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荒漠肉苁蓉(Cistanche deserticola Y.C.Ma)为传统的补肾助阳中药,简称肉苁蓉,具有增力、补肾壮阳、益精血等传统疗效,用于阳痿,不孕,腰膝酸软,筋骨无力,肠燥便秘等症状。化学研究进展表明其主要成分苯苷类、木脂素及其苷类、环烯醚萜及其苷类、生物碱、多糖等;其中苯乙醇苷类主要针对抗疲劳、抗衰老、抗氧化、抗心肌缺血、保肝等疗效,多糖则主要应用于免疫功能;而从目前国内外研究现状来看,肉苁蓉增力作用的有效成分及其相互作用关系尚未明确,故本文针对肉苁蓉增力作用,对其主要有效成分苯乙醇苷类和多糖进行化学分析,以抗氧化、抗疲劳药效学试验初步研究两者的相互作用关系,初步阐述肉苁蓉增力有效成分及其相互作用关系。
1 文献综述
对有关肉苁蓉的文献报道作出系统性梳理,对苯乙醇苷类与多糖类化学成分与药理研究进展进行总结,为论文实验设计提供研究背景。
2 苯乙醇苷类与多糖类定性分析
收集不同产地肉苁蓉,制备70%醇提物(主要含苯乙醇苷类)与多糖类成分。通过定性分析苯乙醇苷类含量发现,肉苁蓉中所含苯乙醇苷类主要以松果菊苷与毛蕊花糖苷为主,且秋季采收含量普遍高于春季;野生方式生长则更有利于苯乙醇苷类的积累。多糖检测表明,不同产地肉苁蓉中多糖分子量分布也呈现出较大差异:16种产地肉苁蓉多糖水解后,葡萄糖在所测7种单糖中所占比例达到50%以上,其次为半乳糖和阿拉伯糖。
3 苯乙醇苷类与多糖抗氧化活性及相互作用分析
体外清除自由基试验中,苯乙醇总苷ICso为14.39 μg*mL,70%醇提物为44.57μg*mL,多糖为261.3μg*mL;纯化后苯乙醇苷类成分抗氧化活性提高约2倍,根据isobologram 分析方法,以单一化合物1Cso为基础,结果表明苯乙醇苷类和多糖是以协同作用发挥抗氧化药效;含量测定中,肉苁蓉70%醇提物通过纯化分析获得苯乙醇总苷,以松果菊苷与毛蕊花糖苷计算,含量由1.9%提高至17%,苯酚硫酸法测得多糖含量为86.87%。
肉苁蓉70%醇提物指纹图谱,体外抗氧化(清除DPPH)药效指标,运用偏最小二乘分析法、相关性分析、灰关联度综合分析肉苁蓉中抗氧化活性成分,结果表明,指纹图谱共匹配17个共有色谱峰,论文成功鉴定其中12个化学成分,即松果菊苷、毛蕊花糖苷及其异构体、肉苁蓉苷A及其异构体、肉苁蓉苷F、cistantubuloside C1/C2、管花苷A、syringalide A-3-a-L-rhamnopyranoside(kankanoside G)、2'-acetylacteoside、kankanoside F、 kankanose。在对共有特征峰进行归属时,首次在荒漠肉苁蓉中发现 salsaside C1/C2、kankanoside F、kankanoside G、kankanose4种化学成分,7种未知结构化合物,为肉苁蓉化学成分的挖掘提供数据基础。
5 苯乙醇苷类与多糖抗疲劳及相互作用分析
肉苁蓉增力作用也与其抗疲劳作用密切相关。前期摸索发现,肉苁蓉(生药)在1、2、4gKg'剂量下均能显著延长小鼠力竭游泳时间,在最优剂量2g·Kg'下,将苯乙醇苷类与多糖单独给药、合并给药,探索苯乙醇苷类与多糖对疲劳状态的影响及其相互作用关系。结果表明,与对照组相比,单独给予苯乙醇苷类能够显著增加小鼠体内肝糖元含量,延长力竭游泳时间(P<0.01);单独给予多糖能够显著降低血乳酸水平(P<0.01);而在清除尿素含量一项,苯乙醇苷类与多糖单独给药、合并给药均未显示出显著性降低;综上所述,肉苁蓉在发挥抗疲劳作用时,其有效成分苯乙醇苷类和多糖是通过不同途径及作用方式发挥药效。
关键词:荒漠肉苁蓉;苯乙醇苷:多糖;谱效:相互作用;抗疲劳;抗氧化;
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