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肉苁蓉对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢及抗运动疲劳能力的影响

发布日期:2021-11-25 10:05:00

摘要: 目的研究肉苁蓉对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢及抗运动疲劳能力的影响。方法以大强度耐力训练大鼠为模型。将7 周龄雄性Wistar 大鼠65 只为对象随机分为4 组: 静止ig 服水组( C 组) 、静止ig 肉苁蓉组( M 组) 、运动ig 水组( T组) 、运动ig 肉苁蓉组( TM 组) ,每组15 只( 剔除不符合实验要求的大鼠) 。采用专业灌胃器每天ig 一次,M、TM 组剂量为6. 01 g·kg - 1 ,ig 体积为5 mL·kg - 1 ,C,T 2 组ig 等量生理盐水。42 d 力竭游泳训练后,测定体重、力竭游泳时间及血睾酮等生化指标。结果TM 组体重大于T 组( P < 0. 05) ,力竭游泳时间长于T 组( P < 0. 01) 。力竭游泳导致大鼠血清睾酮下降,T组与C 组比较,下降了40. 53%( P < 0. 01) 。TM 组与T 组比较,上升了44. 35%( P < 0. 01) ; 血清皮质酮水平各组间均无显著差异,血清睾酮与皮质酮比值变化与睾酮变化较为一致; 肝糖原、肌糖原储量下降,T 组与C 组比较,肝糖原下降25. 85%( P < 0. 01) ,肌糖原下降44. 94%( P < 0. 01) 。TM 组与T 组相比,肝糖原高出19. 41% ( P < 0. 05) ,肌糖原高出58. 05% ( P <0. 01) ; FSH 无明显影响; 血尿素上升,血红蛋白下降,T 组与C 组比较,血尿素上升了59. 30% ( P < 0. 01) ,血红蛋白下降28. 72%( P < 0. 01) ; TM 组与T 组相比,血尿素低出20. 70%( P < 0. 05) ,血红蛋白高出24. 22% ( P < 0. 05) 。结论肉苁蓉可以减轻血睾酮受高强度运动量的影响,并维持在正常生理水平; 可以促进蛋白质合成,抑制氨基酸和蛋白质分解,提高运动训练大鼠血红蛋白含量和糖原的储备。


关键词: 肉苁蓉; 睾酮; 抗疲劳; 大鼠; 肝糖原; 肌糖原; 血尿素; 血红蛋白

肉苁蓉( Cistanche deserticola Y. C. Ma) 为列当科( Orobanchaceae) 肉苁蓉属( Cistanche) 多年寄生草本植物,主产于我国内蒙古、新疆等地。因其生长在荒漠中,具有极好的药用价值,素有“沙漠人参”之美誉。药典记载:“一般补阳物多燥,滋阴物多腻,但是本品补而不燥,滋而不腻,其力和缓,故有苁蓉( 与“从容”谐音) 之称”。其味甘、咸,性温,具有补肾阳、益精血、润燥滑肠、抗疲劳之功效,在我国药用历史有1 800 年之久,列为上品。历代药书均有记载。据统计,在历代增力中药处方中肉苁蓉的出现率占第一位,而在抗老防衰类方剂中仅次于人参居第二位[1]。已有研究表明,长时间大运动量训练造成的运动性低血睾酮是机体运动能力下降和恢复过程延长的主要因素。本实验以大强度耐力训练大鼠为模型,研究肉苁蓉对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢与抗运动疲劳能力的影响,旨在为其抗运动疲劳功效的应用提供理论依据。

1 材料

清洁级雄性Wistar 大鼠65 只,7 周龄,平均体重( 256. 9 ± 15. 2) g[北京大学医学部实验动物科学部,合格证编号SCXK( 京) 2006-0008]。在整个实验过程中,实验室内温度保持在( 22 ± 2) ℃,相对湿度55% ~ 75%,光照时间随自然变化。所有实验大鼠均以基础饲料( 北京大学医学部实验动物科学部) 和蒸馏水常规饲养,自由饮食。实验时间为49d,正式训练时间为42 d。肉苁蓉( Cistanche deserticola Y. C. Ma) ,产地内蒙古,北京同仁堂购得,并经天津中瑞药业有限公司高占友高级工程师鉴定。将干燥带鳞叶的肉苁蓉粉碎成粗粉,用10,6,6 倍量体积分数60%乙醇水浴提取3 次,每次2 h,合并提取液冷藏24 h,过滤,滤液减压回收乙醇,浓缩成浸膏( 相当于每1 g 浸膏2. 0 g 生药) ,备用[2]。

2 方法

2. 1 动物分组

为使实验大鼠适应新环境,首先将购回的大鼠分笼适应性饲养7 d。适应期的第4 天下午将实验大鼠以随机分组法分为4 组: 静止灌服水组( C组) 、静止灌服肉苁蓉组( M 组) 、运动灌服水组( T组) 、运动灌服肉苁蓉组( TM 组) ,每组15 只( 剔除不符合实验要求的大鼠) 。训练期间,各组自由摄食饮水,采用专业灌胃器,每天ig 1 次。M、TM 组ig剂量为6. 01 g·kg - 1·d - 1的肉苁蓉提取物, ig 体积为5 mL·kg - 1,C,T 2 组ig 等量生理盐水。

2. 2 实验方法

2. 2. 1 训练及测试方案C、M 组不进行任何运动。T 组及TM 组进行负重游泳运动,均采用100cm × 50 cm × 60 cm 的玻璃泳槽作为大鼠游泳训练装置,水深50 cm。水温( 31 ± 2) ℃,为防止大鼠在水面漂浮不动,特在游泳箱底部放置佳宝“AP1500”型水泵形成流动水。训练42 d,第1 周不负重,第2周负2%体重,第3 周负4% 体重,第4 ~ 6 周负5%体重,每次游泳训练至力竭。大鼠开始游泳至力竭所用时间为大鼠力竭运动能力[3]。力竭标准以大鼠下沉后10 s 不露出水面为度。处死前的最后1次为无负重力竭游泳训练,记录力竭时的游泳时间。

2. 2. 2 指标测定C、M 组在安静状态下,T,TM 组在末次训练24 h 后称重,乙醚适度麻醉,摘眼球采血,加入枸橼酸钠溶液抗凝, 37 ℃水浴中30 min 后,4 ℃ 3 000 r·min - 1 离心10 min,分离制备血清,并迅速取肝脏、双侧睾丸和深层股四头肌,剔除筋膜,置于预冷的生理盐水中洗净血污,再用滤纸吸干后置于- 20 ℃冰箱保存备用。组织匀浆的制备: 称取适量组织( 0. 2 ~ 1 g) 按W( g) 组织块重量/V( mL)匀浆介质为1 /9 的比例加取预冷的匀浆介质( 0. 9%的NaCl 溶液) 于烧杯中,迅速剪碎组织块( 以上全部操作在冰水浴中进行) 。匀浆经3 000 r·min - 1低温离心15 min,分离提取上清液,在4 ℃冰箱冷藏即用或- 20 ℃冰箱冰冻备用[3]。血清睾酮、血清皮质酮、黄体生成素和尿促卵泡素采用放射免疫分析法测定。试剂盒由天津九鼎医学生物工程有限公司提供。肝糖原、肌糖原采用南京建成生物工程研究所的试剂盒所提供的方法测定。血清尿素采用UVGLDH法测定。血红蛋白采用高铁氰化钾氧法测定,蛋白质定量采用双缩脲法[4]。

2. 3 数据统计

采用SPSS12. 0 软件对所有数据进行处理,数据用平均数标准差( 珋x ± s) ,显著性检验为t 检验。P <0. 05 有统计学意义。

3 结果

3. 1 肉苁蓉对大鼠体重及运动能力的影响

肉苁蓉对大鼠体重及运动能力的影响结果见表1。在整个实验过程中,M 组大鼠体重呈增长趋势,且与C组大鼠比较无显著性差异; T 组大鼠体重小于C 组大鼠( P <0. 01) ; TM 组大鼠体重小于C、M 组大鼠( P <0. 05) ; TM 组大鼠体重大于T 组大鼠( P < 0. 05) 。TM组大鼠力竭游泳时间明显长于T 组( P <0. 01) 。

3. 2 运动及肉苁蓉对大鼠血清睾酮、皮质酮水平的影响

力竭运动引起大鼠血清睾酮下降,T 组与C 组比较,血清睾酮下降了40. 53% ( P < 0. 01) ,而M组、TM 组与C 组比较,未见显著性差异。TM 组与T组比较,血清睾酮水平上升了44. 35% ( P < 0. 01) ,血清皮质酮水平各组间均无显著差异,血清睾酮与皮质酮比值变化与睾酮变化较为一致,与C 组比较,T 组下降了40. 75% ( P < 0. 01 ) ,TM 组下降19. 52%( P < 0. 05 ) 。TM 组与T 组比较,上升了35. 81%( P < 0. 01) ,见表2。

3. 3 运动及肉苁蓉对大鼠肝、肌糖原储量的影响力竭运动引起大鼠肝糖原、肌糖原储量下降。T组与C 组比较,肝糖原下降25. 85%( P < 0. 01) ,肌糖原下降44. 94%( P < 0. 01) 。M 组与C 组比较,未见显著性差异。TM 组与C 组比较,肝糖原下降11. 46%( P <0. 05) ,肌糖原下降12. 98%( P < 0. 05) 。TM 组与T 组相比,肝糖原高出19. 41% ( P <0. 05) ,肌糖原高出58. 05%( P <0. 01) ,见表3。

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3. 4 运动及肉苁蓉对大鼠血清LH 和FSH 水平的影响

运动及肉苁蓉对大鼠血清LH 和FSH 水平的影响结果见表4,除T 组FSH 略有下降( 与C 组比较P < 0. 05) ,其余各组LH,FSH 水平都较为接近,各组间均未见明显差异。

3. 5 运动及肉苁蓉对大鼠血尿素和血红蛋白水平的影响

运动及肉苁蓉对大鼠血尿素和血红蛋白水平的影响实验结果见表5,T 组与C 组比较,血尿素上升了59. 30%( P < 0. 01) ,血红蛋白下降28. 72%( P <0. 01) 。M 组与C 组比较,未见显著性差异。TM 组与C 组比较,血尿素上升了26. 31% ( P < 0. 05) ,血红蛋白下降11. 46% ( P < 0. 05) 。TM 组与T 组相比,血尿素低出20. 70% ( P < 0. 05) ,血红蛋白高出24. 22%( P < 0. 05) 。

4 讨论与分析

实验表明,42 d 力竭游泳训练后,灌服肉苁蓉提取物组大鼠体重和力竭游泳时间显著提高; 同时与运动组大鼠比较TM 组大鼠睾酮、肌糖原和肝肌糖元以及Hb 水平显著上升,BUN 显著下降。睾酮是机体内促合成代谢的激素,其水平高低与其恢复能力关系密切[5]; 肌糖原和肝糖原是体内最主要的糖原储备形式,其储量多寡决定长时间运动能力,同时运动后糖原的恢复状况是影响其再运动能力的关键因素之一; BUN 是评价机体承受体力负荷能力的

重要指标。通过给运动大鼠灌服肉苁蓉提取物使得运动大鼠的上述指标明显得到改善,表明肉苁蓉具有良好的抗疲劳、促进恢复的作用。其主要机制可能为肉苁蓉中所含毛蕊花糖苷和甜菜碱具有雄性激素样作用,可以对运动大鼠下丘脑-垂体-性腺轴起正向调节作用,缓解由于运动对大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的抑制作用,促进睾酮分泌增加[6],使得TM组大鼠睾酮显著高于运动组; 睾酮是促进糖原合成加强的重要因素,使得TM 组大鼠肌糖原和肝糖原显著高于运动组,能量代谢得到恢复和再生,从而降低对蛋白质的利用。因此TM 组的BUN 显著低于运动组。睾酮的升高可以促进肾脏EPO 的合成和分泌,刺激红细胞的生成增加,从而使TM 组大鼠的Hb 显著高于运动组。

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5 结论

补充肉苁蓉可以减轻大鼠血睾酮受高强度运动量的影响,维持在正常生理水平,同时促进蛋白质合成,抑制氨基酸和蛋白质分解,提高运动训练大鼠血红蛋白含量和糖原的储备,从而增强大鼠抗疲劳能力。

REFERENCES

[1] TU P F,JIANG Y,GUO Y H,et al. Cistanche research and itsindustrial development[J]. Chin Pharm J ( 中国药学杂志) ,2011,46( 12) : 882-887.

[2] XUE D J,ZHANG M,WU X H,et al. Studies on the active antisenileconstituents in Cistanche deserticola Y. C. Ma[J]. Chin JMod Appl Pharm( 中国现代应用药学) ,1995,20 ( 11 ) : 687-688.

[3] VOCES J. Effects of administration of the standardized Panax ginsengextract G115 on hepatie antioxidant function after exhaustiveexercise[J]. Comp Biochem Physiol C Pharmacol Toxicol Endocrinol,

1999,123( 2) : 175-184.

[4] LAI X H. The experimental research on the burdock s influence onthe sporting ability of mice [J]. J Chongqing Med Univ( 重庆医科大学学报) ,2010,35( 3) : 375-377.

[5] AAKVAN. Testosterone and testosterone binding globulin in youngmenduring prolonged stress[J]. Int J Androl,1978( 1) : 22-31.

[6] HE W,ZHONG G Z,WU G L. Cistanche male hormone-likeeffects in the active ingredients of study[J]. China J Chin MaterMed( 中国中药杂志) ,1996, 21( 9) : 564-565.


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