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蒋晓燕 王晓雯 王雪飞 毛新民 李琳琳 堵年生
(新疆医科大学基础部药理学教研室,乌鲁木齐 830054)
摘要 目的 研究内苁蓉总苷(CCs)对Cor射线照射小鼠造血系统损伤的辐射防护作用,探讨其作用机制,方法连续动态观察GC对小鼠经Cor射线照射后d3.d7.d14.d21外周血血红蛋白、白细胞、网织红细胞,骨髓有核细胞数,脾集落数(CFU-S)以及骨髓细胞硚谷胱甘肽过氧化物酶(S-GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量的影响,结果辐射损伤后小鼠外周血白细胞,网织红细胞,骨髓有胞数、CFU-S明显减少,骨髓细胞及脾Se-GSHPx活性降低MDA含量明显增加。GC可促进上述各造血指标的恢复,提高Se-GSH-Px活性,降低MDA含量,结论 GC.对受照小鼠造血系统具有保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关。
关键词 肉苁蓉总普:造血系统 辐射损伤:抗氧化作用
肉苁蓉[Cistanche Salsa(C.A.Mey)G. Berk]具补肾、益精、润燥滑肠之功效。肉苁蓉粗制剂可增强小鼠红细胞SOD活性,显著降低心肌脂褐质含量,提高阳虚动物DNA的合成能力,而肉苁蓉总苷(GCs)具有抗氧化作用3,对核酸有辐射防护作用,但GCs对照射损伤小鼠造血系统的防护作用未见报道,本实验观察GCs对CoY照射损伤小鼠造血功能相关指标及生化指标的影响,并阐明其机制.
1 材料和方法
1.1 药品与试剂 肉苁蓉总苷(glycosides of dis-tanche,GCs)由本院药学系植化教研室堵年生教授提供:黄芪(Astragalus MembranausAM)注射液,上海福达制药有限公司生产;1.1.3.3-四乙氧基丙烷(1.1.3.3-tetracthoxypmpac,TEP),为Sigma产 品:5.5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)[5.5'-dithiorbis(2-mitmbenzoic acid).DTNBL为Fuka产品:考马
斯亮兰(Coomassle Brilliant Blun CBB)G250.为Fh-kka产品:还原型谷胱甘肽,中科院上海生化所东风生化技术公司产品.
1.2 照射条件 Cor射线一次性全身均匀照射,照射剂量率为3.89x10-2Cykg,距离0.80m,损伤组及各给药组小鼠受照剂量为6Gy,受体组小鼠(用于脾集落的观察)受照剂量为8Gy,
1.3 动物 NIH小鼠,体重(20±2)g,早含兼用。由新疆流行病研究所提供,生产证号为医动字第16-001号,随机分为7组。①正常组:生理盐水(NS)20mlkg';②损伤组:给予NS20ml*kg;③CCs组:分别给予CCs62.5.125.250mg*kg; ④阳性对照组:黄芪注射液(生药)65g*kg;以上各组均在照射前7d及照射后持续ig每日1次。⑤受体组:接受照射剂量8Gy,仅作受体使用。
1.4 观察指标及检测方法
正常组、损伤组及各给药组分别于照射后d3.d7.d 14.d 21摘取眼球取血测定Hb含量.WBC计数、网织红细胞计数、并迅速颈椎脱白处死小鼠制备骨髓有核细胞悬液计数骨髓有核细胞及测定CFU-S.
1.4.1 造血功能指标测定 Hb含量测定.WBC计数、网织红细胞计数、骨髓有核细胞数,按常规测定计数:脾集落(mlony forming umirsplen.CFU-S)测 定参见文献,采用外源性脾集落形成法。
1.4.2 生化指标测定 骨髓细胞的冲洗:分别将照射后d3.d 7.d 14.d 21小鼠颈椎脱白法处死,取双侧股骨,用1mlNS通过5/2号针头冲出全部骨髓细胞,反复冲洗干净,匀浆,3000r“min,离心30min取上清液待测,每个测量指标均进行蛋白含量修正。测定Se-CSH-Px活性用DTNB直接法:MDA用TBA显色法;蛋白质定量用CBB-SDS
1.5 统计方法 各项数据均以士s表示,实验数据经方差齐性检验后,采用F检验。
2 结果
正常组分别下降11.84%13.22%(P<0.01);GCs3个剂量组恢复程度与损伤组相比均无差异(P>0.05),而阳性对照组于d14.Hb含量较损伤组增高9.14%(P<0.05)结果提示GCs对受照小鼠Hb下降并无改善作用。
2.2 GCs对受照小鼠外周血网织红细胞计数的影响(见表1)与正常组比较,小鼠照射后d3网织红细胞数下降(P<0.01).后逐渐回升,于d21基本恢复(P>0.05);GCs3个剂量组及黄芪治疗组与损伤组比较,网织红细胞数于照后d7.d14均升高(P<0.01),结果提示GCs对照后损伤小鼠网织红细胞有恢复作用,提示可改善骨髓造血机能。
2.3 GGs对受照小鼠外周血白细胞计数的影响(见表2)与正常组比较,小鼠照射后d3白细胞数明显下降(P<0.01)随后渐回升:GCs3个剂量组及阳性对照组WBC数照后d7.d14均高于损伤组(P<005或0.01),结果说明GCs能促进照后损伤小鼠WBC的恢复。
2.4 GGs对受照小鼠骨髓有核细胞数的影响(见表3)与正常组比较,小鼠照射后d3骨髓有核细胞数(NNBMC)明显降低(P<001),随后渐升高:GCs3个剂量组及黄芪治疗组NNBMC于照后d7,d14天均高于损伤组(P<0.05或0.01),结果提示GCs能促进照后损伤小鼠骨髓造血机能的恢复。
Tb 1 Effed of GC en mtioloye cm(%) in Mod of imatbted me(3.a-10)
Dae Daye after imalatiowd | |||||
roup | /mgkg-" | 3 | 7 | 14 | 21 |
Normal | - | 9.10±1.03 | 9.21±1.22 | 9.32±1.16 | 9.27±1.16 |
Damage | - | 2.36±0.6144 | 2.93±0.904 | 6.06±0.7644 | 8.41±0.85 |
GC. | 62.5 | 2.73±0.95 | 4.58±1.13** | 7.84±1.32** | 8.70±1.33 |
125 | 2.68±0.87 | 4.73±0.79** | 7.61±0.95** | 8.21±1.03 | |
250 | 2.72±0.86 | 4.62±0.90** | 7.74±0.94** | 8.23±0.94 | |
AM | - | 2.51±0.74 | 4.58±1.02** | 7.64±1.03 | 8.46±1.25 |
Ap< 0 05
Tab 2 Effact of CO m WBC cant in bhod d radaad mke1x10*L-±a-10)
Dae | Dayeafer i | malatiod | |||
Group | /mgkg- | 3 | 7 | 14 | 12 |
Normal | - | 7.37±0.70 | 6.98±0.91 | 7.24±0.77 | 7.10±0.83 |
Damage | - | 1.65±0.46 | 2.17±0.784 | 3.87±0.9744 | 6.67±1.35 |
*30 | 62.5 | 2.04±0.48 | 2.96±0.83* | 4.95±0.79** | 7.33±1.29 |
125 | 1.95±0.47 | 3.08±0.61* | 4.66±0.62* | 7.24±1.08 | |
250 | 1.98±0.48 | 2.93±0.61* | 4.75±0.76* | 7.35±1.14 | |
AM | - | 1.96±0.46 | 3.02±0.64* | 4.70±0.68* | 7.14±1.22 |
>.100>/ |
Th 3 Erfet of Ge on the mubr of muckatat bone marw at of trratiatel ace CNNBMCX 10fm±--10)
Group | Dae | Days after i | alationd | ||
/mg*kg- | 3 | 7 | 14 | 21 | |
Normal | - | 11.39±1.01 | 11.36±1.17 | 11.51±1.16 | 11.32±1.21 |
Damage | - | 1.94±0.5744 | 3.53±0.764 | 6.80±1.8244 | 10.23±1.52 |
CC. | 62.5 |
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