大连医药科学研究所（116013）  谢继红＊ 高集馥 王瑜郭永沺

沈阳药学院中药药理室      吴春福胡茧邹宇宏刘雯

摘要 用高效液相色谱电化学检测方法发现肉苁蓉Cistanche deserlicola Y.C.Ma的乙醇提取物给药40d可以增加大鼠下丘脑去甲肾上腺素（NA）和5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）含量，并增加多巴胺（DA）与二羟苯乙酸（DOPAC）比值。对纹状体DOPAC有一定增加作用，而对边缘脑区单胺类神经递质无明显影响。

关键词 肉苁蓉 单胺类神经递质 下丘脑 纹状体 大鼠

肉苁蓉属补肾壮阳类中药。药理研究表明，它能增强小鼠免疫功能（1），提高阳虚动物DNA合成率（2、3），促进下丘脑-垂体-性腺功能C4），明显延长果蝇寿命（5）。近来报道（6、7），补益方药对老年或阳虚大鼠下丘脑单胺类神经递质含量有影响，但单味补益中药对中枢单胺类神经递质影响的报道尚少。本文研究了肉苁蓉乙醇提取物对正常大鼠脑中单胺类神经递质水平的影响。

1 材料与方法

1.1 动物：Sprague-Dawley种大鼠，体重180～220g，雌雄兼用，由沈阳药学院实验动物室提供。

1.2 给药与取材：大鼠18只，随机分为3组，每组6只。正常对照组每天灌胃生理盐水5ml／kg，给药组分别灌胃肉苁蓉乙醇提取物100、200mg／kg，2次／d，连续40d。末次给药后12h，将大鼠断头取脑，迅速在冰台上分离出下丘脑、纹状体和边缘部分（包括中隔核、优核和嗅核等部分）。称重后加入到350μ1冰冷的0.4mol／L高氯酸溶液中（含0.5mmol／LEDTA，0.01％半胱氨酸）（8），用Teflon匀浆器电动匀浆（500r／min），离心（12000r／min，20min，4℃），取上清液20μl，直接注入高效液相色谱电化学检测系统同时测定单胺类物质及其代谢产物的含量。各物质含量应用外标法计算。

1.3 生化测定（8、9）；YSB-I型平流泵为中国科学院上海分院科学仪器厂生产。电化学检测器为瑞士Metrom公司产品，工作电压0.70V，检测灵敏度5nA，色谱柱为YWG-C1，10μm，柱长150mmx4mmφ，泵流速1.2ml／min。流动相组成为乙酸钠（100mmol／L）-柠檬酸（85mmol／L）缓冲液，pH3.7，含离子对B，1.0mmol／L，EDTANa20.2mmol／L，甲醇6％（V／V），G。垂熔漏斗过滤并脱气后使用。

1.4 药物与试剂：肉苁蓉购自内蒙古赤峰药材公司，原生药经沈阳药学院孙启时副教授鉴定。多巴胺盐酸盐（DA），去甲肾上腺素（NA），5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA）均为瑞士Fluka产品，3,4-二羟基苯乙酸（DOPAC）为Merck产品，5-羟色胺硫酸肌酐（5-HT）为瑞士进口分装品。

2 结果

2.1 对下丘脑单胺类神经递质水平的影响：肉苁蓉乙醇提取物增加下丘脑NA的含量。大剂量组NA升高呈统计学极显著意义（P＜0.01），5-HIAA水平也有显著升高（P＜0.05）。对5-HT／5-HIAA比值无明显作用，但对DA／DOPAC比值有显著升高作用（P＜0.05）。见表1。

表1 肉苁蓉乙醇提取物对大景下丘脑单胶类递质水平的影响（μg／g显组织）（x±SD，n＝6）

与对照组比较＊P＜0.05 ＊＊P＜0.01（1检验）（下同）

2.2 对纹状体和边缘部分单胺类神经递质水平的影响：肉苁蓉乙醇提取物使纹状体DA、LOPAC、NA水平呈一定升高趋势，除小剂量使DOPAC升高呈显著意义外（P＜0.01），其它皆无统计学意义（表2）。对边缘部分内各单胺冲经递质水平及代谢产物几无影响（表

表2 肉苁蓉乙醇提取物对大鼠纹状体单胺类递质水平的影响（Fg／g温组织）

表3 肉苁蓉乙醇提取物对大鼠边缘系统单胺类递质水平的影响（Fg／g温组织）

3 讨论

本实验세察到肉苁蓉乙醇提取物给药40d能增加大鼠下丘脑NA含量，提高DA／DOPAC比值，表明该药在一定程度上影响下丘脑儿茶酚胺的代谢。陈名道等人观察到含有肉苁蓉的助阳药能使正常及可的松阳虚模型大鼠下丘脑多巴胺水平升高，使其代谢产物DOPAC降低，对NA也呈升高趋势。他们认为助阳药的这种作用似是对单胺氧化酶抑制的结果，而与机体本身状态关系不大（7）。有报道表明，含有肉苁蓉的固真胶囊对老年大鼠脑中单胺氧化酶有显著抑制作用（10）。但单味肉苁蓉是否有抑制单胺氧化酶作用尚需进一步实验研究。

众所周知，下丘脑是机体控制内分泌活动的一个重要的神经结构，下丘脑内的单胺类神经递质通过垂体和各靶腺对机体各器官起着重要的调节作用，肉苁蓉试A和C对悬吊应激所致雄性小鼠的性功能低下有对抗作用，肉苁蓉能增强下丘脑-垂体-卵巢的促黄体功能，提高垂体对黄体生成素释放激素的反应和卵巢对黄体生成素的反应（4）。本实验发现，肉苁蓉可升高下丘脑NA水平及DA／DOPAC比值，提示这种作用对垂体内分泌功能可能会产生影响。大量资料表明，激活下丘脑去甲肾上腺素能系统对性行为和促黄体生成素释放有重要影响（11）。NA能促进黄体生成素释放激素的释放。低剂量NA可以易化雌性大鼠的性行为（12），由此可以设想，肉苁蓉对性腺功能的影响，不单纯是对垂体的直接作用，面且有对下丘脑单胺类神经递质作用的参与。

性腺功能是中医“肾”职能中一个重要的组成部分。肾虚患者可见血清中垂体激素（13）和性腺激素（14）水平的异常改变。而补肾中药通过影响内分泌功能来调节这些激素的水平以达到治病目的（13,14）。肉苁蓉对下丘脑单胺类神经递质代谢的影响，无疑可直接或间接地调节垂体-性腺功能。这也许能部分地解释该药的补肾补阳功效。

肉苁蓉对纹状体DOPAC有显著升高作用，对边缘系统单胺递质代谢未见明显影响。作为补肾中药肉苁蓉这种作用的药理意义尚需深入研究。

致谢：本实验得到大连医药科学研究所霍五书教授热情指导和帮助。