二十世纪80年代以来，科学家们对植物多糖，特别是对中草药中的多糖研究产生了浓厚的兴趣＂，本文对五种中药单味提取物进行研究，表明五种中药均具有显著的免疫增强作用，其有效成分为多糖或糖缀合物（glycoconjugates），包括糖肽、蛋白多糖等5-4。中药可通过影响机体的免疫功能来达到防治疾病的目的。

1 材料

            1.1 动物 昆明健康小鼠，우含各半144只，体重18-23g（由北京肿瘤防治研究所提供）。

            1.2 药物 黄芪 Astragahas memtranaces（Fisd．） Bge.var mangholicus（Bge）产于内蒙古，枸杞 Lycim barhunm L.产于宁夏，蒲公英 Taruzacum mangoliam Hand.-Mazz.产于内蒙古，苦参 Sqphara finesans AL 产于内蒙古，

肉苁蓉

Cistanche deseticob Y.C.Ma产于内蒙古，水煎醇提取，提取物得率分别为：苦参175g／1000g、蒲公英 215g／1000g，黄芪310g／100g，枸杞275g／1000g，

         肉苁蓉235g／1000g（由内蒙古医学院微免教研室提供）。五种药物提取物分别制成400gmL＇的初始浓度，巴氏消毒后备用。为控制制剂的质量，对黄芪、枸杞、蒲公英、苦参、肉苁蓉

         进行了薄层色谱鉴别，用薄层扫描法进行了含量测定。

            1.3 仪器与材料 CS-9301薄层扫描仪（日本岛津公司）：939型薄层制版器（重庆南安贝尔德仪器技术厂）；分析天平（德国赛多利斯BP211D）；硅胶G（青岛海洋化工厂，化学试剂均为分析纯；

         单克隆抗体试剂盒为美国PHARHINGEN 公司产品：刀豆蛋白A和MTT分别购自Sigma公司和Fluka 公司。

2 实验方法

              2.1        T淋巴细胞转化反应 参照唐波等＂介绍的方法，取6～8周龄健康우含各半昆明小鼠，按体重随机分为6组（每组6只，自由取食，饮水），分别给黄芪、枸杞、蒲公英、苦参、肉苁蓉五种中药125／g＊1kgd，

        灌胃给药，正常对照组给与药物等体积的PBS，连续7H，第8d取小鼠脾细胞以0.83％ Tris-NH，CI破坏 RBC，脾细胞浓度调整为5x10°＊mL-＇培养细胞后，采用适量ConA（浓度12.5g／mL）为刺激剂，用甲基

                            H-胸腺嘧啶核苷（H-TdR）掺入法测定对小鼠ConA 诱导的淋巴细胞增殖反应的影响，结果以刺激指数（SI）表示，S1＝实验孔cpm均值／对照孔cpm均值。

              2.2        对小鼠腹腔巨噬细胞生成IL-1的影响 取36只小鼠，分成6组，每组6只，于实验前3d ip 6％巯基乙醇酸钠2ml／只，实验时脱颈处死，ip 8ml．Hank＇s液，按文献［2］在24孔板中无菌制备和培养单层巨噬细胞，

        五种中药单味提取物以无血清的 RPMI-1640液配制成125g＊ml，分别加入单层巨噬细胞1mL／孔，对照组为无血清RPMI-1640液，按文献［2］制备巨噬细胞培养上清，储存于-20℃备用，另取小鼠6只，脱颈处

        死后，无菌制备小鼠胸腺细胞并加入96孔板中，0.1ml／孔，含胸腺细胞1x10个，将含有IL-1的经不同药物作用的培养上清液用培养液作14稀释，分别加入上述培养孔中，每孔504，然后每孔加入Conl 

       使其终浓度为11g＊ml7，另设ConA 对照孔，按文献2］所述的方法测定每孔的放射量，本方法可进行超微量分析，敏感性高，根据11-1的含量对放射量的标准曲线测定IL-1的含量。结果以pg“ml-表示。

              2.3      对小鼠脾淋巴细胞生成IL-2的影响 取6-8周龄健康昆明小鼠108只，分为6组（每组18只雌雄各半，自由取食．饮水）．2-6组分别给黄芪、枸杞、蒲公英、苦参、肉苁蓉五种中药125g＊kg＇f＇，1组为

       对照组，每天给与药物等体积的PBS：给药后的第5.10.15d，分别取上述6组中的每组6只小鼠摘眼球放血，脱颈处死，无菌制备、培养脾细胞收集上清，离心，除菌后，分别作112稀释，按文献［2］

       测定稀释液中小鼠胸腺细胞的放射量，根据IL-2含量对放射量的标准曲线测定IL-2的含量，结果以“ml＇表示。

             2.4       对小鼠脾脏NK细胞活性，T淋巴细胞亚群的影响 取36只昆明小鼠，上述水煎醇提取的中药按400g＊ml-＇-kg-＇灌胃，每日1次，疗程101，取脾研磨经200目过滤后平铺于淋巴分离液上，

                         4000r／min离心20min，吸取中间云雾状细胞即可，T淋巴细胞亚群采用ABC法，用生物素-亲合素-过氧化物酶复合物作为指示剂，组成一新的生物放大系统进一步提高检测的敏感度。

       它是通过生物素标记抗体连接免疫反应系统，同时借助生物素化酶或酶标亲合素引入酶与底物反应系统，NK细胞活性测定采用MTT法，MTT是是细胞线粒体脱氢酶的底物，活细胞特别

       是增殖细胞通过线粒体水解，将MIT分解为兰紫色的甲簪（6muzan）结品而显色，其光密度值能够反应细胞的增殖活性。具体操作均参照试剂盒说明。

             2.5       统计学方法 数据均以x土，表示，采用组间！检验进行统计比较。

3 结果

              3.1 对小鼠T淋巴细胞转化反应的影响 见表1．

              3.2 对小鼠巨噬细胞生成L-1的影响 见表2．

              3.3 对小鼠脾淋巴细胞生成IL-2的影响 见表3．

              3.4 对小鼠脾脏NK细胞活性，T淋巴细胞亚群的影响 见表4．

          T淋巴细胞是机体细胞免疫应答的核心，T细胞受抗原或丝裂原刺激后，从成熟的终末细胞转化为具有分化、增殖能力的免疫活性细胞。表现为T细胞数目增多、活性增强。分泌多种细胞因子，特别是11-2表达，通过自分泌作用自身T淋巴细胞使其克隆扩增和旁分泌作用作用其他的T.B淋巴细胞及NK细胞，提高机体的免疫作用。T细胞表面标志CD3．CD4．CD8表达有利于淋巴细胞识别抗原启动免疫应答。I1-1是由巨噬细胞活化后产生是T淋巴细胞活化的重要细胞因子，NK细胞是体内重要的自然杀伤细胞，特别对肿瘤的杀伤更为重要。本试验证明上述五种中药可激活巨噬细胞产生 IL-1，激活T淋巴细胞产生IL-2，活化NK细胞．使T淋巴细胞增殖及CD3．CD4．CD8表达增高，表明可提高机体的细胞免疫功能。为今后临床应用一步提供参考依据。