摘　要　采用各种色谱技术主要为HPLC从国产德赢vwin登录 Cistanche tubulosa ( Schenk) Wigh t 中分离得到7个苯乙醇苷类化合物,根据理化性质和波谱数据鉴定它们的结构为2′-乙酰基类叶升麻苷(Ⅰ )、类叶升麻苷(Ⅱ )、

crenato side(Ⅲ )、丁香苷A 3′-α-L-吡喃鼠李糖苷(Ⅳ )、异类叶升麻苷(Ⅴ )、去咖啡酰基类叶升麻苷(Ⅵ )和红景天苷(Ⅶ )。化合物Ⅲ 为首次从本属植物中分离得到,其它化合物为首次从本植物中分离得到。

关键词　列当科　肉苁蓉属　德赢vwin登录 　苯乙醇苷

中药肉苁蓉为列当科肉苁蓉属植物的干燥带鳞叶的肉质茎,是常用中药之一,具有补肾阳、益精血、润肠通便等功效,常用于治疗男子阳痿、女子不孕、腰膝冷痛、血枯便秘等症[1 ]。我国有肉苁蓉属植物4种1变种,中国药典一九九五年版收载的品种为肉苁蓉Cistanche desert icola Y. C. Ma. , 由于药源紧缺, 本属其它种也在各地使用[2 ]。德赢vwin登录 C.tubulosa ( Schrenk) Wight 主产于我国新疆,资源比较丰富,为目前中花肉苁蓉的主要基源植物[2 ]。在巴基斯坦、印度等国也有一种德赢vwin登录 C. tubulosa( Schrenk ) Hoo k. f. 作为药材使用,但它与国产管药肉苁蓉在形态、化学成分及寄主植物上都有较大区别,被认为是不同的种[ 3, 4]。日本学者对巴基斯坦产的德赢vwin登录 进行了深入研究,分离得到了苯乙醇苷、环烯醚萜苷、木脂素苷等成分[ 5, 6]。国内学者对国产德赢vwin登录 进行了初步的化学成分研究,并对其挥发油成分进行了GC-M S分析[7～ 9 ]。为了阐明国产德赢vwin登录 的化学成分,为中药肉苁蓉新药源的开发利用提供科学依据,我们对其化学成分进行了研究,采用HPLC法, 从95%乙醇提取物的正丁醇萃取部分分离得到了7个苯乙醇苷类化合物,根据理化性质和波谱数据鉴定它们的结构为2′-乙酰基类叶升麻苷( acetylacteoside, Ⅰ )、类叶升麻苷( acteoside,Ⅱ )、crena to side (Ⅲ )、丁香苷A 3′-α-L-吡喃鼠李糖苷( sy ring alide A 3′-α-Lrhamnopyrano side, Ⅳ )、异类叶升麻苷( isoacteoside, Ⅴ )、去咖啡酰基类叶升麻苷

( decaffeo ylacteoside, Ⅵ ) 和红景天苷( rhodioloside,Ⅶ ) (图1)。Ⅲ 为首次从本属植物中分离得到,其它化合物为首次从本植物中分离得到。

1　仪器和试剂

红外光谱仪: Perkin-Elmer 983型, KBr 压片。核磁共振波谱仪: Bruker ARX-400 型、VarianUN ITY-500 型, TM S 或溶媒作内标。质谱仪:KYKY-ZHP-5# 型, Zab SpecE型。高效液相色谱仪:Waters 600 型( 600 泵, 486 紫外/可见检测器) ;Gil son 712型制备型( 306泵, 118 紫外/可见检测器)。HPLC色谱柱: a. Phenomenex Kromasil 5μmC18 10× 250 mm; b. All tech Eco no sil C18 10 μm22 mm× 250 mm; c. Phenomenex Prodig y 5 μm

O DS ( 3) 100• 4. 6 mm× 250 mm。

色谱纯甲醇、乙腈,水为去离子水重蒸后过滤使用。薄层层析硅胶为青岛海洋化工厂产品; 反相硅胶( RP-18, 100～ 120目)为北京欧亚新技术公司产品;Sephadex L H-20为Pharmacia 产品; D101大孔吸附树脂为天津南开大学化工厂产品; Diaion HP20大孔吸附树脂为日本三菱化工产品; 高效薄层板、RP-18F254薄层板均为Merck产品; 聚酰胺薄膜为浙江四青生化材料厂产品。德赢vwin登录 Cistanche tubulosa ( Schenk) R.Wigh t 的干燥肉质茎购于新疆于田县医药公司,经本文作者屠鹏飞教授鉴定,样品保存于本室。

2　提取和分离

德赢vwin登录 生药36. 0 kg,粉碎后用95% EtO H回流提取4次,合并滤液减压浓缩后得乙醇浸膏,再以适量的H2O混悬,依次用P. ether. 、EtO Ac和n-BuOH萃取。取n-BuOH萃取物( 500 g )进行D101大孔吸附树脂柱层析, H2 O、10% , 30% , 50% , 70%EtO H依次洗脱。50% EtO H部分( 10. 0 g )经反相硅胶柱层析( 30%→ 85% MeO H梯度洗脱)、Sephadex LH-20柱层析( 40% → 70% MeO H梯度洗脱)得12 个流份( Fr. 1～ 12) ,其中Fr. 8～ 9( 0. 36 g )经HPLC分离( C18柱b, H2O-MeOH-CH3 CN = 62∶ 29∶ 9, 8. 0m L /min, 330 nm)得化合物Ⅰ ( 21 mg )、Ⅱ ( 39 mg )、Ⅲ ( 13 mg )和Ⅳ ( 28 mg ) ; Fr. 10( 0. 38 g )经HPLC分离( C18柱b, 45% MeO H, 8. 0 m L /min, 330 nm)得化合物Ⅴ ( 170 mg )。

H2 O 部分( 140. 0 g )经Diaion HP20大孔吸附树脂柱层析( H2 O→ MeO H梯度洗脱)得7 个流份( Fr.Ⅰ ～ Ⅶ )。Fr.Ⅳ ( 3. 2 g )经Sephadex LH-20柱层析( H2O→ 30% MeOH梯度洗脱、反相硅胶柱层析〔H2 O→ 50% MeO H(含0. 25% HCOO H)梯度洗脱〕得9个流份,其中流份5 和6( 0. 13 g )经HPLC分离( C18柱a , H2O-MeO H-HCOOH= 85∶ 15∶ 0. 5,2. 5 mL /min, 280 nm)得化合物Ⅵ ( 17 mg )和Ⅶ ( 12mg )。

3　结构鉴定

化合物Ⅰ : 淡黄色粉末, UV365下显蓝色荧光,FeCl3-K3 [Fe( CN) 6 ]显蓝色。IR, 1 HNM R, FABMS数据与文献[5 ]报道的2′-乙酰基类叶升麻苷基本一致,因此确定Ⅰ 为2′-乙酰基类叶升麻苷。化合物Ⅱ : 淡黄色粉末, UV365下显蓝色荧光,FeCl3-K3 [Fe( CN) 6 ]显蓝色。IR, 1 HNM R, FABMS数据与文献[ 5]报道的类叶升麻苷基本一致,因此确定Ⅱ 为类叶升麻苷。化合物Ⅲ : 淡黄色粉末, UV365下显蓝色荧光,FeCl3-K3 [ Fe( CN ) 6 ]显蓝色。IR( KBr) cm- 1: 3 394(羟基) , 2 928, 1 694和1 630(α,β -不饱和酯) , 1 600和1 515(苯环)。1 HNM R( 500 MHz, CD3OD)δ: 1. 16( 3H, d, 6. 5, R-CH3 ) , 4. 03( 1H, dd, 12. 0, 3. 0, A-H-α) , 4. 18( 1H, t , 9. 5, G-H-3) , 4. 59( 1H, d, 8. 0, G-H-1) , 4. 64( 1H, dd, 10. 5, 3. 0, A-H-β ) , 5. 14 ( 1H, t,9. 5, G-H-4) , 5. 21( 1H, d, 1. 5, R-H-1) , 6. 32 ( 1H,d, 16. 0, E-H-α) , 6. 73 ( 1H, dd, 8. 0, 2. 0, A-H-6) ,6. 77 ( 1H, d, 8. 0, A-H-5) , 6. 82 ( 1H, d, 8. 0, E-H-

5) , 6. 87( 1H, d, 2. 0, A-H-2) , 7. 00 ( 1H, dd, 8. 0,2. 0, E-H-6) , 7. 10( 1H, d, 2. 0, E-H-2) , 7. 65( 1H, d,16. 0, E-H-β )。13 CNMR 数据见表1。FABMS( posi t. ) m / z: 663( M+ H)+ , 477( M+ H- Rha )+ ,325 ( M+ H- Rha-Aglyco ne )+ 。分子式为C29 H34O15。以上数据与文献[ 10]报道的crena toside基本一致。这是首次从本属植物中得到苷元β 位O H与Glc2位O H形成醚键的苯乙醇苷类化合物。化合物Ⅳ : 淡黄色粉末, UV365下显蓝色荧光,FeCl3-K3 [ Fe( CN ) 6 ]显蓝色。IR( KBr) cm- 1: 3 434(羟基) , 2 939, 1 692和1 628(α,β -不饱和酯) , 1 609和1 519(苯环)。1 HNM R( 500 MHz, CD3OD)δ: 1. 13( 3H, d, 6. 5, R-CH3 ) , 2. 89 ( 2H, m, A-H-β ) , 3. 75

( 1H, m, A-H-α) , 4. 10( 1H, m, A-H-α) , 4. 42( 1H, d,8. 0, G-H-1) , 4. 96( 1H, t , 9. 0, G-H-4) , 5. 23( 1H, d,1. 5, R-H-1) , 6. 32( 1H, d, 16. 0, E-H-α) , 6. 74( 2H,d, 8. 5, A-H-3, 5) , 6. 82 ( 1H, d, 8. 0, E-H-5) , 7. 00

( 1H, dd, 8. 0, 2. 0, E-H-6) , 7. 09( 1H, d, 2. 0, E-H-2) , 7. 11( 2H, d, 8. 5, A-H-2, 6) , 7. 63( 1H, d, 16. 0,E-H-β )。13 CNMR数据见表1。FABMS( posi t. ) m /631 ( M+ Na )+ , 609 ( M+ H)+ , 471 ( M+ HAg

lycone)+ , 463 ( M+ H- Rha )+ , 325 ( M+ HAglycone- Rha)+ 。分子式为C29 H36 O14。以上数据与文献[ 6]报道的丁香苷A 3′-α-L -吡喃鼠李糖苷基本一致。

化合物Ⅴ : 灰白色粉末, UV365下显蓝色荧光,FeCl3-K3 [Fe( CN) 6 ]显蓝色。IR, 1 HNM R, FABMS数据与文献[5 ]报道的异类叶升麻苷基本一致。化合物Ⅵ : 白色粉末。IR, 1 HNM R, FABMS数据与文献[11 ]报道的去咖啡酰基类叶升麻苷基本一致。

化合物Ⅶ : 白色粉末。IR( KBr) cm- 1: 3 374(羟基) , 2 918, 1 608和1 512 (苯环)。1 HNM R ( 400M Hz, DM SO-d6 )δ: 2. 73( 2H, m, A-H-β ) , 3. 56( 1H,m, A-H-α) , 3. 87( 1H, m, A-H-α) , 4. 16( 1H, d, 7. 8,G-H-1) , 6. 66( 2H, d, 8. 4, A-H-3, 5) , 7. 04( 2H, d,8. 4, A-H-2, 6)。13 CNMR 数据见表1。FABMS( po sit. ) m /z: 339( M+ K)+ , 323( M+ Na )+ , 301( M+ H)+ 。分子式为C14 H20O7。分析以上数据,Ⅶ 符合文献[12 ]报道的红景天苷。

致谢: 防化研究院分析化学研究室及北京大学分析中心代测核磁共振谱,军事医学科学院分析中心代测质谱,本校药学院教学中心代测红外光谱。

参考文献

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