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肉苁蓉中多酚类物质提取条件的优化及含量的测定(二)

发布日期:2021-11-18 11:53:00

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2 乙醇含量对肉苁蓉中多酚提取的影响

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3 提取温度对肉苁蓉中多酚提取的影响

Fig.3 Efect of temperature on the estaction of polyphenols from Cistanche


选择合适的料液比能使提取液发挥最大的效用。故本实验选择120130140的料液比进行实验。测定结果见图4,由图可知,当乙醇含量为70%,提取时间为30min,温度为60℃时,料液比为120130140的测定结果差别不大,本着节省原材料的原则,故料液比选择为120时较好。

3.1.4 提取时间的确定

溶解速度的快慢决定着提取时间的大小,为使溶解充分,需确定最佳提取时间,分别以10min20min30min为提取时间进行实验,测定结果见图5.由图可知,当乙醇含量为70%,料液比为120时,温度为60℃时,30mm效果最好,提取时间为30min

3.2 肉苁蓉中水分含量的测定

测定肉苁蓉多酚含量时,需同时测定样品中水分含量,以便计算绝干样中的多酚含量。

1)取一只称量瓶洗干净,烘干备用。

2)称肉苁蓉1.0000g左右于称量瓶内,将不盖盖子,称肉苁蓉和称量瓶的质量,将其放入恒温干燥箱内放置1小时,温度设为105℃

3)取出放入干燥器内冷却至室温后,用同一台天平调零后称量干燥后的质量。

4)水分含量%=m-m后/m肉苁蓉x100

3.3 肉苁蓉中多酚含量的测定

取肉苁蓉供试品溶液1ml25mL的容量瓶中,加2.5mLFolin-酚试剂,再加7.5ml20%的NaCO,混匀,蒸馏水定容至标线,放置2h后进行测定,测定结果见表5

3.3 紫外-可见分光光度法测定肉苁蓉中多酚类物质的方法评价

3.3.1 精密度实验

对紫外-可见分光光度法测定肉苁蓉中多酚类物质进行精密度实验,同一肉苁蓉供试品溶液平行测定6次,测定结果见表6,相对标准偏差为0.4804%,表明该试验方法独立测量结果一致程度较高,随机误差较小。

3.3.2 稳定性实验

对紫外-可见分光光度法测定肉苁蓉中多酚类物质进行稳定性实验,同一肉苁蓉供试品溶液每间隔1h测定1次,重复测4次,测定结果见表7。相对标准偏差为0.9333%,表明该方法仪器的计量特性随时间不变化的能力较好,能够满足实验对稳定性的要求。

3.3.3 加标回收实验

准确量取已知含量的肉苁蓉供试品溶液0.5mL3份,分别加人7号的没食子酸工作液(2.0mgL11mL12mL13mL,加2.5mLFolin-酚试剂,再加 7.5ml20%的Na2CO,混匀,蒸馏水定容至50ml,放置2h后分别进行测定。测定结果见表8.由实验结

4 肉苁蓉中水分含量测定结果

Table 4 Resus of determination of moisture in Cistanche

序号

样品:

样品2

样品3

m初始

20001

1.0015g

1.0005g

m干燥前肉苁蓉和称量瓶

11.2771g

11.5263g

120551g

m干燥后肉苁蓉和称量瓶

11.2239g

11.4726g

120018g

水分含量

5.319%

5.362%

5.327%

平均水分含量%


5.336%


5 多酚含量测定

Table 5 Determination of polyphenols content

序号

样品1

样品2

样品3

A

0.8670

0.8395

0.8510

浓度(mg/L)

1.980

1.899

1.933

质量百分比(%)

0.2475

0.2374

0.2416

平均质量百分比(%)


0.2422


6精密度测定结果

Table 6 Result of precision esperiment

序号

1

2

3

4

S

6

A

0.8540

0.8478

0.8480

0.8479

0.8466

0.8448

浓度(mg/L)

1.942

1924

1.924

1.924

1.920

1915

质量百分比(%)

0.2428

0.2405

0.2405

0.2405

.2400

0.2394

RSD%



0.4

804



 

7 稳定性测定结果

Table 7 Resul of sability experiment

时间

1h

2h

3h

4h

A

0.8420

0.8435

0.8430

0.8545

浓度(mg/L)

1.906

1.911

1.909

1.944

质量百分比(%)

0.2382

0.2389

0.2386

0.2430

RSD%



0.9333


8 加标回收试验结果

Table & Reuls of recovery experiment

样品

1

2

3

已知含量(ug)

247.5

252.2

244.6

加入量(g)

220.0

240.0

260.0

测定值

466.5

488.5

506.8

回收率院

99.54

98.46

100.8

平均回收率/%


99.65%


 

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