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提要 肉苁蓉多糖(150mg、300mg/100g)连续灌胃1周对大黄脾虚模型大鼠的饲料消耗量减少和体重增长率减慢有显著改善作用。另对脾虚模型所致的胃蛋白酶及唾液淀粉酶活性降低有明显升高作用。
关键词 肉苁蓉多糖;大黄脾虚模型;胃蛋白酶;唾液淀粉酶
肉苁蓉(Cistanche deserticola Y.C.Ma)为列当科植物肉苁蓉的干燥带鳞叶的肉质茎具有补肝肾、益精气的功用。肉苁蓉多糖是从肉苁蓉中分离的粗多糖除去水溶性小分子杂质经Sevag 法脱蛋白质用水、醇反复处理得肉苁蓉多糖本实验用大黄水煎剂喂饲大鼠制作脾虚证动物模型观察肉苁蓉多糖对上述模型全身状态和消化道功能的影响。
1 材料
1.1 动物 Sparague-Dawley 大鼠体重155±20g 雄性购于浙江省实验动物中心。
1.2 饲料 标准合成大鼠颗粒饲料由扬州大学实验动物中心提供。
1.3 药品 大黄水煎剂西宁大黄切片用水浸泡水煎(80℃)浓缩成1g 生药/ml。肉苁蓉多糖:150mg/kg、300mg/kg。3%水溶液0.5、1ml/100g。
2 方法
取SD 大鼠50只分成5组每组10只标准饲养1周记录正常饲料消耗量(g/100g 体重/24h)和周体重增长率。造模周除对照组灌服生理盐水(20ml/kg)外其余各组均用大黄煎剂(100%20ml/kg每日1次)连续灌服8天后各组动物均出现便溏、纳呆、少动、毛发枯涩、消瘦为主的“脾虚”症状。“脾虚”模型复制成功后各组处理如下:对照组继续灌服生理盐水“脾虚”长期模型组继续灌服大黄煎剂;“脾虚”自然恢复组停止灌服大黄不给任何治疗任其自然恢复;治疗组用肉苁蓉多糖按150300mg/100g(容量为准1ml/100g)治疗时间为1周。测量并计算治疗前后大鼠饲料消耗量和周体重增长率每组取8只大鼠收集胃液和唾液按下述方法测定胃蛋白酶活性和唾液淀粉酶活性。胃蛋白酶活性测定:按改良安宋(Anson)氏法将待测胃液用0.04ml/L 盐酸稀释50倍取稀释胃液0.5ml在37℃±0.5℃环境中加入血红蛋白基质液2ml反应10分钟立即加入5%三氯醋酸5ml 终止反应过滤取滤液在275nm 波长处比色;对照管为稀释胃液0.5ml37℃±0.5℃10分钟孵育后加入5%三氯醋酸室温放置30分钟后加入血红蛋白基质比色方法同前按下列公式计算胃蛋白酶活性:
胃蛋白酶活性(μg/ml 酪氨酸/ml 胃液/分钟)=(测定管酪氨酸浓度-对照管酪氨酸浓度)×75唾液淀粉酶测定:将0.04%可溶性淀粉溶液5ml在37℃水箱中预热5分钟加入唾液(蒸馏水稀释100倍)0.01ml37℃中反应30分钟取出后加入0.01mol/L 碘溶液5ul蒸馏水稀释至50ml立即在660nm 波长处比色。按公式计算淀粉酶单位:淀粉酶单位U/ml=(对照管光密度-测定管光密度)÷对照管光密度×800定义:37℃30分钟内1ml 唾液中淀粉酶能完成水解淀粉2mg称为1个淀粉酶单位。
3 结果
3.1 对大黄脾虚大鼠饲料消耗量和周体重增长率的影响。经肉苁蓉多糖治疗后的大鼠全身状态明显改善饲料消耗量和周体重增长率均有不同程度的恢复和增加(见表1)。
3.2 对大黄脾虚大鼠胃蛋白酶和唾液淀粉酶活性的影响
结果显示经肉苁蓉多糖治疗1周后的脾虚大鼠胃蛋白酶和唾液淀粉酶活性明显升高(见表2)
4 讨论
现代医学研究认为中医理论中的脾虚可以被看作为是一种以消化系统功能低下为主要表现并涉及其它系统功能低下的综合症侯群;过量和长期服用苦寒药大黄会伤元气耗阴血伐脾胃脾失健运水谷不能运化。则气血生化无源肌肉瘦削神疲乏力。本实验用大黄灌服大鼠造成“脾虚”动物模型接近于临床的脾虚症。经大黄灌服后的大鼠出现便溏、消瘦、拱背、纳呆、少动四肢无力毛发枯燥、畏寒、体重减轻等表现经肉苁蓉多糖治疗后明显改善食欲和体重增长率基本恢复到正常水平。由于大黄引起的长期腹泻严重影响了消化腺的储备力和反应性导致唾液淀粉酶和胃蛋白酶活力明显低于对照组而经肉苁蓉多糖治疗后上述两种消化酶活力基本恢复正常。肉苁蓉多
糖不仅能恢复消化酶的活性以达助消化之功效外尚能增强免疫增强体质无疑在治疗严重消化功能紊乱的疾病中具有良好的作用。
参 考 文 献
1 李仪奎.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社.1993:1021
2 陈 奇.中药药理实验方法学.上海:上海科技出版社.1991:320
3 吴咸中高金亮.脾虚证的现代研究.天津:天津科技翻译出版公司.1992:183
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