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德赢vwin登录 Cistanche tubulosa（Schenk）Wight 为列当科肉苁蓉属的全寄生植物是目前中药肉苁蓉的基源植物其寄主为防风固沙、耐盐碱的柽柳属植物［12］。近年来肉苁蓉人工栽培有了一定规模的发展栽培技术不断有研究报道［3-7］但是仍存在接种率低的技术问题对肉苁蓉单株生产能力和有效成分含量变化规律研究很少［8］栽培技术也处于模仿野生的初级阶段。作者在对德赢vwin登录 引种、接种技术和寄生环境研究的基础上［9-11］进行了德赢vwin登录 干物质积累和指标性成分松果菊苷含量的研究为明确德赢vwin登录 生长发育和松果菊苷变化规律提供理论依据。
1 材料和方法
1∙1 材料
试验在河北省中国农业大学吴桥实验站进行。德赢vwin登录 寄主为移栽的中国柽柳Tamarix chinensisLour∙由中国农业大学郭玉海教授鉴定3～4年株龄。德赢vwin登录 种子来自新疆于田德赢vwin登录 基地。HP1100高效液相系统（Agilent 1100VWD －G1314A 检测器）测定松果菊苷含量松果菊苷对照品纯度在98％以上。
1∙2 方法
1∙2∙1 德赢vwin登录 干物质积累进程试验 2003年9月初接种德赢vwin登录 11月考察接种情况每株留2株德赢vwin登录 。2004年4～12月每月初调查1次德赢vwin登录 的生长情况随机取样12株德赢vwin登录 重复3次。德赢vwin登录 样品用90℃水烫1min以灭活德赢vwin登录 内部的水解酶晾30min 后放入50℃烘箱中烘至恒重称重计算其平均值。
1∙2∙2 不同接种时间德赢vwin登录 生长试验 应用根管接种方法［9］于2004年4～10月每月初接种1次。接种后2个月考察德赢vwin登录 接种情况将接种成功的德赢vwin登录 从接种管内撤出埋入土壤。7～11月每月考察1次德赢vwin登录 的生长情况随机取样12株重复3次室内称其鲜重干重测定方法与1∙2∙1中相同计算结果取平均值。
1∙2∙3 德赢vwin登录 松果菊苷含量测定 松果菊苷
含量测定方法参照文献［12］。1∙2∙3∙1 色谱条件 色谱柱：Waters Symmetry C18（4∙6mm×250mm5μm）；流动相甲醇-0∙1％甲酸溶液（28∙5∶71∙5）；检测波长331nm流速1mL·min－1。色谱图见图1。
1∙2∙3∙2 对照品溶液制备 精密称取松果菊苷对
照品适量置棕色量瓶中用50％甲醇制成每1mL含0∙2mg 的溶液即得。由对照品的定量图谱得到的标准曲线回归方程Y ＝1185∙6X －8∙5026r＝0∙9999。线性范围0∙0002～0∙01mg·μL－1。1∙2∙3∙3 精密度试验 精密吸取对照品溶液重复进样5次测定峰面积松果菊苷RSD1∙9％。1∙2∙3∙4 重复性试验 取同一批样品5份按供试品溶液制备方法制备供试品测定含量松果菊苷含量的RSD2∙3％。1∙2∙3∙5 回收率试验 取已知含量样品5份分别精密加入相应的对照品溶液按生药分析方法测定。计算松果菊苷的回收率为99∙2％RSD1∙7％。1∙2∙3∙6 供试品溶液制备 将1∙2∙1所述烘干后的德赢vwin登录 样品粉碎过80目筛取1g精密称定置100mL 棕色量瓶中精密加入50％甲醇50mL密塞称重浸泡30min超声处理（功率230W频率35kHz）50min（50℃以下）取出放冷再称重用50％甲醇补足损失的量摇匀过滤滤液再以微孔滤膜（0∙45μm）滤出滤液置棕色量瓶中即得。1∙2∙3∙7 测定法 吸取对照品溶液10μL 与供试品溶液5～10μL注入液相色谱仪测定即得。
2 结果与分析
2∙1 德赢vwin登录 干物质积累进程分析
一年中不同月份德赢vwin登录 干物质积累量差异极显著（F＝5∙8341）干物质积累量变化呈“S”型曲线（表1）。12月至第2年3月干物质积累很少单株平均仅为0∙34g；从4月开始干物质积累逐渐增加7月开始迅速增加单株干物质量平均增加18∙48g占1年干物质积累量的13∙33％。9月干物质积累最多单株干物质增加量平均为54∙25g占全年干物质量的31∙93％；其次为8月和10月单株干物质量分别增加35∙22g 和26∙45g占全年的25∙42％和19∙08％；8～10月3个月干物质积累量占全年的76∙43％。11月份干物质积累量迅速降低仅为5∙75g。生长1年的德赢vwin登录 单株干物重平均可达138∙58g。
2∙2 接种时间对德赢vwin登录 干物质积累量的影响德赢vwin登录 干物质积累量调查表明（表2）：10月接种的德赢vwin登录 冬前未发现接种上的幼株；4月份接种的6月份调查时未发现7月6日调查发现接种上德赢vwin登录 幼株与5月接种的德赢vwin登录 同时撤出接种管。这可能与接种期间温度较低德赢vwin登录 种子萌发和与柽柳根建立寄生关系需要一定的有效积温有关。另由表2可见不同接种时间的德赢vwin登录 年内平均单株鲜重和干重差异显著。随着接种时间的推迟德赢vwin登录 单株干物质积累量显著降低；4月接种的德赢vwin登录 出管时间和5月相同两者鲜重和干重差异不显著；以4月和5月接种的德赢vwin登录 单株干物质积累量较高分别为31∙63g 和30∙80g且显著高于其他月份接种的德赢vwin登录 ；6～9月接种的德赢vwin登录 干物质量差异显著9月接种的单株干物质量最低单株干重平均仅为0∙14g。同一接种时间德赢vwin登录 干物质积累量比较以9月份干物质积累量增加最多这与2∙1分析结果是一致的。2∙3 德赢vwin登录 松果菊苷含量的动态变化华北平原一年生德赢vwin登录 松果菊苷含量呈“单峰”动态变化且不同时间的含量差异极显著（F＝27∙7069）。德赢vwin登录 生长2～5个月时组织正处于分化和发芽阶段植株幼小松果菊苷含量保持较高水平并逐渐升高5个月时（4月份）松果菊苷含量最高为30∙59％之后随着植株的生长松果菊苷含量逐渐降低5～10月份分别为28∙51％27∙58％20∙12％14∙23％11∙28％10∙05％7至9月份降低幅度较大10月、11月降低幅度较小生长1年的含量降为9∙76％。
3 小结与讨论
3∙1 德赢vwin登录 是全寄生植物干物质量全部来源于寄主柽柳。由于柽柳是多年生灌木1年中受季节温度变化的影响年内不同时间表现生长发育的变化不同地区之间也存在差异。因此柽柳生长发育会直接影响到德赢vwin登录 的干物质积累使不同时间德赢vwin登录 的干物质积累量存在差异。本试验结果表明：9月干物质积累最多单株干物质量平均增加54∙25g占全年干物重的31∙93％其次为8月和10月生长12个月的德赢vwin登录 单株干物质积累量可达138∙58g。明确了华北平原一年生德赢vwin登录 干物质积累的动态变化规律为通过人工栽培技术措施促进柽柳光合产物更多的向德赢vwin登录 运输从而提高德赢vwin登录 单株生产力提供了理论依据。关于柽柳和德赢vwin登录 的源库关系有待于深入探讨。
3∙2 松果菊苷含量是德赢vwin登录 的指标性成分随着德赢vwin登录 的生长松果菊苷含量也会发生变化。本试验结果表明：华北平原一年生德赢vwin登录 松果菊苷含量呈“单峰”动态变化生长2～5个月逐渐升高5个月时达到最高为30∙59％之后含量逐渐降低生长1年的德赢vwin登录 松果菊苷含量为9∙76％。这一变化规律与王长林等对新疆于田德赢vwin登录 松果菊苷含量的分析是基本一致的［8］但是华北平原德赢vwin登录 生长6个月时未发现松果菊苷含量显著降低之后又升高的现象且4月时松果菊苷最高含量和生长1年时的松果菊苷含量高于新疆产德赢vwin登录 这可能与两地寄主的生长状况不同供应德赢vwin登录 生长的光合产物强度存在差异以及气候条件的差异有关这一问题有待进一步探讨。
［参考文献］
［1］ 马毓泉∙内蒙古肉苁蓉属订正∙内蒙古大学学报（自然科学版）1977（1）：69∙
［2］ 屠鹏飞何燕萍楼之岑∙肉苁蓉类药源调查与资源保护∙中草药199425（4）：205∙
［3］ 王学先∙肉苁蓉人工栽培技术∙新疆农业科技2002（1）：13∙
［4］ 刘永博杨黎明∙肉苁蓉栽培与管理∙特种经济动植物2001（8）：22∙
［5］ 高 焕冯 启∙肉苁蓉人工种植技术研究∙内蒙古林业科技2001（增刊）：45∙
［6］ 宋加录张玉芹∙肉苁蓉的栽培与采收∙中国野生植物资源199421（2）：59∙
［7］ 徐胜利陈小青∙南疆肉苁蓉人工栽培新技术∙新疆农业科技2000（1）：16∙
［8］ 王长林屠鹏飞郭玉海等∙人工栽培德赢vwin登录 的化学成分分析∙中草药200435（6）：676∙
［9］ 杨太新王华磊郭玉海等∙华北平原德赢vwin登录 引种试验研究∙中国农业大学学报200510（1）：27∙
［10］ 杨太新王华磊郭玉海等∙德赢vwin登录 田间接种技术研究∙中国中药杂志200530（7）：488∙
［11］ 杨太新王华磊郭玉海等∙华北平原德赢vwin登录 寄生环境研究∙中国中药杂志200530（17）：1380∙
［12］ 中国药典∙一部∙2005：90∙
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