摘要: 目的研究济川煎及以不同功效拆方对小鼠肠蠕动的影响。方法按济川煎组方中中药功效拆方为温肾润肠组( 肉苁蓉、牛膝、当归) 、降浊组( 泽泻、枳壳) 及升清组( 升麻) ，考察不同组方对便秘模型小鼠小肠碳末推进、排便实验、大小肠含水量的影响。结果济川煎全方及降浊组与模型组相比，能显著增加模型小鼠炭末推进率( P ＜ 0. 01) ; 济川煎全方及温肾润肠组与模型组相比，能显著增加模型小鼠小肠含水量( P＜ 0. 01) 及大肠含水量( P ＜ 0. 05) ; 济川煎全方明显增加模型小鼠4h 排便粒数及4h 排便重量，与模型组相比( P ＜ 0. 05) 。结论温肾润肠药物能显著增加肠道含水量，降浊药物能显著促进小肠的推进功能，全方能显著促进排便。

关键词: 拆方配伍; 济川煎; 便秘; 小鼠; 实验研究

济川煎出自明·张景岳《景岳全书》，由肉苁蓉、当归、牛膝、泽泻、枳壳、升麻6 味药组成，功效温肾益精、润肠通便，为治肾虚便秘的常用方。现代研究报道，济川煎临床常用于治疗习惯性便秘、老年便秘、产后便秘等属于肾虚精亏肠燥者〔1，2〕，其机制可能为降低肠道生长抑素水平，促进肠道胃动素、P 物质的释放有关〔3〕，且肉苁蓉〔4〕、当归〔5〕和枳壳〔6〕等药物均对胃肠道有一定的调节作用。本研究拟对济川煎进行拆方研究，考察全方及各拆方( 温肾润肠方、降浊方、升清方) 对模型小鼠肠蠕动的影响，探讨该方治疗便秘作用的主次及配伍的规律。

1 实验材料

1. 1 仪器电子分析天平( FA20004 N 型，上海精密科学仪器有限公司) ; 中草药粉碎机( FY135 型，天津市泰斯特仪器有限公司) ; Ｒesearch Plus 可调量程移液器( eppendorf，德国) ;旋转蒸发仪( ＲE-52 型，上海亚荣生化仪器厂) ; 超声波清洗器( KQ-500E 型，昆山市超声仪器有限公司) ; 数显水浴锅( HH-S型，上海锦屏仪表有限公司) 。

1. 2 药品与试剂肉苁蓉( Cistanches Herba) 、牛膝( Achyranthisbidentatae Ｒadix) 、当归( Angelica sinensis Ｒadix) 、泽泻( Alismatis Ｒhizoma) 、枳壳( Auranth Fructus) 、升麻( CimicifugaeＲhizoma) 等药材均购于福建中医药大学国医堂，并经福建中医药大学王河山老师鉴定。药用炭末( 上海久亿化学试剂有限公司，批号: 20080820) ; 阿拉伯树胶( 天津市恒兴化学试剂制造有限公司，批号: 20080710) 。

1. 3 动物KM 种健康小鼠，6～ 8 周龄，雌雄各半，体重20 ±2g，由福建医科大学实验动物中心提供，许可证号: SCXK( 闽)2013-0001。

2 实验方法

2. 1 药物配制

2. 1. 1 济川煎剂量及拆方: ①济川煎全方剂量参考《方剂学》十二五规划教材中的剂量，即肉苁蓉9g、牛膝6g、当归15g、泽泻4. 5g、枳壳3g、升麻3g; ②济川煎可拆成温肾润肠方( 肉苁蓉9g、牛膝6g、当归15g) 、降浊方( 泽泻4. 5g、枳壳3g) 、升清方( 升麻3g) 。

2. 1. 2 不同组方液的制备: 不同组方( 全方、温肾润肠方、降浊方及升清方) 按2. 1. 1 项下剂量称取适量，加6 倍量水浸泡0. 5h 后，煎煮2 次，每次0. 5h，分别过滤，合并上清液，减压浓缩至1g·mL － 1 ，即得4 个不同组方的药液，置冰箱4℃保存备用。

2. 1. 3 活性炭汁的配制: 精密称取药用炭末约10. 0g，加冰水100mL，即得10%的活性炭冰水，将其置于－ 20℃ 冰箱中保存，用前摇匀。精密称取阿拉伯树胶2. 5g，先加一定量不同组方药液煮至溶液透明，再精密称取药用炭末0. 25g，加入上述溶液，并煮沸数次，冷却后加药液定容至25mL，即得含1%的活性碳粉和含10% 的阿拉伯树胶的混悬药液，将其置于－ 4℃冰箱中保存，用前摇匀。

2. 2 模型复制参照文献〔7〕方法复制小鼠阳虚型便秘模型:造模期间小鼠自由饮水、进食，第一天按0. 3mL/只灌胃白醋，第二天起按0. 01mL·g － 1 灌胃白醋，连续9d; 于第七天起同时灌胃10%的0℃活性炭冰水0. 04mL·g － 1 ，灌胃时间间隔4h。2. 3 分组与给药实验设3 批，共210 只小鼠。将每批70只模型小鼠均随机分为7 组( 空白对照组、生理盐水组、阳性对照组、温肾润肠组、降浊组、升清组、济川煎全方组) ，每组10 只，禁食24h 后，各组方组均灌胃给予含10% 的阿拉伯树胶和含1% 的活性碳粉的混悬组方药液，给药体积均为0. 01mL·g － 1 体重，阳性对照组给予同体积的含10% 的阿拉伯树胶和含1%的活性碳粉的麻仁丸混悬液，生理盐水组给予同体积的含10%的阿拉伯树胶和含1%的活性碳粉的混悬液，空白对照组给予同体积的生理盐水。

2. 4 检测指标

2. 4. 1 一般情况观察: 造模及给药期间观察并记录小鼠的活动情况、饮食情况、毛发光泽度和精神状况等。

2. 4. 2 对模型小鼠小肠碳末推进的影响: 给药40min 后颈椎脱臼处死动物，剖开腹腔，暴露肠管，分离肠系膜，剪取幽门至回盲部的肠管，轻轻将其拉成直线，从幽门至回盲部的长度即为小肠总长度( cm) ，从幽门至活性炭末前进的长度即为活性炭末在小肠中推进长度( cm) ，按下式计算小鼠小肠碳末推进率( 见表1) 。

2. 4. 2 对模型小鼠排便实验的影响: 给药1h 后，将各组小鼠分别置于垫有滤纸的烧杯内，并开始计时，观察记录小鼠4h内排便的总粒数，称重( 见表2) 。

2. 4. 3 对模型小鼠大小肠含水量的影响: 给药2h 后颈椎脱臼处死动物，剖开腹腔，暴露肠管，分离肠系膜，剪取幽门至回盲部的肠管，系小肠段; 剪取回盲至直肠末端，系大肠段，分别称其湿重后，置于烘箱内90℃烘2h，称其干重，按下式计算小肠、大肠的含水量( 见表3) 。

2. 5 统计学分析

实验数据采用SPSS 20. 0 统计分析软件，结果以均数±标准差( x ± s) 表示，组间比较采用t 检验，P ＜ 0. 05 表示有显著差异。

3 实验结果

3. 1 一般情况观察模型小鼠体重上升不明显，全身机能低下，活动减少，毛发发黄，无光泽且伴竖毛，大便次数变少，且粪便坚硬、粪粒细小，表明造模成功。给药组小鼠上述情况稍有好转。

3. 2 不同组方对模型小鼠炭末推进率的影响不同组方对模型小鼠炭末推进率影响的实验结果( 见表1) ，由表1 可知，生理盐水组与空白对照组比较，模型小鼠炭末推进率差异显著( P ＜ 0. 05) ，证明模型复制成功; 阳性对照组与生理盐水组比较，炭末推进率显著升高( P ＜ 0. 05) ，表明阳性药可作为对照参考。济川煎全方组及降浊组与生理盐水组比较，炭末推进率极显著升高( P ＜ 0. 01) ，与空白对照组比较，炭末推进率亦显著升高( P ＜ 0. 05) ，而温肾润肠组、升清组与空白对照组比较，炭末推进率略升高，但无统计意义( P ＞ 0. 05) 。结果说明济川煎全方及降浊药物能明显促进模型小鼠的肠推进作用。

3. 3 不同组方对模型小鼠排便情况的影响不同组方对模型小鼠排便情况影响的实验结果( 见表2) ，由表2 可知，济川煎全方组及阳性对照组与生理盐水组比较，4h 内排便总粒数、4h 内排便均量均显著升高( P ＜ 0. 05) ，济川煎全方组与空白对照组比较，4h 内排便总粒数、4h 内排便均量亦显著升高( P ＜ 0. 05) ，说明济川煎全方能促进模型小鼠的排便。

3. 4 不同组方对模型小鼠肠道含水量的影响不同组方对模型小鼠肠道含水量影响的实验结果( 见表3) ，由表3 可知，生理盐水组与空白对照组比较，模型小鼠肠道含水量差异显著( P ＜ 0. 05) ，证明模型复制成功; 阳性对照组与生理盐水组比较，肠道含水量显著升高( P ＜ 0. 05) ，表明阳性药可作为对照参考。济川煎全方组及温肾润肠组与生理盐水组比较，小肠含水量极显著升高( P ＜ 0. 01) ，与空白对照组比较，小肠含水量亦显著升高( P ＜ 0. 05) ，而降浊组、升清组与空白对照组比较，小肠含水量略升高，但无统计意义( P ＞ 0. 05) ; 济川煎全方组与生理盐水组比较，大肠含水量显著升高( P ＜ 0. 05) ，与空白对照组比较，大肠含水量亦显著升高( P ＜ 0. 05) ，而温

肾润肠组与空白对照组比较，大肠含水量略升高( P ＞ 0. 05) 。以上结果均说明济川煎全方及温肾润肠药物能明显增加模型小鼠肠道含水量。

4 讨论

济川煎是温肾益精、润肠通便的代表方，由肉苁蓉、当归、牛膝、泽泻、枳壳、升麻6 味药组成。方中肉苁蓉补肾阳、益精血、润肠通便，当归补血润燥、润肠通便，牛膝补肝肾、强筋骨、且性善下行，三药共奏温肾润肠之功; 枳壳下气宽中、行滞消胀以助通便，泽泻利水渗湿而泄肾浊，妙伍升麻以升清阳，清阳升、浊阴降，相反相成，以助通便之效。诸药合用，既能温肾益精治其本，又可润肠通便治其标。鉴于本方的配伍特点“补中有泻，降中有升”，本研究将该方拆分为温肾润肠药( 肉苁蓉、当归、牛膝) 、降浊药( 泽泻、枳壳) 和升清药( 升麻) ，旨在探讨全方中不同药物对模型小鼠小肠推进率、肠道含水量、排便情况的作用主次及配伍规律，为临床应用及进一步开发研究提供实验依据。

本研究实验结果表明，济川煎全方组及降浊组与空白对照组比较，炭末推进率显著升高( P ＜ 0. 05) ，而温肾润肠组、升清组炭末推进率虽略升高，但无统计意义( P ＞ 0. 05) ，提示降浊药物( 泽泻、枳壳) 在方中的机制可能与促进模型小鼠的肠推进作用相关; 济川煎全方组及温肾润肠组与空白对照组比较，肠道含水量显著升高( P ＜ 0. 05) ，而降浊组、升清组肠道含水量略升高，但无统计意义( P ＞ 0. 05) ，提示温肾润肠药物( 肉苁蓉、当归、牛膝) 在方中的机制可能与增加模型小鼠肠道含水量相关。由此可见，温肾润肠药物与升清降浊药在方中的机制不尽相同，诸药合用，共奏通便之效，也正如排便情况实验结果所示，济川煎全方能显著提高模型小鼠4h 内排便总粒数及排便重量( P ＜ 0. 05) 。中医认为六腑“以通为用”、“以降为顺”，如《素问·五脏别论》曰: “六腑者，传化物而不藏，故实而不能满也。所以然者，水谷入口，则胃实而肠虚，食下，则肠实而胃虚”。若功能失调，升降失职，浊气不降，肠道失润，传导不利，则可见大便不通。本研究从某种意义上佐证了升清阳、降浊阴，以助通便之效，但其深入作用机制有待进一步研究。

参考文献

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