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肉苁蓉多糖的提取分离和理化分析

发布日期:2021-11-26 10:15:00

多糖类是重要的生物高分子化合物, 我国多糖类的研究虽然起步较晚, 但在近几十年来随着膜学说及免疫物质的研究, 逐渐发现多糖类在生命现象中的重要性, 发现多糖类属非细胞毒物质, 有着多方面的生物活性, 关于多糖的研究得以重视起来。作者对中药肉苁蓉中的苁蓉多糖成分进行了系统的研究, 以期为多糖类的研究作出贡献。

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1  材料及仪器

肉苁蓉:由内蒙古阿拉善药材公司提供, 无水葡萄糖对照品:中国药品生物制品检定所提供, 红外分光光度计:599 -BPE, 紫外分光光度计:UV -260岛津, 真空恒温干燥箱:YB —IA 天津。

2  方法及实验结果

2.1  提取分离和精制取肉苁蓉剪碎加水小火煮沸2 小时, 过滤, 残渣加水煮沸2小时过滤, 合并提取液。用Sevag法〔1〕去蛋白。取提取液浓缩后加乙醇反复多次沉淀, 用H2O2 在pH =8〔2〕的条件下脱色,得灰白色物质。依次用无水乙醇、乙醚洗涤, 置真空干燥器中减压干燥, 得灰白色干燥物。

2.2  理化分析

( 1) 理化性质:苁蓉多糖精品呈灰白色粉末状, 溶于水, 尤易溶于热水。不溶于高浓度的乙醇及丙酮、乙酸乙酯、氯仿、乙醚等有机溶剂。苁蓉多糖的水溶液为透明的粘稠状, 碘—碘化钾反应为阴性, 茚三酮反应为阴性, 蒽酮反应及硫酸—咔唑反应为阳性。

( 2) 纯度鉴定:采用硅胶薄层色谱法, 用浓氨水:正丁醇:水( 40∶60∶5) 展开, 苁蓉多糖只有一个斑点, 纸层析法用新华滤纸点样展开约8 小时, 取出后吹干, 用0.5 %甲苯胺蓝乙醇液染色, 再用95 %的乙醇漂洗至背景无色。结果表明为单一斑点。

( 3) 紫外光谱分析:将苁蓉多糖配成500μg/ml 的溶液, 用紫外分光光度计在200 ~ 400nm扫描, 未发现有核酸( 260nm)和蛋白质( 280nm) 特征吸收。

( 4) 红外光谱分析:取苁蓉多糖2mg, KB1 压片, 红外光谱扫描, 特征吸收分别为:3500cm, 3000cm, 1600cm,1400cm, 1100cm, 890cm 为β —吡喃糖苷健特征吸收峰。

( 5) 含量测定:采用硫酸—蒽酮法〔3〕比色, 无水葡萄糖为对照品, 测得多糖含量为69.64 %, 硫酸—咔唑法测定葡萄糖醛酸含量为18.12 %。总糖含量为87.76 %, 其余为水分及灰分, 不含蛋白质和核酸。

讨论:报告了从苁蓉中提取出灰白色的多糖成分以及多糖的理化性质, 由于条件所限所得苁蓉多糖的纯度不够好, 这将是作者努力的方向。同时苁蓉多糖的单糖组成以及连结方式将是作者继续关注的问题。

参考文献

1 沈阳药学院学报.第2 卷第3 期,1985, 234 ~ 240

2 中国科学院上海药物研究所.中草药有效成分提取与分离.上海科学技术出版社, 1983 415~ 420

3 袁晓等.植物生理生化实验.高等教育出版社, 1983


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