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  • 屠鹏飞 何燕萍 楼之岑   (北京医科大学药学院 北京 100083)从裁培肉苁蓉(Ciustascle deserticola Ma)中分离到10个化合物,利用光谱和化学方法鉴定了它们的结构,分别为v-戊内酯(1)、6-去氧梓醇(2)、8-表马钱子酸(3)、D-葡萄糖(4)、鹅掌楸脂素 liriodendrin(5)、B-谷甾醇葡萄糖式(6)、半乳糖醇(7)、B-谷甾醇(8)。谷面醇葡萄糖式-/-0-十七酸酯(9)和蔗糖(10),其中化合物(9)为新化合物,化合物*(1)、(7)为首次从本属植物中分得,其它化合物都为首次从本植物中分得。药用物作肉苁蓉为补肾壮阳常用中药之一,近年来,由于大量采挖,野生资源濒于枯竭,为了解决药源紧缺问题,内蒙古阿拉善盟肉苁蓉栽培场对其进行了栽培研究,目前已引种栽培成功。为了比较栽培品与野生品的化学成分的差别,我们对栽培的荒漠肉苁蓉C.desertuoola Ma进行了化学成分研究。从正丁醇萃取部分分离鉴定了7个化合物,分别为B-戊内酯(1)、6-去氧梓醇(2)、8-表马钱子酸(3)、D-葡萄糖(4)、鹅掌楸脂素 liriodendrin(5)、B-谷甾醇葡萄糖甙(6)和半乳糖醇(7)从乙酸乙酯萃取部分分离鉴定了3个化合物,分别为B-谷甾醇(8)、B-谷甾醇葡萄糖甙-3'-0-十七酸酯(9)和蔗糖(10),其中化合物(9)为新化合物,化合物(1)、(7)为首次从本属植物中分离得到,其它化合物均为首次从本植物中分离得到。1 结果与讨论1.1 化合物9 B-谷甾醇葡萄糖甙-3'-0-十七酸酯(B-sitosteryl glucoside-3-0-heptadecoicate) 氯仿-甲醇(2:1)溶液中析得白色脂状物,H-NMR谱和C-NMR 谱显示为B-谷甾醇葡萄糖式的脂肪酸酯(表1、2),把化合物9的”C-NMR谱与B-谷甾醇葡萄糖甙(6)的标准谱比较(表2),发现葡萄糖C-3'的化学位移向高场移动了4.4ppm,C-2"的化学位移向低场移动了1.4ppm,C-4'的化学位移向低场移动了2.0ppm,说明脂肪酸是连接在葡萄糖C-3'-0-上.化合物9进行碱水解,得化合物9a和9b.9a经TLC和IR比较,与β-谷甾醇葡萄糖甙完全相符。将化合物9b进行甲酯化得脂肪酸甲酯,经GC-MS分析,此脂肪酸甲酯的M+为m/z 284、所以脂肪酸为十七酸。化合物9的'H-NMR显示有7个甲基(50.67,3H,s;δ0.81,3H,d;50.83,3H,d,6 0.86,3H,t,δ 0.89,3H,t;6 0.92,3H,d;6 1.00,3H,s),母核上有6个甲基,其脂肪酸链 上只能有1个甲基,所以此留肪酸为正十七酸。综上所述,化合物9鉴定为B谷甾醇葡萄糖式-3-0-十七酸酯(B-sitosteryi giucoside-3-0-heptadecoicane),为新化合物,  Tabie 1 H-NMR spectral dasa of Sanl 5 Tabie 1 H-NMR spectral dasa of Sanl 59Cm CDC6(in pirfine-d)0.67(3H,1,C-CH4)0.75(3H,s.C,-CH)0.81(3H.d.CCH.)0.95(3H.4.C-CH)0.83(3M,0,C-CH)0.97(3H,4,Cr-CH.)0.86(3H,x.C-CH,)0.99(3H,t,C-CH,)0.89(3H,1.C1-CH,)0.92(3H,4.C-CH)1.02(3H,4,C.-CH)1.00(3H..C.CH.)1.03(3H,s.C-CH)1.23<28H,br.s,eliphatie chain H)2.30(2H-t,e-CH,of farty scid)4.35(1M,m.3-H)5.33(1H.br.s.6-H)4.37(1H.m.3-H)5.15(1H.d.8-4)Talle 2 C-NMR speciral data of S and 5Cia pridne-6) 월0 -C 율9c ⑮ 월⑮037.3 37.231.9 31.873.3 73.342.3 42.2140.4 140.7122.0 121.632.0 31.832.0 31.80 50.1 S0.110 36.7 36.611 21.1 21.112 39.8 39.713 42.3 42.2 8 29.8 29.914 56.7 56.6 28 18.8 18.824.2 27 19.8 19.824.328.2 28.2 28 23.0 23.19117 56.2 56.0 29 11.8 11.718 11.9 11.9 1 102.7 102.219 19.4 19.1 76.2 74.820 36.2 36.1 3 72.6 70.021 19.0 19.0 0 73.3 71.322 33.9 33.9 할 79.8 78.023 26.2 2.2 824 45.8 45.863.7 62.4P 174.134.3- 29.925.05*~11 29.812 29.529.429.115* 27.222.7142 实验部分2.1 仪器及药品Kofer 型熔点测定仪(温度计未校正),红外光谱仅为Perkin-Elmer 983G,核磁共振谱仪:H-NMR,Bruker 400MHz,"C-NMR:JEOL FX-900.22.5MHz;质诺仅为:ZAB-HS,FAB测定 底物为S-GLY,GC-MS为GMS-3000,大孔树脂D-101为天津果胶厂生产。 2.2 实验材料荒模肉苁蓉Cutascle desertinla Ma的干燥肉质基为内蒙古阿拉善盟内苁蓉试验场栽培,作者鉴定。2.3 提取分离荒漠肉苁蓉干燥药材15kg,粉碎,用95%乙醇渗流提取,将乙醉提取液减压浓缩得3.5kg浸膏,把浸膏分布于10L水中,用乙酸乙酯萃取(1000mmlx7),合并乙酸乙酯萃取液井浓缩,得浸膏55g,水层加入大孔树脂D-101柱中,用水洗脱,得组分1(约3kg)和组分2(27.5g),再用50%乙醇洗脱,得组分3(55g),最后用95%乙醇洗脱,得组分4(4.5g),组分2经反复硅胶柱层析,用CHCI,-MeOM(9·1)至CHO,-MeOH-H.O(6:4:0.5)程序洗脱,得化合物1~4;组分3经理胶柱层析,用CHCI-MeOH(8:2)洗脱得化合物5,组分4经硅胶柱层析,以CHCIs-MeOH(9:1)为洗脱剂,得化合物61组分1加甲醇溶解,放置,折出白色结品,再用甲醉重结品得化合物7:乙酸乙酯萃取物经硅胶柱色谱,用Petr.etber-EOAe(9·D)至EIOAc-MeC.1(8·2)程序 洗脱,得化合物8~10。2.4 结构鉴定Y-Valerolactone(1),白色粉末,"HNMR(300MHz)&(ppn):1.27(3H.d,Me).1.68(1H,d.a- H,J=2.7Hz),2.54(2H,m.B-H),2.63(1H,s,u-H),5.26(1H.m,y-H);"C- NMR( CDC,)6 (ppm):168.7(C-2),67.4(C-5),40.6(C-3).29.5(C-4).19.6(C-6) 6-deoxycatalpol(2):无色方品(MeOH).mg 204~206C,1Rdcm-,3400,1640,FAB-MS m/,347(M+1)*.364(M+H,0):H-NMR(300MHz.D,O)5(ppm),1.36~1.50(1H.m.H-6)。 2.19(1H.m.H-5).2.37(2H.m.H-6.9),3.63(1H.H-7).3.75.4.19(2H.AB system.J= 13Hz,H-10),4.73(1H.d,J=8Hz,anomarc H).4.9~5.0(2H,m,H-4,1).6.19(1H.d.J- 6Hz,H-3):"C-NMR(D,O)b(ppm):141.9(C-3),108.3(C-4).101.1(C-P),96.9(C-1). 78.7(C-3').78.2(C-S').75.3(C-2).72.0(C-4').71.4(C-8),64.0(C-7),63.1(C- 10,6).44.8(C-9).36.6(C-6).33.3(C-5) 8-epiloganic acid(3);无色针品(MeOH).mp 146~149C,IRdcm-1,3400(OH),2800~ 2500,1680,1640,1430;FAB-MSm/,377(M+1)*,'H-NMR(300MHz,C.D,N)6(ppm);1.16 (3H,d,J-7.2Hz,CH,),2.25~2.40(2H,m,H-6).2.26(1H,m.H-8),3.06(1H,dt.J=3, 8.5Hz,H-9),3.56(1H,m,H-5).4.0~4.6(H-7 covered by glucosylic signals),5.41(1H.d.J -8.1Hz,anomeric H).5.91(1H.d,3=3Hz.H-).7.92(14.8.H-3);"C-NMR(C.D,N) (ppm),169.6(C-11),150.6(C-3),114.5(C-4),100.4(C-1).95.7(C-1),78.6(C-7, 3,5),74.7(C-2').71.4(C-4').62.8(C-6).44.7(C-9),42.3(C-6).41.3(C-8),30.5 (C-5).14.3(C-10)0 D-glucose(4);无色砂品(MeOH);IRcm,3300(OH),1440,1100,980,FAB-MS:1810M +1)*.其TLC行为与葡萄糖标准品一致。Liriodendrin(S):白色粉末(MeOH);1R42cm-,3400(OH),1590,1495,"C-NMR(DMSO- d.)る(ppm),153.5(C-3".3".5.5),138.5(C-4,4"),134.3(C-1'.1),104.9(C-2',2".6 6^),103.8(glu-H),86.1(C-2.6).77.8(gu l-5),7 7.2(glu-3 ),75. 2(glu-2),72.4(C-4.8),70.6 (glu-4),61.8(glu-6).54.6(C-1.5)㎡。 B-sitosteryi gluconide(6):白色粉末(MeOH),IR:cm-*,3400(OH),2900,与标准品一致。Galactinol(7):无色针品(MeOH),mp 169~171C,IRcm:3280(OH),1440,1075. 1010;'H-NMR(400MHz,DyO),b(ppm),3.68(2H.q.H-2.5),3.71~3.82(4H.m.H-1.6). 3.87(2H,dd,J=11.5,2.7,H-3.4);C-NMR(D,O)b(ppm):70.8(C-3,4),69.2(C-2,5). 63.2(C-1.6)- B-sitosterol(8);无色针品(EIOAc);IRdcm:3420(OH ),2940.其红外光谱数据和TLC行为与标准品一致。 B-sitonteryl glaconde-3'-O-bepuadecolcate(9) :白色脂状物:H-NMR(400MHz,CDCL)见表 1,"C-NMR(CDC)见表2.化合物9的碱性水解,化合物(9)90mg,溶于甲醇-四氢呋喘(2:1)混合液9ml中,加人INNaOH lml,室温搅拌1h,放置过夜,TLC检测反应完全,加人水10ml,有白色沉淀析出,收集白色沉淀,用CHCI,-MeOH(2:1)重结品,得化合物9m,经IR和TLC比较,与化合物(8)完全一致,碱水解后的滤液加盐酸酸化至pH<1,用二氯甲烧(4x5ml)萃取,回收二氯甲烷,得萃取物(90),将然取物(90)于无水乙融5ml中,加入3-甲基-1-对-甲苯基三氮烯50mg,搅拌2h,室温放置过夜,得脂肪酸甲酯(9c),经GC-MS鉴定为正十七酸甲酯。Sucrose(10),无色方品(MeOH),IRdcm",3380(OH),FAB-MS m/a,343(M+1)*,"C-NMR(C,D,N)6(ppm),106.3(C-2).94.8(C-1).84.0(C-3).79.1(C-4),76.7(C-5). 75.1(C-2,3),73.7(C-5),71.8(C-4),65.0(C-1).64.0(C-V),62.8(C-6) 致谢:北京医科大学测试中心,军事医学科学院波请宝测定NMR,北京大学波谱室代测MS,中国药品生物制品检定所波谱室测GC-MS,参考文献1 Sadtier Sundard Specua,"C-NMR Spxcea.1978,3509C 2 Pirkle WH,Satenga DL,Pavge MS.J.Org.Chen,1977,42(2),384 3 Kotayaahi H,Karaawa H,Miyse T,Fukutina S.Crm,Parm,But.1985.33(9),3645 Kobayaahu H,Komatsu J,Yakgku Zzh.1983.103(5),508 5 Kobayeshi H,Karsaws H,Miyase T,Pakccima S.Chen,Phars,But.1985,33(4),1452 6 Sadter Standand Speetra,IR Spectra 1952,1044 Sedtler Stancard Spectra,H-NMR Specra,1971,10331 Breitmaier E,Haas G,Varter W.Attas of Carbon-13 NMR Dute  (Vel. 1). 1979.998 9 Sadter Sandard Speces,"C-NMR Spectrs.1980.8110C 
  • 多糖是由超过10个以上的单糖分子缩合、失水,由糖苷键连接而成的聚合糖高分子碳水化合物。是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。多糖是来自高等植物,动物细胞膜、生物细胞壁中的天然大分子物质,是所有生命有机体的重要组成部分,并与维持生命所需的多种生理功能有关”。某些多糖,如纤维素和儿丁质,可构成植物或动物骨架;不均一多糖通过共价键与蛋白质连接构成糖蛋白或蛋白聚糖发挥生物学功能,如作为机体润滑剂、识别外来组织的细胞,血型物质的基本成分等。研究发现,多糖具有独特且广泛的生物学活性,如抗病毒、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老和参与免疫调节等多种功用甲。当今社会,老龄化速度越来越快,社会养老压力日益加大。衰老是伴随着年龄的推进所发生的连续改变的积聚,它是复杂的自然现象,表现为结构的退行性变和机能的衰退,适应性和抵抗力减退。为了应对老龄化社会的到来,国家必须建立一整套包括预防,诊疗、老年照护等多方面内容的应对体系。因此,深入研究药物抗衰老作用机制,寻找延缓衰老新的药物及作用靶点,日益成为近年来医药基础研究的热点。现代药理研究表明,多种植物多糖均可通过抗脂质过氧化和清除自由基,调节端粒酶活性和机体的糖,脂质代谢,以及神经-内分泌功能等多种途径来发挥抗衰老作用。1 植物多糖通过增强超氧化物歧化酶对自由基的清除作用来抗衰老氧自由基是体内代谢的必然产物,是生命活动所必需的物质。体内的自由基具有广泛的作用,在正常情况下机体通过低分子化合物和酶的作用维持自由基的动态平衡。随着年龄的增大,自由基生成过多面清除过少时,过多的自由基极易侵害细胞脂质中的不抱和脂肪酸,形成脂质自由基,引起脂质过氧化反应,损伤细胞,从而引起细胞分化障碍,最终引起机体衰老。超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内重要的抗氧化酶,广泛分布于动物、植物、微生物等各种生物体内。SOD具有特殊的生理活性,是生物体内清除自由基的首要物质。SOD在生物体内的水平高低是检测组织细胞衰老与死亡的直观指标。1.1 当归多糖当归具有多种药理作用,其中一种重要的功效就是抗衰老,尤其是脑的衰老。徐露等发现,当归多糖能显著提高衰老小鼠脾脏指数,增强血清和脑组织的SOD活性,增大脾小节,提高脾淋巴细胞数,抑制衰老小鼠脑细胞凋亡,且呈剂量-效应关系”。当归多糖通过提高血液和其他组织的SOD活性,增强了机体清除自由基的能力。可以认为当归多糖抗衰老的主要机制是提高SOD活力,清除自由基,抑制细胞凋亡和增强免疫力"。1.2 构杞多糖枸杞多糖是枸杞的主要活性成分之一,是水溶性杂多糖同蛋白质结合的复合性多糖”。研究表明。枸杞多糖可以提高SOD活性,抑制脂质过氧化反应。使其丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)及脂褐质(Lr)含量减少,还能提高SOD的表达量,加快SOD蛋白在细胞中的成,使机体抗氧化力增强"。1.3 肉苁蓉多糖荒漠肉苁蓉是列当科肉苁蓉属寄生植物。肉苁蓉带鳞叶的肉质茎有补肾益精,润肠通便的功效”。文献报道,肉苁蓉多糖可以提高组织SOD活性,降低MDA含量",直接或间接地清除自由基,减轻自由基对线粒体及整个细胞的损伤,从而起到抗衰老作用。1.4 海带多林海带多糖是从海带中提取的多糖化合物,近年来发现海带多糖具有消除自由基抗氧化的作用。海带多糖抗衰老的途径之一可能是通过提高生物体内SOD,过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶的活性,降低过氧化脂质分解的最终产物MDA的含量"。2 植物多糖通过影响染色体末端端粒的长度来起到抗衰老作用研究发现,成纤维细胞在衰老过程中染色体末端限制性片段长度会逐渐变短。端粒变短,细胞就老化。相反,端粒越长,细胞就不容易老化,而端粒酶的作用则是帮助合成端粒。端粒酶激活是细胞永生化和增殖的必要条件,人类衰老过程中伴随着细胞染色体末端端粒缩短和端粒酶活性的下降”。黄芪多糖等植物性多糖对端粒缩短速度有明显的减缓作用,但其具体作用机制仍在研究中。2.1 黄芪多糖黄芪是日常常用的中药之一,具有补气固表、利尿脱毒、排脓、敛疮生肌等功效",其抗衰老作用已经为临床实践所认同。黄芪多糖是从黄芪中分离提纯的主要有效成分。研究发现,黄芪多糖或可调节端粒酶活性,或调节,改变端粒结合蛋白,防止染色体末端限制性片段变短,从面达到抗衰老的目的”。2.2 锁阳多糖锁阳是锁阳科锁阳属多年生全生草本植物,常寄生在蒺黎科白刺属植物的根上。锁阳性甘、温。有补肾壮阳、益精血,润肠通便等功效"。研究发现锁阳有清除氧自由基、抗氧化、抗缺氧、抗应激、抗疲劳、抗癌、抗HIV等作用””。实验表明,锁阳多糖可以提高衰老小鼠的端粒酶活性,说明其有可能通过抑制端粒的缩短进程,延缓细胞凋亡面起到抗衰老作用”。2.3 黄精多糖黄精是百合科黄精属多年生草本植物,气味平和,质地滋润,有补养肺脾之阴、润燥生津、延缓衰老的功效。黄精多糖是黄精水提物的主要有效成分,也是黄精的主要生物学活性成分之一。实验证实,黄精延缓衰老的机制可能与黄精多糖增加某些组织(如脑、性腺)的端粒酶活性的表达有关。3 植物多糖通过提高谷胱甘肽过氧化物酶的活性和降低丙二醛的浓度来保护细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Ps)主要存在于细胞质中,一部分存在于线粒体中。在线粒体及胞浆中所产生的HO常靠GSH-Px清除,还原生成相应的醇或H,O。GSH-Px还能催化其他混合二硫化合物如GSH和辅酶A混合二硫化合物还原。GSH-Px是防止过氧化物堆积的主要保护酶,且随年龄的增长不断减少,是衰老的因素之一。3.1 平贝母多糖平贝母为百合科植物平贝母的干燥鳞茎,有清热润肺、化痰止咳的功效,是一种常用中药。刘春红等研究发现,平贝母多糖FUP-1能显著降低D-半乳糖诱导衰老小鼠肝脏组织中的MDA含量,提高小鼠和肝组织的GSH-Px活性,说明平贝母多糖FUP-1可通过增强机体抗氧化能力面抗衰老,其机理可能与平贝母多糖的自由基清除能力和抗脂质过氧化作用有关”。3.2 当归多糖徐露等研究发现,当归多糖能显著提高衰老小鼠血清和脑组织的SOD和GSH-Px活性、降低其中的MDA含量,阻遇了蛋白质的溶解、变性,保证了细胞膜结构和功能的完整,延缓了细胞凋亡的发生叫。3.3 女贞子多糖女贞子系木犀科植物女贞的成熟果实。女贞子可防治因肝肾不足引起的头晕耳鸣、双目昏糊、腰膝酸软、须发早白。研究表明,女贞子多糖能抑制D-半乳糖致衰老模型小鼠心、肝、肾组织中MDA含量的升高和SOD及GSH-Px活性的下降”。4 植物多糖通过调节免疫系统来防止机体老化有关衰老与周围淋巴系统关系的研究表明,细胞免疫功能低下是导致衰老及多种老年性疾病的重要原因之一”。Walfond在20世纪60年代提出衰老的免疫学理论,认为免疫系统从根本上参与正常脊椎动物的老化,比较典型地反映了大多数哺乳动物(包括人类)的老化过程。4.1 紫菜多赫紫菜多糖是从紫菜中分离出的相对分子质量为7.4x10的多糖,已被证明能增强机体免疫力,促进蛋白质的合成,对多种老年性疾病有防治作用。4.2 马齿苋多林马齿苋为一年生肉质草本植物,是我国卫生部划定的78种药食同源的野生植物之一。马齿苋不仅含有多种营养成分,而且还含有多种活性成分,其黄酮和多糖的含量很高,具有特殊的医疗保健作用。研究表明,马齿苋多糖能改善胸腺指数和脾脏指数,并能促进淋巴细胞增殖,从而提高小鼠特异性细胞免疫功能而使机体抵抗衰老門。5 结语目前已发现的具有抗衰老作用的植物多糖,除上述来源外,还包括从天麻、芦荟、仙人拿、银杏等传统中草药中提取的生物活性多糖。研究发现,多糖是中药中的主要有效成分。植物多糖被广泛应用于医疗保健领域。相信随着科技的发展,新的多糖分子的发现及抗衰老机制的深人研究,以多糖为功能分子的药物将越来越多地得以应用,而对多糖资源开发利用的前景也将越来越广。
  • 辐射是广泛存在于宇宙人生存环境中的自然现象。一种是来自自然环境的天然辐射源的辐射,包括宇宙辐射,来自地壳放射性核的外照射,来自吸入或食入并留在体内的放射性核的内照射,氧及其子体的照射等:另一种是来自人类活动的人工辐射源的辐射,包括医疗照射,职业照射,核爆炸和核式器所致的照射,重大事故所致的公众照射等,随着核技术在工农业,医生命科学等方面应用的迅速发展,人类越来越多的按触放射物质并导致机体出现各种损伤,辐射的危害已不容忽视。因此-研究开发抗辐射损伤的药物,特别是中药抗辐射损伤活性成分的研究,在现代医药保健事业中受到人们的极大关注。由糖和非糖物质合面成的试是中药中存在的一大类活性成分。第者主要对年来国内关于中药试类活性成分抗幅射作用的研究作一综述。1 人参皂试人参皂式(ginemal.C8)是人参生理活性的主要有效或分,对机体的许多功能起到调节作用,同时也具有辐射防护作用。刘伟家等”研究了人参三醇组式对维性大鼠免疫器官的辐射防护作用-结果证实人参三醇组式对x射线所致的免疫损伤有保护作用,有助损伤机体免收功能的恢复,主要作用于骨造血组织,减轻辐针损伤,促进造血功能的恢复及白细胞从骨向外周的释放。人参三醇组式还可减轻受照大队胸腺,脾脏重量的降低,明显提高受照大队胸腺和脾脏有核细胞数,张铭等研了人参三醇组式对x射线照射大队胰岛素水平的影响.25g-14人参三醇组式对x封线照后胰腺的射损伤具有治疗和预防作用,刘丽波等P研究了人参皂式对骨随细胞染色体具有保护作用,2.5~200mg-1.对X射线诱发小限骨储细胞染色体畸变具有明显的防护作用。可使X射线请发的染色体畸变率,细胞畸交丰明显降低,金光等以细胞调亡,细胞周期及细胞内S0D.lbO为观察指标。讨人参三醇组式及VE.VaC对紫外辐射人角质那成细胞(Colb16)的损伤的保护作用,结果表明一定制量紧外辐射可诱导明显的皮肤角须形成细胞发生S期阻滞和细胞亡,可使细胞内SOD 下降,lHy0升高;人参三醇组试及ViE.VaC 对其均有不同程度的保护作用,减少S期细胞数,抑制细胞亡,微活细胞内SOD活性,降纸细胞内比0b-从面说明了人参三经组式.V及VaC对紫外辐射致皮肤损伤的防护机理。2 肉苁蓉试肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉Cieanche dorticla Y.C.的干操带麟叶的肉质茎,它具有补益精血,滋肾壮体的作用,素有一沙漠人多”之称。蒋晓等A”研究了内苁容总登(C)对*C。7射线照射小以造血系统损伤的辐射防护作用,O能用显促进受小鼠外周血白细胞,网织红细胞,网织红细胞,骨髓有核细胞数,脾集落数(OFU/-S)的恢复,增强骨髓细胞研一谷胱苷肽过氧化物酶(Se-GSH-Px)話性-并降低丙二醛(MDA)含量。还研响-结果表明辐射损伤后小鼠胸腺,脾,军九生物膜及细胞器受到不同程度的损伤.CC.可促进其恢复,说明GC对受照小鼠敏感官超微结构有保护作用,其机制可能与抗氧化,促进DNA,BNA合成有关。李琳非等”研究发现CC,可明显增强小鼠红组惠S0D話性,降低血清MDA含量,提高肝,肾组织中DNA.BNA含量-能明显促进受”C照射报伤后小鼠红细胞SOD活性及牌核服含量的恢复-降低肝MDA含量,说明CC对核酸的保护作用及辐射防护作用与其抗脂质过氧化作用密切相关,小英等門或察了5对Co损伤小鼠免疫功能及30d存活率的影响-研究表明C84能不同程度的调节辐射损伤小鼠体液免疫,细胞免疫和非持异性免疫功能,即G对辐射报伤小原的免疫功能具有较强防护作用。3 三七皂式三七为五加科信物三七Paut stajineng(Buk-)Flhn的干燥积,主要有效或分为三七名试,第丹”等研究证明三七皂试可明显对抗*Ca7射线照射所政小队的实验性骨髓神制,主要表现为要高小鼠外周直10,WBC,BC总数以及CFUS和OUCM集落产率。这一结果为三七应用于放射病的防治提供了实检依据。4 苓试黄苓为为题形科多年草本植物黄苓Soelina iatenisGng的根,其主要成分为黄式,具有抗氧化,抑制过氧化脂质生成,請除氧自由茶等作用,刘甘桌回等探时黄芩中险性式类对小鼠须下腺放射性损伤的细胞保护作用。黄芩中酚性式能防止政射所政小限须下腺萎缩,并可维持腺细胞超微结构的完整性,对小鼠须下腺的放射损伤有明显的细胞保护作用。Zace-)Maim.的地上部分,主要成分为淫羊蕾试,李晓冰[等保讨了羊蒙试(ICA)对辐射小队免疫学功能恢复的促进作用ICA能够提小以腹腔巨程细胞吞壁百分率和吞单指数,明显促进小鼠脾脏巴细胞转化功能和促进NK细胞活性,结论证明ICA具有明显提高实验小队免疫学功能作用,葛林章[叫等探了ICA对辐照小队造血调控的影响,ICA可促进小鼠外周血白细胞总数增加-明显促进骨髓和牌驻CFU-CM集落形成-说明ICA具有明显的促进辐封小鼠造血功能恢复的作用。6 芍药苷芍药苷为毛度科植物号码Parsris sfiona Pal.主要化学成分。郭平印等考了芍药登对效射线致血虚证小鼠生血作用及对骨髓Epe,G-CSF,基国表达的影响,结果证用芍药苷显著升高致射线数血虚证小鼠外周血白细胞数量和骨髓CFU-GM,BFU-E,CUE,CU-mix 数量,上满骨髓Epo 和GOSF 基因表达,用明了芍药苷的生血作用-促进骨髓Epo和QCSF基因的表达可能是其生血作用的机制之一。
  • 近年来大量研究资料表明,更年期妇女应用植物雌激素替代治疗既可明显减轻绝经期症状、预防骨质疏松和降低心血管及子宫内膜癌等妇科肿瘤的发病率,又可避免因长时间使用维激素后产生的高凝血状态、高血压、水肿和其他副作用00,中药肉苁蓉是最常用的滋补中药之一,常出现在传统医家补益方剂中,具有滋补肾阳、生精活血,润泽肠道,疏下排便的功效和显著的雌激素作用,成为医药领域研究的热点,本文对近几年中药肉苁蓉的雌激素作用研究作一概述,为相关研究及临床应用提供参考。1 植物雌激素植物维激素是指存在于植物中,分子结构和药理作用与维激素相似的化合物件,在体内雌激素水平低于正常水平时发挥类雌激素作用,该作用在绝经期症状的防治、癌症的治疗、心血管系统的保护、骨质疏松的缓解与治疗等方面发挥重要作用:当体内趣激素水平较高时,可产生雌激素拮抗作用,用于抑制乳腺增生、子宫肌瘤等病症的恶化别1.1 植物维激素的分类植物雌激素的化学成分主要有异黄酮类、木脂素类,香豆素类及二苯乙烯类等其他成分。1.1.1 异黄酮类异黄酮的基本母核为3-苯基苯并二氢吡喃。主要分布在豆科、螺形花科、苋科、桑科、蓄薇科、鸢尾科植物中国,在大豆中含量丰富,故有“大豆异黄酮"之称1.1.2 木脂素类木脂素类多具有C6-C3的基本骨架结构,在夹竹桃科、爵床科、马兜铃科等植物中较常见 植物中存在的木脂素需在肠道菌群的作用下转化为哺乳动物中的木脂素后,才能呈现出一定的雌激素活性别1.2.3 香豆素类植物雌激素的重要组成成分有香豆素类”,它的基本母核具有苯并a-吡喃酮结构,主要在豆科等高等植物中含量丰富。1.2.4 其他类还有二苯乙烯、萜类、甾醇、真菌维激素类等其他类成分1.2 植物维激素的药理作用1.2.1 抗肿瘤作用在肿瘤生长过程中各种细胞因子,癌组织代谢分泌物质都会对肿瘤细胞的生长,转移产生影响回,有相关报道指出植物维激素有诱导卵果恶性肿瘤分化、凋亡的作用”,有学者发现b诱导肿瘤分化、凋亡的趋化国子骨桥蛋白(OPN)与HIF-la的表达有关,植物雌激素可能通过使磷酸化通路激活,增加HIF-1a分泌量促进OPN 表达,从而提高肿瘤细胞分化凋亡速率。1.2.2 维激素作用雌激素替代疗法已经受到社会的认可,但是很少部分绝经期女性愿意接受这样的治疗,原因是长期服用雌激素易产生高凝血状态、水肿、高血压等一系列副作用,并增加乳腺癌的患病危险,临床研究表明·植物雌激素能促进乳腺发育和泌乳,有效控制绝经期妇女潮热和出汗症状,且能减少上述副反应的发生率。1.2.3 对心血管系统的保护作用植物雌激素可使血浆中甘油三酯含量降低,在植物雌激素摄入量适宜的情况下心血管系统会得到保护,并且具有使血压降低,防止血管内皮细胞受到损伤,抗动脉粥样硬化的作用[,有实验表明:雌激素对摘除卵果的患高胆固醇血症动物有扩张血管、降低血管损伤和抗动脉粥样硬化作用[0有学者研究表明,染料木黄酮可以使血管内皮细胞前列环素的释放量增加,从而扩张冠状动脉血管,减轻内皮细胞损伤,调节冠脉血流量叫。1.2.4 对骨质疏松症的作用妇女绝经期后体内雌激素分泌不足,随者这种不足的时间的延长,患骨质疏松的危险性也随之增加·植物维激素能够预防妇女绝经期后的骨质疏松,有学者研究指出[回,植物雌激素类中药补骨脂能促进大鼠成骨细胞的增殖,其原因可能是其能使成骨细胞在数量上有所增加和增殖能力有所增强2 中药肉苁蓉研究概况2.1 肉苁蓉概述肉苁蓉Citanche Hehu 为列当科肉苁蓉属植物肉苁蓉 Cistanche dserticnla Y.C.Ma 或管花肉 苁蓉C.tabulosa(Shmml)Wight的肉质茎,主产于新疆、甘肃、内蒙古、青海等地、性温,味甘、咸,在传统中药增益处方中出现率占首位.2010年版《药典》记述,肉苁蓉有“补肾阳、益精血、润肠通便”的功效,用于治疗阳痿,不孕,腰膝酸软,筋骨无力,肠燥便秘等症状。2.2 肉苁蓉的化学成分目前已分离鉴定出的肉苁蓉化学成分主要有苯乙醇苷类,环烤醚萜苷类、木脂素类、氨基酸、糖类等2.2.1 苯乙醇苷类苯乙醇苷类是肉苁蓉发挥滋阴补阳、抗氧化,抗癌等多种功能的要活性成分,一些学者已经证明松果菊苷和毛蕊花糖苷是肉苁蓉中的主要标志性成分,药典中以松果菊苷和毛蕊花糖苷作为肉苁蓉生药鉴定的标准品,二者均为苯乙醇苷类化合2.2.2 环烯醚萜类目前从肉苁蓉属植物中分离得到环烯醚萜和环烯醚萜苷共12个.有学者对产地为内蒙古的肉苁蓉用95%乙醇加热回流提取后,再用正丁醇对提取物进行硅胶柱色谱分析,最后得到的物质被鉴定为8-表马子酸叫,另有学者从内蒙古产的肉苁蓉中分离得到8-表马钱子苷酸,并用HPLC法测定其含量网,2.2.3 木脂素类有学者从肉苁蓉属植物中分离得到5种木脂素苷和1种木脂素·其中有2种新木脂素苷b02.2.4 其他类成分肉苁蓉中尚有挥发性成分、生物碱、多糖、氨基酸、无机微量元素等,有学者运用SFE技术对肉苁蓉中的脂溶性成分作了大量研究,发现其大致可分为酯类化合物,含十六个碳到含二十八个碳的直链烷烃和含氧、氯化合物中相对分子量较低的化合物,另外还发现有棕桐酸和亚油酸等3类成分。白英通过柱层析法分离得到的糖类成分经HPLC测定,确定肉苁蓉提取液中所含成分甘露糖占主要部分,还有少量的鼠李糖和蔗糖以及一些低聚糖3 肉苁蓉的雌激素作用研究3.1 肉苁蓉单味中药的雌激素作用实验研究指出,肉从蓉可使实验组大鼠子宫重量,卵果、垂体前叶的重量比对照组明显增加吨。由于其能使垂体部位某些细胞增长,促使卵果中孕激素的分泌量增加,还能使性腺轴中ER,PR的表达增强,抑制卵巢和子宫间质中IL-2R的表达。因此对卵巢功能有所衰退的大鼠的性腺输的形态和功能都有较大的影响b.肉苁蓉表现出较强的维激素作用,可为在植物中寻找效果明显且副作用小的维激素普代物提供又一宝贵中药。赵丕文叫实验研究包括肉苁蓉在内的种中药对肿瘤细胞增殖的作用,分析其植物难激素作用的有无及强弱,为更年期妇女缓解更年期症状与练激素依赖性肿瘤患者的用药提供参考-结果表明肉苁蓉等中药含药血清均可使乳腺癌MCF-7细胞增殖程度加快,表现出一定的维激素样作用。有学者对肉苁蓉发挥维激素作用的有效部位及剂量进行筛选,分别用水和浓度为95%的乙醇对肉苁蓉药材进行提取,对提取物分别运用小鼠子宫增重法和MIT法进行体外和体内维激素活性的综合实验,小鼠子宫增重实验显示:与空白组相比,95%醇提物剂量为40g/(kg·dd)可使小鼠子宫系数增加(P<0.05),而95%醇提物剂量为30g/(kg·d)相比之下作用更显著(P<0.01);与己烯雌酚组0.35mg/(kg·d]对照.40g/(kg·d的95%醇提物+0.35mg/(kg·d)己烯维酚组对小鼠子宫增重有明显的抑制作用(P<O.01).MTT实验显示:剂量为30g/(lg-d的95%醇提物能发挥类雌激素作用.40g/(kg·d)的95%醇提物发挥抗雌激素作用,体内和体外实验结果基本一致,综合表明肉苁蓉95%醇提取物发挥维激素作用更显著,其中剂量为30g/(kg·d)发挥类维激素作用,剂量为40g/(kg·d)发挥抗雌激素作用;在进行子宫增重实验时发现肉苁蓉可使子宫含水量增加且有弹性,表明肉苁蓉提取物可降低由于体内激素水平变化而引起的子宫肌瘤,子宫内膜病变等疾病的患病风险.3.2 肉苁蓉复方制剂的维激素作用诊治女性闭经、不孕的中药复方养经汤,其主要成分是肉苁蓉,临床观察显示,卵泡发育障碍患者会表现出月经量少甚至无,不孕的症状,此外还会有出白带量少,阴干涩、腰膝酸软等肾部精血不足的症状,同时检测出血清中E2 值偏低、子宫内膜增生缓慢等内分泌相关指标值较低,当服用养精汤治疗后患者相关指标有所升高,临床症状得到了改善,说明养精汤对卵泡发育具有确切的促进作用时张少文叫以补肾为主的黄芪、当归、肉苁蓉、补骨脂四味中药组成复方,观察该复方对去卵巢大鼠血清中FSH,LH,E2,TSH、T13、TT4 等值的影响,探讨补肾为主的中药复方治疗绝经期综合征的作用机理,实验结果显示,中药复方能显著降低去卵果大鼠血清中的FSH,LH值和TB、TT4值,但对于E2值和TSH值的升高作用相对较弱,说明该中药复方是使下丘脑-垂体-性腺,甲状腺各个层次的功能都有所改善,对患者生殖内分泌系统和植物神经功能进行整体调节。4 结语中药肉苁蓉一直都是补肾阳,益精髓的首选药物之一,随者寻找能代替人工合成雌激素起作用又能尽量减少副作用的植物维激素类药物的急需,其维激素作用被日益重视和挖掘,由于中药的成分复杂,药效作用物质基础还不明明,用传统的煎服很难起到应有的效果,所以对肉苁蓉起练激素作用的有效部位,有效成分的提取,分离将是今后实验研究的重点参考文献:00 赵丕文,十中药检物线激素样作用及其机制的研究[0].北京:北京中医药大学,2007.国家药典委员会,中国药典(一部[].北京:化工业出版祉:200000 OS0KIAI,KENEILY EL yseamgst aw of b 845-869. 陈描,李文,丁振师,等,中药植物球激素双向调节的机制研究00.哈尔滨商业大学学报:自然科学版,2014,30(2):139-141. [月 黄芸·秦民坚·余国克,持买期类化合物在植物开的分布药理用0].中野生阻物源,2001(1):5-7.
  • 引言阿拉善盟是内蒙古自治区沙漠化较为严重的地区,全盟土地面积约为27万km2,其中巴丹吉林沙漠、乌兰布和沙漠和腾格里沙漠占全盟总面积的29.07% (周建秀等,2014),生态环境呈现出降水量少、沙尘天气多、植被覆盖度低的典型特征(马文瑛等,2015)o近年来,为遏制荒漠化土地面积增加、改善生态环境,政府出台了多项政策,但是传统的治理方法需要投入巨额财政资金,政府主导,当地农户被动参与,项目期间内在巨额补贴利益的驱动下农户自愿遵守“游戏规则”,项目一旦结束,农户与企业参与积极性降低,治理成果无法有效持续(Shixiong Cao 等,2018;娜仁图雅等,2009)。在防沙治沙的前提下,要想实现阿拉善盟生态环境改善、农牧民收入水平提高、经济增速显著的多重目标,选择能够可持续发展、激发农牧民参与积极性并带来经济效应的产业成为必经之路。目前,国内学者对沙产业的研究多集中于产业发展现状(达世彩,2014;孔维亮,2014;王文舒等,2018)以及产业发展的经济和生态效益,如王睿等(2017)运用DEA法对库布齐沙漠3种沙产业发展模式的经济效益进行了评价,指出沙产业光伏发电、生态旅游等发展模式可带来巨大的经济效益,但同时也存在投入高、产出低等很多问题;吴琼(2010)以沙产业及其发展链条为切入点研究了沙产业发展对鄂尔多斯生态和经济的影响,得出沙产业发展可提高经济发展速度、改善当地生态环境的结论。沙产业发展的经济、生态效益最直接的感知主体为农户,随着“以人为本”“公众参与”思想的发展,农户作为主要参与者和微观实践者,其参与意愿直接影响沙产业的实施绩效和可持续性,因此,理解沙产业经济、生态效益对农户参与意愿的影响至关重要(周俊俊等,2019)。但是,目前国内尚未有学者对该领域进行研究分析。因此,本文选取已开展沙产业8余年之久的阿拉善盟为研究区域,以其典型产业——肉双蓉产业为例,运用结构方程模型进行分析,以期量化产业发展经济、生态效益对农户参与意愿的影响。研究结果将有助于填补该研究领域的空白,有助于政府更好地把握沙产业发展经济、生态效益情况,理解农户在生态环境保护和经济收益之间的权衡取舍,为政府有目标地提高农户参与沙产业意愿,促进沙产业健康、持续发展提供有效的科学依据。2模型假设经济效益是衡量一切经济活动的综合指标(王力,2013)。根据理性经济人假设,每一个从事经济活动的人都是利己的(何大安,2013)。在风险可控的情况下,参与某项活动所带来的收益越高,理性经济人的参与意愿越强烈(何颖等,2014)。微观经济学理论指出,理性经济人对经济效益的考量主要集中于收入及生活水平的变化、生活条件的改善、就业机会的增加等。农户作为经济活动的重要实践主体,能否带来经济效益是影响其参与意愿的重要因素,如周俊俊等(2019)在研究农户生态补偿参与意愿影响因素时指出,如果在生态补偿过程中农户家庭总收入不断增加,其参与生态补偿的敏感性和积极性提高。沈萌等(2019)基于解构计划行为理论以武汉为例研究农户农地转出意愿影响因素,指岀经济收益是农户农地转出的最大动力,农地转出给农户带来的经济利益愈高,其执行农地转出的意愿越强烈。张文静等(2017)以杭州市桐庐县瑶琳镇为对象研究农户旅游感知和其参与意愿的关系,发现农户参与乡村旅游的经济利益驱动型最强。因此,本文的经济效应对农户参与意愿的影响主要包括收入、就业机会、外来投资和消费的增加以及生活条件的改善等方面。基于以上内容本文提出研究假设1(H1):肉欢蓉产业的正向经济效应对农户参与意愿有正向影响。某项活动的生态效应指该活动的各个环节对生态环境产生的影响(陆芸,2016),它不仅包括对自然生态环境的影响,社会生态环境的改变也应考虑其中。生态环境作为经济发展的基础,在理性经济人决策时同样会产生至关重要的作用,如史恒通等(2019)以黄土高原退耕还林为例,分析生态环境对农户参与退耕还林意愿的影响,研究结果表明,农户生态认知对其退耕还林行为有显著正向影响,并且农户退耕还林意愿与其退耕还林行为之间的关系存在调节作用。张瑶等(2019)以内蒙古达茂旗和王子四旗421户农户微观数据为基础,运用结构方程模型分析了牧户生态认知对其保护草原意愿的影响,研究结果显示生态认知对牧户草原保护意愿有显著正向影响。在本文中,根据阿拉善盟的实际生态情况,生态效应对农户参与意愿的影响主要包括梭梭覆盖度、荒漠化面积的变化以及生活环境的改善。肉欢蓉产业发展促使政府、企业加强对梭梭林的保护力度,减少荒漠化土地面积,改善当地恶劣的生存环境,提升地方形象,吸引外来游客,带动经济发展,这同样会提升农户参与肉茨蓉产业意愿,因此,正向环境效应对农户参与意愿影响的分析也不可或缺。基于以上内容本文提出研究假设2(H2):肉欢蓉产业的正向环境效应对农户的参与意愿有正向影响。根据利益相关者理论,一项产业的发展持续性取决于各方利益主体的积极参与(吴诗孃,2014)。产业发展过程中,政府作为农户利益的代理人,提高农户认知对产业发展极为重要。根据行为经济学理论,个体对事物的参与程度宜接或间接地影响其选择的偏好和参与意愿(张瑶等,2019),如张璐等(2019)从农户角度出发,收集农户数据探究农户参与森林保险意愿的影响因素,模型结果显示,农户是否知道政策性森林保险、是否参加过政策性保险政策的制定等变量是影响农户参与森林保险的显著因素,并在此基础上提岀了加强农户参与政策制定程度等政策建议。陈昭玖等(2016)从成本收益分析视角探究人力资本、地缘特征对农民工市民化意愿的影响机理,分析结果显示,政府政策对农民工市民化意愿呈显著的相关关系,政府在政策制定中是否收集农民工主观想法会对其市民化意愿产生影响。在本文中,政府管理态度主要包括政府在制定产业发展政策过程中的农户参与度以及管理完善的程度。基于以上内容本文提出研究假设3(H3):排斥农户参与肉灰蓉产业管理的政策对农户的参与意愿有反向影响。模型构建与变量选取近年来,越来越多研究发现,在多观测变量的情况下,采用结构方程模型更容易考量各影响因素之间的关系。结构方程模型区别于Logistics回归分析法的最大优点是可以同时处理多个因变量,且允许解释变量和被解释变量含有测量误差,并将这种误差纳入模型进行分析,使其估计结果更加准确(Joyce等,2011;卞玉梅,2017;段伟等,2017;易丽蓉,2006;阮文奇等,2016)。实证分析中,本文建立的结构方程模型包含“正向经济效应(AJ”“正向环境效应(A】”“政府对肉欢蓉产业的管理态度(AJ”以及“农户参与意愿(A,)”4个潜变量,其中正向经济效应包括肉忒蓉产业可以提高收入水平等5项观测变量(张静等,2015),正向环境效应包括肉欢蓉产业发展可有助于梭梭的植被保护等3项观测变量(张瑶等,2019),政府对肉欢蓉产业的管理态度包括肉茨蓉产业相关政策的制定会征集农户意见等3项观测变量,农户参与意愿包括农户愿意从事肉欢蓉种植活动等4项观测变量,详细观测变量情况如表1所示,分析框架如图1所示。结构方程模型把内生潜变量和外生潜变量联系起来(侯杰泰等,1999)o在结构方程(!)中,巾为内生潜变量,表示农户参与意愿;$,(21,2,3)为外生潜变量,分别指肉欢蓉产业发展的正向经济效应、正向环境效应和政府管理态度。(为内生潜变量未能解释的部分。测量方程可以反映潜变量与观测变量的一致性关系。在测量方程中,入/=1,2,...5;_/=1,2,3)为外生潜变量与观测变量之间的因子载荷,— 123,4)为内生潜变量与观测变量之间的因子载荷。^=1,2,...12)表示外生潜变量在各个观测变量的测量误差,®(i= 1,2,3,4)表示内生潜变量各个观测变量的测量误差。X,-X5分别代表正向经济效应的5个观测变量,乙…乙分别代表正向环境效应的3个观测变量,分别代表了影响农户参与意愿的4个观测变量,Z, -Z3分别代表肉忒蓉产业政府管理态度的3个观测变量(表1)。4问卷设计与样本特征4.1问卷设计本文以农户为调查对象,遵循科学性、针对性和实效性原则,通过问卷调查法获取研究核心数据,为后续的实证分析奠定客观、科学的数据基础。《肉茨蓉产业农户参与意愿调查问卷》是在阅读了大量相关文献以及上文研究的基础上,利用李克特量级法,设置不同层次的题目进行全面、综合测量的问卷。4.2数据来源本研究采用了问卷调查和实地访谈相结合的方法,首先在实地访谈的基础上设计初步调查问卷,其次根据在阿拉善盟进行的120份问卷预调查情况以及信度和效度检验的结果,增列符合实际的变量,剔除存在问题的变量,同时有针对性地修正了所有变量的语义表达,最终形成了包括4个潜在变量和15个观测变量的调查问卷。数据来源于笔者和课题团队在2018年7月7号至2018年8月4号在阿拉善盟的调研。本研究共发放调查问卷230份,回收201份,问卷有效回收率为87%。4.3样本特征现有有效调研问卷显示,201个调研样本在年龄阶段、性别构成以及教育水平等方面存在较为显著的差异(表2)。性别组成上,男性共145人,占72.14%,女性共56人,占27.86%;从调研人口年龄结构来看,40岁以上的比例为78.65%, 30岁及以下的受访者人数较少,仅为7人,30-40岁的为36人,所占比例为17.87%;从接受教育程度看,大部分受访者仅接受过初中或小学教育,人数分别为78人和81人,占38.81%和40.30%,文盲有10人,占4.98%,高中和大专的分别为28人和4人,占总数的13.92%和1.99%;在对肉欢蓉产业了解程度方面,听说过肉茨蓉产业却未从事其中的占44.78%;在对肉双蓉产业或沙产业相关政策的了解程度方面,参与过制定政策过程的人数较少,仅占25.87%。5农户参与意愿实证分析5.1信度与效度分析信度分析通常用于评价问卷是否稳定和可靠。本文利用SPSS23.0对数据进行信度和效度检验,结果显示总量表的Cronbach a系数为0.902,各观测变量的Cronbach a系数值如表3所示。由以上数据可知,量表的整体信度以及各观测变量的Cronbach a系数值均在0.7以上,远超过0.35的最低信度水平值,说明问卷数据具有较高的内部一致性,信度较好。利用因子分析进行效度检验,可知KMO系数为0.878,样本的Bartlett球形检验值卡方值为1575.686,自由度为105,显著性水平为0.000,效度水平也较高(表4),适合做因子分析。5.2因子分析为确保运用结构方程模型有效地对数据进行分析,本文先利用Amos23.0构建模型进行验证性因子分析,结果表明模型较为显著(图2)。通过上示验证性因子分析模型可以看岀,所有的因子载荷均大于0.5,绝大部分因子载荷大于0.7,检验结果理想,所设模型通过检验,可以进行进一步的分析。模型拟合与验证完成模型界定之后,利用AMOS进行拟合,输入农户参与肉欢蓉产业意愿相关数据,将相关观测变量和潜变量联系起来,选择最大似然法对模型进行了拟合,构建完整模型,输出标准化系数模型和标准化模型参数估计摘要表,如表5所示。同时,根据国际惯例,采用才修(卡方自由度比)、GFI(拟合优度指数)、RMSEA(近似均方根误差)、AGFI(调整的拟合优度指数)、NFI(正态拟合指数)、IFI(增值指数)以及CFI (相对拟合指数)7个指标来评价研究的模型,其中X2/# 一般要求小于3, GFLAGFI、NFI、IFI.CFI 一般要求这些值均大于0.9,表示模型适配能力比较好。由表5可知,本文选取的各项指标均符合要求,说明模型的拟合程度可以被接受。5.4模型估计结果与分析通过极大似然法对模型进行估计结果如表6所示。表中列示出了农牧民种植肉欢蓉积极性影响因素模型的路径系数、标准误差、临界比率以及显著性。(1) 测量模型反映了各观测变量指标与潜变量之间的关系。综合标准化系数路径估计值,表6中测量模型反映的关系可以归纳为:①反映肉欢蓉产业发展正向经济效应的5个可观测指标对农户参与意愿的贡献大小分别是:X、(0.522)、/(0.120)、X,(0.116)、X2 (0.104)、X,(0.078);②反映正向环境效应的3个可观测指标对农户参与意愿影响的贡献大小分别为:扎(0.468)、X6 (0.290)、X7(0.063);③反映政府管理态度的3个可观测指标对农户参与意愿影响的贡献大小分别为:Z、(0.514)、Z2(0.503)、Z] (0.446)o(2) 结构模型反映了各潜变量之间的关系。结果表明,肉芨蓉产业发展的正向经济效应、正向环境效应和肉忒蓉产业发展政府的管理态度对农牧民对肉双蓉产业参与意愿的路径系数均比较理想,通过显著性检验且方向为正,由此可见肉茨蓉产业发展的正向经济和生态效应越大,农户参与意愿越强烈,政府在产业管理政策的制定中提高公众参与度,农户参与意愿也会增强。这与本文假设一致。但是,运算结果表明就业机会的增加对农牧民种植肉欢蓉意愿路径的临界值比率较低,为0.446,未通过检验,完全脱离原假设。这可能是因为目前阿拉善盟的肉茨蓉产业发展并不完善,多数农牧民仅从事简单的初级种植,并将收获的肉双蓉出售给大型的肉欢蓉收购公司,对于肉欢蓉产业拉动就业没有较为成熟的认知,而更深层次的肉欢蓉产业比如加工制造业,其辐射范围波及农牧民较少,因此农牧民对肉欢蓉产业能够提高当地居民就业机会感知较弱,从而导致模型输出结果不显著。(3)从标准化路径的结果来看,肉欢蓉产业的正向经济效应、正向环境效应和政府对肉欢蓉产业的管理态度潜变量的标准化路径系数分别为0.539、0.383和0.151,说明经济效应对农户参与肉欢蓉种植意愿的影响最大,环境效应次之,政府对肉欢蓉产业的管理态度影响最弱。6主要结论及建议6.1主要结论(1)沙产业发展的正向经济效应、正向环境效应和政府管理态度均对农户参与意愿有显著的正向影响。正向经济效应和生态效应越高,农户参与沙产业意愿越强烈;政府制定沙产业发展政策过程中提高农户参与度,同样可以增强农户参与意愿。(2) 沙产业发展的正向经济效应对农户参与意愿的影响显著高于正向生态效应和政府管理态度。这表明农户参与沙产业意愿更多地受到经济收益的影响,经济收益越高,农户的参与意愿越强烈。在经济收益得到保证的情况下,生态环境的改善可提高其参与积极性。(3) 政府对沙产业管理态度虽然影响程度小,但不可或缺。政府作为农户的代理人对沙产业进行管理,应当减少信息不对称性,维护农户利益。因此,提升农户参与沙产业意愿,政府管理态度和措施也应当考虑其中。同时,研究还发现,农户普遍认为当地的肉欢蓉产业发展的管理还有待提升。6.2政策建议基于本文的分析及结论,提出3条政策建议。(1) 大力扶持沙产业发展。一方面,政府应当加大产业扶持力度,提高对种植梭梭-肉茨蓉农户、沙产业企业政策性补助额度,完善市场监督管理体制,保障农户从事沙产业合理收入,提高经济效益,增强农户参与意愿;另一方面,加大科技研发投入力度,研发沙产业新产品,降低种植沙地作物成本,提高收益。(2) 增强宣传力度。通过宣传,让农户切实了解参与沙产业带来的经济、环境效益,对改善已有生存条件带来的正外部性,培养农户参与沙产业的环境驱动目的;此外,还可聘请相关专家对农户种植沙地作物进行培训和技术指导。(3) 完善管理,增强政策制定过程的透明度。政府与农户之间的信息传递效率提升及农户反馈渠道的拓展与保障同样尤为重要,应开通农户参与沙产业相关政策制定的渠道,通过诸如公共建议邮箱、电话专线、微信订阅号等新型联络方式来改善政企或政农之间的信息不对称状况。参考文献卞玉梅.结构方程模型研究及其应用[D].大连海事大学,2017陈昭玖,胡雯.人力资本、地缘特征与农民工市民化意愿——基于结构方程模型的实证分析0].农业技术经济,2016(1):37-47达世彩.张掖市肉次蓉产业发展现状及对策建议[J].现代园艺,2014,7⑷:32〜33段伟,马奔,温亚利,等•林业生态工程对山区减贫影响实证分析:一个结构方程模型(SEM)[J]汗旱区资源与环境.2017,31(12):8-12何大安.行为理性主体及其决策的理论分析[J].中国工业经济,2013(7):5-17何颖,李思然•新公共管理理论方法评析山・中国行政管理,2014,353郑可,卢毅•农民创业机会开发活跃度的宏观影响因素探索一基于2005-2014年农村省际面板数据的实证[I]•农村经济,2018(2):123-128钟永光,贾晓菁,李旭等•系统动力学[M]•北京:科学出版社,2009周菁华,谢洲•农民创业能力及其与创业绩效的关系研究一基于重庆市366个创业农民的调査数据[J].农业技术经济,2012(5):121-126朱红根,康兰媛•家庭资本禀赋与农民创业绩效实证分析[J].商业研究,2016(7):33-41,56庄晋财,李丹•“互联网+ ”对农民创业机会开发的影响研究[J]广西大学学报(哲学社会科学版),2018(5):104-110Baumgartner D, Schulz T, Seidl I. 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  • 摘 要: 建立良性前列腺增生大鼠模型,用不同剂量的阿克替苷灌胃4周,研究肉苁蓉的化学成分阿克替苷对前列腺增生大鼠前列腺细胞凋亡和超微结构的影响。结果表明: 模型组细胞凋亡率较低;高剂量阿克替苷处理后,大鼠前列腺细胞凋亡率明显高于模型组。超微结构显示阿克替苷较模型组细胞核完整,细胞核浓缩不明显,细胞核致密度增高,粗面内质网空泡减少。证明阿克替苷能促进细胞凋亡,对超微结构有明显的改善作用,因而抑制前列腺增生。关键词: 阿克替苷; 大鼠; 前列腺增生; 细胞凋亡; 超微结构前列腺增生( BPH)过程中细胞凋亡是目前较受关注的机制之一,其由基因编码所决定,并能够使细胞通过对特定信号的反应控制细胞程序性死亡。前列腺发育至成年大小后,通过细胞凋亡平均速率的平衡作用使前列腺细胞的增殖率维持在1% ~ 2% , 一旦这种平衡被打破则被认为是BPH的诱发原因。正常条件下,前列腺内的雌、雄激素水平及正常循环是存在于增殖与凋亡过程中的一种自我平衡状态。当增殖与凋亡失去平衡时,会导致腺体进一步生长和扩大,主要使上皮细胞间隔间发生膨胀[ 1 ]。本试验通过建立大鼠前列腺增生模型,观察并分析肉苁蓉化学成分之一阿克替苷(类叶升麻苷)对大鼠前列腺细胞凋亡及超微结构变化的影响,以评价阿克替苷抑制前列腺增生的效用,为开发利用中药肉苁蓉的新用途提供科学依据。1 材料与方法1. 1 试验动物6~ 7周龄雄性SD大鼠50只,清洁级,体重80~ 100 g, 由扬州大学比较医学中心提供。1. 2 试剂与药品丙酸睾丸酮注射液由上海通用制药有限公司生产,规格25 mg· mL- 1 , 批号060708。PI染液由扬州大学测试中心提供。阿克替苷含量945 g· kg- 1 , 中国药科大学中药分析教研室制备。1. 3 实验仪器Philips Tecnai 12透射电子显微镜荷兰飞利浦公司生产; FACSAria型流式细胞仪为美国BD公司制造。1. 4 分组与造模按文献[3 ]方法去势后,大鼠背部皮下注射丙酸睾酮5 mg· ( kg· d)- 1 , 连续4周,建立前列腺增生模型。将模型大鼠随机分为模型组、模型十阿克替苷高剂量组、模型十阿克替苷中剂量组、模型十阿克替苷低剂量组,每组10只; 另取10只正常大鼠为对照组。1. 5 给药方法造模后1周,阿克替苷高、中、低剂量组分别按60、30、15 mg· ( kg· d) - 1灌胃给药。模型组、对照组灌胃等容积生理盐水,每天1次,连续4周,每周1次称量体重,根据体重调整给药剂量。1. 5 样本采集与处理1) 取材与制样: 末次给药后24 h , 称量空腹大鼠体重,用颈椎脱臼法处死大鼠,立即打开下腹部,剥离前列腺周围组织,游离前列腺,取部分前列腺于冰浴中用组织匀浆器匀浆,制备前列腺单细胞悬液,采用碘化丙啶一步法染色[4 ]; 另取部分前列腺组织固定于25 g· L- 1戊二醛中,制备超薄切片。2) 制备单细胞悬液: 在无菌条件下,完整取出大鼠前列腺移入平皿中,用PBS冲洗前列腺组织表面的血液及血凝块,去除周围附带的脂肪及多余的纤维、胞膜,从同一大鼠前列腺取大小约0. 5 cm3 新鲜前列腺组织,剪碎,制备前列腺细胞悬液[5 ]。将前列腺组织块置于培养皿中,加入少量PBS; 冰浴锅中用眼科剪将组织剪碎,匀浆器研磨至混悬状,加入10 mL PBS, 吸管吸取组织匀浆,用0. 074 mm孔径尼龙网过滤到试管内, 1 500 r· min- 1离心3 min, 沉淀物再用PBS洗3次,每次以500 r· min- 1短时低速离心除去细胞碎片,以0. 037 mm孔径尼龙网过滤去细胞团块。细胞计数并调整细胞浓度为2× 109 个· L- 1。用1 mL PI染液染色, 4 ℃避光10 min。3) 超薄切片制备: 超薄组织切片制备见文献[6]。2. 1 阿克替苷对大鼠前列腺细胞凋亡的影响图1为流式细胞仪检测的凋亡波峰图,由此可见阿克替苷具有促凋亡作用。对细胞凋亡的结果统计分析表明,经高、中、低剂量阿克替苷分别处理后大鼠细胞凋亡率明显增加( 24. 7± 1. 85)% 、( 16. 1± 1. 04)% 、( 14. 5± 0. 68)% ,与正常组( 1. 1± 0. 06)% 、模型组( 9. 5± 0. 5)% 、阳性组( 9. 83± 0. 76)%比较差异均极显著( P < 0. 01) , 表明阿克替苷可诱导细胞凋亡,且作用明显强于阳性对照药前列康(图2)。2. 2 阿克替苷对前列腺增生细胞超微结构的影响电镜观察显示: 正常大鼠前列腺可见细胞核完整,核仁明显,核染色质分布均匀; 粗面内质网大小一致,排列整齐, 无空泡化现象,上皮表面无指状微绒毛突起,未见线粒体肿胀现象,腔内分泌物少。模型组前列腺细胞的细胞核明显变形、皱缩,胞质丰富; 粗面内质网呈囊状高度扩张,明显空泡化,囊内充满高密度蛋白颗粒; 线粒体轻度肿胀(也有空泡) ,腔内有中等密度分泌物,有些细胞内可见致密圆形分泌颗粒。阿克替苷干预的大鼠,细胞核较模型组完整,细胞核略浓缩,核致密度增高,异染色质积聚,胞质有空泡,粗面内质网空泡减少; 低剂量阿克替苷组的细胞核轻度皱缩,不规则,胞质较丰富,粗面内质网减少(图3)。讨论应用FCM定量检测凋亡细胞简便、快速、客观,并可进行多参数检测,较深入地了解细胞凋亡的变化及其可能的调节机制。细胞凋亡是多细胞有机体为调控机体发育、维护内环境稳定由基因编码决定的细胞程序性死亡过程。凋亡细胞有其独特的形态和生物学特征: 细胞核染色质固缩, DN A广泛降解断裂,细胞全面皱缩,细胞膜皱缩外突包裹细胞器(如线粒体、核糖体) ,细胞核片段形成特征性的凋亡小体,凋亡细胞不仅保留完整的细胞膜结构和功能,而且细胞器结构完整,这不同于细胞坏死。细胞凋亡的分子机制迄今尚未完全阐明,有研究[7 ]表明,在细胞凋亡中有多种基因参与了细胞凋亡的基因调控。BPH过程中细胞凋亡目前较受关注,其由基因编码决定,并能够使细胞通过对特定信号的反应控制细胞的死亡[1 ]。前列腺发育至成年大小后,通过细胞凋亡速率的平衡作用使前列腺细胞的增殖率维持在1% ~ 2% , 这种平衡的破坏一直被认为是BPH的起因[8 ]。正常条件下,前列腺内的雌激素与雄激素水平和正常循环是存在于增殖与凋亡过程中的一种自我平衡状态。当增殖与凋亡失平衡时,会导致腺体进一步生长和扩大,主要因上皮细胞间隔之间的膨胀所致[9 ]。这种平衡的中断可能源于雄激素水平或功能的改变;也可能起因于AR对DHT的刺激或者以DHT为媒介的生长因子水平的改变而产生的任何一种反应[2 ]。本研究经FCM检测细胞凋亡发现,与模型组比较,给予高剂量阿克替苷的大鼠前列腺细胞凋亡率明显增加。电镜结果显示,模型组大鼠前列腺细胞胞核变形,粗面内质网呈囊状高度扩张,囊内充满高密度蛋白颗粒, 空泡化明显;线粒体轻度肿胀,与相关研究[ 10-11 ]报道一致。阿克替苷干预后大鼠前列腺增生程度显著减轻,高剂量组同时出现了凋亡的早期征象: 前列腺细胞胞核基本保持完整,内质网空泡明显减少。细胞核浓缩,核致密度增高,异染色质积聚,类似于大鼠去势后前列腺组织细胞的表征[12-13 ]。说明阿克替苷可诱导前列腺增生大鼠细胞凋亡,调节和恢复前列腺细胞凋亡与增殖的平衡,发挥抑制前列腺细胞增生作用。本研究及先前研究[ 14]结果表明,德赢vwin登录 化学成分阿克替苷抑制前列腺增生的作用可能与其促进细胞凋亡、减弱AR及TGF-UR1过表达有关,详细的作用机制尚有待于进一步深入研究。参考文献:[ 1] Giacomo N, Anto nio G, Ra fa el B B, et al. 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  • 摘要] 目的:采用三种方法制备pPB 修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体,并对其体外性质进行考察。方法:分别采用薄膜分散法、二次包封法、逆相蒸发法制备肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体,并对不同方法制得脂质体的粒径、电位、包封率进行比较。结果:薄膜分散法、二次包封法、逆相蒸发法制得的脂质体粒径分别为(209.20 ± 1.77) nm、(212.70 ± 1.27) nm、(196.40 ±1.56) nm,ξ 电位分别为(– 43.35 ± 2.17) mV、(– 37.85 ± 0.68) mV、(– 47.95 ± 2.62) mV左右,包封率分别为(28.55 ± 5.61)%、(38.46 ± 7.85)%、(33.88 ± 3.50)%。结论:三种方法制得的脂质体的包封率之间有显著性差异,其中二次包封法所得脂质体的包封率最高,因此选择二次包封法作为pPB修饰的肉苁蓉总苷脂质体的制备方法。[ 关键词] 苯乙醇总苷;脂质体;包封率;粒径肉苁蓉(Herba Cistanches)为列当科植物德赢vwin登录 的干燥带鳞叶的肉质茎,具有补肾、益经血、润肠通便等作用,有“沙漠之参”之称[1-3]。苯乙醇总苷是肉苁蓉的主要化学成分之一,主要包含松果菊苷与毛蕊花糖苷两种成分。研究显示苯乙醇总苷能够明显抑制机体内酪氨酸酶的活性,并在修复自由基损伤、抗衰老、抗疲劳、抗色素沉着、抗老年痴呆症方面显示了强大的功效[3-5]。肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)是肝脏遭受反复或慢性损伤后的一种损伤与修复过程,主要与慢性炎症和引起慢性肝脏损伤的化学因素相关。研究表明,肉苁蓉苯乙醇总苷可降低肝纤维化大鼠肝组织中的胶原纤维生成,因此具有良好的抗肝纤维化的作用[6-8]。环肽pPB 能特异性识别血小板源生长因子受体,因此能靶向到肝纤维化细胞。脂质体(liposomes)是由磷脂构成的双分子层结构的微型囊泡,脂质体作为药物载体具有缓释、降低药物毒性、保护被包封的药物和靶向性等特点,以脂质体给药后,其可将药物自动转运到肝、脾、肺和骨髓等组织器官,对于治疗肝、脾部位疾病及提高药物的治疗指数具有很好的作用[9-11]。在上述基础上,本研究拟将肉苁蓉苯乙醇总苷制成pPB环肽修饰的脂质体,利用pPB 环肽作用,使脂质体聚集到肝纤维化的细胞,更好地发挥肉苁蓉苯乙醇总苷治疗肝纤维化的作用。本研究采用不同的制备方法分别制备pPB 修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体,并选择松果菊苷为含量测定指标,对脂质体的粒径、电位和包封率进行测定,最终确定该脂质体的制备方法[12-13]。1 仪器与试药1.1 仪器AB135-S分析天平(瑞士Mettler Toledo公司);T6新世纪紫外可见分光光度仪(北京普析通用仪器有限公司);EYELAN-2100 旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司);Malvern Nano-2S90 型激光粒径测定仪(英国马尔文仪器有限公司);JEOL-1340H 透射电子显微镜(捷欧路科贸有限公司);85-2 型控温磁力搅拌机(江苏金怡仪器科技有限公司);KQ-500DE 超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。1.2 试药松果菊苷对照品(批号327A021,含量98%,北京索莱宝科技有限公司);苯乙醇总苷原料药(实验室自制,纯度95%);大豆卵磷脂(Lipoid 公司);二棕榈磷脂酰胆碱(DPPC,意大利Corden Pharma 公司,批号T0343);胆固醇(美国Sigma 公司);马来酰基- 二硬脂酸磷脂酰乙醇胺- 聚乙二醇2000(Mal-DSPE-PEG2000,美国Nanocs 公司,批号130916);pPB(Cys*-Ser-Arg-Asn-Leu-lle-Asp-Cys*,批号20170204,含量98.49%,上海吉尔生化有限公司);N- 琥珀酰亚胺基-S- 乙酰硫基乙酸酯(SATA,美国Sigma 公司,批号SLBR3300V);Sephadex G-50(100-300)(美国Sigma 公司,批号SLBB6637V);其余试剂均为分析纯。2 方法与结果2.1 含量测定方法的建立2.1.1 最大吸收波长的选择 取适量甲醇溶解松果菊苷对照品,以甲醇作为空白,在紫外分光光度仪上200 ~ 400 nm 范围内进行紫外扫描,考察最大吸收波长,结果显示在330 nm 处松果菊苷有最大吸收。2.1.2 标准曲线建立 精密称取松果菊苷对照品适量,用甲醇溶解并定容至刻度,得200 μg·mL-1 的松果菊苷对照品储备液。分别精密量取对照品储备液适量,用甲醇溶解,制得浓度分别为5.0、8.0、10.0、20.0、40.0 μg·mL-1 对照品溶液,将各溶液置于330 nm处测定吸光度值,以浓度(C)对吸光度(A)值作线性回归,得线性回归方程C = 42.615 A + 1.210 8,r =0.999 8,结果表明,在5.0 ~ 40.0 μg·mL-1 范围内线性关系良好。2.1.3 精密度实验 配制10.0、20.0、40.0 μg·mL-1 的低、中、高浓度的松果菊苷对照品溶液,每个浓度配3份,1 天内重复测定3 次,计算日内精密度,连续测定3 d,计算日间精密度。结果显示日内精密度和日间精密度的RSD值均小于2%,表明方法精密度良好。2.1.4 回收率考察 取0.8 mL 肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体作为样品的加入量,并加入高、中、低浓度松果菊苷对照品溶液分别为0.5、1.0、2.0 mL,使对照品量分别为样品加入量的120%、100%、80%,样品与对照品溶液混合均匀后,用甲醇定容至刻度,用紫外分光光度计测定药物含量,计算对照品的加入量及回收率。回收率(%)=(测得总量– 样品加入量)/ 实际对照品的加入量×100%。结果显示松果菊苷的平均回收率分别为98.85%、100.67%、99.62%,RSD均小于2%,回收率符合规定,结果见表1。2.2 肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体的制备2.2.1 薄膜分散法制备肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体 称取卵磷脂、DPPC、胆固醇适量(质量比为2∶2∶1),溶于适量氯仿和甲醇混合溶剂中(氯仿∶甲醇 = 4∶2,v∶v),置于旋转蒸发仪,在49 ~ 50 ℃ 下旋转蒸发使成膜状,然后加入250 μg·mL-1的苯乙醇总苷水溶液旋转水化,即得脂质体,将所得脂质体分别用0.45 μm微孔滤膜挤压4 ~ 5 次,0.22 μm 的微孔滤膜挤压18 ~20 次,即得肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体。2.2.2 二次包封法制备肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体 称取卵磷脂、DPPC、胆固醇适量(质量比为2∶2∶1),溶于适量氯仿和甲醇混合溶剂中(氯仿∶甲醇 = 4∶2,v∶v),置于旋转蒸发仪,在49 ~ 50 ℃ 下旋转蒸发使成膜状,然后加入250 μg·mL-1的苯乙醇总苷水溶液旋转水化,得脂质体备用。同法再次取磷脂成分溶于氯仿,旋转成膜状后,将制得备用的脂质体加入,再次旋转水化,即得二次包封的脂质体。将所得脂质体分别用0.45 μm 的微孔滤膜挤压4 ~ 5 次,0.22 μm 的微孔滤膜挤压18 ~ 20 次,即得肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体。2.2.3 逆相蒸发法制备肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体 称取质量比为2∶2∶1 的卵磷脂、DPPC、胆固醇,溶于适量氯仿和甲醇混合溶剂中(氯仿∶甲醇 = 4∶2,v∶v),加入250 μg·mL-1 苯乙醇总苷原料药水溶液适量,冰浴超声1 h,直至形成稳定的乳剂,采用旋转蒸发仪减压蒸发,达到胶态后,加适量水水化,继续减压蒸发除去残留溶剂,将所得脂质体分别用0.45 μm的微孔滤膜挤压4 ~ 5次,0.22 μm的微孔滤膜挤压18 ~20 次,即得肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体。2.2.4 pPB-DSPE-PEG2000 的制备 首先将环肽pPB分子中引入巯基(-SH),然后使pPB 环肽上巯基与Mal-DSPE-PEG2000 末端的马来酰基发生C-S 加成反应。具体方法为:将4 mg pPB 溶于PBS 缓冲液,并与8 mg SATA 混合,使SATA与pPB 质量比为2 : 1,在室温下搅拌2 h 后,加入Mal-DSPE-PEG2000,室温下磁力搅拌24 h,将所得反应产物用截留分子量为3500Da 的透析袋透析除去多肽、SATA等,截留下链接好的产物pPB-DSPE-PEG2000,将产物冷冻干燥后备用。为检测偶联是否成功,将pPB-PEG2000-DSPE和Mal-PEG2000-DSPE分别溶于氚代氯仿中,分别测定1H-NMR,通过比较马来酰基特征峰(6.7 ppm)的消失与否来验证偶联是否成功。结果表明pPB-PEG2000-DSPE 1H-NMR图谱中6.7 ppm未见相应的马来酰基峰出现,说明偶联已成功。2.2.5 pPB修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体的制备 称取大豆磷脂、DPPC、胆固醇、pPB-DSPE-PEG200(0 质量比为10 : 10 : 5 : 1)溶于氯仿和甲醇的混合溶剂,同“2.2.2”项下方法制备pPB修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体。2.3 苯乙醇总苷脂质体的体外性质考察2.3.1 不同方法制得的脂质体的粒径、电位测定 采用Malvern粒径测定仪测定脂质体的粒径和电位,结果见表2,由结果可知,3 种方法形成的脂质体粒径均在200 nm左右,粒径均匀,电位均在35 ~ 45 mV。2.3.2 脂质体的包封率测定 1)洗脱曲线测定:采用葡聚糖凝胶柱洗脱法测定脂质体的包封率,取SephadexG-50 装柱,使径高比为1∶10(cm∶cm),取1 mL 脂质体上样,用pH 7.2 的磷酸盐缓冲液洗脱,流速控制在1 mL·min-1,每2 mL 接取一个流份,共接取30个流份,所得流份分别用2 mL甲醇溶解,置于330 nm处测定吸收度,以流份为横坐标,以药物浓度为纵坐标,绘制洗脱曲线。结果表明,脂质体流份在第3 ~ 6流份流出,游离药物在7 ~ 14 流份流出。2)不同制备方法制得的脂质体包封率的测定:包封率测定方法为:取SephadexG-50(粒径100 ~ 300μm)装柱,使径高比为1 cm∶10 cm,取不同制备方法制得的脂质体1 mL 分别上样,用pH 7.2 的磷酸盐缓冲液进行洗脱,流速控制在1 mL·min-1,收集脂质体流份,从中取2 mL 加甲醇破乳溶解后测定松果菊苷的含量,作为脂质体中包封的药物含量。另取苯乙醇总苷脂质体1 mL 直接加甲醇破乳溶解后,测定松果菊苷的含量作为脂质体中药物总量。按下述公式计算包封率:包封率%=(脂质体中包封药物量/ 脂质体中药物总量)×100%。本研究结果表明,采用薄膜分散法、二次包封法、逆相蒸发法制得脂质体的载药量分别为(28.55 ±5.61)%,(38.46 ± 7.85)%,(33.88 ± 3.50)%。用SPSS16.0 软件中SNK-Q 检验对三种方法制备的肉苁蓉总苷脂质体包封率均数两两比较,以P < 0.05 为差异具有统计学意义。结果显示,二次包封法制得的脂质体的包封率最高。2.3.3 脂质体的载药量测定 取制得的脂质体1 mL精确称重,记录载药脂质体的总重量,将此1 mL 脂质体同“2.3.2”项下方法上样洗脱后,测得脂质体中的载药量,依据公式:载药量=Wd/WL×100%,其中Wd表示包封于脂质体中的药量,WL 表示载药脂质体的总重量。结果显示采用薄膜分散法、二次包封法、逆相蒸发法制得脂质体的载药量分别为(2.73±0.57)%,(3.71±0.32)%,(3.28±0.49)%。2.3.4 pPB 修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体的体外性质测定 1)pPB 修饰的苯乙醇总苷脂质体的粒径、电位、包封率、载药量的测定:对不同制备方法所得的脂质体的粒径、电位、包封率和载药量的结果进行比较,结果表明,二次包封法制得的脂质体的包封率和载药量最高,粒径和电位与其它制备方法相似,因此确定二次包封法是制备脂质体的最优方法。在此基础上,采用二次包封法制备了pPB 修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体,其粒径为(227.60±1.63)nm、电位为(– 45.37±1.62) mV、包封率为(35.55±7.35)%、载药量为(3.80±0.28)%。2)脂质体形态观察:取二次包封法制得的pPB修饰的苯乙醇总苷脂质体混悬液1 滴,滴至专用铜网上,用磷钨酸染色后,自然晾干,于透射电镜下观察脂质体形态,结果见图1。讨论脂质体是磷脂双分子层构成的囊泡,无毒副作用和免疫原性,用其包封药物后,具有使药物生物利用度提高,增加药物靶向性,降低药物毒性等优点。同时在脂质体表面偶联能与靶点高效结合的配体(如pPB 环肽)后,可使脂质体与靶细胞表面相应的受体分子特异性结合,从而将药物靶向至具有特异性受体的细胞、组织或器官。通过HPLC方法测定,发现肉苁蓉总苷主要成分为松果菊苷和毛蕊花糖苷,这两种成分在HPLC条件下能够同时出峰,其中松果菊苷含量更高,同时根据文献报道,肉苁蓉总苷可选用松果菊苷作为指标性成分,因此本研究选用松果菊苷作为测定肉苁蓉总苷的指标性成分。有文献报道,除HPLC方法外,由于松果菊苷在总成分中占比较高,因此为了便于测定,本文在采用UV法测定肉苁蓉苯乙醇总苷含量时,以测定松果菊苷含量为主要指标[14]。凝胶柱层析法是利用分子筛的原理,通过在凝胶柱上滞留时间的差别对传递体和游离药物进行分离,脂质体的分子大,滞留时间短,洗脱较快;游离药物分子小,滞留时间长,洗脱较慢,从而使脂质体与游离药物得到较好的分离。选择适当的有机溶剂和油水比可制备较稳定的脂质体,本研究过程中发现氯仿和甲醇混合溶剂为有机溶剂,比单独使用一种溶剂更容易形成稳定的脂质体。本实验测得的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体的包封率较低,可能与该药物本身的性质有直接的关系。当药物油水分布系数(logP)< – 0.3或> 4.5时,药物可被包封成具有较高包封率的脂质体,否则包封率较低。肉苁蓉苯乙醇总苷的logP约为1,介于两者之间,这可能是导致脂质体包封率较低的主要因素[15]。[ 参考文献][1]  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  • 摘要:建立微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法同时测定肉苁蓉及其饮片中锶、铬、钴、镍、铜、锌、铅等7种无机元素含量的方法。以硝酸-高氯酸-氢氟酸为消解体系对样品进行微波消解,采用ICP-MS法同时测定。方法学验证表明:7 种元素均在0~500 μg/L 的质量浓度范围内线性关系良好(r2>0.999);检出限在0.0031~0.0720μg/L;低、中、高3 种浓度水平,7种元素的平均回收率(n=3)在93.75%~105. 0%之间,重复性RSD(n=6)在1.2%~3.4%之间。结果表明,肉苁蓉确为一种矿质元素含量丰富且安全性较好的药品及功能保健食品(原料);其中肉苁蓉药材:Sr>Cu>Ni>Pb>Co>Cr>Zn;肉苁蓉饮片:Sr>Zn>Cu>Pb>Ni>Co>Cr;可见肉苁蓉经过加工处理成饮片,其无机元素含量变化比较大。为肉苁蓉的综合质量评价、营养价值评价、制药工艺及科学合理施肥等提供一定参考。关键词:肉苁蓉;肉苁蓉饮片;电感耦合等离子体质谱法;无机元素肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉Cistanchedesrtico⁃laY.C.Ma 或德赢vwin登录 Cistanchetubulosa(Schenk)Wight 的干燥带鳞叶的肉质茎,具有补肾阳、益精血、润肠通便的功效,是一种应用价值很高的传统中草药,素有“沙漠人参”之美誉,主产于内蒙古、新疆、宁夏、甘肃和青海等西北地区[1-2]。现代药理学研究表明肉苁蓉具有延缓衰老、抗疲劳等作用[3];临床上主要用于肾阳不足、精血亏虚、阳痿不孕、腰膝酸软、筋骨无力等症,为常用的补肾壮阳药[4];最新研究发现肉苁蓉很可能成为抗阿尔兹海默病的新药,也可能被应用于中老年神经退行性疾病等新型药物的开发。关于肉苁蓉成分研究较多,但是关于肉苁蓉中微量元素的检测研究较少。微量元素在中药材中普遍存在,既为植物组织结构的组成部分,也是中药发挥药效治疗疾病的有效成分。现代营养学中微量元素是生活中必不可少的,同时微量元素可增强药效,如锌(Zn)、锶(Sr)、钴(Co)在人体内不仅具有生物活性,还参加人体合成和代谢生物大分子(如合成核苷酸、生物酶等);肉苁蓉及其饮片中微量元素含量的检测对于研究中药材的道地性和质量具有重要指导意义[5-9]。同时,有毒元素的含量还可作为评价中药材质量的指标。中药饮片与传统的中药相比较,具有携带方便,免称量、清洗的麻烦,增加了用药顺应性[8]。但是肉苁蓉药材经过生产加工,制备成饮片,其无机元素含量是否存在差异,还尚未见报道,对比分析检测肉苁蓉及其饮片中无机元素含量及其变化规律对于肉苁蓉综合开发利用,药食同源等方面都会有非常重要的作用。电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)是近年来发展迅速的一项技术,具有灵敏度高、准确性好、精密度高、检出限低、线性范围宽、易于同时进行多元素分析等优点[10-18]。本文将采取电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)技术测定肉苁蓉中药及其饮片中7种微量元素的含量并进行比较分析。1 实验部分1.1 仪器与试药XSeries2 型电感耦合等离子体质谱仪(美国Thermo Ecemntal公司),EX12001ZH 型电子分析天平(美国奥豪斯仪器有限公司),Milli-Q B型超纯水装置(美国MIKKIPORE公司)。所有玻璃仪器均以铬酸洗液浸泡过夜,再以去离子水彻底冲洗后备用。锶(Sr)单元素标准溶液(1000mg·L-1,批号为GSB04-1767-2004,国家有色金属及电子材料分析测试中心);铬(Cr) 单元素标准溶液(1000mg·L-1,14040931,国家标准物质研究中心)。钴(Co)单元素标准溶液(1000mg·L-1,GSB04-1722-2004,国家有色金属及电子材料分析测试中心)。镍(Ni) 单元素标准溶液(1000mg·L-1,B1802007,国家标准物质研究中心)。铜(Cu)单元素标准溶液(1000mg·L-1,GSB04-1725-2004,国家有色金属及电子材料分析测试中心)。锌(Zn)单元素标准溶液(1000mg·L-1,GSB04-1761-2004,国家有色金属及电子材料分析测试中心)。铅(Pb)单元素标准溶液(1000mg·L-1,B003036,国家标准物质研究中心)。氩气纯度为99.999%;盐酸、硝酸、高氯酸、氢氟酸为优级纯;试验用水为超纯水(电阻率18.25MΩ·cm-1)。肉苁蓉、肉苁蓉饮片来源于酒泉市中医院,原产地均为甘肃省。1.2 标准溶液制备精密量取各单元素标准溶液适量,以2% 硝酸溶液稀释,制成Cr浓度为0、1、5、10、50、100 μg/L 的标准工作溶液,Sr、Co、Cr、Ni、Cu、Zn、Pb的浓度分别为0、10、50、100、500μg/L 的混合标准工作溶液。1.3 内标溶液的制备分别精密量取Ge、In、Rh 标准溶液0.5 mL 于50 mL 容量瓶中,用2% 硝酸定容到50 mL,得到质量浓度为10 mg/L 的混合内标储备溶液;再将内标储备溶液用2% 硝酸稀释10 倍,得到Ge、In、Rh混合内标使用溶液,质量浓度均为0.5 mg/L。1.4 供试品溶液制备取肉苁蓉药材、肉苁蓉饮片样品用自来水冲洗后,分别用去离子水冲洗、烘干、粉碎、过筛(100目),恒重后置于干燥器中备用。分别精密称取样品0.2000g 细粉于聚四氟乙烯消解罐中,精密加入10mL硝酸-高氯酸-氢氟酸(8+2+3),摇匀,静置至气泡散尽,置微波消解系统内消解。微波功率1000W,温度在25 min 内由室温升至200℃,维持22分钟,待消解完全后冷却至室温。取出消解罐,在通风橱中将酸挥尽,将消解液转移至容量瓶中,用去离子水洗涤消解罐与盖子3次,合并洗液于容量瓶中,用2%稀硝酸定容至25mL,待测。2 实验方法与结果2.1 工作条件高频发生器输出功率1550 W;等离子体流量15.0 L/min;辅助气流量0.8 L/min;载气流量1.1 L/min;碰撞气(氦气)流量4.3 L/min;射频1.8V;炬管水平位置-0.5mm;雾化室温度2℃;蠕动泵转速0.1 rps;扫描方式调谐模式He;重复采集次数3次;炬管水平位置0.5 mm;溶液稳定时间40s ;积分时间0.30 s;氧化物1.58% ;采样深度10.0mm。对样品进行检测时,内标进样管始终置于内标溶液中,同时样品管需插入浓度由低到高的对照品溶液中,依次测定。重复测定3次,取平均值。2.2 方法学考察2.2.1 线性关系及检出限取“2.1”项下混合标准工作溶液,按“2.4”项下工作条件依次测定,以标准品质量浓度为横坐标,测量值与内标值的比值为纵坐标,绘制标准曲线,得到各元素的回归方程及相关系数(r)。对样品空白溶液连续进行11次平行测定,以标准偏差的3倍计算检出限(3s)。各元素的线性参数和检出限见表2。7种元素相关系数均大于0.999,说明线性相关系数良好,满足标准曲线线性相关系数的要求。2.2.2 精密度试验取“2.1”项下混合标准工作溶液,连续进样6次,计算得各元素的RSD 为1.1%~3.2%(见表1),表明该方法精密度良好。2.2.3 重复性及稳定性试验精密称定肉苁蓉样品R1 约0.2000 g,按“2.3”项下方法平行制备6 份供试品溶液,测定,计算质量分数,各元素RSD 为1.2%~3.4%,表明该方法重复性良好。该样品分别于0、1、2、4、6、8、10、12 h 进样测定,结果各元素的RSD 为0.5%~2.1%,表明供试品溶液于室温12 h 内稳定性良好。2.2.4 加样回收试验精密称定肉苁蓉、肉苁蓉饮片样品0.2000 g,分别加入适量低、中、高三水平的单元素标准溶液,按“2.3”项下方法平行制备试样,上机测定,通过计算各元素的加标回收率和相对标准偏差(RSD)来确认方法的准确性与精密度,结果见表3和表4。三份样品的加标回收率在93.75%~105. 0% 之间,表明所测定元素都获得了良好的回收率,所建立的方法准确可靠且精密高。2.3 样品含量测定按建立的方法进行分析,每个肉苁蓉药材(编号为R1、R2 、R3)、肉苁蓉饮片(编号为Y1、Y2 、Y3)样品均重复测定3次,,测定其样品中Sr、Co元素的含量,结果见表5。3 结果分析3.1 本研究采用微波消解ICP-MS 法首次同时测定肉苁蓉药材和肉苁蓉饮片中7种无机元素含量的方法,并将其含量进行对比分析。所建立的方法样品预处理简单,测定结果准确可靠,适用于肉苁蓉及肉苁蓉饮片中无机元素测定及有害元素评估,能够为肉苁蓉的综合质量评价、营养价值评价、制药工艺及科学合理施肥等提供一定参考。3.2 人体正常新陈代谢需要微量元素的参与,其中Zn、Cu、Cr为人体必需矿质元素,Co、Ni、Sr在中药材功效物质形成和疗效发挥方面发挥着重要的作用。本研究发现,肉苁蓉中含有丰富的矿质元素,肉苁蓉药材中Sr>Cu>Ni>Co>Cr>Zn;肉苁蓉饮片:Sr>Zn>Cu>Ni>Co>Cr。Sr 元素在肉苁蓉药材和饮片中含量均较高,尤其是在饮片中,含量达到221.4μg/g,锶元素具有促进成骨细胞的生成,影响神经肌肉的兴奋过程,刺激人体骨骼生长,在骨生成中发挥着重要作用;人体较易缺乏的Zn 微量元素含量次之;钴是动物体内形成维生素B12 的重要组成;Cu、Cr 虽为人体必需矿质元素,但超过安全限度也会蓄积中毒而危害人体健康,肉苁蓉中Cu、Cr含量符合国家相关规定。综合来看,肉苁蓉确为一种矿质元素含量丰富且安全性较好的药品及功能保健食品(原料)。3.3 比较肉苁蓉药材与饮片中无机元素中7 种重金属元素Cr、Co、Ni、Cu、Zn、Sr、Pb平均含量。肉苁蓉药材:Sr>Cu>Ni>Pb>Co>Cr>Zn;肉苁蓉饮片:Sr>Zn>Cu>Pb>Ni>Co>Cr;可见肉苁蓉经过加工处理成饮片,其无机元素含量变化比较大。3.4 从实验结果可看出,肉苁蓉药材中Cu>Pb>Cr,肉苁蓉饮片中Cu>Pb>Cr,其重金属含量的规律具有一致性。2015 年版《中华人民共和国药典》规定中药材重金属元素限量为:Cu≤20.0 μg/g,Pb≤5.0 μg/g,Cr≤2.0 μg/g[14]。依据以上标准,甘肃产肉苁蓉及其饮片样品中各重金属元素及重金属总量均符合规定。此外,肉苁蓉药材加工成饮片后,Cr含量从0.043μg/g 下降至0.012μg/g,Pb 含量从2.173μg/g下降至1.860μg/g,而Cu含量从5.225μg/g下降至7.656μg/g。这表明在中药的加工过程会对原料药中重金属的含量造成影响,有部分重金属含量下降,当时有些重金属含量仍有上升,这为肉苁蓉药材的加工提供一定的数据参考。参考文献[1] 刘鹏,刘华. 肉苁蓉研究进展[J]. 宁夏农林科技,2019,60(11):9-12,56.[2] 成喜雨,郭斌,倪文,等.电感耦合等离子体-原子发射光谱法测定不同产地丹参中微量元素[J]. 北方药学,2020,29(1):51-54.[3] 蔡鹏,常相伟,朱琼. 肉苁蓉研究进展[J]. 天然产物研究与开发,2005,17(2):235-222.[4] 李祥溦,李喆,任晓航,等. 肉苁蓉微型饮片切制工艺优化[J]. 中成药,2019,11(2):459-463.[5] 蔡鹏,常相伟,朱琼. 电感耦合等离子体-原子发射光谱法测定不同产地丹参中微量元素[J]. 北方药学,2020,29(1):51-54.[6] 李春盈,张玉英. 植物类中药材及饮片中18 种重金属及有害元素研究[J]. 分析测试学报,2016,35(12):1634-1638.[7] Jie Ouyang,Xiaodong Wang,Bing Zhao,et al. 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T-2毒素的毒性及其作用机制与代谢研究进展[J]. 湖北农业科学,2015,54(21):5207-5210.[5] GB 5009.118-2016 食品安全国家标准-食品中T-2毒素的测定[S].[6] 谢婷婷. 粮食中伏马毒素胶体金快速定量法研究[J]. 粮食与饲料工业,2019,(9):60-63.[7] 聂聪,侯宝翠,杨宇,等. 胶体金免疫层析法快速定量检测蓖麻毒素[J]. 中国国境卫生检疫杂质,2019,(6):385-387.
  • 中药肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉或德赢vwin登录 干燥带鳞叶的肉质茎,别名大芸,是传统的补肾阳中药,始载于《神农本草经》,具有补肾阳、益精血、润肠通便的功效。主治男子阳痿、女子不孕、血枯便秘等症,有“沙漠人参”之美誉。自20世纪70年代起,国内外学者开始系统研究肉苁蓉属植物的化学成分和药理活性。至今,已从肉苁蓉中分离并鉴定了近百种化学成分及微量元素,其中苯乙醇苷类成分含量最高,是肉苁蓉属植物的主要活性成分之一,也是中国药典“肉苁蓉”项下鉴别和含量测定的指标性成分。经北京大学屠鹏飞团队不懈的深入研究,至今,明确分离鉴定出的苯乙醇苷类成分已近40种。此外,还开发了来源于德赢vwin登录 的苯乙醇总苷,以松果菊苷和毛蕊花糖苷为主要成分。苯乙醇苷类(phenylethanoid glycosides,PHGs)成分是一类由苯乙醇苷元与糖基结合而成的苷类化合物,肉苁蓉中的苯乙醇苷类化合物成分大多具有通式结构(见图1),其构成糖多为葡萄糖和鼠李糖2种;与苷元直接相连的中心糖为葡萄糖;除单糖苷外,中心葡萄糖的3位均连有鼠李糖;三糖苷中第二个葡萄糖常连在中心葡萄糖的6位;在中心葡萄糖的4或6位常与咖啡酰基、阿魏酰基或香豆酰基等苯丙烯酰基成酯。图1  苯乙醇苷类化合物的基本母核许多研究结果表明,苯乙醇苷类成分作用于机体的细胞层面,主要药效作用均通过调节相关细胞机制进行。主要药理作用为抗衰老、抗氧化、细胞保护、调节免疫、补肾壮阳等功效。如苯乙醇苷能通过显著抑制血清、脑超氧化物歧化酶(SOD)活力的降低,降低肝脏、血清MDA,有助于机体发挥抗氧化、抗衰老功效。补肾壮阳主要通过两种途径起作用:其一,增强下丘脑垂体-肾上腺功能,促进体内相关递质和激素的释放,提高性欲;其二,抗疲劳、提高身体机能作用。苯乙醇苷类化合物还具有保护神经细胞和心肌细胞、抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、增强记忆及性机能等作用。苯乙醇苷类成分是肉苁蓉发挥神经保护作用的活性成分。目前,很多学者对肉苁蓉中苯乙醇苷类成分含量控制主要通过紫外分光光度法及高效液相色谱法,主要指标成分为松果菊苷、管花苷A、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷。
  • 肉苁蓉Cistanche Herba又名金笋、地精、苁蓉、大芸,为列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma 或德赢vwin登录 C. tubulosa (Schrenk) Wight的干燥带鳞叶的肉质茎,主产于内蒙古、甘肃、新疆、青海等地;性温、味甘咸,为补肾壮阳、润肠通便之要药,有“沙漠人参”的美誉。自20世纪70年代起,国内外学者开始系统研究肉苁蓉属植物的化学成分和药理活性。至今,已从肉苁蓉属中分离并鉴定了近百种化学成分。为了进一步阐明肉苁蓉的药效物质基础,同时为其生物活性和质量控制研究提供指标化合物,屠鹏飞团队对肉苁蓉属植物进行了较为系统的化学成分研究。研究结果显示,肉苁蓉中主要化学成分为:苯乙醇苷类(Phenyl ethanoid glycosides,PEG)、苯甲醇苷类(benzanoid glycosides)、苯丙烯酰寡糖类、环烯醚萜及其苷类、木脂素及其苷类、挥发性成分、酚苷、单萜苷、生物碱、糖类、糖醇、甾醇等成分。其中苯乙醇苷类化合物(Phenyl ethanoid glycosides,PEG)是肉苁蓉属植物的主要活性成分之一,是一类含有羟基、甲氧基取代苯乙基和羟基、甲氧基取代肉桂酰基的化合物,通常以β-葡萄糖为母核的含有酯键及氧苷键的天然糖苷,广泛存在于双子叶植物中。目前己从肉苁蓉植物中分离得到39个苯乙醇苷类化合物,包括2个单糖苷、23个双糖苷和14个三糖苷。苯乙醇苷类化合物主要由咖啡酸、苯乙醇苷元和糖三部分组成,包括松果菊苷(echinacoside)、毛蕊花糖苷(麦角甾苷(Acteoside))、肉苁蓉苷A~I(cistanosideA~I),海胆苷(Echinacoside)、异麦角甾苷(Isoacteoside)、2-乙酰基麦角甾苷(2’-acetylacteoside)、类叶升麻苷(acteoside)、异类叶升麻苷、2’-乙酰类叶升麻苷、红景天苷(salidroside)等。苯甲醇苷类化学结构与苯乙醇苷类似,其苷元部分为苯甲醇基。苯丙烯酰寡糖类是具有苯丙烯酰结构的苯乙醇苷类成分脱掉苷元后的部分,目前从肉苁蓉属植物中分离得到的该类化合物有6个。该类成分的糖部分由β-D吡喃葡萄糖和a-L 吡喃鼠李糖组成,鼠李糖与葡萄糖之间1→3连接;葡萄糖4位连有咖啡酰基或香豆酰基,6位偶有葡萄糖连接。环烯醚萜及其苷类也是肉苁蓉属植物的主要化学成分,肉苁蓉属植物的环烯醚萜苷具有以下特征:1位连有葡萄糖;5,9位为β-H;4位有些存在羧基;6,7,8或10位常常含有羟基,或失去羟基形成双键或环氧醚键。国内学者运用GC-MS技术和超临界流体萃取技术(SPE)对肉苁蓉的脂溶性及挥发油成分作了大量研究,大致分为3类:C16-C28的直链烷烃;酯类化合物中有3个主要成分是邻苯二甲酸二丁酯、葵二酸二丁酯和邻苯二甲酸二异辛酯;低相对分子质量的含氧、含氮化合物,以丁香酚为主,其次为香草醛和异丁子香酚等。此外还发现有棕榈酸和亚油酸等成分。另外肉苁蓉属植物中还有酚苷、单萜苷、生物碱、糖类、糖醇、甾醇、氨基酸及Mn、Fe、Zn、Sr、Ca等微量元素。

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