摘要: 目的测定分析德赢vwin登录 不同生长时间和部位的松果菊苷、毛蕊花糖苷及半乳糖醇含量。方法高效液相色谱法。结果德赢vwin登录 不同生长时间的松果菊苷和毛蕊花糖苷含量以11 月最高，分别为295． 25 mg·g － 1和48． 25mg·g － 1，两者均表现为11 月＞ 10 月＞ 12 月;半乳糖醇含量12 月最高为36． 71 mg·g － 1，12 月＞ 11 月＞ 10 月。德赢vwin登录 不同部位的松果菊苷和毛蕊花糖苷含量基部＞中部＞顶部，半乳糖醇含量顶部＞中部＞基部。结论德赢vwin登录 不同生长时间和部位的松果菊苷、毛蕊花糖苷和半乳糖醇含量差异显著。

关键词: 德赢vwin登录 ; 有效成分; 生长时间; 部位; 高效液相色谱法

德赢vwin登录 Cistanche tubulosa ( Schrenk) Wight 为列当科肉苁蓉属全寄生草本植物，作为中药肉苁蓉的基源植物载入《中国药典》，具补肾阳、益精血、润肠通便之功效［1］。德赢vwin登录 的主要成分为苯乙醇苷类，关于不同产地德赢vwin登录 化学成分的差异及测定方法多见报道，熊元君等［2］报道了不同产地德赢vwin登录 6种苯乙苷类活性成分的HPLC 指纹图谱，王果平［3］分析指出不同产地德赢vwin登录 中松果菊苷含量差异较大，同一产地栽培和野生品的松果菊苷含量也存在差异，笔者分析了中国柽柳和德赢vwin登录 复合体不同部位的松果菊苷含量［4］，蔡鸿等［5］建立了德赢vwin登录 药材中的松果菊苷、毛蕊花糖苷和半乳糖醇含量的测定方法，并分析了不同栽培地点和同一栽培地点不同批次的成分差异，陈敏等［6］测定分析了德赢vwin登录 野生种和栽培种以及人工种植不同寄主、不同大小药材的松果菊苷和毛蕊花糖苷含量，王长林等［7］分析了栽培德赢vwin登录 不同生长时间、不同部位的松果菊苷含量，郭雄飞等［8］比较了德赢vwin登录 根部和顶部的松果菊苷、毛蕊花糖苷含量的差异，赵奎君等［9］HPLC － ELSD 测定分析了肉苁蓉及德赢vwin登录 中半乳糖醇含量。综上，关于德赢vwin登录 不同生长时间和不同部位的化学成分研究报道较少，本文研究了人工栽培德赢vwin登录 不同生长时间和不同部位的松果菊苷、毛蕊花糖苷及半乳糖醇含量的差异，为明确德赢vwin登录 不同生长时间和不同部位的成分变化，指导德赢vwin登录 药材的适期采收和科学使用提供理论依据。

1 材料

美国AgiLent 1100 系列( G1322A 在线真空脱气机，G1311A四元梯度泵，G1313A 自动进样器，G1316A 柱温箱，G1314A VWD紫外检测器) ; 法国SEDEX 75 型蒸发光散射检测器( ELSD) 。德赢vwin登录 取自河北农业大学标本园寄生于中国柽柳的栽培德赢vwin登录 植株( 河北农业大学——————教授鉴定) 。松果菊苷、毛蕊花糖苷和半乳糖醇对照品均购自中国药品生物制品鉴定所，色谱纯乙腈( 美国，J． T． Baker) ，色谱纯甲醇( 天津市西华特种

试剂厂) ，其他试剂均为分析纯。

2 方法

2． 1 德赢vwin登录 取样与处理不同时间德赢vwin登录 样品的取样和处理: 10、11、12 月每月3 号随机挖去4 株德赢vwin登录 样品，鲜样洗净，切片， 50℃烘干至恒重，干燥样品粉碎后过80 目筛备用，重复3 次。德赢vwin登录 不同部位取样和处理: 12 月挖去的德赢vwin登录 鲜样洗净后，按照长度平均分成3 段( 基部、中部和顶部) ，分别切片，50℃烘干至恒重，干燥样品粉碎后过80 目筛备用，重复3 次。

2． 2 松果菊苷和毛蕊花糖苷含量的测定色谱条件［1］: 色谱柱Agilent Zorbax SB C18( 150 mm × 4． 6 mm，5μm) ; 流动相: 甲醇－0． 1%甲酸梯度洗脱，按甲醇－ 0． 1% 甲酸( 26． 5∶ 73． 5) ，保持17min，3 min 内换成29． 5∶ 70． 5，保持7 min; 体积流量为1． 0 ml /min; 检测波长为330 nm; 柱温35℃。理论塔板数按松果菊苷峰计应不低于3000。松果菊苷和毛蕊花糖苷对照品、样品色谱图

见图1。

对照品及供试品溶液制备: 精密称取松果菊苷和毛蕊花糖苷对照品适量，加50%甲醇制成质量浓度分别为0． 5 mg /ml 的混合溶液，摇匀，即得对照品溶液。精确称取“2． 1”项中德赢vwin登录 样品1． 0 g，置100 ml 棕色量瓶中，精密加入50% 甲醇50 ml，密塞，摇匀，称定质量，浸泡0． 5 h，超声处理40 min，取出，放冷，再称定质量，用50% 甲醇补足减失质量，摇匀，静置，取上清液用0． 45μm微孔滤膜滤过，滤液置棕色样品瓶保存，作为测定松果菊苷和毛蕊花糖苷的供试品溶液。松果菊苷和毛蕊花糖苷的测定: 分别精密吸取松果菊苷和毛蕊花糖苷混合对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，按外标一点法计算质量分数，即得。标准曲线的制作: 分别精密吸取松果菊苷和毛蕊花糖苷对照品溶液，在色谱条件下，分别进样0． 1，0． 5，1． 0，5． 0，10． 0，20． 0μl，测定峰面积。以峰面积积分值为纵坐标( Y) 、进样量( μg) 为横坐标( X) ，得回归方程。松果菊苷: Y = 1201． 527X －11． 437( r = 1． 0000，n = 6) ，线性范围0． 05 ～ 10． 00μg; 毛蕊花糖苷: Y = 1457． 737X － 16． 672( r = 1． 000 0，n = 6) ，线性范围0． 04 ～10． 00μg。

2． 3 半乳糖醇含量的测定色谱条件: 色谱柱PrevailCarbohydrateES 聚合凝胶柱( 250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ; 流动相: 乙腈－ 水( 77∶ 23) ; 体积流量为0． 7 ml /min; 柱温为25℃; 检测器为ELSD: 漂移管温度40℃，气体压力2． 4 bar，检测灵敏度设置为8; 理论塔板数按半乳糖醇峰计算不低于3 000。半乳糖醇对照品、样品色谱图见图2。对照品及供试品溶液制备: 取半乳糖醇对照品适量，加水制成质量浓度为0． 50mg /ml 的溶液，摇匀，即得对照品溶液。取“2． 2”项下供试品溶液5 ml 置25 ml 量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，用0． 2μm 微孔滤膜滤过，作为测定半乳糖醇的供试品溶液。半乳糖醇的测定: 分别精密吸取对照品溶液5、25μl，供试品

溶液5μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，按外标二点法对数方程计算，即得。标准曲线的制作: 取质量分数为0． 50 mg /ml 半乳糖醇对照品溶液，分别进样0． 5，1． 0，2． 0，5． 0， 10． 0， 20． 0μl，按色谱条件测

定峰面积，以峰面积积分值对数( Y) 为纵坐标、半乳糖醇进样量( μg) 对数( X) 为横坐标，得回归方程为Y = 1． 548 8X + 2． 918 4( r= 0． 999 2，n = 6) ，线性范围0． 25 ～ 10． 00 μg。

3 结果

3． 1 德赢vwin登录 不同生长时间的化学成分分析德赢vwin登录 不同生长时间的松果菊苷、毛蕊花糖苷及半乳糖醇含量的差异均达显著水平( 表1 ) 。松果菊苷含量以11 月最高，达295． 25 mg·g － 1 ，其次为10 月含量， 12 月含量最低，仅为176． 70mg·g － 1 ; 其毛蕊花糖苷含量变化与松果菊苷相同，11 月含量最高，为48． 25 mg·g － 1， 10 月含量次之， 12 月含量最低，仅为22． 88mg·g － 1 ; 松果菊苷和毛蕊花糖苷含量的变化均为11 月＞ 10 月＞ 12 月。半乳糖醇含量变化与松果菊苷、毛蕊花糖苷含量变化存在差异， 12 月半乳糖醇含量最高，为36． 71 mg·g － 1 ，11 月含量次之， 10 月含量最低，仅为13． 66 mg·g － 1 ，半乳糖醇含量的变化为12 月＞ 11 月＞ 10 月。可见，年内不同生长时间德赢vwin登录 的有效成分变化存在差异，松果菊苷和毛蕊花糖苷含量以11 月最高，半乳糖醇含量以12 月最高。

3． 2 德赢vwin登录 不同部位的化学成分分析由表2 可见，德赢vwin登录 不同部位的松果菊苷、毛蕊花糖苷及半乳糖醇含量的差异均达显著水平。德赢vwin登录 基部的松果菊苷含量最高，达237． 34mg·g － 1 ，中部含量次之，顶部含量最低，仅为114． 69 mg·g － 1 ;其毛蕊花糖苷含量变化与松果菊苷相同，基部含量最高，为26． 37 mg·g － 1 ，中部含量次之，顶部含量最低，仅为16． 12 mg·g － 1 ; 松果菊苷和毛蕊花糖苷含量的变化均为基部＞ 中部＞ 顶部。

半乳糖醇含量的变化与松果菊苷、毛蕊花糖苷含量变化存在差异，顶部含量最高，为53． 09 mg·g － 1 ，中部含量次之，顶部含量最低，仅为17． 25 mg·g － 1 ，不同部位半乳糖醇含量的变化为顶部＞中部＞ 基部。

4 讨论

德赢vwin登录 是一种全寄生濒危中药材，其自身生长发育所需的碳水化合物全部来源于寄主柽柳的光合产物，其体内有效成分来源于初生代谢产物的次生代谢转化，因此柽柳光合产物的供给和德赢vwin登录 体内的次生代谢水平影响德赢vwin登录 的有效成分含量。本试验结果表明: 随着德赢vwin登录 的寄生生长，不同时间的松果菊苷、毛蕊花糖苷及半乳糖醇含量的差异显著，松果菊苷和毛蕊花糖苷含量的变化均为11 月＞ 10 月＞ 12 月，半乳糖醇含量的变化为12 月＞ 11 月＞ 10 月，试验结果对确定德赢vwin登录 的秋季采收时间具有指导作用。德赢vwin登录 不同有效成分变化的差异性可能与不同时间柽柳光合产物对德赢vwin登录 的供给水平，及不同时间温度变化对德赢vwin登录 体内次生代谢的影响有关。关于德赢vwin登录 不同部位有效成分的差异性，本试验结果表明: 德赢vwin登录 不同部位的松果菊苷、毛蕊花糖苷及半乳糖醇含量的差异显著，松果菊苷和毛蕊花糖苷含量的变化均为基部＞ 中部＞ 顶部，半乳糖醇含量的变化为顶部＞ 中部＞ 基部。不同部位松果菊苷含量的变化趋势与王长林等报道结果一致［7］，不同部位松果菊苷与毛蕊花糖苷含量的变化规律与郭雄飞等报道结果一致［8］。实验结果将为合理科学地使用德赢vwin登录 提供依据，关于德赢vwin登录 不同部位半乳糖醇含量变化与松果菊苷、毛蕊花糖苷含量变化存在较大差异的原因，有待进一步探讨。

参考文献:

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