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王晓雯 李琳琳 木胡牙提 王雪飞 堵年生
(新疆医学院药理教研室 乌鲁木齐830054)
摘要 目的:研究肉苁蓉总甙(GCS)对小鼠组织的抗氧化作用,方法:采用邻苯三酚自氧化、硫代巴比妥酸(TBA)和荧光法,分别测定小鼠心、肝、脑,肾组织中SOD活性,MDA及脂褐质含量,结果:GCS(125mg/kg250mg/kg)组能显著提高脑,肾组织中SOD活性.250mg/kg时提高心,肝组织中SOD活性,并显著降低各组织MDA及脂褐质含量,结论:结果提示GCS能有效地提高机体组织抗氧化能力.防止组织脂质过氧化损伤。
关键词 肉苁蓉总试 超氧化物歧化酶 丙二醛 脂褐质 抗氧化
肉苁蓉 Cistanche salsa(C.A.Mey.)G. Beck.有补中益气,益精,壮阳之功效,在历代抗老延年古方中出现的机率仅次于人参,近代药理研究,肉苁蓉有增强机体免疫功能”,促进记忆,提高智能,抗衰老等作用。肉苁蓉粗制剂显著降低心肌脂褐质含量,本文主要研究肉苁蓉总甙(GCS)对小鼠心、肝、脑、肾组织的抗氧化作用及脂褐质含量的影响。
1 材料
1.1 药材及试剂 肉苁蓉总甙由新疆医学院药学系植化室提取并鉴定4,邻苯三酚,遵义市第二化工厂生产;硫代巴比妥酸,上海试剂二厂生产;奎宁,上海试剂二厂;1.1.3.3-四乙氧基烷(TEP),考马斯亮蓝均为Sigma公司产品。
1.2 动物 NIH种小鼠,由新疆地方病研究所动物实验中心提供。
2 方法与结果
21 GCS对小鼠组织中SOD活性及MDA含量的影响 选5月龄NIH健康小鼠40只,体重(33.5±2)g,雌雄兼用,依体重均衡随机分成生理盐水对照组(NS)和不同剂量GCS组(62.5,125.250mg"kgd',ig),连续30d; 另设1月龄NIH幼年小鼠10只,体重(15.2±1.5)g,ig同体积NS.每天1次.连续30d.各组于末次给药后1.5h,脱颈椎处死,开胸腹,立即取出心、肝、脑、肾组织.用冷冻NS冲洗.组织
称重,研磨,制备组织匀浆,3000r"min'离心30min.取其上清液备测,采用邻苯三酚自氧化法测定组织SOD活性;用TBA显色法测组织MDA含量;用考马斯亮蓝法测定组织蛋白
结果表明5月龄NS组小鼠心、肝组织中SOD活性明显低于1月龄NS组,各组织MDA含量明显高于1月龄NS组.GCS组与5月龄NS组比较.250mg*kg'时显著提高心,肝组织中SOD活性,接近1月龄组;125.250mg*kg组均降低心,肝组织中MDA含量,接近1月龄组:125.250mg*kg'组显著提高脑、肾组织中SOD活性,并显著降低MDA含量,接近1月龄组(表1).
22 GCS对小鼠组织脂褐质含量的影响 选健康5月龄NIH种小鼠40只,体重(32±1.5)g.雌雄兼用,依体重均衡分成4组,NS对照组和不同剂量GCS组(62.5,125.250mg*kg dg),连续30d,另设1月龄NIH种小鼠10只,体重(15±1.5)g.ig同体积NS,每天1次,连续30d,各组于末次给药后1.5h.脱颈椎处死分别取心、肝、脑、肾组织,用滤纸吸干水分.称取各组织0.2g,按Sohal方法,将组织用氯仿-甲醇(2:1)混合液分次制成8ml匀浆,置40℃水浴温育5min.3000r*min-'离心10min取氯仿层于岛津RF-540型荧光分光光度仪,激发波长351.6nm,发射波长451.1nm,测荧光强度,按硫酸奎宁1"g*ml'的荧光强度为100单位计算每克湿组织的荧光计数单位,以Ug表示。
结果见表2.各组均与5月龄小鼠NS组比较1月龄NS组,肝、脑组织中脂褐质含量明显低于5月龄NS组.GCS 250mg*kg'组明显降低心脏组织中脂褐质含量,125.250mg*kg'时均明显降低肝,肾组织中脂褐质含量,250mg*kg '时降低更明显。
表1 肉苁蓉总试对小鼠心、肝、脑.肾组织中SOD活性及MDA含量的影响
组别 | 心 肝 脑 | 肾 |
mg/kg | SOD MDA SOD MDA SOD MDA | SOD MDA |
NS组 | 7.20±1.52 0.66±0.13 11.98±1.47 0.69±0.09 6.20±1.57 0.40±0.04 | 10.20±0.5 0.48±0.08 |
GCS组 | ||
62.5 | 7.96±1.46 0.63±0.12 12.50±1.54 0.59±0.06 6.39±1.60 0.28±0.07 | 12.24±0.85 0.45±0.13 |
125 | 8.50±1.31 0.50±0.12"13.27±1.60 0.43±0.06"&76±1.66 0.26±0.04 | 12.42±1.02 0.33±0.13 |
250 | 8.94±1.010.48±0.12"13.70±1.33#0.37±0.05 7.88±1.60 0.26±0.06 | 12.30±0.77 0.34±0.112) |
NS组 | 9.85±1.580.42±0.0914.03±1.52 0.46±0.0827.02±1.63 0.28±0.07 | 11.90±0.52 0.33±0.08 |
注:①±:②n=10 ③SOD单位Umg MDA单位mmolmg5月龄 1月龄 与5月龄NS组比较P<0.05P<0.01(下同)
表2 对小鼠心、肝、脑、肾组织脂褐质含量的影响
组别 | 脂褐质 | U/g |
mg/kg 心 | 肝 | 脑 肾 |
NS组 33.8±3.8 | 35.1±5.6 | 42.5±6.6 22.8±2.4 |
GCS组 | ||
62.5 31.5±4.4 | 30.8±6.4 | 33.5±9.122.4±2.3 |
125 33.6±2.6 | 28.7±6.3# | 31.8±6.819.9±2.5 |
250 28.7±5.1# | 29.1±5.1# | 31.3±5.719.4±2.0 |
NS组 31.8±2.7 | 28.2±5.8# | 30.9±8.1221.2±3.0 |
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