杨建华，胡君萍，热娜“卡斯木”，堵年生

（1．新疆医科大学附属肿瘤医院，新疆 乌鲁木齐8300112．新疆医科大学药学院，新疆乌鲁木齐830054）

摘要 目的：研究肉苁蓉属植物中苯乙醇苷类化合物抗氧化活性的构效关系。方法：采用DPIH·自由基分析法，对肉苁蓉属植物中的6种苯乙醇苷单体成分进行抗氧化活性的测试 根据其结构特征和活性测定结果，初步推断苯乙醇苷类化合物抗氧化活性的构效关系。结果：不同化学结构的苯乙醇苷化合物清除自由基的能力存在一定差异，其抗氧化能力的顺序为2＇乙酰基毛蕊花糖苷＞毛蕊花糖苷＞管花苷B异毛蕊花糖苷＞松果菊苷＞肉苁蓉苷A它们清除自由基的能力与浓度呈明显量效关系。结论：肉苁蓉属植物中苯乙醇苷类的抗氧化活性与苷元及苯丙烯酰基上的酚羟基数目，酚羟基连接位置，化合物空间位阻的大小、中心葡萄糖2位上乙酰基的取代均存在一定关系。与苯乙烯酰基上的aβ不饱和酮结构片断可能也有一定关联。

关键词 肉苁蓉：苯乙醇苷；抗氧化活性；构效关系；DPPH

中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1001-4454（2009）07-1067-03

中药肉苁蓉为列当科肉苁蓉属植物肉苁蓉Chtanche mlm（C A Me）G Bed干燥带鳞叶的肉质茎，始载于《神农本草经》列为上品，它在历代补肾壮阳方剂中出现的频率最高，在抗老防衰类中药处方中出现频率仅次于人参位居第二，有着“沙漠人参”之美誉。苯乙醇苷类是肉苁蓉属植物的特色成分，目前已从该属植物中分离得到30余种此类化合物，药理研究也已基本明确该类化合物是肉苁蓉发挥药理活性的主要物质基础 G2)

二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）是一种较为稳定的自由基，其N上有一个游离电子。DPHH的甲醇溶液呈紫色，在517m处有最大吸收峰，当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，它的褪色程度与其接受的电子数成定量关系。因此，采用分光光度法检测 DPHH·与试样液反应后吸光值的变化，可检定试样清除自由基抗氧化的能力 (1)目前关于肉苁蓉中苯乙醇苷类成分清除自由基的抗氧化研究已有所报道，但尚未见对其抗氧化性与活性物质间构效关系的分析.本文首次采用 DPHH·自由基分析法，对肉苁蓉中的6种苯乙醇苷单体进行了抗氧化活性的测试，根据这些化合物的结构特征和活性测定结果，初步推断了苯乙醇苷类成分抗氧化活性的构效关系。

1 仪器与材料

松果菊苷、肉苁蓉苷 A毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、2＇乙酰基毛蕊花糖苷、管花苷 B对照品（从盐生肉苁蓉 Cisanche m中分离制备，UV RE1MS＇H-NMRC-NMR数据符合文献值.含量经HPLC面积归一化法测定纯度大于95％，结构式见图1和表1）二苯代苦味酰基自由基（DPH·购于SHma公司；其他试剂均为国产分析纯。

SpecrMaxM5多功能全波长生物活性检测仪（Anthos Co Austri）96孔培养板（Cosan，AB104-N型电子天平｜MettjerTokedo hst（Shang Hai）

图1 肉苁蓉中6种苯乙醇苷化合物结构式

表1 肉苁蓉中6种苯乙醇苷化合物中的取代基

出Ac为乙酰基。C为反式和啡酰基。Gk为β-D葡萄吡响糖。Rho为a-L鼠李吡喃糖

2 供试液的配制

DPHH·用乙醇配制成浓度为1.3x10moyL的储液，置冰箱中冷藏，临用前将储液以乙醇稀释至1.3x10＃mov46种苯乙醇苷对照品和维生素C以乙醇配制成浓度为0.05～50.0＃g／ml的溶液。

3 方法与结果

32 结果 测定结果见表2由表2可知不同浓度的6种苯乙醇苷对 DHH·均有不同程度的清除作用，且其清除自由基能力与浓度呈明显的量效关系，表现为在相同底物浓度条件下，苯乙醇苷对DPHH·清除作用的大小随浓度的增大而增加。

表2 不同浓度样品对DPPH-的清除率（n＝3）

注阳性对照为抗坏血酸（ViamjnC1样品编号为7

根据各样品的C值，6种苯乙醇苷对 DPPH的清除能力的强弱依次为：2＇乙酰基毛蕊花糖苷＞毛蕊花糖苷≥管花苷 B异毛蕊花糖苷＞松果菊苷＞肉苁蓉苷A 6种苯乙醇苷在与阳性对照 VieminC相同浓度下，作用均略低于 VimpC

4 讨论

本研究结果进一步证实了苯乙醇苷类成分普遍具有抗氧化活性。分析对比它们的化学结构，毛蕊花糖苷，异毛蕊花糖苷、2＇乙酰基毛蕊花糖苷、管花苷B均为双糖苷，而松果菊苷和肉苁蓉苷 A为三糖苷，空间位阻变大，增大的空间位阻效应使得松果菊苷和肉苁蓉苷 A不易与自由基接近，因此它们的抗氧化能力相对较弱；松果菊苷和肉苁蓉苷 A的结构差别仅在于前者的R为酚羟基面后者为甲氧基，邻二酚羟基被认为是抗氧化活性的重要官能团。肉苁蓉苷 A由于R位上甲氧基的存在，使得苯乙醇苷元上的邻二酚羟基消失，抗氧化作用显著下降，通过分析化合物的结构并结合测定结果，推测肉苁蓉中苯乙醇苷的抗氧化活性与苷元及苯丙烯酰基上的酚羟基数目，酚羟基连接位置、化合物空间位阻的大小，中心葡萄糖2位上乙酰基的取代均存在一定关系。与苯乙烯酰基上的aβ不饱和酮结构片断可能也有一定关联，而与苯丙烯酰基的取代位置关系不大

VitmhC是目前公认的活性较强并被广泛应用的抗氧剂，因此本实验选择 VitmnC作为苯乙醇苷类化合物清除自由基抗氧化能力的阳性对照。