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1.3 已鉴定成分
从20世纪70年代开始,国内外学者对中药肉苁蓉的化学成分进行了大量研究,其中荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 的研究较为深入和系统,其他品种亦有研究报道“。至今,从肉苁蓉中明确分离鉴定出苯乙醇苷类成分已近40种。
北京大学屠鹏飞课题组在这方面做了大量工作,并在2003年雷丽等总结报道国内外学者已从肉苁蓉属植物中分离得到了22个苯乙醇苷类成分,包括1个单糖苷,14个双糖苷和7个三糖苷。2008年姜勇等5叫进行了进一步系统介绍,总结发现从肉苁蓉属植物中共分离鉴定出苯乙醇苷类化合物30多种,其中肉苁蓉12种,德赢vwin登录 19种,盐生肉苁蓉10种,沙苁蓉13种。此外,还开发了来源于德赢vwin登录 的苯乙醇总苷,以松果菊苷和毛蕊花糖苷为主要成分,其苯乙醇苷含量>90%,松果菊苷含量>40%。
宋海龙等还报道从国产德赢vwin登录 中分离得到19个苯乙醇苷类化合物。后来,又有4个苯乙醇苷类成分从肉苁蓉中被分离鉴定出来,分别是 kankanosidesJ1、2、K1和K2。
2 提取分离工艺
苯醇苷类化合物多为无定形粉末,具有良好的水溶性和湿性,易溶于甲醇,可溶于丙酮,性质较为稳定。目前已有研究报道的提取分离方法包括乙醇回流提取、大孔树脂吸附法、多种有机溶剂萃取法、微波萃取法、超声萃取法、絮凝水提法,其中以大孔树脂吸附法的应用研究最广泛,报道最多。
2.1 乙醇回流法
孟庆艳等四用多指标综合评分正交设计法筛选德赢vwin登录 中苯乙醇苷的乙醇回流提取工艺,得到的最佳提取工艺为:采用20倍量的40%乙醇,提取1次,2h,提取液减压浓缩至无乙醇味,浓缩液于60℃干燥,得德赢vwin登录 的苯乙醇苷类粗品。
吴海虹等四对盐生肉苁蓉中苯乙醇苷乙醇回流提取工艺的各因素进行考察,发现反应温度为40~70℃,对苯乙醇苷类化合物的提取无明显影响。但提取温度在超过70℃时,随着反应温度升高,提取液中苯乙醇苷类化合物浓度明最降低,建议提取温度以70℃为宜。
2.2 大孔树脂吸附法
大孔吸附树脂具有选择性强,吸附容量大,再生简单,吸附迅速,解吸容易等多重优点,近年来在中药有效成分的分离方面倍受青睐,在肉苁蓉的苯乙醇苷类成分分离中被广泛应用,并且已经产业化。任璐等門根据肉苁蓉中苯乙醇苷类活性成分的极性特点,对D290、D3520、NKA、AB-8、D-100、NKA-II、S-8等7种大孔树脂进行吸附性能比较研究,发现AB-8对苯乙醇苷类成分的吸附量较大。
陈新萍等通过对比8种树脂的吸附和解析性能,选择适于分离松果菊苷和毛蕊花糖苷的吸附剂,并从吸附率、解析率、吸附时间、酸度的控制、再生性等多个方面进行比较研究,为工业化生产提供重要参考依据。
2.3 有机溶剂萃取分离法
张凯叫选用乙醇对肉苁蓉进行粗提,然后依次用乙酸乙酯、正丁醇分别萃取,得到较高浓度的苯乙醇苷类化物,并对乙醇提取工序各因素影响进行考察,结果发现各因素的影响顺序为:提取时间>粉碎度>乙醇用量>乙醇浓度,得到了最佳提取工艺条件。
2.4 絮凝水提法
王英姿等以松果菊苷、β-谷甾醇、总糖及干浸膏得率为指标,在药材粒度、药材量、滤过、浓缩等条件相同的前提下,对超声提取法(USE)、絮凝水提法(WFE)、醇提法(AE)3种方法进行比较研究,实验结果表明,累凝水提法优于其他2种方法,为肉苁蓉苯乙醇苷类化合物提供了又一较佳提取分离工艺。
2.5 其他提取法
早期,肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物常采用硅胶或葡聚糖凝胶柱层析进行单体化合物的分离和制备。但由于这类化合物分子中含有酚羟基基团,极易吸附在固体色谱柱上,所以采用柱层析分离制备这一类化合物收率较低,且需消耗大量的有机溶剂門。雷丽等用高速逆流色谱技术提取德赢vwin登录 中的苯乙醇苷类化合物,并作了分离鉴定,为苯乙醇苷类化合物的分离提供了一种简单、快速的方法。
3 药理作用
目前,国内外很多学者对肉苁蓉中苯乙醇苷类成分的药理活性进行了大量研究,主要集中在苯乙醇总苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷,其他成分的药理活性报道较少。研究发现肉苁蓉中的苯乙醇苷类成分有提高记忆力、抗衰老、免疫调节作用、抗中脑神经细胞调亡、心肌缺血保护、改善性功能多种药理活性。
3.1 抗衰老作用
肉苁蓉总苷灌胃能明显提高D-半乳糖所致的亚急性衰老小鼠超氧化物歧化酶(SOD)的活性,显著降低脑、肝中的脂质过氧化物含量,显示较强的抗氧化作用及抗衰老作用严。
匡荣等門利用H202损伤的PC12细胞模型研究松果菊苷对H202损伤的PC12细胞的存活、凋亡、坏死和乳酸脱氢酶(LDH)渗漏的保护作用,并从细胞凋亡通路之一线粒体通路角度研究其作用机制,为松果菊苷开发利用于防治阿尔茨海默病(AD)等神经退行性疾病提供了重要的理论依据。
3.2 提高记忆力
研究表明,该类成分不但对失忆模型小鼠及对正常小鼠均具有改善学习记忆的功能。朴景华等叫研究发现毛蕊花糖苷能拮抗东莨若碱所引起的大脑皮层乙酰胆碱酯酶的增高及皮层、纹状体M受体最大结合力降低,能改善东莨菪碱所致的记忆力障碍。
胡余明等四使用水迷宫实验、跳台法、避暗法观察了苁蓉总普对正常小鼠学习记忆功能的影响。实验结果均显示苁蓉总苷可以明显降低其水迷宫实验到达终点的时间,2 min内到终点的动物数是著增多;可以使跳台的潜伏期明显延长,5min内的错误次数明显减少。显示苁蓉总苷可以提高正常小鼠的学习记忆功能,为其开发成为用于健康人群的辅助改善记忆力的新资源提供依据。
3.3 免疫调节作用
肉苁蓉总普给小鼠灌胃能增强受60CO-Y 照射的迟发型超敏反应,增加胸腺指数,增加T淋巴细胞增殖反应和提高白介素2(IL-2)的活性P。口服给药能显著增加小鼠血中巨噬细胞的能力及免疫器官的重量,显示肉苁蓉总苷类化合物具有促进免疫调节作用”。
3.4 改善性功能
肉苁蓉是传统的补肾壮阳中药,毛蕊花糖苷、多糖和甜菜碱是肉苁蓉产生雄激素样作用的主要活性成分之一。
一项功能测试表明,德赢vwin登录 中的麦角甾苷(即毛蕊花糖苷)能缩短去势大鼠阴茎勃起潜伏期、增加去势大鼠包皮腺、精囊腺等副性器官的重量和指数,并增加正常大鼠性器官重量和副性器官指数,显示雄性激素样作用,从而产生改善性功能作用叫。国内学者对肉苁蓉补肾阳药理作用进行研究,结果表明2种肉苁蓉(肉苁蓉及德赢vwin登录 )的水提液,均能让氢化可的松引起的肾阳虚模型小鼠耐寒时间明显延长,补肾阳作用显著,并提示已被证明产生补肾壮阳的成分包含多糖和甜菜碱等叫。
3.5 心肌缺血保护
实验研究发现,对大鼠静脉注射给药肉苁蓉总苷后5min再结扎冠脉,与未给药组相比,肉苁蓉总苷可明显改善缺血心电图,减小心肌梗死面积,提高心肌组织中肌酸磷酸激酶(CPK)的活力,显示出保护缺血心肌的作用。王晓雯2.到等研究表明,肉苁蓉总苷可清除体外自由基,产生抗氧化作用从而具有心肌保护作用。
3.6 中枢神经系统保护
蒲小平等研究发现,德赢vwin登录 的苯乙醇苷类成分通过抑制半胱氨酸门冬氨酸特异蛋白酶-3(caspase-3)的活性,具有抗中脑神经细胞凋亡的作用。肉苁蓉总苷灌胃可明显缩小局灶性脑缺血大鼠小脑梗死范围,升高脑组织SOD和谷胱甘过氧化物酶(GSH-Px)的活性,显著降低丙二醛(MDA)含量,具有神经保护作用39。
3.7 其他
实验研究表明,毛蕊花糖苷对氯仿引起的肝损伤有显著的保护作用。此外,国内学者总结松果菊苷具有神经保护、防止肝损伤、抗炎、抗肿瘤、抗衰老、影响免疫调节、改善记忆力等多种药理作用四。
4 结语
肉苁蓉是我国传统的名贵中药,在历代补肾阳处方中使用频度最高,也是目前珍贵的野生资源,已被我国列为二级保护物种,并被收入《国际野生植物保护名录》。目前已在我国新疆和内蒙古等地区成功大面积人工种植。其中主要成分苯乙醇总苷已被证实并开发应用于治疗老年痴呆等多种方面。随着科学技术的不断发展和研究的不断深入,苯乙醇苷及其单个成分的新的药理活性也将逐渐被发现,并将为肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物的中药现代化研究和开发奠定坚实基础。
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