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表3 肉苁蓉水提物对肠道菌群紊乱小鼠脏器指数的影响
Table 3 Elfect of Cistanche deserticola water extract on organ index of mice with intestinal flora disorder
mg/g
组别 | A | B C D |
心 | 4.826±0.305 | 4.881±0.340 4.928±0368 4,675+0.522 |
肝 | 41.860±1.498 | 39.193±2626 40.603±5.193 38.787±1.358 |
脾 | 2.09-0.18 | 2.07±0.24 1.88±0.32 1.86±0.15 |
肺 | 6.387±0.761 | 6800±1.135 7.369±1051 7.102±0.948 |
肾 | 11.045-0.761 | 11.119-0519 11880*2.050 11.480±0.636 |
脑 | 21.5±1.511 | 22.491±0446 2260310.539 21.946±1.175 |
胸腺 | 1.52810.28 | 0.673±0.329 0.45±0.2141.125±0.335* |
自肠 | 4.234±1.138 | 8.008±1.445 9.055±1617 8660±1.501 |
注:A为空白对照组,B为肠道菌群素乱模型组,C为肉苁蓉水提液低剂量组,D为肉苁蓉水提物高剂量组:*表示与空白组相比有显著差异(P<0.05):**表示与空白组相比有极显著性差异(P<0.01):#表示与模型组相比有显著意义(P<0.05)。
鼠胸腺的生长发育可能具有抑制作用,引起免疫抑制。与模型组相比肉苁蓉水提物高剂量胸腺指数显著提高(P<0.05),肉苁蓉水提物低剂量组小鼠胸腺指数降低(P<0.05)。胸腺作为中枢免疫器官一定程度上反应了机体的免疫功能,可能由于肉苁蓉水提物中的肉苁蓉多糖促进机体中免疫系统产生的IL-2,促进免疫细胞增殖,促进胸腺成熟细胞的释放,缓解应激功能,使免疫功能趋于稳定,减轻抗生素引起对小鼠免疫器官的生长抑制。
2.2.3 肉苁蓉水提物对肠道紊乱小鼠肠道菌群的影响
按对机体健康的影响,肠道菌群可分为:益生菌、有害菌和调节致病菌,共同调节肠道微生态平衡。双歧杆菌、乳酸菌作为肠道中典型的益生菌,能够改善肠道功能,刺激机体免疫功能,促进抗炎因子的分泌,缓解炎症反应等。条件致病菌在菌群平衡时不致病,但一旦处于生态失调的状态下,这类细菌可成为致病菌,如大肠杆菌、肠球菌。肠道菌群特定微生物比例失调会影响肠道菌群平衡,B/E值(双歧杆菌/大肠杆菌)可反映肠道内正常菌群对致病菌群定植的抵抗力,肠道环境良好时B/E值≥1。图2为肉苁蓉水提
双岐杆菌菌落总数
(D)为双岐杆菌含量:(②为乳酸杆菌含量;(3)为肠球菌含量:(4)为大肠杆菌含量:(⑤为B/E值:*表示与空白组相比有显著差异(R0.05:**表示与空白组相比有极显著性差异(P<0.01):#表示与模型组相比有显著意义(P<0.05);##表示与模型组相比极有显著性差异(P<00D)。
图2 肉苁蓉水提物对肠道紊乱小鼠肠道菌群的影响
物对肠道紊乱小鼠肠道菌群数量变化情况。
图2(D可看出灌胃7d时,与空白组相比模型组小鼠粪便中双岐杆菌含量降低(P<0.01),肉苁蓉水提物低剂量组及高剂量组与空白及模型组相比双岐杆菌数量升高(P<0.01),14d时模型组及低剂量组与空白组相比双岐杆菌显著降低(P<0.01),高剂量组与模型组相比升高(P<0.01)。图2(2)可知,灌胃7d时,模型组及低剂量与空白组相比组小鼠乳酸菌数量降低(P<0.01),高剂量组乳酸菌含量升高(P<0.01)。14d时低剂量组及高剂量组与模型组相比乳酸菌含量升高(P<0.01)。图2()可知,灌胃7d时模型组、低剂量组、高剂量组肠球菌与对照组比显著升高(P<0.0D14d后低剂量组、高剂量组肠球菌与模型组比显著降低(P<0.01)。图2(4可知,灌胃7d时模型组、低剂量组、高剂量组大肠杆菌菌与对照组比显著升高(P<0.01)14d后低剂量组、高剂量组大肠菌与模型组比显著降低(P<0.01)。图2(5)可知,灌胃7d时模型组、低剂量组、高剂量组B/E值与对照组比显著降低(P<0.0D,且模型组B/E值<1,低剂量组、高剂量组B/E值>1,表明低剂量组、高剂量组肠道环境比模型组好。14d后组模型组B/E值显著低于对照组(P<0.01),高浓度组与对照组B/E值差异不显著(P>0.05)。试验表明肉苁蓉能显著提高肠道菌群紊乱小鼠粪便中双岐杆菌、乳酸菌含量B/E值,对肠球菌及大肠杆菌生长有一定抑制作用。肉苁蓉对肠道菌群紊乱的调节作用,可能由于其在机体内参与糖代谢从而维持机体内代谢稳态,改善机体内环境,从而降低抗生素对肠道菌群紊乱的影响。
2.2.4 肉苁蓉水提物对小鼠肠道菌群紊乱结肠形态结构的影响
肠道形态结构的改变对机体生长发育、消化吸收、免疫调节、肠道损伤修复具有一定影响。肠绒毛能够增大肠道黏膜表面积以及与营养物质的接触面积,增强肠道的消化吸收功能。隐窝细胞向绒毛顶端迁移分化后形成绒毛细胞,补充绒毛上皮细胞脱落。绒腺比(V/C值)能综合反映肠道消化状况,与肠道消化吸收能力成正比。肠绒毛、隐窝、V/C值代表肠道黏膜完整性的重要指标。肉苁蓉水提物对小鼠肠道菌群紊乱结肠形态结构的影响见图3和表4。
由图3和表4可知,不同试验组结肠绒毛形态有一定的差异。对照组及肉苁蓉水提物高剂量组结肠绒毛较长,呈指状,肠道菌群紊乱模型组及肉苁蓉水提物低剂量组肠绒毛较短,模型组肠绒毛顶端断裂。肉苁蓉水提物高剂量组能够极显著提高肠道菌群紊乱小鼠结肠绒毛高度及V/C值(P<0.01)。与对照组相比
(A)为空白对照组。(ED为肠道菌群紊乱模型组,(O为肉苁蓉水提液低剂量组,(D为肉苁蓉水提物高剂量组。
图3 肉苁蓉水提物对肠道菌群紊乱结肠结构的影响
Fig3 The effect of Cistanche deserticola water extract on the colonie structure of intestinal flora disorder
表4 肉苁蓉水提物对肠道菌群紊乱结肠结构的影响
Table 4 The effect of Cistanche deserticola water extract on the colonic structure of intestinal flora disorder
组别 | 肠绒毛/μm | 隐窝/μm | V/C |
A | 1024,546±220.186 | 76.170±5.440 | 13.581x3,448 |
B | 332.00423.733" | 110.720±13.381* | 3.018±0.248" |
C | 467,852+59.082" | 113.166±8.658" | 4,1350.400" |
D | 687938±53.187* | 87.266=4.151" | 7.887±0.539* |
注:A为空白对照组,B为肠道菌群素乱模型组,C为肉苁蓉水提液低剂量组,D为肉苁蓉水提物高剂量组:*表示与空白组相比有量著差异(P<0.05),**表示与空白组相比由有极显著性差异(P<0.01);#表示与模型组相比有显著意义(P<0.05);##表示与模型组相比极有显著性差异(PC0.0D)。
其他3组肠绒毛及VC值减小存在极显著性差异(P<0.0D,模型组与低剂量组与对照组相比隐窝变深存在极显著差异(P<0.0D,高剂量组与空白组隐窝深度无显著性差异(P>0.05),隐窝深度增加会降低营养物质吸收。绒毛长度大小顺序为:对照组>高剂量组>低剂量组>模型组:隐窝深度大小依次为:模型组>低剂量组>高剂量组>对照组:V/C值大小为:对照组>高剂量组>低剂量组>模型组,故肉苁蓉水提物可调节肠道菌群紊乱小鼠诱发的肠绒毛变短、隐窝深度增加的现象。这可能由于抗生素诱导肠道菌群紊乱,而使肠黏膜屏障促炎症信号上调,诱发炎症细胞传导,引发肠道炎症疾病,影响机体代谢。肉苁蓉水提物通过提高抗炎因子的释放,降低促炎因子的分泌减缓肠道粘膜的炎性损伤,进而调节肠道菌群紊乱引发的肠道形态结构的改变。
3 结论
肉苁蓉水提物具有良好的抗氧化作用,DPPH自由基、ABTS自由基、O-自由基的IC值依次为0.225、1.819、12.53mg/ml。肉苁蓉水提物在一定浓度下能够缓解抗生素对小鼠体质量下降及对胸腺的生长抑制,能显著提高肠道菌群紊乱小鼠粪便中双岐杆菌、乳酸菌的数量,对肠球菌及大肠杆菌生长有一定抑制作用,调节肠道内正常菌群对致病菌群定植的抵抗力。改善肠道菌群紊乱小鼠诱发的肠绒毛变短、隐窝深度增加现象。由此看出,肉苁蓉水提物具有一定的抗氧化能力及调节肠道菌群紊乱的作用,为肉苁蓉开发产品及其应用提供一定理论依据。
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