第一章 综述        

肉苁蓉自古就被视作强壮、滋补的名贵中药,素有“沙漠人参”之美誉,始载于《神农本草经》,列为上品,具有补肾阳、益精血、润肠通便、延缓衰老的功效,常用于治疗男子阳痿、女子不孕、虚寒泄泻、腰膝冷痛、血枯便秘等症。《中国药典(2015年版)部收载的肉苁蓉为列当科植物荒漠肉苁蓉 Cistanche deserticola YC.Ma和德赢vwin登录 C. tubulosa( Schenk)R. wight的干燥带鳞叶内质茎,由于当前市场流通的肉苁蓉类药材混乱,对肉苁蓉的质量控制大多只关注苯乙醇苷类化合物。为了更好地评价肉苁蓉的质量,保证药材及其产品的疗效,本文对肉苁蓉的化学成分分析和体内成分分析的研究进展一一综述,以期建立更加全面、有效的分析方法,弥补当前质量分析及体内研究的不足。

第一节  中药肉苁蓉化学成分分析研究进展

自然环境以及地域条件直接影响着中药材或者制剂的质量,而中药材或者制剂的质量与临床用药的安全性息息相关,因此,为了提高肉从蓉药材或者制剂的质量控制水平

建立准确、可靠以及快速的测定方法显得尤为重要。近年来,国内外学者在肉苁蓉化学成分分析方面做了大量的工作,也尝试了多种分析方法,包括指纹图谱法、比色法HPLC-DAD、 HPLC-ELSD、LCMS、GCMS、FT-BR、以及2DIR等

1.指纹图谱

指纹图谱法与中药“整体性”观念一致,是鉴别中药真实性和评价其质量一致性的切实可行的质量控制方法,在国际社会上的认可度比较高。

朱乃亮等利用UPLC建立荒溴内苁蓉和德赢vwin登录 药材的指纹图谱,标定了15个共有峰,鉴定其中5个共有峰,表明药典收载的两种肉苁指纹图潜具有显著区别,该方法简便,重现性好,可用于区分荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 药材及药材的质量评价。

朱旭江等运用HPLC建立10批兰州肉苁蓉的指纹图谱,研究兰州肉苁蓉与肉苁蓉的内在质量差异。结果显示,与肉苁蓉相比,兰州肉苁蓉出现许多特征峰的缺失,特别是松果菊苷特征峰的缺失;且兰州肉苁蓉与肉苁蓉对照药材的相似度仅为0.04左右,表明兰州肉苁蓉与正品肉苁蓉存在较大的差异。马志国等叫采用HPLC建立10批沙苁蓉饮片指纹图谱,标定了7个共有峰,相似度评价结果均大于0.92,表明了沙苁蓉指纹图谱具有专属性,能为沙苁蓉饮片的质量控制提供一定的参考。熊元君等采用HPLC色谱图法,以6种苯乙醇苷类化合物为参照,建立了新疆维吾尔自治区9个不同产地德赢vwin登录 的指纹图谱和其分析方法,结果表明该方法稳定、可靠、重现性好,可以用来评价德赢vwin登录 药材的质量谢洁娜等1用 Agilent Zorbax Extend-Cn(150mmx46mm,Spm)色谱柱,以0.095%磷酸水

溶液0.095%磷酸乙腈溶液为流动相线性梯度洗脱,洗脱梯度为0~18min,96%A-4%B18~40min,88%A-12%B;40~65min,85%A-15%B;65~75min,85%A-15%B;

75~90min,80%A20%B;90~100min,80%A20%B;100min,96%A4%B,检测波长330m;体积流量:1mL/min;柱温为30℃。建立16批不同产地荒漠肉苁蓉的HPLC指纹图谱,结果表明不同来源的荒漠肉苁蓉药材内在质量差异较大,该方法可用于评价肉苁蓉药材的质量。屠鹏飞等采用反相高效液相色谱法对国产4种及1变种和25份商品药材肉苁蓉药材所含的苯乙醇苷类成分进行了研究,分析了它们的HPLC图谱,结果这些生药材均含有多种苯乙醇苷,其中荒漠肉苁蓉、盐生肉苁蓉、白花盐苁蓉和德赢vwin登录 所含苯乙醇苷成分相似,而沙苁蓉与其它种差别较大,松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量以盐生肉苁蓉最高,杨瀚春等以毛蕊花糖苷为参照物,采用 Shim-pack VP-ODS色谱柱(150mm×4.6mm,5m),建立22批荒漠肉从蓉的HPLC指纹图谱分析方法,共标定出肉苁蓉药材的共有指纹峰27个。结果表明不同批次的肉苁蓉指纹图谱差异较大,表现在不同批次肉苁蓉药材的色谱峰数目、色谱峰面积都存在明显差异,相似度评价结果表明少量样品的相似度不高。杨建华等固选择 RP-HPLC建立盐生肉苁蓉中苯乙醇苷类成分的指纹图谱,并进行栽培品与野生品、不同生长期、不同药用部位指纹图谱的比较研究标定了19个共有色谱峰,结果发现种植的与野生盐生肉从蓉指纹图谱有很高的相似度化学成分种类与相对含量基本稳定,不同生长期或者不同部位的指纹图谱也有较好的致性,但是特征峰的含量存在明显的差异,这种方法重现性好,可以较好地反映盐生肉从蓉特征成分的内在质量。Sh比较了荒漠肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉、沙苁蓉的HPLC指纹图谱和 SSR (inter-simple sequence repea)基因指纹图谱,结果发现两种指纹图增都能很好的对肉从药材进行区别和质量控制,而且笔者认为由于沙蓉中松果菊苷含量较低,因此,沙苁蓉不能代替荒漠肉苁蓉或者德赢vwin登录 进入药典。 Jiang等

建立 HPLC-DAD-MS方法对来自不同产地的36份内苁蓉药材(包括14份荒漠肉苁蓉、14份德赢vwin登录 、2份盐生肉苁蓉以及6份沙苁蓉)指纹图谱进行分析并对其中18个苯乙醇苷类化合物进行指认。结果显示德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉与荒漠肉苁蓉的相似度最高而沙苁蓉的相似度针低,仅为0.053

2.原子吸收分光光度法

随着人们对中药有效成分的全面认识,无机元素日益受到人们的重视,特别是近几年来,某些不能用传统中医理论解释的中药材功效,已经可以通过微量元素的生理作用得以解释,因此,研究肉苁蓉中微量、宏量元素及其相应的元素标定及规范化检测方法对建立、健全中药肉从蓉质量控制及安全性评价体系都具有重要意义。原子吸收分光光度法因其灵敏度高、精密度高、应用范围广、用样量小,仪器操作简便等优点逐渐成为检测无机元素的主要方法。陈卫军等叫采用湿法直接消解肉苁蓉粉末,并用火焰原子吸收法FAAS)直接测定其中的Pb、Cd和Cu,结果表明新疆3个主产地的肉苁蓉未超出限量范围,临床使用安全性较高。程齐来等采用火焰原子吸收分光光度法和石墨炉法测出荒漠内苁蓉中含有多种人体必需微量元素,这些微量元素含量从高到低的顺序依次

为g、cu、Zn、Pb、S且Mg、Ca、Fe、Zn含量较高,有着重要的生理功能、营养作用和临床诊疗意义,齐誉等利用火焰原子吸收分光光度计测定新疆肉苁蓉中微量元素锰及铜的含量,并对比了干法消化、湿法消化两种样品处理方式,结果表明干法消化、湿法消化法均不影响测定的结果。