赵晶晶1，李薇1，2，张丽娟1，安君3，宋新波1

（1.天津中医药大学，天津 300193 ；2.内蒙古曼德拉沙产业开发有限公司，内蒙古 阿拉善盟阿左旗 750300 ；3.天津中一制药有限公司，天津 300193）

摘 要：目的：考察采籽前后荒漠肉苁蓉不同部位中松果菊苷、毛蕊花糖苷含量。方法：采用RP-HPLC法，Kromasil C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇（A）-0.1%甲酸水溶液（B），梯度洗脱：0~37min，26.5%A ；37~40min，26.5%~29.5%A ；40~65min，29.5%A ；检测波长：334nm ；流速：1mL/min ；柱温：35℃。结果：松果菊苷在0.0284~0.6320μg范围内线性关系良好（r =0.9999），平均回收率为101.56%，RSD为1.82%（n =6），毛蕊花糖苷在0.0320~0.7100μg范围内线性关系良好（r =0.9999），平均回收率为98.22%，RSD 为0.97%（n =6）。采籽前随机抽取的7根药材，其头部及根部中松果菊苷、毛蕊花糖苷总量均大于0.30%，符合《中华人民共和国药典》规定，其中2根药材头部两成分总量大于根部；采籽后药材中只有1号根部两成分总量符合《中华人民共和国药典》规定，其余均不符合。结论：采籽后药材中有效成分松果菊苷、毛蕊花糖苷总量明显低于采籽前，药材的头部与根部存在较大差别，但其个体差异较大，未显示一致性。

关键词：荒漠肉苁蓉；RP-HPLC ；松果菊苷；毛蕊花糖苷；含量测定

肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉Cistanchedeserticola Y.C.Ma或德赢vwin登录 Cistanche tubulosa（Schrenk）Wight 干燥带鳞叶肉质茎，具有补肾阳、益精血、润肠通便的作用，用于肾阳不足，精血亏虚，阳痿不孕，腰膝酸软，筋骨无力，肠燥便秘[1]。肉苁蓉始载于《神农本草经》，列为上品[2]，在历代增力中药处方中出现率第一，在抗老防衰类方剂中仅次于人参占第二[3]，有极好的药用价值，素有“沙漠人参”之美称[4]。

20世纪80年代以来，对肉苁蓉药理、药性及化学成分的研究逐渐增多，肉苁蓉得到广泛关注，以肉苁蓉为原料的各种药品、保健品逐渐发展起来。因此对肉苁蓉进行合理全面的质量控制变得尤为重要。苯乙醇苷类是肉苁蓉的主要活性成分，也是肉苁蓉质量控制的主要检测指标，其中以松果菊苷和毛蕊花糖苷为代表[5]。我们以这两种成分为指标，运用RP-HPLC法对肉苁蓉进行了含量测定。

前期工作中，我们发现同一批肉苁蓉中这两种成分的含量差别较大，为了寻找原因，我们首先考虑药材不同部位的影响，传统说法也认为肉苁蓉根部药效好，鉴于此我们把肉苁蓉分为根部和头部两部分进行测定，寻找不同部位的区别。传统说法还认为肉苁蓉采籽后药效明显降低，关于这种观点的报道较少，我们试图寻找这种观点与这两种有效成分含量之间的关系。

1 仪器与试药

岛津LC-2010A高效液相色谱仪；LCsolution色谱工作站；LC-2010 检测器；KQ5200DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AL204型电子天平[梅特勒-拖利多仪器（上海）有限公司]。松果菊苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：111670），毛蕊花糖苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：111530）；甲醇为色谱纯；水为新制重蒸水；甲酸为分析纯；肉苁蓉药材采于内蒙古阿拉善地区，由天津中医药大学张丽娟教授鉴定为肉苁蓉（Cistanche deserticolaY.C.Ma）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

Kromasil C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇（A）-0.1%甲酸水溶液（B），梯度洗脱：0~37min，26.5%A ；37~40min，26.5%~29.5%A ；40~65min，29.5%A ；检测波长：334nm ；流速：1mL/

min ；柱温：35℃。色谱图见图1。

2.2 对照品溶液的制备

分别精密称取0.0065g松果菊苷、0.0100g毛蕊花糖苷于50mL 棕色容量瓶中加50%甲醇制成浓度分别为0.1300mg/mL、0.2000mg/mL的对照品储备液，分别吸取适量制成松果菊苷为0.0316mg/mL、毛蕊花糖苷为0.0355mg/mL的混合标准品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

药材70℃烘干，粉碎，过40目筛。取适量样品粉末，精密称定，置50mL 容量瓶中，加50% 甲醇适量，超声1h，放冷，定容，摇匀，滤过，即为供试品溶液。

2.4 线性关系考察

分别精密吸取2.2项下的混合标准品溶液0.9、5、10、15、20μL 进样，按上述色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，进样量（μg）为横坐标，绘制标准曲线，进行线性回归，松果菊苷回归方程为：Y=1315039.83X-2375.33，r =0.9999， 线性范围：0.0284~0.6320μg ；毛蕊花糖苷回归方程为：Y=1492306.11X-3051.30，r =0.9999，线性范围：0.0320~0.7100μg。

2.5 精密度试验

精密吸取混合标准品溶液10μL，按上述色谱条件连续进样6次，测定峰面积，计算RSD分别为：松果菊苷0.20%，毛蕊花糖苷0.27%，均小于2%，表明仪器精密度良好。

2.6 稳定性试验

取同一供试品溶液，照上述色谱条件，分别于0、2、4、8、12、20h 测定峰面积，RSD值分别为：松果菊苷0.65%，毛蕊花糖苷0.57%，均小于2%，表明两种成分在20h 内稳定。

2.7 重复性试验

平行取6份同一样品，制备供试品溶液，照上述色谱条件，分别测定两成分含量，RSD分别为：松果菊苷1.18%，毛蕊花糖苷0.83%，均小于2%，表明本法重复性良好。

2.8 加样回收率试验

平行取同一样品6份，精密称定，分别精密加入松果菊苷对照品3.35mL，毛蕊花糖苷对照品2.35mL，制备供试品溶液，照上述色谱条件分析，计算回收率。结果松果菊苷平均回收率为101.56%，RSD为1.82%，毛蕊花糖苷平均回收率为98.22%，RSD为0.97%，回收率在95%~105% 之间，RSD小于3%，表明该方法准确度较好，结果见表1。

2.9 样品测定

2.9.1 采籽前不同部位松果菊苷及毛蕊花糖苷的含量测定同一批药材中随机抽取7根完整肉苁蓉，编号，分两部分（上部有明显花序视为头部，余下视为根部），按“2.3”项下方法制备供试品溶液，照上述色谱条件测定，结果见表2。

*指含量较高的部位。头部、根部中松果菊苷及毛蕊花糖苷总量均大于0.30%，符合《中华人民共和国药典》规定，其中1 号、7号两成分总量头部大于根部，其余根部大于头部，没有一致性，由此可见，肉苁蓉个体差异较大，从各个部位中两种成分含量上，没有找到与传统说法“根部药效好”相符合的实验依据。

2.9.2 采籽后不同部位中松果菊苷及毛蕊花糖苷的含量测定

取采籽后不同部位肉苁蓉粉末适量，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，照上述色谱条件测定，结果见表3。

实验结果显示只有1号采籽后根有效成分松果菊苷、毛蕊花糖苷总量符合《中华人民共和国药典》规定，其余均不符合，可见采籽后药材中两成分总量明显降低，支持传统说法“采籽后药效降低”的说

法。

3 讨 论

在流动相的选择上，参照文献比较了甲醇-乙腈-1%醋酸（15 ：10 ：75），流速0.7mL/min 与甲醇-0.1%甲酸梯度洗脱，发现前者松果菊苷分离效果不好，故选择甲醇-0.1%甲酸梯度洗脱作为流动相。实验中采用RP-HPLC法测定了采籽前后肉苁蓉不同部位中松果菊苷及毛蕊花糖苷的含量。采籽前不同部位中，有效成分松果菊苷及毛蕊花糖苷总含量均大于0.30%，符合《中华人民共和国药典》规定，但在不同部位的比较上未显示一致性，没能为传统说法“根部比头部药效好”提供依据；采籽后药材中只有一个样品的两成分总量符合《中华人民共和国药典》规定，其余均不符合，提示采籽后药材的有效成分含量降低，一定程度上支持“采籽后药效降低”的说法，也为//www.wagawa.com肉苁蓉的采集及实际应用提供依据。在测定样品的过程中发现肉苁蓉个体差异较大，影响其有效成分含量的因素较多，除了产地、采收季节等大家熟知的因素外，不同生长阶段、不同部位都会影响其有效成分的含量。不同生长阶段：陈君等研究表明其肉质茎出土后松果菊苷及毛蕊花糖苷含量下降[6] ；不同部位：徐荣等研究表明，其径向不同部位化学组成存在一定差异，特别是皮部芳香类、环烯醚萜类及糖苷类物质均与中部和髓部存在明显不同；而中部除维管束主要成分纤维素、木质素与髓部存在较大差异外，其水提、醇提物均与髓部非常相似，而含量低于髓部[7] ；杨太新等研究表明指标性成分松果菊苷是柽柳光合产物经次生代谢后形成的，寄生柽柳根是柽柳和德赢vwin登录 物质运输通道，随着德赢vwin登录 生长发育，需要柽柳根运输更多光合产物供给德赢vwin登录 植株[8]。肉苁蓉根是否因为是传输松果菊苷的重要部位而含量较高，这有待于进一步研究。由此可见影响肉苁蓉有效成分含量的因素较多且不易控制，给肉苁蓉采集，评价及应用造成较大困难，提示我们要关注肉苁蓉各个方面的信息，以达到合理高效用药的目的。◆

参考文献

[ 1 ] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典（一部）[ S ] . 北京：中国医药科技出版社，2010 ：126.

[ 2 ] 李时珍. 本草纲目[ M ] . 北京：人民卫生出版社，1977 ：727.

[ 3 ] 郑荣，张立国，倪力军. 一种新的肉苁蓉苷类化合物的分离方法[ J ] .天然产物研究与开发，2001，13 ( 4 ) ：55-57.

[ 4 ] 中国科学院中国植物志编辑委员会. 国植物志（第六十九卷）[ M ] . 北京：科学出版社，1990 ：83-89.

[ 5 ] 徐荣，朱维成，陈君等. 栽培与野生肉苁蓉主要有效成分比较研究[ J ] .中国药学杂志，2001，46 ( 12 ) ：903-906.

[ 6 ] 陈君，于晶，徐荣，等. 肉苁蓉生殖生物学初步研究Ⅰ[ J ] .中国中药杂志，2007，32 ( 17 ) ：1729-1732.

[ 7 ] 徐荣，孙素琴，刘友刚，等. 红外光谱对肉苁蓉径向不同部位的分析与评价[ J ] .分析化学研究报道，2009，2 ( 37 ) ：221-226.

[ 8 ] 杨太新，张喜焕，蔡景竹，等. 德赢vwin登录 松果菊苷次生代谢部位研究[ J ] .中国中药杂志，2007，24 ( 32 ) ：2591-2594.