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肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉(cistanchedeserticolaY.C.Ma)以干燥带鳞片的肉质茎为正品入药是常用的补肾壮阳中药具有补肾益精、润燥的功能在历代抗老延年古方中出现的频率仅次于人参。现代医学研究表明肉苁蓉具有一定的抗衰老作用其总提取物在延长实验动物寿命、增强机体免疫功能和降低体内褐脂质堆积等方面都显示出一定的活性[12]。为了深入探讨肉苁蓉抗衰老的活性成分及其作用机制我们制造了衰老小鼠模型并同时观察了肉苁蓉多糖对延缓小鼠衰老的作用。
1 材料与方法
1.1 药物及试剂
肉苁蓉(cistanchedeserticolaY.C.Ma)药材购自于广州市清平中药材专业市场并经广东省佛山医药集团黄敏高级工程师鉴定。肉苁蓉多糖的提取参照文献[3]用生理盐水配制成5mg/mL肉苁蓉多糖溶液。所用试剂均为国产分析纯试剂用去离子水配制。
1.2 试验动物NIH种健康小鼠雌雄各半体重18~22g由广东省医学实验动物中心提供。
1.3 亚急性衰老动物模型的制造[4]及给药将50只NIH健康小鼠随机分为正常组(NS)、模型组(Model阴性对照组)、给药组PCD1、PCD2维生素E组(VE阳性对照组)每组10只小鼠。然后将给药组PCD1、PCD2每天灌胃肉苁蓉多糖提取物剂量分别50mg/kg、100mg/kg维生素E组每天灌胃35mg/kg维生素E溶液其余二组每天灌胃10mL/kg的生理盐水;普通饲料常规喂养。同时取模型组、给药组PCD1、PCD2及维生素E四组小鼠各鼠每天颈背部皮下注射D-半乳糖50mg/kg连续近7周造成模型组出现亚急性衰老动物模型症状后即刻进行实验样本的采集。
1.4 样本的采集与SOD活性和LPO含量的测定将小鼠采用断头取血法取0.5mL血液放入肝素抗凝的试管中加入生理盐水离心、沉淀;同时分离已取过血的小鼠肝组织用冷冻的生理盐水冲洗冰浴下制成匀浆后以3000r/min离心10min取上清液备测采用邻苯三酚自氧化法[5]测定各样本中SOD活性;运用TBA比色法[5]在532nm波长下测量各样本中LPO的含量实验结果用统计学处理。
2 实验结果
2.1 肉苁蓉多糖对亚急性衰老小鼠超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响
从表1结果可见:PCD100mg/kg组与模型组相比均具有显著差异(P<0.01)均能显著增加亚急性衰老小鼠血清及肝中SOD的活性。
2.2 肉苁蓉多糖对亚急性衰老小鼠过氧化脂质(LPO)的作用
结果表明肉苁蓉多糖组对亚急性衰老小鼠的血清、肝中的脂质过氧化物的含量明显低于模型组(P<0.05)随着剂量的增加脂质过氧化物的含量也相应降低。
3 讨 论
随着全球老龄化日趋严重对衰老及抗衰老的方面的研究已成为各国科学家研究的热点。1956年DenhamHaman首次提出衰老自由基学说其主要论点是人类随年龄增大的退行性变化是由于自由基活性氧的损伤作用所致。脂质过氧化物是自由基作用于多饱和脂肪酸的产物含量与自由基的生成正相关由于机体有抗氧化作用的酶系及非酶系的保护作用使自由基不断产生又不断被清除。但随着年龄的增长体内抗氧化剂不断下降消除自由基的作用能力逐渐减弱脂质过氧化作用则增强脂质过氧化产物增多使体内主要脏器心、肝、脑、肾等受损因此测定脂质过氧化产物是评价抗衰老药物的重要指标之一。
本实验研究结果显示肉苁蓉多糖(100mg/kg组)可显著提高亚急性衰老小鼠SOD的活性;并明显降低亚急性衰老小鼠的血液和肝中的脂质过氧化物的含量。这说明肉苁蓉多糖具有调节衰老小鼠机体氧化/抗氧化平衡的功能消除D-半乳糖引起自由基产生的增多。提示肉苁蓉多糖具有抗氧化的作用及延缓衰老的作用。
参考文献
[1]薜德钧刘能俊胡福泉等.肉苁蓉提取物对人体抗衰作用研究[J].中国现代应用药学.199714(5):16-18.
[2]杨翠平苏薇薇.肉苁蓉研究进展[J].中药材.200124(12):907-909.
[3]曾群力霍亚楠毛俊浩等.肉苁蓉多糖的分离、纯化和鉴定[J].中草药.200233(12):1057-1059.
[4]龚国清.小鼠衰老模型研究[J].中国药科大学学报199122(2):101.
[5]徐叔云卞如濂陈修主编.药理学实验方法学[M ].第三版.北京:人民卫生出版社2003.535-537430-434
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