤，对精子头体、颈部、鞭毛等超微结构形态也具有修复作用，具体作用机制不详，可能与其抗氧化作用有关”.综上所述，少弱精子症的病因复杂，包括生殖道感染，环境及理化因素、精索静脉曲张、内分泌疾病、遗传性疾病等。在治疗上，西医主要应用克罗米芬、左卡尼汀，促性腺激素等药物，疗效有限，而传统中医药取得了较好的疗效。其作用机制主要包括：（1）抗氧化作用 如巴戟天、肉苁蓉、锁阳、黄芪、淫羊藿等能增加睾丸中SOD含量，降低MDA含量来拮抗生殖细胞及精子的氧化损伤，且抗氧化活性普遍优于维生素E和维生素C：（2）调节激素水平 如巴戟天、肉苁蓉、淫羊藿、枸杞子、菟丝子、五味子等能作用于下丘脑-垂体-睾丸轴来促进睾酮的分泌，且肉苁蓉、淫羊藿还能通过增加StAR等类固醇生成酶的分泌来促进睾酮分泌；（3）促进生精细胞增殖 锁阳可以增加睾丸GDNF表达，激活P13K／AKt、Src、Ras／ERK1／2等信号通路，促进精原干细胞的增殖。而枸杞子也能促进精原细胞分裂和分化，促进4C细胞的增殖，但其具体作用途径尚不明确：（4）抑制生精细胞凋亡 如枸杞子、苑丝子可以通过上调抑网亡基因Bcl-2，下调促凋亡基因Bax、Fas来减少生精细胞的凋亡：（5）其他 如巴戟天、锁阳富含锌等微量元素对精子的生成过程也具有重要作用：锁阳、注羊藿能促进支持细胞增殖：苑丝子、黄芪可增加体外精子的运动能力，在辅助生殖中具有应用价值等。而五子衍宗丸等中成药则利用多种中药优势互补，综合了上述多种作用途径。此外，多项临床研究表明中药联合左卡尼汀，维生素E、克罗米芬等能取得更好的临床疗效。然而传统中药组方药物种类多以及每种中药成分复杂，使得构效关系不明确，目前相关研究尚处于初级探索阶段，多数报道仍局限于临床观察，且较多研究是在同一水平的重复。未来仍需进一步加强相关中药的有效成分、作用机制以及不良反应的研究。为临床辩证用药的标准化奠定理论基础，使中医药治疗少弱精子症更加科学化和规范化。数谢：本文受四川省科技厅基金（14）C0803），四川省教育厅基金（15ZA0164），四川省人力资源和社会保障厅留学四国人员科技项目（川人社办发【2016-64】）基金项目资助男性关键词 少精子症 弱精子症； 中药， 不弃。

屠鹏飞 何燕萍 楼之岑   （北京医科大学药学院 北京 100083)从裁培肉苁蓉（Ciustascle deserticola Ma）中分离到10个化合物，利用光谱和化学方法鉴定了它们的结构，分别为v-戊内酯（1）、6-去氧梓醇（2）、8-表马钱子酸（3）、D-葡萄糖（4）、鹅掌楸脂素 liriodendrin（5）、B-谷甾醇葡萄糖式（6）、半乳糖醇（7）、B-谷甾醇（8）。谷面醇葡萄糖式-／-0-十七酸酯（9）和蔗糖（10），其中化合物（9）为新化合物，化合物＊（1）、（7）为首次从本属植物中分得，其它化合物都为首次从本植物中分得。药用物作肉苁蓉为补肾壮阳常用中药之一，近年来，由于大量采挖，野生资源濒于枯竭，为了解决药源紧缺问题，内蒙古阿拉善盟肉苁蓉栽培场对其进行了栽培研究，目前已引种栽培成功。为了比较栽培品与野生品的化学成分的差别，我们对栽培的荒漠肉苁蓉C.desertuoola Ma进行了化学成分研究。从正丁醇萃取部分分离鉴定了7个化合物，分别为B-戊内酯（1）、6-去氧梓醇（2）、8-表马钱子酸（3）、D-葡萄糖（4）、鹅掌楸脂素 liriodendrin（5）、B-谷甾醇葡萄糖甙（6）和半乳糖醇（7）从乙酸乙酯萃取部分分离鉴定了3个化合物，分别为B-谷甾醇（8）、B-谷甾醇葡萄糖甙-3＇-0-十七酸酯（9）和蔗糖（10），其中化合物（9）为新化合物，化合物（1）、（7）为首次从本属植物中分离得到，其它化合物均为首次从本植物中分离得到。1 结果与讨论1.1 化合物9 B-谷甾醇葡萄糖甙-3＇-0-十七酸酯（B-sitosteryl glucoside-3-0-heptadecoicate） 氯仿-甲醇（2：1）溶液中析得白色脂状物，H-NMR谱和C-NMR 谱显示为B-谷甾醇葡萄糖式的脂肪酸酯（表1、2），把化合物9的”C-NMR谱与B-谷甾醇葡萄糖甙（6）的标准谱比较（表2），发现葡萄糖C-3＇的化学位移向高场移动了4.4ppm，C-2＂的化学位移向低场移动了1.4ppm，C-4＇的化学位移向低场移动了2.0ppm，说明脂肪酸是连接在葡萄糖C-3＇-0-上．化合物9进行碱水解，得化合物9a和9b．9a经TLC和IR比较，与β-谷甾醇葡萄糖甙完全相符。将化合物9b进行甲酯化得脂肪酸甲酯，经GC-MS分析，此脂肪酸甲酯的M＋为m／z 284、所以脂肪酸为十七酸。化合物9的＇H-NMR显示有7个甲基（50.67,3H，s；δ0.81,3H，d；50.83，3H，d，6 0.86,3H，t，δ 0.89,3H，t；6 0.92,3H，d；6 1.00,3H，s），母核上有6个甲基，其脂肪酸链 上只能有1个甲基，所以此留肪酸为正十七酸。综上所述，化合物9鉴定为B谷甾醇葡萄糖式-3-0-十七酸酯（B-sitosteryi giucoside-3-0-heptadecoicane），为新化合物，  Tabie 1 H-NMR spectral dasa of Sanl 5 Tabie 1 H-NMR spectral dasa of Sanl 59Cm CDC6(in pirfine-d)0.67(3H,1,C-CH4)0.75(3H,s.C,-CH)0.81(3H.d.CCH.)0.95(3H.4.C-CH)0.83(3M,0,C-CH)0.97(3H,4,Cr-CH.)0.86(3H,x.C-CH,)0.99(3H,t,C-CH,)0.89(3H,1.C1-CH,)0.92(3H,4.C-CH)1.02(3H,4,C.-CH)1.00(3H..C.CH.)1.03(3H,s.C-CH)1.23<28H,br.s,eliphatie chain H)2.30(2H-t,e-CH,of farty scid)4.35(1M,m.3-H)5.33(1H.br.s.6-H)4.37(1H.m.3-H)5.15(1H.d.8-4)Talle 2 C-NMR speciral data of S and 5Cia pridne-6) 월0 -C 율9c ⑮ 월⑮037.3 37.231.9 31.873.3 73.342.3 42.2140.4 140.7122.0 121.632.0 31.832.0 31.80 50.1 S0.110 36.7 36.611 21.1 21.112 39.8 39.713 42.3 42.2 8 29.8 29.914 56.7 56.6 28 18.8 18.824.2 27 19.8 19.824.328.2 28.2 28 23.0 23.19117 56.2 56.0 29 11.8 11.718 11.9 11.9 1 102.7 102.219 19.4 19.1 76.2 74.820 36.2 36.1 3 72.6 70.021 19.0 19.0 0 73.3 71.322 33.9 33.9 할 79.8 78.023 26.2 2.2 824 45.8 45.863.7 62.4P 174.134.3- 29.925.05*~11 29.812 29.529.429.115* 27.222.7142 实验部分2.1 仪器及药品Kofer 型熔点测定仪（温度计未校正），红外光谱仅为Perkin-Elmer 983G，核磁共振谱仪：H-NMR，Bruker 400MHz，＂C-NMR：JEOL FX-900.22.5MHz；质诺仅为：ZAB-HS，FAB测定 底物为S-GLY，GC-MS为GMS-3000，大孔树脂D-101为天津果胶厂生产。 2.2 实验材料荒模肉苁蓉Cutascle desertinla Ma的干燥肉质基为内蒙古阿拉善盟内苁蓉试验场栽培，作者鉴定。2.3 提取分离荒漠肉苁蓉干燥药材15kg，粉碎，用95％乙醇渗流提取，将乙醉提取液减压浓缩得3.5kg浸膏，把浸膏分布于10L水中，用乙酸乙酯萃取（1000mmlx7），合并乙酸乙酯萃取液井浓缩，得浸膏55g，水层加入大孔树脂D-101柱中，用水洗脱，得组分1（约3kg）和组分2（27.5g），再用50％乙醇洗脱，得组分3（55g），最后用95％乙醇洗脱，得组分4（4.5g），组分2经反复硅胶柱层析，用CHCI，-MeOM（9·1）至CHO，-MeOH-H．O（6：4：0.5）程序洗脱，得化合物1～4；组分3经理胶柱层析，用CHCI-MeOH（8：2）洗脱得化合物5，组分4经硅胶柱层析，以CHCIs-MeOH（9：1）为洗脱剂，得化合物61组分1加甲醇溶解，放置，折出白色结品，再用甲醉重结品得化合物7：乙酸乙酯萃取物经硅胶柱色谱，用Petr．etber-EOAe（9·D）至EIOAc-MeC．1（8·2）程序 洗脱，得化合物8～10。2.4 结构鉴定Y-Valerolactone（1），白色粉末，＂HNMR（300MHz）＆（ppn）：1.27（3H．d，Me）．1.68（1H，d．a- H,J=2.7Hz),2.54(2H,m.B-H),2.63(1H,s,u-H),5.26(1H.m,y-H);"C- NMR( CDC,)6 (ppm):168.7(C-2),67.4(C-5),40.6(C-3).29.5(C-4).19.6(C-6) 6-deoxycatalpol（2）：无色方品（MeOH）．mg 204～206C，1Rdcm-，3400,1640，FAB-MS m/,347(M+1)*.364(M+H,0):H-NMR(300MHz.D,O)5(ppm),1.36~1.50(1H.m.H-6)。 2.19(1H.m.H-5).2.37(2H.m.H-6.9),3.63(1H.H-7).3.75.4.19(2H.AB system.J= 13Hz,H-10),4.73(1H.d,J=8Hz,anomarc H).4.9~5.0(2H,m,H-4,1).6.19(1H.d.J- 6Hz,H-3):"C-NMR(D,O)b(ppm):141.9(C-3),108.3(C-4).101.1(C-P),96.9(C-1). 78.7(C-3').78.2(C-S').75.3(C-2).72.0(C-4').71.4(C-8),64.0(C-7),63.1(C- 10,6).44.8(C-9).36.6(C-6).33.3(C-5) 8-epiloganic acid（3）；无色针品（MeOH）．mp 146～149C，IRdcm-1,3400（OH），2800～ 2500,1680,1640,1430;FAB-MSm/,377(M+1)*,'H-NMR(300MHz,C.D,N)6(ppm);1.16 (3H,d,J-7.2Hz,CH,),2.25~2.40(2H,m,H-6).2.26(1H,m.H-8),3.06(1H,dt.J=3, 8.5Hz,H-9),3.56(1H,m,H-5).4.0~4.6(H-7 covered by glucosylic signals),5.41(1H.d.J -8.1Hz,anomeric H).5.91(1H.d,3=3Hz.H-).7.92(14.8.H-3);"C-NMR(C.D,N) (ppm),169.6(C-11),150.6(C-3),114.5(C-4),100.4(C-1).95.7(C-1),78.6(C-7, 3,5),74.7(C-2').71.4(C-4').62.8(C-6).44.7(C-9),42.3(C-6).41.3(C-8),30.5 (C-5).14.3(C-10)0 D-glucose（4）；无色砂品（MeOH）；IRcm，3300（OH），1440,1100,980，FAB-MS：1810M ＋1）＊．其TLC行为与葡萄糖标准品一致。Liriodendrin（S）：白色粉末（MeOH）；1R42cm-，3400（OH），1590,1495，＂C-NMR（DMSO- d.)る(ppm),153.5(C-3".3".5.5),138.5(C-4,4"),134.3(C-1'.1),104.9(C-2',2".6 6^),103.8(glu-H),86.1(C-2.6).77.8(gu l-5),7 7.2(glu-3 ),75. 2(glu-2),72.4(C-4.8),70.6 (glu-4),61.8(glu-6).54.6(C-1.5)㎡。 B-sitosteryi gluconide（6）：白色粉末（MeOH），IR：cm-＊，3400（OH），2900，与标准品一致。Galactinol（7）：无色针品（MeOH），mp 169～171C，IRcm：3280（OH），1440,1075． 1010;'H-NMR(400MHz,DyO),b(ppm),3.68(2H.q.H-2.5),3.71~3.82(4H.m.H-1.6). 3.87(2H,dd,J=11.5,2.7,H-3.4);C-NMR(D,O)b(ppm):70.8(C-3,4),69.2(C-2,5). 63.2(C-1.6)- B-sitosterol（8）；无色针品（EIOAc）；IRdcm：3420（OH ），2940．其红外光谱数据和TLC行为与标准品一致。 B-sitonteryl glaconde-3＇-O-bepuadecolcate（9） ：白色脂状物：H-NMR（400MHz，CDCL）见表 1，＂C-NMR（CDC）见表2．化合物9的碱性水解，化合物（9）90mg，溶于甲醇-四氢呋喘（2：1）混合液9ml中，加人INNaOH lml，室温搅拌1h，放置过夜，TLC检测反应完全，加人水10ml，有白色沉淀析出，收集白色沉淀，用CHCI，-MeOH（2：1）重结品，得化合物9m，经IR和TLC比较，与化合物（8）完全一致，碱水解后的滤液加盐酸酸化至pH＜1，用二氯甲烧（4x5ml）萃取，回收二氯甲烷，得萃取物（90），将然取物（90）于无水乙融5ml中，加入3-甲基-1-对-甲苯基三氮烯50mg，搅拌2h，室温放置过夜，得脂肪酸甲酯（9c），经GC-MS鉴定为正十七酸甲酯。Sucrose（10），无色方品（MeOH），IRdcm＂，3380（OH），FAB-MS m／a，343（M＋1）＊，＂C-NMR(C,D,N)6(ppm),106.3(C-2).94.8(C-1).84.0(C-3).79.1(C-4),76.7(C-5). 75.1(C-2,3),73.7(C-5),71.8(C-4),65.0(C-1).64.0(C-V),62.8(C-6) 致谢：北京医科大学测试中心，军事医学科学院波请宝测定NMR，北京大学波谱室代测MS，中国药品生物制品检定所波谱室测GC-MS，参考文献1 Sadtier Sundard Specua,"C-NMR Spxcea.1978,3509C 2 Pirkle WH,Satenga DL,Pavge MS.J.Org.Chen,1977,42(2),384 3 Kotayaahi H,Karaawa H,Miyse T,Fukutina S.Crm,Parm,But.1985.33(9),3645 Kobayaahu H,Komatsu J,Yakgku Zzh.1983.103(5),508 5 Kobayeshi H,Karsaws H,Miyase T,Pakccima S.Chen,Phars,But.1985,33(4),1452 6 Sadter Standand Speetra,IR Spectra 1952,1044 Sedtler Stancard Spectra,H-NMR Specra,1971,10331 Breitmaier E,Haas G,Varter W.Attas of Carbon-13 NMR Dute  (Vel. 1). 1979.998 9 Sadter Sandard Speces,"C-NMR Spectrs.1980.8110C 

肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉 Cistanche deser-tioola Y.C.Ma.或德赢vwin登录 Cistanche Tubaloss （schrenk） R.Wight的干燥带鳞叶的肉质茎，成面温，具有补肾阳、益精血、润肠通便和延缓衰老等功能只肉苁蓉在补肾阳方剂中出现的频率最高，素有“沙漠人参”之称随着近些年来的乱采乱挖，导致野生植物资源的逐渐枯竭，现已被列为国家二级保护植物之一，因此如何科学的理解肉苁蓉药理学作用，科学开发植物资源日益被提到意识日程，本文就近年来关于肉苁蓉药理作用研究予以综述。      1 增强免疫功能肉苁蓉总苷对60Coy 照射损伤小鼠T淋巴细胞功能的影响研究发现，肉苁蓉总苷能增强受照射小鼠迟发型超敏反应，增加胸腺指数，增强T淋巴细胞增殖反应和11-2的活性，表明肉苁蓉总苷对辐射损伤小鼠的T淋巴细胞功能具有增强免疫功能，对造血系统损伤有保护作用，并能不同程度地调节辐射损伤小鼠的体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫功能旦沈敬华等”报道肉苁蓉中的多糖可增强T淋巴细胞增殖反应、巨噬细胞产生IL-1，淋巴细胞释放IL-2、活化NK细胞及T细胞表面标志CD3．CD．，CD．表达，对小鼠的细胞免疫功能具有品著调节作用.     2 调节神经内分泌系统的作用下丘脑是人体神经内分泌系统的调节和控制中心，肉苁蓉对下丘脑的老化有调整作用，并能改善阳虚动物的营养、体质量、耐力和抗寒力等，对阳虚患者具有明显的强壮作用和治疗作用.王德俊等”用肉苁蓉水煎液对雄性小鼠灌胃2-3周，发现其能促进睾丸生精功能，改善附睾的微环境，何伟等”测定肉苁蓉中的麦角甾苷和甜菜碱具有雄性激素作用，能显著增加去券大鼠精囊前列腺的重量，荒溴肉苁蓉还可减轻肾上腺的质量 Joumal Elccronic Pais陈亚琼＂发现肉苁蓉能促进垂体部分细胞增加，促进卵果孕激素的分泌，还能增强性腺轴维激素受体孕激素受体的表达，抑制卵果和间质的白细胞介素-2受体的表达，表明肉苁蓉可能参与了大鼠神经分泌免疫网络调节机制.     3 抗衰老和抗氧化作用衰老与自由基引起的生物膜脂质过氧化膜结构损伤和功能失活有密切关系，正常情况下，超氧化物主要由SOD清除，随着年龄增大，衰老机体的SOD减囊，抗氧化剂减少，自由基损伤因素（OFR-MDA）增加，导致机体衰老，孙云等发现肉苁蓉提取物能明显增强小鼠血清SOD活性，降低其血浆、脑及肝组织中脂质过氧化物的含量和脑组织中MAO-B的活性，并且呈现出量效关系，表明肉苁蓉可能通过上述机制产生抗衰老作用，王晓雯等国指出肉苁蓉总苷有清除体外自由基和对OH引起损伤的DNA损伤的保护作用，并推测其清除自由基作用可能是其抗衰老，抗辐射损伤与保护心肌缺血的机制之一，进一步研究表明，苯乙醇苷总苷对小鼠组织有抗氧化作用，对小鼠急性脑缺氧和小鼠心肌损害有一定的保护作用，这与其对SOD的保护作用和脂质抗氧化作用有关，     4 增强体力和抗疲劳作用韩春丽＊等用肉苁蓉 15％水煎液给健康小鼠港胃，记录游泳时间，结果肉苁蓉组显著高于对照组同时测定小鼠负荷运动后血清肌酸激酶，肉苁蓉组上升幅度显著低于对照组，表明肉苁蓉可降低小鼠负荷运动后血清肌酸激酶升高幅度.对小鼠负荷运动后骨骼肌超微结构的观察，细胞膜通透性维持正常，肌纤维结构未见明显损伤.这都证实肉苁蓉具有增强体力和抗疲劳作用.5 通便作用徐文签等＊通过实验证实，肉苁蓉能引起大银胃底条和豚鼠回肠的收缩，并且这种收缩可被阿托品抑制，说明其具拟胆碱活性与通便作用有关。     6 肝脏的保护作用日本大仓多关子叫发现肉苁蓉水煎液及提取物能明显抑制由CCL，诱导的GOT，GPT升高倾向。有防止CCL，所致的肝中毒作用。赵锡安等通过肉苁蓉对负荷运动小鼠肝组织、糖原及乳酸脱氢酶同工酶（LIED活性的影响，表明肉苁蓉可增加负荷运动小鼠肝糖原含量，降低LDH5同工酶活性，对肝脏具有保护作用。     7 心肌缺血的保护作用毛新民等研究发现肉苁蓉苯乙醇总苷能明显改善缺血心电图，减少心肌梗死面积，提高心肌组织中磷酸肌酸激酶活力，肉苁蓉苯乙醇总苷对缺血心肌具有保护作用。     8 对脑缺血再灌注损伤的保护作用肉苁蓉提取物对小鼠脑缺血损伤实验叫表明，肉苁蓉总苷可以使脑缺血后再灌注24h的小鼠脑梗死范围明显缩小，并能显示出肉苁蓉总普对神经元凋亡的显抑制作用，其主要机制主要在于清除氧自由基及减轻脂质过氧化对脑组织的损害。     9 改善学习记忆作用从德赢vwin登录 中提取出的苁蓉总普有改善氢化可的松导致的肾阳虚小鼠学习记忆障码，提高小鼠记忆障碍水平的作用照     10 其他作用肉苁蓉能增强败血症大鼠线粒体能量代谢，减轻败血症肝损伤，降低败血症大鼠死亡率的功能門肉苁蓉多糖具有明显的促进成纤维细胞的生长作用，此外，肉苁蓉苷类化合物还有镇静作用的报道。     11 结语近年来对肉苁蓉药理作用的研究取得了很大进展，在此基础上，我们仍需对肉苁蓉的有效成分及药理作用方面进行更广范围和更深层次的研究，尤其对上述的增强免疫功能、调节神经内分泌系统的作用、增强体力和抗疲劳作用、心肌缺血的保护作用及对脑缺血再灌注损伤的保护作用等药理作用的进一步研究，为中药肉苁蓉的临床应用提供理论基础和科学依据，以推动我国这一传统中药的发展

邓巍 300000 天津市和平区中医医院 关键词 社区中医门诊 内苁蓉肉苁蓉是一种极有药用价值的植物。在临床应用中可以增强体质、提高免疫力、减缓衰老，治疗老年痴呆症和记忆力减退等疾病的中药，为生活在高竞争时代的当代人改善其亚健康状态和提高生活质量提供较好的物质条件。为探讨社区中医诊疗中药肉苁蓉临床使用药理特点，2009年1月-2011年1月收治患者544例，对其临床资料进行分析，同时进行小兔子动物实验，肉苁蓉具有增生物免疫功能，抗衰老·增强雄激素分泌，利便等作用。中医门诊医师必须了解和掌握各种肉苁蓉的药理作用，根据其不同疾病，在临床上正确使用，促使疾病的早日康复。临床资料2009年1月-2011年1月收治患者544例，544例社区门诊患者主要为糖尿病例256例，老年性多尿症157例，便秘102例，其他29例。肉苁蓉的药理作用本次使用的肉苁蓉采取的炮制方法不同于现代肉苁蓉普遍炮制方法，是根据成书于我国南北朝时代，我国历史上第一部制药专著《雷公炮灸论》上记载的古法炮制方法，先把肉苁蓉用酒浸一晚上，再从中间劈开，去掉一层白膜，蒸约7个小时，取出，用酥油灸后即可。确保肉苁蓉补肾增阳，润腑通便的功效。增强生物免疫功能：544例患者随机分为两组，每组272例，一组服用肉苁蓉水煎物，一组不服用肉苁蓉水煎物，两组比较。服用肉苁蓉水煎物组，患者自觉免疫力明显提高，糖尿病并发症的症状也有所减轻，不服用肉苁蓉水煎物组，患者自觉免疫力无明显变化。经过血化验显示服用肉苁蓉水煎物组巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数显著升高，证明其有一定恢复非特异性免疫功能的作用。 抗衰老作用：服用肉苁蓉水煎物组患者，自觉延缓皮肤衰老，机体免疫功能增强，化验显示超氧化物歧化酶方面有显著变化。不服用肉苁蓉水煎物患者无此变化。用8只兔子分成两组，肉苁蓉水煎物分别以每千克体重每日200mg 灌胃，给药9周。结果表明，给药组兔子活动量加大，好动，各方面衰老程度有所减轻。雄性激素样作用：服用肉苁蓉水煎物组患者男子体毛变的更加浓密，女子腋毛有所增加。男性副性征较明显，性欲较以前旺盛。尿化验显示尿氨减少。对经胃管给予6只兔子肉苁蓉醇水煎物，剂量为每只每日200mmg，发现兔子活力明显增加，雄性性征明显，肌肉发达。兔血中雄激素水平较给药前明显提高，肾脏红细胞生成素增多骨髓正铁血红素的合成提高。有利于排便作用：服用肉苁蓉水煎物组患者，便秘症状明显好转，大便次数时间均恢复正常。其对照组无此现象。经过兔子解剖实验发现肉苁蓉具有明显的通便和治疗便秘作用，抑制大肠的水分过分吸收，增强蠕动，缩短排便时间及排便时的痛苦。讨论肉苁蓉是一种极有药用价值的植物，在临床应用中可以提高免疫力、增强体质、减缓衰老，治疗老年痴呆症和记忆力减退等疾病的中药，为生活在高竞争时代的当代人改善其亚健康状态和提高生活质量提供较好的物质条件。它的药理作用作为一名社区临床医疗工作者是必须要掌握的。参考文献1 刘启恩．宽肠理气汤治疗粘连性肠梗阻112例0．中外健康文摘·2006（6）：15-17．2 徐红欣，田发琳，宽肠理气汤保留灌肠治疗术后腹胀肠麻痹80例［］．黑龙江医学，1999.10:79-80. 3 张思臣.HPIC同时测定肉苁蓉中松果菊苷和麦角品背含量［D］．中药志，2004.10：740. 4 中华人民共和国药真（一部 0，北京：工业出版社，2000：103．5 肖培根·李大鹏·杨世林，肉苁蓉药理及化学成分的研究进展D］．中药志，2001.9；107. 6 成喜雨，郭斌，倪文：肉苁蓉研究进展［］．天然产物研究与开发，2005.17：235-237．7 蔡鸿，姜勇，不同产地肉苁蓉中有效成分的定量分析D］．中国中药志，2005.6（30）：839. 8 吴小春，史颖，肉苁蓉的研究与临床［］，甘肃中医，2007.20（12）：21-24．9 张思臣·刘丽-肉苁蓉药材质量标准的研究0］．中国中药杂志，2000.25（6）：359．10 宋志宏，居鹏飞，德赢vwin登录 的苯乙醇苷成分01．中草药，2000.31（11）：808-80911 欧阳杰·赵兵，王晓东．循环超声提取肉苁蓉中苯乙醇糖式类化合物的研究［］.天然产物研究与开发，2003.15（3）：232-235．

肉苁蓉在中国是传统的名贵补益中药材，味甘，咸而温，具有补肾阳、益精血、润肠通便、延缓衰老等功效。《药典》记载肉苁蓉的有效成分主要有：苯乙醇总苷，包括松果菊苷 （海胆苷） 、毛蕊花糖苷（麦角甾苷 ）。《中国药典》记载肉苁蓉现代药理研究表明，肉苁蓉除作为传统的补肾壮阳中药外，其中的苯乙醇苷类化合物主要是松果菊苷和毛蕊花糖苷，是肉苁蓉功效的核心成分。松果菊苷和毛蕊花糖苷具有广泛的药理作用，包括抗氧化、保护神经、改善学习记忆、抗炎、抗肿瘤、保护肝脏以及免疫调节等作用。肉苁蓉所含有效成分肉苁蓉有效成分之一 松果菊苷【分子式】C35H46O20【分子量】786.72【性状】白色结晶粉末，溶于甲醇、乙醇、热水，微溶于乙酸乙酯松果菊苷C35H46O20松果菊苷，含有多种药用有效成分，包括多糖、糖蛋白和烷基酰胺等。松果菊苷的治疗用途十分广泛，包括对免疫系统的增强作用、抗癌作用、抗氧化作用、肝脏的调节作用等。现代研究表明，松果菊苷通过进入人体内，达到补肾益精、提升机体免疫力、延缓衰老等药理作用。目前在关于老年痴呆的致病机理及抗老年痴呆药物的筛选研究中，发现松果菊苷具有改善记忆学习的能力，能有效预防老年痴呆的早期症状。松果菊苷的药理作用• 抗氧化、抗衰老作用• 神经保护作用• 抗炎、促伤口愈合作用• 肝保护作用• 骨保护作用• 抗肿瘤作用• 免疫调节作用• 预防老年痴呆作用• 松果菊苷除以上作用以外还具有抗凋亡作用、抗糖尿病作用等肉苁蓉有效成分之一 毛蕊花糖苷【分子式】C29H36O15【分子量】624.59【性状】类白色或淡黄色结晶粉末，溶于甲醇。毛蕊花糖苷C29H36015毛蕊花糖苷是一类生物活性很强的化合物，具有消炎、增强免疫、抗缺氧、清除自由基、DNA碱基修复、治疗肝纤维化等多种生理作用。目前在关于肝纤维化的病理发生机制研究中，发现其病理发生机制与毛蕊花糖苷的药理学防治机制具有很强的相关性。对于肝纤维化，至今仍然没有公认的有效治疗方案，深入研究发现，毛蕊花糖苷抑制HSC的迁移作用，使ECM分泌减少，促进ECM降解，抑制HSC的增殖并诱导其凋亡。毛蕊花糖苷的药理作用• 止痛作用• 提高免疫作用• 消炎、抗炎作用• 增强记忆力作用• 降血脂作用• 润肠通便作用• 抗缺氧作用• 抗癌作用肉苁蓉提取精华肉苁蓉行业工业标准制定者：和田帝辰公司和田帝辰公司，掌握了膜分离技术来提取肉苁蓉有效成分，申请专利号：CN101041677，并通过了新疆维吾尔自治区科技成果鉴定。膜分离专利肉苁蓉提取物以德赢vwin登录 为原料，经粉碎、提取（75%乙醇）、浓缩、水沉、离心、纯化、再浓缩、干燥、粉碎、混合、包装等工艺加工制成。肉苁蓉提取物每10kg肉苁蓉切片提取出1kg提取物，提取物更易穿透细胞壁，滋养五脏效果更好。每10kg肉苁蓉干品提取出1kg提取物帝辰公司定制了不同含量指标的提取物，从0号到7号，提取物标号越高，有效成分含量越高，效果也越好。肉苁蓉提取物成分含量一览表肉苁蓉比例提取物成分含量一览表

许多人认为，只有男人才会出现各种各样的肾脏毛病，以肾虚最为明显。其实，女人也一样会遇到肾脏问题。那么女性养肾该怎么做呢？这就为大家介绍。第一，常用脚后跟走路，女性朋友们可以常常用脚后跟来走路，将双脚的脚后跟先抬起，脚尖不要着地，腿往前，直走，经常这样运动，可有助于女性朋友们养肾。女性脚后跟先着地，有助于刺激脚底对于肾的穴位，经常用这种方式走路，不仅可以养肾，而且还能够帮助预防骨质疏松，养生保健功能非常多。第二，坚持每天用热水泡脚，每天晚上七点到九点这一时间段，是肾经气血最衰弱的时辰，此时，女性朋友们可以通过用热水泡脚、按摩足底来改善全身的血液循环，以达到滋养肾脏的目的。泡脚的水温不宜过高，维持在四十摄氏度左右就可以，时间也不宜过长，半个小时左右就可以。但要坚持每天晚上都用热水泡脚，才可达到养肾的效果。第三，坚持每日饮水量，女人是水做的这句古话，证明了广大女性不要等到每次口干舌燥的时候才去喝水，每日坚持6~8杯水，饮用充足的水能够帮助肾脏将体内毒素排出，减少身体肾脏的负担。同时可以做到皮肤好好。第四，做到及时上厕所，因为饮水的关系，每日体内一定会排出大量尿液。这个习惯你可能觉得有的时候憋一下没什么问题，但是对于肾脏的健康来说，影响却很大。尿液中含有大量的细菌，如果不及时排出，可能会引起泌尿系统中繁殖，引起肾脏炎等疾病。第五，女性也要合理规划作息时间，现在随着时代科技的发达，很多人上床后也不会休息，夜间十点后是人体肾脏休息的时间，放下手中的手机和电视，合理的安排自己的休息时间，不要熬夜。夜间是人体肾脏需要充足休息的时间，熬夜会影响肾脏白天工作，进而影响他的正常功能。第六，保持心情舒畅，中医理论是上，人生病的原因多数和人的情绪也有所挂钩，女性不能过度压抑自己的心情，但是也需要有一个乐观的心态，不急躁，这样对女性肾脏及身体有更好的帮助。女性肾虚可能会影响生育能力，中医认为“肾藏精”，主生殖发育，女性生殖系统就是在精气的呵护下逐渐发育成熟的，如果女性肾精不足可能会影响到生育能力。所以女人以为肾脏只是男人的事情，不深是男人的专利。根本想不到女性也会肾虚，以上这几点希望广大女性注意和重视起来，不能等到自己面容枯燥、眼圈发黑，头发失去光泽的时候才觉得自己是不是真的肾虚。