益肾强身饮治疗失眠症52例临床观察                             罗伦才 季小平 代 频 宋土江 朱卫国 李列平摘要 目的 观客益肾强身饮治疗失现在的疗此，方法 拼配例失队在志才苑机分为2组，治疗组52例，予直营强身饮（肉苁蓉、黄精、黄芪、山楂、决明子等）治疗：对照红30例，予安定片治疗，结果 海疗丝格床治盒15例，监此14例，有就19例，总有效率为92.3％；对照组临床治念2例，显故4例，有效14例，恶有效率66.7％，2组总有批率比校，差异有显著性意义（P＜0,06），治疗后治疗组主要在状明监改善，与治疗前比权，黑异有监著性意义（P＜0.05），与对照组治疗后比税，差异有足著性意义（P＜0.05）；2组比税，油疗红水见中味、修名、药物依等副作用。结论 益管强身批治疗失眠在行效确切，丹可显等改善思才主委症状，提高特纸质量。关键词 失职在：中医药疗法；点管强身饮中图分类号 B255.9 文献标识码 A  随着生活节奏的不断加快，生存环境的改变以及社会老龄人口的增加，失眠已或为困扰人们生活和工作的常见病，成为严重危害人类健康的公共问题之一。世界卫生组织的调查结果显示。全球约有27％的人存在睡眠障碍：我国的失眠流行性病学研究显示，43.1％的成年人曾不同程度地受到过失眠困扰，因此，失眠症已引起了人们的广泛关注，并成为治疗的一大课题門，自2004年9月～2005年11月，我们采用纯中药制剂益肾强身饮治疗失眠症52例，并与西药安定片作对照观察，结果报道如下。1 临床资料1.1 病例选择 失眠症参照《中国精神障碍分类与诊断标准》（CCMD-3）［中的诊断标准，即（1）几乎以失眠为唯一的症状，包括难以入睡、睡眠不深、多梦、早醒或醒后不易再睡，醒后不适感，疲乏，或白天困倦等：（2）失眠至少每周发生3次，并至少已一个月；（3）失眠引起显著的苦恼，或精神活动效率下降，或妨碍社会功能：（4）无躯体疾病或精神障碍；（5）国脏脑功能减退，调节失衡而出现前述症状者。1.2 一般资料 观察病例共82例，均为2004年9月～2005年11月四川省凉山州第二人民医院门诊病人，随机分为2组。治疗组52例，男21例，女31例：年龄24～87岁，平均51.2岁；病程3个月～10年，平均2.6年。对照组30例，男11例，女19例；年龄25～85岁，平均50.5岁；病程4个月～9年，平均2.5年，2组性别、年龄、病程经统计学处理，差异均无显著性意义（P＞0.05），具有可比性。2．治疗方法2.1 治疗组 予益肾强身饮治疗。益肾强身饮系本院研制的纯中药制剂，由肉苁蓉、黄精、黄芪、山楂，决明子等按一定比例制成袋泡型茶剂，4.5g／包，1包／日，鲜开水浸泡，取汁代茶饮。1个月为1疗程。疗程结束1周后进行疗效统计。2.2 结照组 予西药安定片，5mg／次，每晚睡前30分钟口服。1个月为1疗程。疗程结束1周后进行疗效统计。2.3 观察项目 采用阿森氏（Athens）失眠量表（AIS）记录患者治疗前后的总睡眠时间、入睡时间、熟睡感、中途易醒、梦、晨起后自觉症状、早醒、饮酒或服用安眠药等8项内容，根据评分记录，对治疗前后主要症状情况进行分析比较。2.4 统计学方法 计数资料分析采用2检验：计量资料以x土，采用：检验。3 疗效标准与治疗结果3.1 疗效标准 参照《中药新药临床研究指导原则中失眠症的疗效标准拟定。临床治愈：睡眠时间恢复正常或夜间睡眠时间＞6小时，睡眠深沉，醒后精力充沛。显效：睡眠明显好转，睡眠时间增加3小时，睡眠深度增加，但总睡眠时间＜6小时。有效：症状减轻，睡眠较前增加不足3小时，无效：治疗后睡眠无明显改善或加重。表1 2组治疗前后主要症状评分比较（±。）主要症状治疗组(4-52)对問组(x-2)治疗前治疗后治疗前治疗后总理军时间3.0士1.44土3.4±1.97±1.001.33*1.101.27A入通时间3.5士0.35±2.8士2.13士1.060.081.521.48熟腾感2.77士0.3士2.27士1.5±1.490.581.341.48中途易路3.4土1.9土3.2±1.5±1.661.301.421.3631士2.4土313±2.23±梦.1.061.00.1.041.48晨起后自党症状2.65土0.4±2.47±2.53士1.900.911.381.141.37士0．高士1.4士0.1±早醒1.551.001.220.31饮酒或服用安眼药1.12士0.5±1.43±1.43土1.001.361.36总分（平均数）30．否士士20.1土13.39土20.905.305.416.47与本治疗组治疗前比较，＊p＜0.05：与对照组治疗后比较，ΔP<0.06 3.2 治疗结果3.2.1 2组睡眠障碍改善情况比较 1疗程后，治疗组临床治愈15例，显效14例，有效19例，无效4例，总有效率92.3％；对照组临床治愈2例，显效4例，有效14例，无效10例，总有效率66.7％，2组总有效率比较，差异有显著性意义（P＜0.05），提示治疗组优于对照组。3.2.2 2组治疗前后主要症状评分比较（见表1）。治疗组治疗后主要症状明显改善，与对照组治疗后比较，差异有显著性意义（P＜0.05），值得一提的是治疗后治疗组在改善入睡时间、熟睡感及晨起后自觉症状等方面明显优于对照组，且无嗜睡、倦怠、药物依赖等安定片常见的副作用。表明益肾强身饮治疗脏腑功能减退、调节失衡所致的失眠症疗效确切，并可显著改善失眠患者的主要症状，提高睡眠质量。4讨论失眠症属中医学不寐范畴，原因虽多，其病机不外邪实、正虚两端。无论有邪之实证，或无邪之虚证，终归于脏腑功能减退、调节失衡，其中尤与肾、脾、肝、心功能失调密切相关。现代医学研究认为：睡眠充足可提高免疫力，低质量睡眠的人其免疫功能低下何；肾虚和脾虚患者均有免疫功能低下的表现回。中医认为：人到中老年，脏腑之气渐衰，阴阳渐趋失衡，自身调节功能减退，抗病能力下降，诸虚百损由是而生。脾虚化源不足则脏腑失养，如心神失养则失眠，肠道失养则大便艰涩······肾为先天之本，主五液司二便，肾阴亏耗，阴不制阳，虚阳上扰则失眠；肾精亏耗，精不化液润肠则肠道干涩；肾阳不足，气化失常皆可引起大肠传导功能异常面便秘。再者，由于人们生活方式、生存环境及饮食结构的改变，以及久坐少动等，均易诱发失眠，便秘等。益肾强身饮属新型中药复方制剂，所选药物肉苁蓉能“养五脏，强阴，益精气”（《本经》）、“暖腰膝，健骨肉，滋肾肝精血，润肠燥结”（《玉愀药解》）：黄精能“益脾胃，润心肺”（《日华子本草》）、“宽中益气，使五脏调和，肌肉充盛，骨髓坚强”（《本经逢源》）：黄芪能“补肺腱脾，实卫敛汗，驱风运毒”（《本草汇言》）、“补五脏诸虚而能通调血脉，流行经络，可无碍于垂滞也”（《本经逢源》）等，诸药相伍共奏安养五脏、润燥通便、降脂通脉功效，适用于脏腑坝、功能失调所致的失眠、便秘等病症。现代药理研究表明：肉苁蓉、黄精、黄芪均能增强免疫功能，苁蓉、黄芪能促进代谢，肉苁蓉能调整内分泌，黄精具有镇静安眠功能門。因此本制剂治失眠效果显著，2组总有效率比较，差异有显著性意义（P＜0.05）：治疗后治疗组主要症状明显改善，与治疗前比较，差异有显著性意义（P＜0.05），与对照组治疗后比较差异有显著性意义om（β50.05），焦一提的是治疗后治疗组在改善患者入睡时间、熟睡感、醒后自觉症状等方面明显优于

              益气养血法治疗老年性便秘98例                     李祥（地安县中医医院 老年病件，云南 姚安675300）摘要 目的：观察益气养血法治疗老年性使私的临床疗效。方法：入选的98例患者，给益气养血通使方（由黄花、当归、白芍、内苁蓉、麻仁等药物组成）加减治疗，每日1列，水其分3次服5剂为1疗位，连服3个疗程，结果：治您68例，好转26例，无效4例，总有效率为95.9％，结论：益气券血法治疗老年性使私疗效璃切。关键词 老年人：便私／中医药疗法；益气券血法；黄花：当白；内苁蓉中图分类号 R256.35      文献标志码 B      文章编号 1007-4813（2011）0B-0433-01便秘，在老年人群中最为常见，也让老年人最为苦恼，老年性便秘，中医认为多因气血亏虚，肠道失调，传导失司所致，笔者近年应用中医益气养血法治疗老年性便秘，疗效颇佳，现报道如下。1 临床资料          1.1 一般资料 98例均为姚安县中医院老年病科门诊病人，男70例28％年龄大84岁，最小62岁，平均年龄69岁；病程最长18年，最短6个月。其中71例长期借助果导片，番泻叶等泻药排便。             1.2 诊断标准 参照《中医病证诊断疗效标准》中，便秘属“虚秘”型确诊，以大便涩滞，粪便干燥坚硬，经常解面不畅或数日不解者。2 治疗方法基础方药：黄芪30g，当归20g，白芍20g，肉苁蓉20g，麻仁12g，厚朴3～8g，威灵仙15g。若大便数日不下，燥热明显者加芦荟10g（分次冲服）；气短自汗者加党参20gi腹胀满闷者加莱服子12gg腰膝酸软者加牛膝15g。每日1剂，水煎分3次服，5剂为1疗程，连服3个疗程。3疗效标准与结果          3.1 疗效标准 治愈每1～2d排便1次，排便轻松自然如常人，随访3个月无复发；好转；排便时间间隔较前明显缩短，排便更容易；无效；全身及局部症状均无改善。          3.2 治疗结果 98例中，治愈68例，好转26例，无效4例，总有效率为95.9％。4 病案举例刘某，男，76岁，患高血压、心房纤频，糖尿病8年余，长期服用卡托普利片，倍他乐克片，肠溶阿斯匹林片及二甲双胍片，血压，血糖控制达标，病情相对稳定，但苦于大便燥结难行，每每借于开塞露灌肠或服番泻叶，大黄泻下之后方能排便，但近月来也服之效不如前，来诊，见疲惫气短，苦不堪言，稍动即满头是汗，夜问烦热不安，睡眠差，手足心热，诊脉弦大，涩而不匀，舌胖大红赤苔黄浊不均。一见便知气血津液俱不足，燥热内蕴肠腑，宜标本兼治，于补气养血之中，辅以清下之品，以基础方煎汤加芦荟汁6g冲服，每日3次。服药1剂便奏效，大便得下，腹舒，夜间睡眠有改善，原方调理月余，精神转佳，大便每1～2d一行，神清气爽，获愈。5 体会笔者治疗老年性便秘，以益气养血润燥之法立方、佐以行气。方中黄芪补气，归芍养血，麻仁，肉苁蓉润燥以治本：佐以厚朴行气，威灵仙“宜通五脏，去腹内冷积，胸腕腹水”，使三焦俱得畅达，虽有痰水气滞，亦得以疏导而解，便通之后，仍须多服补血生津之剂，助其真阴，固其根本，以免再结之患。此外，治疗老年性便秘，应采取综合措施，药疗同时，配合饮食调节，适当体育锻炼，养成定时排便习惯，当能取得较好疗效。参考文额：耳李七一中医老年病乳川，北京：中国中医药出版社。［4梁丽期，老年习惯性使秘病因及防润1，中国社区医师。2006.17).6 ［3黄细风 老年人便秘防泊的探讨［月，工企医刊，2006.19(5):38 14果望老年性使秘研究进胸月-中国老年医学杂志，2006。20(12):61-63 ［5匀温丽性，陈长香，王静，等、老年人便秘及其影响因素的研』中华现代护理杂志，2008.35（15）：23

以绿原酸为内标用HPLC测定肉苁蓉愈伤组织中松果菊苷的含量研究                     朱咏华1，杜方麓，张胜（1．湖南中医学院中药化学教研室，湖南 长沙410004：2．湖南中医学院2000级研究生班，湖南 长沙410007）（摘要）目的减少在测定肉苁蓉愈伤组织中松果菊苷含量时对照品松果菊苷的用量研究。方法 以绿原酸为内标，用HPLC测定肉苁蓉愈伤组织中的松果菊苷的含量，结果研究测定的校正因子为2.3：肉苁蓉对绿原酸的相对保留值为1.973，测定了各种肉苁蓉愈伤组织中的松果菊苷的含量，结论该法操作简便，结果准确、可靠。（关键词）绿原酸：高效液相色谱；肉苁蓉：松果菊苷（中图分类号）R284.2 （文献标识码）A（文章编号）1000-5633（2003）03-0005-02肉苁蓉［Cistanche sala（C-A-Mey）G-Bedk］具有补肾 阳，益精血，润畅通便之功能。其中的苯乙醇总苷为主要活性成分，其含量可作为判断质量的标准，通常以松果菊苷（echinacoside）为对照品，采用反相高效液相色谱或比色法测定，肉苁蓉来源稀少，国家明令禁止采挖，我们已通过组织培养手段诱导出肉苁蓉愈伤组织中，为减少确定愈伤组织中次生代谢产物（苯乙醇苷类，以松果菊苷为指标）含量时所需松果菊苷对照品的用量，我们以绿原酸（chlomgrnicarid）为内标，测定了不同培养基配方诱导不同部位产生的11 种愈伤组织（A，B、C、D、E、F、G、H、I、J、K）中的松果菊苷的含量，此法简单，重现性好，结果准确、可靠，更重要的是，绿原酸价格低康，为测定肉苁蓉中苯乙醇苷类成分的含量提供了一个新方法。1 材料与方法1.1 色谱条件Pekin Elmer HPLC：785A紫外检测器：Series 200 四元梯度洗脱泵；Turbo EL 色谱工作站：HypenilODS2C1s4.6mmx200mm色谱柱；流动相：按表1所列线性梯度洗脱；波长；335mm：进样量；51L。表1 色谱操作条件     (ml.)时间(min)流速(ml/min)A液(M2)B液（0.1％磷酸水溶液）00.8892350.820801.2 操作方法1.2.1 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸（购自生物制品检定所）9.5mg，用10％的乙腈溶液溶解并定容于50ml容量瓶中，配成浓度为0.19mg／mL的溶液。分别称取松果菊苷（新疆医学院提供）4.8、5.2,7.0mg，用上述绿原酸溶液溶解并定容于10ml容量瓶中。1.2.2 供试品溶液的制备 精密称取肉苁蓉粉末（过80目）0.5g·加100ml．甲醇超声提取30min后，过滤，滤液蒸发至干，用上述绿原酸溶液溶解并定容于10ml．容量瓶，0.45m微孔滤膜过滤，即得。1.2.3 标准曲线的测定 绿原酸回归曲线：Y=12901008X-42 418.7 r=0.9997 绿原酸在0.12～1.90g之间呈良好的线性关系。松果菊苷的标准曲线：Y=124 828 770.5X+2615 447.8 =0.999.6 松果菊苷在0.65～3.90g之间呈良好的线性关系。1.2.4 校正因子的测定 松果菊苷（C3sHsO2o）分子量：786；绿原酸（C1sHsOs）分子量：354；其分子量之比为2.22。取2个对照品混合溶液3份分别进样5L，测定，数据如表2。表2 校正因子的测定松果菊苷绿原酸校正平均值 RSD进样号浓度 面积浓度 面积国子10.52 2 613 5930.19 2 253 5902.3620.70 3 427 9660.095 1 059 5542.282.30 1.74%30.48 2 396 6970.095 1 070 6472.25所得平均校正因子为2.30．与松果菊苷和绿原酸的分子量的比值2.2相近，与这个分子中均有咖啡酰共轭体系结构吻合。1.2.5 相对保留值 在本梯度洗脱范围，经3次测定相对保留值为1.973，见表3．图1。表3 松果菊苷对绿原酸相对保留值的测定松果菊苷（min）绿原酸（min）比值平均值RSD23.48411.8791.97422.987(11.6511.9731.9730.06%22.59411.4581.972t/min 图1 对照品和内标的HPLC色谱图1.2.6 重复性试验 精密称取K样品6份，按测定法操作，所得含量松果菊苷（％）见表4。2 测定结果取样品溶液A、B、C、D、E、F、J、H、I、J、K分别进样量为514，按上述方法测得含量分别为0.18％、0.02%,3.80%、4.74%、3.87%、1.75%、2.66%、 0.56％、4.48％、2.34％、1.10％。样品K的测定如图2。表4 重复性试验结果       (%) 图2 样品K的含量测定色谱图3 讨论肉苁蓉中的苯乙醇总苷为主要活性成分，而松果菊苷等苯乙醇苷类成分的分离精制比较难，价格昂贵且难于买到。绿原酸分布广泛，易于分离，价格低廉。以绿原酸为内标测定松果菊苷含量结果可靠，肉苁蓉中其他类似成分只要测出与绿原酸的关系（校正因子、相对保留值，分别为定量、定性指标），即可测定，减少对照品的用量。本法所采用的梯度洗脱程序，相对保留值稳定。测定不同培养基配方诱导不同部位产生的11种愈伤组织（A、B、C、D、E、F、G、H、1J、K）中的松果菊苷的含量结果表明，C、D、量较大。此法为进一步研究肉苁蓉愈伤组织培养条件打下基础。参考文献：［1］张思巨，刘 丽，张淑运，等·肉苁蓉药材质量标准的研究［J］．中国中药杂志，3000,25（6），359．[2] 堵年生，叶银梅，胡君萍，硝酸铝一比色法测定肉苁蓉中苯乙醇贰的含量［J］·新疆医学院学报，1993.16（4）：308．[3] 朱咏华，陈彩艳，唐前瑞，等，肉苁蓉不同外植体愈伤组织诱导比较［J］·中药材，2001.24（4）：242．

肉苁蓉在中国是传统的名贵补益中药材，味甘，咸而温，具有补肾阳、益精血、润肠通便、延缓衰老等功效。《药典》记载肉苁蓉的有效成分主要有：苯乙醇总苷，包括松果菊苷 （海胆苷） 、毛蕊花糖苷（麦角甾苷 ）。《中国药典》记载肉苁蓉现代药理研究表明，肉苁蓉除作为传统的补肾壮阳中药外，其中的苯乙醇苷类化合物主要是松果菊苷和毛蕊花糖苷，是肉苁蓉功效的核心成分。松果菊苷和毛蕊花糖苷具有广泛的药理作用，包括抗氧化、保护神经、改善学习记忆、抗炎、抗肿瘤、保护肝脏以及免疫调节等作用。肉苁蓉所含有效成分肉苁蓉有效成分之一 松果菊苷【分子式】C35H46O20【分子量】786.72【性状】白色结晶粉末，溶于甲醇、乙醇、热水，微溶于乙酸乙酯松果菊苷C35H46O20松果菊苷，含有多种药用有效成分，包括多糖、糖蛋白和烷基酰胺等。松果菊苷的治疗用途十分广泛，包括对免疫系统的增强作用、抗癌作用、抗氧化作用、肝脏的调节作用等。现代研究表明，松果菊苷通过进入人体内，达到补肾益精、提升机体免疫力、延缓衰老等药理作用。目前在关于老年痴呆的致病机理及抗老年痴呆药物的筛选研究中，发现松果菊苷具有改善记忆学习的能力，能有效预防老年痴呆的早期症状。松果菊苷的药理作用• 抗氧化、抗衰老作用• 神经保护作用• 抗炎、促伤口愈合作用• 肝保护作用• 骨保护作用• 抗肿瘤作用• 免疫调节作用• 预防老年痴呆作用• 松果菊苷除以上作用以外还具有抗凋亡作用、抗糖尿病作用等肉苁蓉有效成分之一 毛蕊花糖苷【分子式】C29H36O15【分子量】624.59【性状】类白色或淡黄色结晶粉末，溶于甲醇。毛蕊花糖苷C29H36015毛蕊花糖苷是一类生物活性很强的化合物，具有消炎、增强免疫、抗缺氧、清除自由基、DNA碱基修复、治疗肝纤维化等多种生理作用。目前在关于肝纤维化的病理发生机制研究中，发现其病理发生机制与毛蕊花糖苷的药理学防治机制具有很强的相关性。对于肝纤维化，至今仍然没有公认的有效治疗方案，深入研究发现，毛蕊花糖苷抑制HSC的迁移作用，使ECM分泌减少，促进ECM降解，抑制HSC的增殖并诱导其凋亡。毛蕊花糖苷的药理作用• 止痛作用• 提高免疫作用• 消炎、抗炎作用• 增强记忆力作用• 降血脂作用• 润肠通便作用• 抗缺氧作用• 抗癌作用肉苁蓉提取精华肉苁蓉行业工业标准制定者：和田帝辰公司和田帝辰公司，掌握了膜分离技术来提取肉苁蓉有效成分，申请专利号：CN101041677，并通过了新疆维吾尔自治区科技成果鉴定。膜分离专利肉苁蓉提取物以德赢vwin登录 为原料，经粉碎、提取（75%乙醇）、浓缩、水沉、离心、纯化、再浓缩、干燥、粉碎、混合、包装等工艺加工制成。肉苁蓉提取物每10kg肉苁蓉切片提取出1kg提取物，提取物更易穿透细胞壁，滋养五脏效果更好。每10kg肉苁蓉干品提取出1kg提取物帝辰公司定制了不同含量指标的提取物，从0号到7号，提取物标号越高，有效成分含量越高，效果也越好。肉苁蓉提取物成分含量一览表肉苁蓉比例提取物成分含量一览表

杨瑞瑞1 乔蓉霞1杜宏伟2 李卓敏2( 1. 陕西省食品药品检验所，西安，710061；2. 西安正大制药有限公司，西安，710043)摘要：目的 完善补脑丸质量标准。 方法 采用薄层色谱鉴别补脑丸中的当归、枸杞子、肉苁蓉、酸枣仁，采用RP- ELSD-HPLC 测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A 的含量。结果 在薄层色谱中分别检出当归、枸杞子、肉苁蓉、酸枣仁，斑点清晰，重现性好。RP- ELSD-HPLC 得到酸枣仁皂苷A 的线性范围在0.498μg～24.9μg 之间，γ=0.999；平均回收率为95.47%，RSD 为6.35%(n=6)。结论 定性定量方法简便、专属、准确，提高了补脑丸药品的控制标准。关键词：薄层色谱法；酸枣仁皂苷A；高效液相色谱法补脑丸［1］收载于《卫生部药品标准中药成方制剂第十册》，是由酸枣仁、当归、 枸杞子、 肉苁蓉、五味子等多味中药组成的复方制剂，具有滋补精血，健脑益智，安神镇惊，化痰熄风。临床上用于治疗迷惑健忘，记忆减退，头晕耳鸣，心烦失眠，心悸不宁，癫痫头痛，神烦胸闷等。原质量标准中只有当归、五味子等几味药的显微特征鉴别，为了更好的控制该制剂的内在质量，对本品分别用薄层色谱法和高效液相色谱法进行了定性定量研究。1 仪器、试剂与试药Waters -Alliance 2695-2487(YY01520041103)高效液相色谱仪，蒸发光散射检测器 (Alltech ELSD 2000)，色谱柱：kromasil C18 柱(5μm，250×4.6mm)；乙腈为色谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。酸枣仁皂苷A 对照品（批号为110734－200509）、酸枣仁皂苷B 对照品（批号为1110814－200506）、枸杞子对照药材（批号121072－0301）、松果菊苷对照品（批号为111670－200401，中检所提供）、当归对照药材 (批号120927-200310)均由中国药品生物制品检定所提供。补脑丸样品及实验用阴性样品均由西安正大制药有限公司提供。2 定性鉴别2.1 当归的鉴别2.1.1 对照药材溶液的制备 取当归对照药材1g，加乙醚20m1，超声处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇2ml 使溶解，作为对照药材溶液。2.1.2 供试品溶液的制备 取本品适量，除去包衣，研细，取1g，加乙醚20m1，超声处理10 分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇2ml 使溶解，作为供试品溶液。2.1.3 阴性样品溶液的制备 取不含当归的阴性样品1g，按“2.1.2”项下方法进行制备，作为阴性样品溶液。2.1.4 薄层色谱鉴别 吸取对照药材溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以正己烷－乙酸乙酯(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性样品无干扰。见图1。2.2 肉苁蓉的鉴别2.2.1 对照品溶液的制备 取松果菊苷对照品，加甲醇制成每1ml 含0.5mg 的溶液，作为对照品溶液。2.2.2 供试品溶液的制备 取本品适量，除去包衣，研细，取1g，加甲醇20ml，超声处理15 分钟，滤过，滤液浓缩至近干，残渣加甲醇2ml 使溶解，作为供试品溶液。2.2.3 阴性样品溶液的制备 取不含肉苁蓉的阴性样品1g，按“2.2.2”项下方法进行制备，作为阴性样品溶液。2.2.4 薄层色谱鉴别 吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各1μl ，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲醇－醋酸－水(2∶1∶7)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性样品无干扰。见图2。2.3 枸杞子的鉴别2.3.1 对照药材溶液的制备 另取枸杞子对照药材0.5g，加水50ml，加热煮沸15 分钟，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯25ml 振摇提取，提取液浓缩至约1ml，作为对照药材溶液2.3.2 供试品溶液的制备 取本品适量，除去包衣，研细，取5g，加水50ml，加热煮沸15 分钟，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯25ml 振摇提取，提取液浓缩至约1ml，作为供试品溶液。2.3.3 阴性样品溶液的制备 取不含枸杞子的阴性样品5g，按“2.3.2”项下方法进行制备，作为阴性样品溶液。2.3.4 薄层色谱鉴别 吸取对药材溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G 薄层板上，以甲苯－乙酸乙酯－甲酸(10∶5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性样品无干扰。见图3。2.4 酸枣仁的鉴别2.4.1 对照品溶液的制备 取酸枣仁皂苷A 和酸枣仁皂苷B 对照品适量，加甲醇分别制成每1ml 含0.5mg 的溶液，作为对照品溶液。2.4.2 供试品溶液的制备 取【含量测定】项下的供试品溶液作为供试品溶液。2.4.3 阴性样品溶液的制备 取不含酸枣仁的阴性样品5g，按“2.4.2”项下方法进行制备，作为阴性样品溶液。2.4.4 薄层色谱鉴别 吸取酸枣仁皂苷A 对照品溶液与酸枣仁皂苷B 对照品溶液各5μl，供试品溶液、阴性样品溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G薄层板上，以正丁醇－冰醋酸－水（4∶1∶5）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。喷以2%香草醛硫酸溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性样品无干扰。见图3。3 RP-HPLC 测定补脑丸中酸枣仁皂苷含量3.1 色谱条件色谱柱： Kromasil 色谱柱(C18，5μm，250×4.6mm)；柱温：30℃； 流动相： 乙腈—水 (33：67) ；流速: 1.0ml/min ；气流:2.5 ml/min ；漂移管温度：110℃。3.2 对照品溶液的制备 精密称取酸枣仁皂苷A 对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg 的溶液。3.3 供试品溶液的制备 取本品适量，除去包衣，研细，精密称取5g，置于索氏提取器中，加乙醚适量回流提取3 小时，醚液弃去。药渣挥尽残醚，再加甲醇适量回流提取5 小时。甲醇提取液置水浴上蒸干，残渣加水20ml，分数次定量转移到分液漏斗中。用水饱和的正丁醇提取5 次，每次15ml。合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的氨水（取40ml 浓氨溶液加水稀释到100ml，再用正丁醇饱和。分取下层液）洗涤2 次，每次50ml，洗液弃去，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次50ml，正丁醇提取液置水浴上蒸干。残渣加甲醇溶解，定量转移至5ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。3.4 阴性样品溶液的制备 取不含酸枣仁的阴性样品，按“3.3”项下的制备方法，同法制成阴性样品溶液。3.5 方法学考察3.5.1 线性范围考察 精密称取酸枣仁皂苷A 对照品12.45mg，置25ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即浓度为0.498mg/ml，按上述色谱条件，分别进样1μl、2μl、5μl、10μl、15μl、20μl、25μl、30μl、40μl、50μl，记录色谱图，计算峰面积，以峰面积的对数值与进样量的对数值进行回归，求得回归方程为：Y=1.4102X+5.7014,R=0.999,表明酸枣仁皂苷A 在0.498μg～24.9μg 之间线性良好。3.5.2 精密度考察 取按“3.3”制备的样品溶液，重复进样6 次，按“3.1”项下色谱条件进行测定，记录峰面积，计算相对标准偏差为4.01%。表明仪器精密度良好。3.5.3 稳定性考察 取按“3.3”制备的样品溶液，24 小时内分别进样5 次，记录峰面积，计算相对标准偏差为4.80%。表明样品溶液在24 小时内基本稳定。3.5.4 重复性考察 精密取同一批次样品6 份，分别按“3.3”项下的供试品溶液制备方法制备供试品溶液，按“3.1”项下色谱条件进行测定，计算其相对标准偏差为5.33%。3.5.5 加样回收率试验 精密称取重复性试验样品细粉共6 份，每份2.5g，分别精密加入酸枣仁皂苷A 对照品溶液(0.4265mg/ml)1ml，挥干，按“3.3”项下的供试品溶液制备方法制备供试品溶液，按“3.1”项下色谱条件进行测定，结果见表13.6 样品含量测定收集到的13 批样品，分别按按“3.3”项下的供试品溶液制备方法制备供试品溶液，按“3.1”项下色谱条件进行测定，结果见表2。4 讨论4.1 补脑丸中的酸枣仁［2］具有养心安神的功效，其中所含的酸枣仁皂苷A 及B为有效成分之一。酸枣仁皂苷A 及B 的含量测定方法以前多采用薄层扫描法［3］，近来有采用高效液相色谱法测定。本实验在查阅有关资料［4］［5］后，对补脑丸主要药味酸枣仁中的酸枣仁皂苷A 用高效液相色谱法进行了测定，结果表明，该方法简便、准确、重现性好，可有效地控制其质量。4.2 在预试验中，对样品供试品溶液制备中的取样量、提取溶剂、提取时间、除杂溶剂及用量等进行了多因素考察，以乙醚脱脂、甲醇提取、正丁醇萃取、氨溶液除杂质为较优条件。对于色谱条件也进行了优化，比较了甲醇-水系统和乙腈-水系统，以乙腈－水（33∶67）为优；由于用的是空气源，所以气流速为2.5ml/min，漂移管温度为110℃。4.3 薄层色谱鉴别中当归、枸杞子用对照药材作对照，均能得到满意的层析结果；肉苁蓉因有二种，薄层色谱不完全一致，选用松果菊苷和毛蕊花糖苷作对照，样品中在与毛蕊花糖苷斑点相同位置有干扰，故只选松果菊苷作对照；酸枣仁皂苷B 在含量测定中量较小，未作为控制指标，增加在薄层色谱鉴别中。参考文献：［1］《卫生部药品标准中药成方制剂第十册》［2］《中国药典2005 年版一部》［3］尹清茹，张永玲.薄层扫描法测定咽炎丸中酸枣仁皂苷的含量. 中国药业，1999,8(8)：34～35［4］钟东会，雷根虎，郭五保等. RP-HPL 测定酸枣仁中的酸枣仁皂苷A 的含量. 中成药，2004, 26 (11)：963～964［5］李会军，李萍. 高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定酸枣仁皂苷A 及B 的含量. 药物分析杂志，2000,20(2)：82～84

尚军卫(河南省平顶山市结防所, 467021)便秘是大便秘结不通,排便时间延长,或欲大便而艰涩不畅的一种病证,多伴见于各种急慢性疾病中[1 ]。老年肺结核是指年龄在60岁以上的肺结核患者[2 ]。近年来,老年肺结核患病率不断上升,而便秘经常发生于该病患者,单纯的西药治疗效果欠佳。笔者于1997年5月～ 2005年5月采用自拟补肺润肠汤治疗该病72例,收效较好,现总结如下。一般资料本组72例老年肺结核患者均为明确诊断的住院病人,抗痨方案均采用WHO规定的短程化疗方案。男48例,女24例; 年龄60～ 83岁; 便秘病程7天～ 2年。诊断标准以国家中医药管理局发布的《中医病证诊断疗效标准》[3 ]为依据: ①排便时间延长, 3天以上1次,粪便干燥坚硬;②重者大便艰难,干燥如栗,可伴少腹胀急、神倦乏力、胃纳减退等症; ③排除肠道器质性疾病。治疗方法采用补肺润肠汤治疗。药用: 炙黄芪20g ,太子参20g ,生地黄15g , 白术15g , 火麻仁15g ,当归15g ,肉苁蓉15g ,杏仁15g ,桃仁12g ,川厚朴3g ,枳实3g,陈皮6g ,炙甘草6g。每日1剂,水煎2次,取汁300ml, 每次150ml ,分早、晚2次饭后半小时服。疗程1～ 4周。忌辛辣食物,多吃蔬菜,勤饮水,定时排便。治疗结果疗效评定标准: 以国家中医药管理局发布的《中医病证诊断疗效标准》为依据。治愈: 2天以内排便1次,便质转润,解时通畅,短时无复发;好转:3天以内排便1次,便质转润,排便欠畅; 未愈: 症状无改善。结果: 治愈68 例, 占94. 4% ; 好转4 例, 占5. 6% 。总有效率100% 。典型病例患者,男, 69岁,大便秘结近2年, 3～ 5天排大便1次,经常服果导片、番泻叶、蜂蜜等缓解症状,病情时轻时重。2002年3月15日因发热、咳嗽半月,就诊于我所,经检查确诊为肺结核收住入院。入院后给予2HREZ/4HR方案抗痨治疗,即2个月的异烟肼( H)、利福平( R)、乙胺丁醇( E)、吡嗪酰胺( Z) , 4个月的异烟肼、利福平。服药5天后,大便秘结加重, 6天未解,一次服果导片6片,无效。中医四诊摘要: 便秘不通,腹稍胀,潮热,干咳,口干唇燥,面白无华,神疲乏力,纳差,左下腹有轻度压痛,可触及粪块,舌干红、少苔,脉细弦无力。辨证为虚秘, 治以益气养血、润肠通便。给予补肺润肠汤治疗。药用: 炙黄芪20g ,太子参20g ,生地黄15g ,白术15g , 火麻仁15g, 当归15g, 肉苁蓉15g , 杏仁15g ,桃仁12g,川厚朴3g ,枳实3g,陈皮6g ,炙甘草6g。服药2天后排大便1次,便干难解。1周后停用果导片, 2～ 3天能排便1次,便质稍干,能顺利解出。2周后大便每天1次,便秘症状解除,其他症状亦明显减轻。上方减川厚朴、枳实,坚持服药至4周,停服中药。半年后随访,肺结核已治愈,便秘未再复发。体会便秘的病理关键是大肠传导失常,常见证型有热秘、气秘、虚秘、冷秘, 临床尤以热秘、虚秘多见,虚秘主要表现为气虚、血虚。肺痨在病理性质方面,基本以阴虚为主,并可导致气阴两虚,甚则阴损及阳,阴阳两虚。老年肺痨患者年事已高,气血阴阳俱虚,气虚、阳虚则大肠传导无力,血虚、阴虚则津液匮乏, 肠道失润,导致大肠传导功能失常,形成便秘。补肺润肠汤中炙黄芪、太子参、白术、陈皮、炙甘草补益肺脾之气; 生地黄、当归、肉苁蓉、火麻仁、杏仁、桃仁滋阴养血,“增液行舟” ,温润通便; 小量川厚朴、枳实行气,促进肠道蠕动。全方以补为主,肺肠表里兼顾,补中有通, 不仅有利于肠道功能的恢复,更有利于肺痨病的治疗与康复,故能取得较好疗效。但应注意川厚朴、枳实应小量、短期应用,大便通畅后即停用,以免耗气伤阴。

杨凯，张桂菊，徐宝财( 北京工商大学食品学院北京市食品风味化学重点实验室食品添加剂与配料北京高校工程研究中心，北京100048)摘要: 采用单因素试验结合正交试验的方法，研究了以表面活性剂水溶液为提取剂，提取肉苁蓉中总黄酮的工艺条件。结果表明，在质量分数为0． 2%的十二烷基硫酸钠( SDS) 水溶液为提取剂，料液比( g∶ mL) 为1∶ 20，提取温度为80 ℃，提取时间为1． 0 h 的条件下肉苁蓉黄酮的提取率可达7． 34%。关键词: 表面活性剂; 肉苁蓉总黄酮; 辅助提取肉苁蓉有极高的药用价值，具有补肾阳、益精血、润肠通便、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤和增强机体免疫力等作用，素有“沙漠人参”的美誉［1，2］。肉苁蓉中的化学成分主要包括苯乙醇苷类、黄酮类、环烯醚萜及其苷类、木脂素及其苷类、氨基酸类、糖类、挥发性成分及微量元素等，其中国内外学者对苯乙醇苷类化合物的研究较多［3］。黄酮类化合物具有重要的生物活性，如抗肿瘤、抗心血管疾病、抗氧化、抗衰老、抗菌、抗病毒和免疫调节等作用［4，5］，而目前对肉苁蓉中黄酮类化合物的提取、分离及性能研究相对较少［6，7］。黄酮类化合物的提取方法主要为加热回流或索式提取法［8，9］，这些方法提取时间长、有机溶剂的用量大、能耗高。虽然也有新技术辅助其提取，如超声波技术［10］、微波技术［11］、闪式提取技术［12］和超临界流体技术［13］等，可以缩短其提取时间，但提取率并未有明显提高，而且仍然需要加入50% ～ 85% 的有机溶剂。表面活性剂具有双亲结构，能显著降低溶液的表面张力，增强溶剂对物料的润湿和渗透作用，对天然产物的有效成分具有增溶作用，因此，用表面活性剂来辅助提取肉苁蓉中的总黄酮可获得较好的提取率及提取效率［14 － 18］。更重要的是，在该提取过程中采用纯水介质，符合绿色、环保的要求。笔者采用单因素试验和正交试验分析的方法，研究表面活性剂辅助提取肉苁蓉中黄酮类化合物的工艺条件，以期为肉苁蓉资源的深度开发、合理利用提供技术支持。1 实验部分1. 1 主要试剂与仪器肉苁蓉，特级品，产自新疆，市售; 乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、盐酸、三氯化铝等，均为分析纯，北京化学试剂厂; 芦丁对照品( 生产批号100080 －201408) ，纯度不小于92． 8%，中国食品药品检定研究院; 十二烷基苯磺酸钠( LAS ) ，十二烷基硫酸钠( SDS) ，十六烷基三甲基溴化铵( CTAB) ，聚氧乙烯月桂醚( Brij － 35) ，Tween 20，Tween 40，Tween 60，Tween80，Triton X － 100，双( 2 － 乙己基) 磺基丁二酸钠( AOT) ，均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司。UV － 3600 紫外可见红外光谱仪，岛津国际贸易( 上海) 有限公司; DF － 101S 集热式恒温加热磁力搅拌器，巩义市予华仪器有限责任公司; SHZ － D( Ⅲ) 循环水式真空泵，巩义市予华仪器有限责任公司; LT 电子天平，沈阳龙腾电子仪器有限公司; FW80 微型高速万能试样粉碎机，北京中兴伟业仪器有限公司;DZ － IBC真空干燥箱，天津市泰斯特仪器有限公司。1. 2 肉苁蓉中总黄酮的提取方法取干燥肉苁蓉，粉碎后过40 目筛，准确称取2 g，按一定比例加入表面活性剂水溶液，在一定温度下加热提取一定时间，待提取液冷却至室温后，过滤，滤液转移至100 mL 容量瓶中，用纯水定容至刻度后摇匀，放置待测。1. 3 总黄酮的测定方法1. 3. 1 芦丁标准曲线的绘制精确称取干燥至恒重的芦丁标准品50 mg，用无水乙醇定容至50 mL，摇匀，得到质量浓度为1 g /L 的标准液。准确量取上述标准溶液0，0． 5，1. 0，1. 5，2. 0，2. 5和3. 0 mL 于10 mL 容量瓶中，各加入质量分数为5%的NaNO2溶液0. 5 mL，摇匀，静置6 min; 然后加入质量分数为10% 的Al( NO3)3溶液0. 5 mL，摇匀，静置6 min; 再加入质量分数为4% 的NaOH 溶液4 mL，用体积分数为70%的乙醇溶液定容至10 mL，摇匀，静置10 ～ 15 min 后于510 nm 波长处测定吸光度。因使用的芦丁标准品纯度为92. 8%，对此进行校正，以校正后芦丁标准品溶液的质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，得到回归方程y = 17. 934x －0． 008 1，Ｒ2 = 0. 999 7，结果表明芦丁的质量浓度在50 ～ 300 mg /L 范围内与吸光度具有良好的线性关系。1. 3. 2 肉苁蓉中总黄酮的测定方法精确移取1. 0 mL 肉苁蓉提取液于10 mL 容量瓶中，按照1. 3. 1 节的方法测定510 nm 波长处的吸光度，计算肉苁蓉中总黄酮的提取率。具体公式如下:Y1 = C1 × V1 × V × 1 000× 100%              m × V2式中Y1为总黄酮提取率，%; C1为按照标准曲线由吸光度计算出的显色溶液的质量浓度，g /L; V1为显色时溶液的定容体积，mL; V2为显色时提取液的体积，mL; V 为提取液的总体积，mL; m 为称取样品的质量，g 。1. 4 黄酮提取物的定性分析在温度为60 ～ 65 ℃的条件下，将得到的总黄酮提取液用旋转蒸发仪减压浓缩。取少量减压浓缩后的肉苁蓉总黄酮提取物溶解于甲醇中，制备供试溶液后进行以下操作。盐酸－ 锌粉实验: 吸取1 mL 供试溶液于试管中，加入4 ～ 5 滴浓盐酸，再加入少许锌粉，观察颜色变化; 三氯化铝反应: 吸取1 mL 供试溶液于试管中，加入几滴质量分数为1% 的三氯化铝溶液，在日光灯和紫外光下观察颜色变化。将肉苁蓉总黄酮提取物用甲醇稀释，在190 ～400 nm进行紫外光谱扫描，并观察其特征吸收峰。2 结果与讨论2. 1 单因素试验2. 1. 1 表面活性剂种类对提取率的影响以表面活性剂质量分数为0． 1% 的水溶液作为提取液，在料液比为1 ∶ 20 ( g ∶ mL，下同) ，提取温度为70 ℃和提取时间为1. 0 h 的条件下进行肉丛蓉中总黄酮的提取。选取的表面活性剂有阴离子型( SDS，LAS，AOT) 、阳离子型( CTAB) 和非离子型( Tween 20，Tween 40，Tween 60，Tween 80，Brij － 35，Triton X －100) 共10 种，以纯水介质中的总黄酮提取率为对照，实验结果见图1。从图1 可以看出，不同种类的表面活性剂对肉苁蓉中总黄酮的提取效果差异较大。阴离子表面活性剂的辅助提取效果较为理想( 除AOT) ，非离子表面活性剂其次，而阳离子表面活性剂CTAB 的提取率较低。其中阴离子表面活性剂SDS 效果最好，对肉苁蓉总黄酮的提取率可达5． 4%，因此选择SDS辅助提取肉苁蓉中的总黄酮。2． 1． 2 表面活性剂用量对提取率的影响在料液比为1∶ 20，温度为70 ℃提取1. 0 h 的条件下，考察SDS 的用量对肉苁蓉中总黄酮提取率的影响，结果如图2 所示。由图2 可知，随着表面活性剂质量分数的增大，总黄酮的提取率也随之增加，可能是由于溶液中形成的胶束增多，从而对肉苁蓉的润湿渗透作用和对总黄酮的增溶作用增大，而当SDS 质量分数大于0． 2%时，总黄酮的提取率明显减小，综合考虑选择SDS 的较优质量分数为0． 1% ～ 0． 2%。2． 1． 3 料液比对提取率的影响在SDS 的质量分数为0． 1%，温度为70 ℃ 提取1. 0 h 的条件下，考察料液比对肉苁蓉中总黄酮提取率的影响，结果如图3 所示。从图3 可以看出，当料液比为1∶ 20 ～ 1∶ 40 时料液比对肉苁蓉总黄酮的提取率影响不大，而当料液比为1∶ 40 后提取率降低。从减小成本并保证提取率的角度考虑，选择较优料液比为1∶ 20 ～ 1∶ 40。2． 1． 4 提取温度对提取率的影响在SDS 的质量分数为0． 1%，料液比为1∶ 20，提取时间为1. 0 h 的条件下，选择提取温度分别为40，50，60，70，80 和90 ℃，考察温度对肉苁蓉中总黄酮提取率的影响，结果如图4 所示。从图4 可看出，随着温度的升高，总黄酮提取率逐渐增加，这可能是由于升高温度有利于促进介质传递，同时增加总黄酮的溶解度，而当温度进一步升高后提取率降低。从降低能耗和保证提取率的角度综合考虑，较优提取温度为60 ～ 80℃。2． 1． 5 提取时间对提取率的影响在SDS 的质量分数为0． 1%，料液比为1∶ 20，提取温度为70 ℃的条件下，考察提取时间对肉苁蓉总黄酮提取率的影响，结果见图5。从图5 可以看出，总黄酮提取率随提取时间的延长而增加，但1． 5 h 之后提取率增加缓慢，到2. 0 h 后基本不变。综合考虑后选择较优提取时间为1. 0 ～ 2. 0 h。2． 2 正交试验优化肉苁蓉总黄酮提取工艺根据单因素试验结果，选择SDS 的质量分数、料液比、提取温度和提取时间为考察重点，以肉苁蓉总黄酮提取率为考察指标，进行L9( 34 ) 正交试验，因素水平设置和试验结果分别见表1 和表2。由表2 分析可知，各因素对总黄酮提取率的影响次序为A ＞ C ＞ D ＞B，即表面活性剂的质量分数对提取率的影响最大，料液比对提取率的影响最小。在选取的各因素水平范围内，根据正交试验结果，得出肉苁蓉总黄酮的较优提取工艺为A3B1C3D2，即SDS 质量分数为0． 2%，料液比为1∶ 20，提取温度为80 ℃，提取时间为1． 0 h。以优化后的工艺条件提取肉苁蓉中的总黄酮，共进行6 次重复试验，提取率分别为7. 33%，7. 35%，7. 30%，7. 34%，7. 36% 和7. 33%，平均提取率为7. 34%，相对标准偏差( ＲSD) 为0． 29%，说明此优化工艺条件波动范围很小，具有很好的稳定性。2． 3 黄酮化合物的定性分析盐酸－ 锌粉实验，是鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应，多数的黄酮、黄酮( 醇) 类化合物显红色或紫红色。实验加入锌粉后，溶液由黄色变为紫红色，反应呈阳性，初步鉴定为黄酮类化合物或黄酮( 醇) 类化合物。三氯化铝实验，鉴定酚羟基的存在，铝离子与酚羟基结合使溶液变为黄绿色，在紫外灯光下溶液有黄绿色荧光出现。实验加入三氯化铝溶液后，溶液颜色由黄色变为黄绿色，紫外光下出现黄绿色荧光，表明有酚羟基的存在，初步鉴定为黄酮( 醇) 类化合物。在SDS 的质量分数为0． 1%，料液比1∶ 20，提取温度80 ℃，提取时间1． 0 h 的条件下提取肉苁蓉中的总黄酮，提取物的紫外吸收光谱如图6 所示。大多数黄酮类化合物在甲醇中的紫外吸收光谱由2 个主要吸收带组成，带1 在300 ～ 400 nm 之间，是由B 环肉桂酰基系统的电子跃迁所引起; 带2 在200 ～ 285 nm之间，归属于A 环苯甲酰基系统电子跃迁引起的吸收［19］。由图6 可知，肉苁蓉总黄酮提取物在256 和357 nm 处有2 个明显的吸收峰，且吸收峰强度均较强，此为黄酮( 醇) 类化合物的典型特征。3 结论从肉苁蓉中提取总黄酮的优化工艺条件为: 以质量分数为0． 2% 的SDS 水溶液为提取剂，料液比( g∶ mL) 为1∶ 20，提取温度为80 ℃，提取时间为1． 0 h。在此条件下，肉苁蓉中总黄酮的平均提取率为7． 34%。由图3 可知，牛毛水解物在290 ～ 320 和320 ～400 nm 2 个波段内吸光度曲线的积分值分别为8. 721 7和12. 760 2，UVA/UVB 比值为1. 46，说明牛毛水解物具有较好的抗UVA 作用，能有效防护紫外线中UVA 对皮肤的损伤［20］。结合抗UVB 测定结果可知，牛毛水解物具有较高的SPF 值和UVA/UVB 比值，可有效阻挡紫外线中UVA 和UVB 对皮肤的辐射损伤，具有较好的抗紫外线活性。3 结论牛毛水解物有较高的水解度( 15. 68%) ，分子量分布在1 800 ～ 22 000 Da 之间，富含半胱氨酸、谷氨酸、精氨酸、丝氨酸等多种活性氨基酸，具有较显著的吸湿、保湿能力及较好的抗紫外线活性。研究工作为牛毛资源在日化工业的高附加值转化利用提供了实验依据。参考文献:［1］ 石碧，陆忠兵． 制革清洁生产技术［M］． 北京: 化学工业出版社，2004: 37 － 44．［2］ HILL P，BＲANTLEY H，DYKE M V． Some properties of keratinbiomaterials: kerateines ［J］． Biomaterials，2010，31: 585 － 593．［3 ］ ALGHAMDI K M，ALHOMOUDI F A，KHUＲＲAM H． Skin care:historical and contemporary views ［J］． Saudi Pharmaceutical Journal，2014，22: 171 － 178．［4］PＲOKSCH E，BＲANDNEＲ J M， JENSEN J． The skin: an indispensablebarrier ［J］． Experimental Dermatology， 2008， 17: 1063 － 1072．［5 ］刘玉兰，王娟，张吉平． 皮肤保湿剂及其性能评价方法的研究［J］．日用化学工业，1999( 5) : 52 － 54．［6］LALL N，KISHOＲE N． Are plants used for skin care in South Africafully explored ［J］． Journal of Ethnopharmacology， 2014， 153: 61 － 84．［7］ 李立，白雪涛． 紫外线辐射对人类皮肤健康的影响［J］． 国外医学:卫生学分册，2008( 4) : 198 － 202．［8］ 张玉彬，潘建英，帕它木，等． 长波紫外线对皮肤健康的影响［J］．中国公共卫生，2006( 4) : 494 － 496．［9］ 吴兑． 太阳紫外线辐射及其生物效应［J］． 气象，2001( 4) : 54 － 57．［10］ 曾维才，张文昌，廖学品，等． 牛毛水解物的抗氧化活性［J］． 中国皮革，2013，42( 15) : 11 － 15．［11］ 迟原龙，文振华，崔敏，等． 胶原水解度的测定［J］． 中国皮革，2010，39( 19) : 13 － 16．［12］MANSUＲ J，BＲEDEＲ M，MANSUＲ M，et al． Determination of sunprotection factor by spectrophotometry ［J］． Anais Brasileiros deDermatologia，1986，3: 121 － 124．［13］SAYＲE Ｒ M，AGIN P P，LEVEE G J，et al． A comparison of in vivoand in vitro testing of sunscreening formulas ［J］． Photochemistry andPhotobiology，1979，29: 559 － 566．［14］DIFFEY B L． A method for broad spectrum classification of sunscreens［J］． International Journal of Cosmetic Science，1994，2: 47 － 52．［15］WANG W Y，GONZALEZ D M E． A new frontier in soy bioactivepeptides that may prevent age － related chronic diseases ［J］．Comprehensive Ｒeviews in Food Science and Food Safety，2005，4:63 － 78．［16］ 贾建萍，鲁健章，周彦钢，等． 不同来源胶原肽的抗氧化活性及吸湿保湿性能［J］． 食品科学，2010，31( 21) : 169 － 172．［17］ 何黎，刘流． 皮肤美容学［M］． 北京: 人民卫生出版社，2008: 346 －372．［18］ 何黎． 皮肤屏障与保湿［J］． 实用医院临床杂志，2009( 2) : 25 － 27．［19］ 张丽华，王建龙，梅海平，等． 珍珠的美容保健功效［J］． 日用化学品科学，2002，25( 4) : 34．［20］ 樊豫萍． 防晒化妆品功效性评价与发展趋势［J］． 香料香精化妆品，2013( 4) :参考文献:［1］ 陈飞，陈卓，邢雪飞，等． 肉苁蓉的研究进展［J］． 药物评价研究，2013，36( 6) : 469 － 475．［2］ 杨峻山． 沙漠人参: 肉苁蓉［J］． 中国药学杂志，2011，46( 12) : 881．［3 ］ 颜贵卉，田金虎，龙本文，等． 肉苁蓉中苯乙醇苷类成分的研究进展［J］． 中南药学，2012，10( 9) : 692 － 695．［4］ 王慧． 黄酮类化合物生物活性的研究进展［J］． 食品与药品，2010，12( 9) : 347 － 350．［5］ 张海凤，张绍良，张春雷，等． 具抗自由基与紫外防护功效黄酮类化合物的研究进展［J］． 日用化学工业，2008，38( 1) : 54 － 57．［6 ］宋阳． 肉苁蓉中黄酮类化合物的提取及抗氧化性能研究［J］． 辽宁化工，2013，42( 1) : 13 － 15．［7］ 孙萍，李艳，杨秀菊． 肉苁蓉总黄酮的微波提取及含量测定［J］． 现代中药研究与实践，2003，17( 2) : 28 － 29．［8 ］ 张强，孙玉军，储俊，等． 洋葱中黄酮类化合物的提取及其体外抗氧化活性研究［J］． 中国食品添加剂，2009( 3) : 74 － 79．［9 ］ 孟良玉，兰桃芳，卢佳琨，等． 败酱草中黄酮类化合物的提取及其抗氧化活性［J］． 食品科学，2010，31( 24) : 214 － 217．［10］PAN G Y，YU G Y，ZHU C H， et al． Optimization of ultrasound － assistedextraction ( UAE) of flavonoids compounds ( FC) from hawthorn seed( HS) ［J］． Ultrasonics Sonochemistry， 2012， 19( 3) : 486 －490．［11］ 谭静，姜子涛，李荣，等． 微波萃取和超声波提取法提取柚皮中黄酮类化合物的对比［J］． 食品研究与开发，2010，31( 2) : 42 － 45．［12］ 韩帅，李淑燕，陈芹芹，等． 响应面分析法优化闪式提取胡柚皮中黄酮类化合物工艺［J］． 食品科学，2011，32( 10) : 52 － 56．［13］HE J Z，SHAO P，LIU J H，et al． Supercritical carbon dioxide extractionof flavonoids from pomelo ( Citrus grandis ( L． ) Osbeck) peel andtheir antioxidant activity ［J］． International Journal of MolecularSciences，2012，13( 10) : 13065 － 13078．［14］ 赵二劳，范建凤，张小燕． 表面活性剂增效微波提取沙棘叶黄酮的研究［J］． 日用化学工业，2009，39( 1) : 22 － 24．［15］ 潘芳芳，高佳，陈京． 正交优选表面活性剂提取山楂黄酮的工艺研究［J］． 中国当代医药，2011，18( 5) : 136 － 138．［16］ 马祥，晏日安． 超声波－ 表面活性剂协同提取竹叶总黄酮的工艺［J］． 食品科学，2012，33( 22) : 76 － 80．［17］ 董树国，陆钊，曹宏梅． 表面活性剂辅助提取桑叶总黄酮的工艺研究［J］． 安徽农业科学，2011，39( 32) : 19778 － 19780．［18］ 肖道安，熊知行． 非离子表面活性剂协同超声提取广东紫珠总黄酮的研究［J］． 日用化学工业，2013，43( 6) : 437 － 440．［19］ 张文华． 菠萝皮黄酮类化合物的结构分析及其生理活性研究［D］． 湛江: 广东海洋大学，2012．

每年4月，肉苁蓉迎来生长高峰期，因为肉苁蓉素有“沙漠人参”美誉，受利益驱使的盗采人员明知肉苁蓉属于新疆重点保护野生植物，仍潜入沙漠腹地采挖，造成沙漠植严重破坏。肉苁蓉寄生在沙漠植物梭梭的根部。大量采摘后，梭梭的根部长期裸露在外，大量流失水分后将枯死，给当地生态造成严重影响。肉苁蓉属高大草本，高40-160厘米，大部分地下生，茎不分枝或自基部分2-4枝，下部直径可达5-10(-15) 厘米，向上渐变细，直径2-5厘米。叶宽卵形或三角状卵形，长0.5-1.5厘米，宽1-2厘米，生于茎下部的较密，上部的较稀疏并变狭，披针形或狭披针形，长2-4厘米，宽0.5-1厘米，两面无毛。花序穗状，长15-50厘米，直径4-7厘米；花序下半部或全部苞片较长，与花冠等长或稍长，卵状披针形、披针形或线状披针形，连同小苞片和花冠裂片外面及边缘疏被柔毛或近无毛；小苞片2枚，卵状披针形或披针形，与花萼等长或稍长。花萼钟状，长1-1.5厘米，顶端5浅裂，裂片近圆形，长2.5-4毫米，宽3-5毫米。花冠筒状钟形，长3-4厘米，顶端5裂，裂片近半圆形，长4-6毫米，宽0.6-1厘米，边缘常稍外卷，颜色有变异，淡黄白色或淡紫色，干后常变棕褐色。雄蕊4枚，花丝着生于距筒基部5-6毫米处，长1.5-2.5厘米，基部被皱曲长柔毛，花药长卵形，长3.5-4.5毫米，密被长柔毛，基部有骤尖头。子房椭圆形，长约1厘米，基部有蜜腺，花柱比雄蕊稍长，无毛，柱头近球形。蒴果卵球形，长1.5-2.7厘米，直径1.3-1.4厘米，项端常具宿存的花柱，2瓣开裂。种子椭圆形或近卵形，长约0.6-1毫米，外面网状，有光泽。花期5-6月，果期6-8月。肉苁蓉是一种寄生在沙漠树木梭梭根部的寄生植物，从梭梭寄主中吸取养分及水份。素有“沙漠人参”之美誉，具有极高的药用价值，是中国传统的名贵中药材。肉苁蓉在历史上就被西域各国作为上贡朝廷的珍品，也是历代补肾壮阳类处方中使用频度最高的补益药物之一。每年4月，肉苁蓉、锁阳进入生长高峰期，也是违法分子盗挖盗采的高峰期，在经济利益的趋使下，一些违法者甚至不惜阻挠执法，与执法者发生正面冲突

    肉苁蓉，又名大芸、苁蓉，属濒危植物。分布于内蒙古、宁夏、甘肃和新疆，素有“沙漠人参”之美誉，具有极高的药用价值和经济价值，是中国传统的名贵中药材，国家二级保护野生植物，并被收入《国际野生植物保护名录》。　　昨日，记者在甘泉堡公安检查站看到，此次查获的几十根长短不一的肉苁蓉，分别装在纸箱和尿素袋中，其中有几根长度超过一米。　　市公安局特警五支队二大队副大队长张效廉介绍，经询问得知，司机陈某是阜康人，这些肉苁蓉是他花了2600元从五彩湾一牧民手里买的，最长的一根有1.6米，花了1200元。　　据了解，这也是甘泉堡公安检查站自2012年2月成立以来，查获肉苁蓉数量最多的一次。　　随后，受理此案的米东森林派出所对陈某进行了行政处罚。　　“近年来，由于市场收购价格的上涨，受利益驱动，非法采挖和收购野生肉苁蓉的现象屡禁不止，对生态环境和草原植被造成了严重破坏。”张效廉说，今年以来，甘泉堡公安检查站已陆续查获肉苁蓉近千公斤。 

肉苁蓉（《本经》上品）【释名】肉松容（《吴普》）、黑司命（《吴普》）。时珍曰︰此物补而不峻，故有从容之号。从容，和缓之貌。【集解】《别录》曰︰肉苁蓉，生河西山谷及代郡雁门，五月五日采，阴干。普曰︰生河西山阴地，丛生，二月至八月采。弘景曰︰代郡雁门属并州，多马处便有之，言是野马精落地所生。生时似肉，以作羊肉羹补虚乏极佳，亦可生啖。芮芮河南间至多。今第一出陇西，形扁广，柔润多花而味甘。次出北地者，形短而少花。巴东建平间亦有，而不嘉也。恭曰︰此乃论草苁蓉也，陶未见肉者。今人所用亦草苁蓉刮去花，代肉苁蓉，功力稍劣。保升曰︰出肃州福禄县沙中。三月、四月掘根，长尺余，切取中央好者三四寸，绳穿阴干，八月始好，皮有松子鳞甲。其草苁蓉，四月中旬采，长五、六寸至一尺以来，茎圆紫色。大明曰︰生落树下，并土堑上，此即非马交之处，陶说误尔。又有花苁蓉，即暮春抽苗者，力较微尔。颂曰︰今陕西州郡多有之，然不及西羌界中来者，肉浓而力紧。旧说是野马遗沥所生，今西人云大木间及土堑垣中多生，乃知自有种类尔。或疑其初生于马沥，后乃滋殖，如茜根生于人血之类是也。五月采取，恐老不堪，故多三月采之。震亨曰︰河西混一之后，今方识其真形，何尝有所谓鳞甲者？盖苁蓉罕得，人多以金莲根用盐盆制而为之，又以草苁蓉充之，用者宜审。嘉谟曰︰今人以嫩松梢盐润伪之。【修治】曰︰凡使先须清酒浸一宿，至明以棕刷去沙土浮甲，劈破中心，去白膜一重，如竹丝草样。有此，能隔人心前气不散，令人上气也。以甑蒸之，从午至酉取出，又用酥炙得所。【气味】甘，微温，无毒。《别录》曰︰酸、咸。普曰︰神农、黄帝︰咸；雷公︰酸；李当之︰小温。【主治】五劳七伤，补中，除茎中寒热痛，养五腑，强阴，益精气，多子，妇人症瘕。久服轻身（《本经》）。除膀胱邪气腰痛，止痢（《别录》）。益髓，悦颜色，延年，大补壮阳，日御过倍，治女人血崩（甄权）。男子绝阳不兴，女子绝阴不产，润五脏，长肌肉，暖腰膝，男子泄精尿血遗沥，女子带下阴痛（大明）。【发明】好古曰︰命门相火不足者，以此补之，乃肾经血分药也。凡服苁蓉以治肾，必妨心。震亨曰︰峻补精血，骤用，反动大便滑也。藏器曰︰强筋健髓，以苁蓉、鳝鱼二味为末，黄精汁丸服之，力可十倍。此说出《乾宁记》。颂曰︰西人多用作食。只刮去鳞甲，以酒浸洗去黑汁，薄切，合山芋、羊肉作羹，极美好，益人，胜服补药。宗曰︰洗去黑汁，气味皆尽矣。然嫩者，方可作羹；老者，味苦。入药，少则不效。【附方】旧一，新四。补益劳伤，精败面黑︰用苁蓉四两，水煮令烂，薄切细研精羊肉，分为四度，下五味，以米煮粥空心食。（《药性论》）肾虚白浊︰肉苁蓉、鹿茸、山药、白茯苓等分，为末，米糊丸梧子大，每枣汤下三十丸。（《圣济总录》）汗多便秘，老人虚人皆可用。肉苁蓉（酒浸，焙）二两，研沉香末一两。为末，麻子仁汁打糊，丸梧子大。每服七十丸，白汤下。（《济生方》）消中易饥︰肉苁蓉、山茱萸、五味子为末。蜜丸梧子大。每盐酒下二十丸。（《医学指南》）破伤风病，口噤身强︰肉苁蓉切片晒干，用一小盏，底上穿定，烧烟于疮上熏之，累效。（《卫生总微》）