前言

现代药理研究表明，肉苁蓉中具有抗氧化、抗疲劳、抗衰老、保肝等多种药效；其中有效成分为苯乙醇苷类与多糖，但目前国内外关于苯乙醇苷类与多糖相互作用研究较少，故本文以体外抗氧化和抗疲劳药效学试验分析探讨肉苁蓉有效成分的相互作用关系。

收集不同产地肉苁蓉，首次综合分析肉苁蓉中苯乙醇苷类与多糖，从化学分析角度比较肉苁蓉品质；对肉苁蓉70％醇提物，苯乙醇总苷、多糖进行含量测定，以清除DPPH水平评价上述3者抗氧化能力；以isobologram 分析法研究苯乙醇苷类与多糖抗氧化相互作用方式；文章还将建立不同产地苯乙醇苷类指纹图谱，以Iso（清除 DPPH 能力）为药效指标，运用数理统计学（相关分析、灰关联度分析、偏最小二乘分析）对肉苁蓉抗氧化活性进行谱一效分析，最后通过 UPLC-Q-TOF／MS对肉苁蓉化学成分进行归属，发掘抗氧化活性成分。

选取高品质肉苁蓉作为抗疲劳药效学试验用药，将苯乙醇苷类、多糖单独给药与合并给药，测定不同给药组下对小鼠抗疲劳作用的影响，从而探索苯乙醇苷类与多糖潜在的相互作用，推测有效成分发挥抗疲劳机制的途径。

第一章 文献综述

本章综述将对肉苁蓉2大有效成分，苯乙醇苷类及多糖化学分析、药理活性方面进行综合叙述，为试验设计提供基本思路与数据参考；重点对肉苁蓉抗疲劳作用的研究进展、分子机制详细叙述：为文章谱效关系的分析，抗氧化、抗疲劳药效学试验的设计提供可借鉴方法。

第一节 肉苁蓉属化学成分及药理活性研究进展

目前药理研究表明，肉苁蓉种主要有效成分为苯乙醇苷类与多糖，现主要对这2种成分的研究进展进行讨论。

1 苯乙醇苷类研究进展

1.1 苯乙醇苷类化学成分

查阅近10年文献，Yong Jiang etal对肉苁蓉属化学成分进行综述，包括荒漠肉苁蓉、盐生肉苁蓉、德赢vwin登录 等5个种，其中统计苯乙醇苷类化合物达到34种，环烯醚萜类化合物有17种，木质素类有6种，苯甲醇等其他类化合物共有9种。

卢克刚等首次从荒漠肉苁蓉中分离得到次黄嘌呤核苷（inosine），2＇-脱氧腺苷（2＇-deoxyadenosine），2-甲氧腺苷（2＇-O-methyl-adenosine）；刘晓明等3首次从荒漠肉苁蓉种分离得到 plantainoside C、osmanthuside B。（Z／E）、芒柄花苷（ononin）、管花苷E（tubuloside E）、盐生肉苁蓉苷D（salsaside D）、盐生肉苁蓉苷E（salsasideE）6种化合物，其中前3种为首次从本属中分离得到。南泽东等人在肉苁蓉醇提物中分离出10余种化合物，之后其团队又继续发现一种新的化合物 cistadesertoside A。

在最新的肉苁蓉属化学成分文献综述中，丁燕等5人统计的苯苷类化合物达到64种，环烯醚萜及其苷类化合物有25种，1个木质素苷元及12个木质素苷。同年，MavisBoakye-Yiadom 等16人从荒漠肉苁蓉种分离出一种新的化合物 kankanoside D1，从苯乙醇苷化学成分的发现来看，从2009至今，新增化学成分27种，使得肉苁蓉中一个又一个有价值的活性成分被挖掘利用。

1.2 苯乙醇苷药理研究进展

在Lin-lin Wang7最新的文献综述中，概括了苯乙醇苷类化合物的药理研究进展，包括抗氧化能力，提高记忆与神经保护作用，保护脑细胞和抗凋亡作用，抗肿瘤活性，保肝作用，拟雌激素作用（植物雌激素），治疗骨质疏松症和骨折愈合，免疫调节作用，抗辐射，抗炎，治疗高原疾病，降血糖等其他作用。Hoi Shan Wong et al8建立高脂肪进食小鼠模型以验证肉苁蓉（Cd）的减肥效果及线粒体解偶联机制是否与其相关；结果表明通过肉苁蓉醇提纯化物喂养的模型小鼠体重显著降低，特别是在骨骼肌中通过线粒体解偶联的诱导。同时体重减轻也与改善胰岛素敏感有关。陶艺存等对高原肺水肿大鼠预防给与肉苁蓉（Ct）苯乙醇苷药物后，降低肺组织含水量，改善病理现象，同时测定的抗炎、抗氧化相关指标呈现阳性变化，由此推测肉苁蓉苯乙醇苷改善高原性肺水肿可能与抗炎、抗氧化机制相关。

Elaine Wat et allo采用肉苁蓉水提物培养L6大鼠骨骼肌细胞，通过分析MTT染色后膜联蛋白VFITC／PI变化与胱天蛋白酶-3活性，探讨其是否对辛伐他丁诱导引起的细胞凋亡具有保护作用，同时检测ATP的产量变化；结果表明肉苁蓉水提物可能通过胱天蛋白酶-3信号通道改善（呈剂量依赖性）由辛伐他丁引起的肌肉毒性副作用，同时会导致ATP含量降低。

Qian Yu et all研究了肉苁蓉（Cd）苯乙醇的心肌保护作用及相应信号通路；结果显示用PhG-RE治疗后，心脏梗塞面积显著减少；CK-MB和LDH活性降低，同时降低MDA水平，升高GSH-Px，SOD活性；细胞色素C的表达在治疗组明显降低，同时在治疗组观察到抗凋亡蛋白Bcl-2／Bax上调与裂解的半胱天冬酶-3下调；PhG-RE可以降低再灌注心肌的氧化应激，对抑制凋亡途径起重要作用，进行心脏保护。

Wei-Yong Lin et al2）给予果蝇德赢vwin登录 水提物粉末制剂进行氧化应激、饥饿、迷宫认知等试验，通过定量RT-PCR的靶基因转录水平推测相关信号通路，结果显示Notch信号通路、Nmdarl and Nmdar2（N-甲基-D-天冬氨酸受体）为德赢vwin登录 改善记忆潜在的作用机制：由Silent information regulator（沉默信息调节器）调整的 forkhead boxtranscription factor（叉头框转录因子）可能为延长寿命的作用通路，同时结果显示抗氧化机制也与延长生命相关；另一种关键的抗衰老途径由mTOR的复合物（mTORC1 and