王艳芳，赵继军2，海鹏丽＇，薛培凤3，李辉＊，李旻辉”

包头医学院，包头014040；包头医学院第一附属医院，包头014010：内蒙古医科大学药

学院，呼和浩特010110：“内蒙古大芸生物有限公司，包头014010

摘要：本实验通过建立小鼠酒精性肝损伤模型，以肝功能生化指标以及肝脏组织病理学变化为考察指标，研究盐生肉苁蓉总苷对实验性酒精性肝损伤的保护作用。灌胃给予盐生肉苁蓉总苷高剂量（130mg／kg）、中剂量（100mg／kg），低剂量（65mg／kg），并以联苯双酯（150mg／kg）为阳性对照药。结果显示模型组小鼠血清中ALT、AST显著升高：肝脏中SOD 活性降低，MDA含量升高：肝细胞出现脂变情况。盐生肉苁蓉总苷高剂量组能有效改善肝功指标，减轻肝细胞的脂变情况。在此基础上，初步测定盐生肉苁蓉总苷中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量为29.1％。上述实验表明，盐生肉苁蓉总苷对小鼠酒精性肝损伤具有保护作用，同时证实了松果菊苷和毛蕊花糖苷为盐生肉苁蓉总苷的主要活性成分。

关键词：盐生肉苁蓉总苷：高效液相色谱法：毛蕊花糖苷；松果菊苷；酒精性肝损伤

盐生肉苁蓉（Citanche salsa）是列当科（Oroban-chaceae）肉苁蓉属（Cistanche）植物，又名盐生大芸，为多年生草本寄生植物，主要分布于荒漠、沙漠等干燥地带，主要产区在我国新疆和内蒙古0。由于其同科同属药材肉苁蓉（Herba Cistanche）被大量采挖，加之寄生植物繁殖困难，药用资源日趋减少，难以满足市场需求。在我国民间盐生肉苁蓉被用于肉苁蓉的代用品，但其研究报道较少。为进一步明确其药用价值，对盐生肉苁蓉总苷（total glycosides ofCistanche salsa），一类含苯乙醇苷类结构成分的物质进行了药理研究。盐生肉苁蓉总苷对神经具有保护作用日，并能保护羟基（OH·）引发的DNA氧化损伤回。盐生肉苁蓉苯乙醇苷可以显著提高小鼠心、肝、脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性田。以上研究提示盐生肉苁蓉总苷具有抗氧化的作用。

酒精性肝病（alcoholic liver disease，ALD）的发病率在我国呈逐年上升的趋势，酒精已成为继病毒性肝炎后导致肝损害的第二大病因国。对于酒精性肝损伤的治疗，现缺少安全有效的药物。如何利用植物资源开发解酒保肝的药物及保健品受到医药及食品行业的广泛关注，经大量查阅文献发现酒精性肝损伤和氧化应激有关系，而盐生肉苁蓉总苷对酒精性肝损伤的保护作用研究尚属空白，本实验的研究为盐生肉苁蓉总苷开发、利用提供科学依据。

1 材料与仪器

1.1 药品与试剂

盐生肉苁蓉由包头医学院蒙药材鉴定与标准化重点实验室提供：联苯双酯滴丸（浙江万邦药业股份有限公司，批号A02121139）；丙氨酸氨基转移酶（ALT）试剂盒、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）试剂盒、丙二醛（MDA）测试盒、超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号20110422）：56°白酒（北京红星股份有限公司）：其他试剂为国产分析纯。

1.2 动物

昆明种雄性小鼠72只，体重17～22g（内蒙古大学实验动物中心，动物合格证号：scxk（蒙2002-0001))。

1.3 仪器

紫外可见分光光度计［尤尼柯（上海）仪器有限公司，型号UV-2000］：酶标仪（美国贝克曼库尔特，型号 AD340）；高速离心机（杭州艾普仪器设备有限公司，型号TG18-WS）：高效液相色谱仪（赛默飞世尔科技，型号Uhimate 3000）；分析天平（梅特勒一托利多仪器有限公司，型号 AR1530）：超声振荡仪（上海Branson，型号SB3200）；冷冻干燥剂（北京博医康实验仪器有限公司，型号FD-1-50）。

2 方法与结果

2.1 盐生肉苁蓉总苷活性研究

2.1.1 盐生肉苁蓉总苷提取

2.1.1.1 粗提物的提取

称取盐生肉苁蓉粗粉100 g，加70％乙醇600ml．浸泡3h，超声提取30min，过滤，滤渣重复上述步骤2次，合并滤液浓缩回收乙醇至无醇味，收集提取物冷冻干燥，得盐生肉苁蓉粗提浸膏19.46g。

2.1.1.2 纯化过程

将盐生肉苁蓉粗提浸膏10g置于烧杯中，加20ml．水在超声波中溶解，加80mL无水乙醇摇匀静止放置12h，过滤，滤液浓缩回收乙醇至无醇味，冷冻干燥，得盐生肉苁蓉总苷提取物8.408g。

2.1.2 动物的分组与给药

72只小鼠，实验前适应性喂养2d，随机分为6组，每组12只，分别为空白对照组、酒精性肝损伤模型组、阳性对照组（150mg／kg联苯双酯）、盐生肉苁蓉总苷高剂量组（130mg／kg）、盐生肉苁蓉总苷中剂量组（100mg／kg）和盐生肉苁蓉总苷低剂量组（65mg／kg）。各组动物每日灌胃（ig）给药2次，ig容积均为0.2ml．／20g体重。空白对照组和模型组给予等体积的生理盐水。每次给药后2h，除空白对照组外，其余各组按0.4ml／20g体重ig给予56°白酒，连续10d造成急性酒精性肝损伤模型。于造模第9d禁食不禁水，第10d给予56°白酒3h后眼球取血并分离血清，取血后处死小鼠，迅速摘取肝脏，冰冷的生理盐水漂洗，滤纸吸干后称重，取肝脏右叶置于10％甲醛固定液中，其余肝脏置于-20 ℃的冰箱中。

2.1.3 统计学处理

应用SPSS 11.5统计软件处理数据，方差分析，P＜0.05有统计学意义。

2.1.4 盐生肉苁蓉总苷对小鼠急性酒精性肝损伤的体重、肝重和肝脏指数的影响

如表1所示，模型组小鼠的肝重和肝脏指数与空白对照组相比显著升高（P＜0.05），表明肝脏受损。与模型组相比，盐生肉苁蓉总苷高剂量组与阳性对照组小鼠的肝重和肝脏指数显著降低（P＜0.01），盐生肉苁蓉总苷中、低剂量组无显著差异（P>0.05)。 

表1 盐生肉苁蓉总苷对小鼠的体重、肝重影响（x±s，n＝9）

Table 1 The effect of total ghycosides of C salsa on body weight and liver weigha(x±s.n=9)

注：与空白对照组比较。P＜0.05；与模型组比较。”P＜0.05，＊＊P＜0.01

Note:Comgared wih bank cotml,AP <0.05;compand with mdel goup.*P<0.05.**P<0.01 

2.1.5 盐生肉苁蓉总苷对血清AST和ALT的影响

将收取的血液以3.5x10＇r／min离心10 min，制得血清。采用赖氏法，紫外可见分光光度计505nm读数，测定血清中ALT、AST的活性。

如表2所示，模型组小鼠血清中ALT、AST与空白对照组相比显著升高（P＜0.05），说明模型组造模成功。阳性对照组小鼠血清 ALT、AST 与模型组相比均显著降低（P＜0.01）。盐生肉苁蓉总苷高剂量组小鼠血清ALT、AST与模型组相比显著降低（P＜0.01）。盐生肉苁蓉总苷中、低剂量组与模型组比较均无显著性差异（P＞0.05）。

表2 盐生肉苁蓉总苷对血清中ALT、AST的影响（x±s，n＝9）

Table 2 Effects of total ghyoonides of C.salsa on serum aminotansferase activities(i±s,n=9)

注：与空白对照组比较，P＜0.05；与模型组比较，＊P＜0.05．＊＊P＜0.01．

Nate:Camgand wih lank comml, P <O.05;cmpurrd with mdl gmop.P<0.05.**P<o.0r. 

2.1.6 盐生内苁蓉总苷对肝脏中的MDA含量和SOD 活性的影响

取0.3g肝脏组织制备10％和1％匀浆液，将1％肝脏匀浆与3.5x10＇r／min离心10 min取上清液，采用考马斯亮蓝法测定肝匀浆中的蛋白。取1％肝脏匀浆上清液，按SOD测试盒操作，酶标仪450nm处读数。取10％肝脏匀浆上清液，按MDA测定试剂盒操作，分光光度计532 mm测吸光度。(V) 如表3所示，模型组小鼠肝脏中的MDA含量与空白对照组相比显著升高（P＜0.05），SOD活性显著降低（P＜0.05）。阳性对照组小鼠肝脏中的MDA 含量与模型组相比显著降低（P＜0.01），SOD的活性显著增高（P＜0.01）。盐生肉苁蓉总苷高剂量组MDA 含量与模型组相比显著降低（P＜0.01），SOD的活性显著增高（P＜0.01）。盐生肉苁蓉总苷中、低剂量组MDA、SOD与模型组相比均无差异（P>0.05)。

表3 盐生肉苁蓉总苷对肝脏组织中 MDA，SOD 含量的影响（i±s，＃＝9）

Table 3 Effects of total ghycosides of C sabsa on hepatic MDA,SOD levels(±s.n=9)

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组别	剂量	MDA	SOD(U/L)
Gesnagas	Dase(mg/kg)	(mmal/ng pmd)
空白对照 Blank control	-	3.6±0.6	171.8±5.7 上一篇：盐生肉苁蓉化学成分的研究 下一篇：阳气冲天肉苁蓉 CONTACT US 联系方式 公司：win德赢官方 地址：新疆和田洛浦县杭桂路232号 公司网址：www.www.wagawa.com 厂家服务热线：0903-6682528 全国服务热线：400-966-8288 在线商城扫一扫购买 SHORTUCT MENU 快捷导航 网站首页 新闻中心 企业荣誉 公司产品 vwin.com 商城 德赢vwinac米兰伙伴 copyright © 2018-2019 www.www.wagawa.com win德赢官方 All rights reserved    新ICP备15002650号-1     网站技术支持：新疆百疆图网络服务有限公司 map