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不同寄主、产地和采收期对肉苁蓉有效成分含量的影响(二)

发布日期:2021-12-14 11:00:00

2.1.7 稳定性试验

取同一批肉苁蓉样品6份,按“2.1.2”项制备供试品溶液2.1.3”项色谱条件下于0、2、4、12、24h进样,记录松果菊苷、肉苁蓉苷A、管花苷A和毛蕊花糖苷峰面积,RSD值分别为0.45%、1.68%、1.89%、1.05%,表明供试品在24h内稳定。

2.1.8 加样回收率试验

取已知含量的肉苁蓉样品0.5g,精密称取6份,分别加入适量对照品溶液,加50%甲醇补足至50mL,按“2.1.3”项色谱条件进样,测得松果菊苷、肉苁蓉苷A、管花苷A、毛蕊花糖苷平均加样回收率分别为103.24%、103.54%、97.67%、101.01%, RSD分别为4.18%、3.89%、3.90%、3.32%,加样回收率良好。

2.1.9 含量测定

按“2.1.2”项下方法制备样品,分别精密吸取供试品溶液各10μL注入高效液相色谱仪测定。

2.2 可溶性多糖测定

2.2.1 供试品溶液制备

取干燥后的肉苁蓉粉末1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加入95%乙醇50mL,超声30 min,趁热过滤,重复提取1次,滤渣挥干乙醇后加水50mL,超声处理30min,重复提取1次。合并滤液,加活性炭吸附脱色,转移至100mL容量瓶中,蒸馏水定容至刻度线,密塞,摇匀,取1mL溶液至50ml量瓶中,蒸馏水定容至刻度线,即得可溶性多糖供试液。

2.2.2 对照品溶液的制备

精密称定葡萄糖对照品12.3mg,加蒸馏水溶解并定容至100mL棕色量瓶中。吸取1、3、5、7、8、9mL分别置于10ml量瓶中,蒸馏水定容至刻度线,即得到不同浓度的对照品溶液。

2.2.3 含量测定

以蒸馏水做空白对照,取蒸馏水与供试品各2mL,冰水浴中缓慢加硫酸-蒽酮试液5mL,摇匀,沸水浴10min,冷却,于626nm波长下测定。

2.2.4 方法学考察

精密度试验RSD值为0.65%,表明仪器精密度良好:稳定性试验RSD值为4.55%,表明供试品在2h内稳定性良好:重复性试验RSD值为0.05%,表明该方法重复性良好。

2.3 数据分析

利用Excel 2010软件进行数据统计,SPSS 23.0软件进行方差分析。

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3 结果及分析

3.1 不同寄主和不同采收季节肉苁蓉苯乙醇苷含量

以甘肃省民勤治沙综合试验站采收的四翅滨藜寄生肉苁蓉和甘肃省民勤县采收的梭梭寄生肉苁蓉为研究对象,通过对不同寄主和不同采收季节肉苁蓉苯乙醇苷含量的测定可以看出(表1),不同寄主和不同采收季节肉苁蓉苯乙醇苷含量存在差异。秋季采收的不同寄主肉苁蓉中,寄主在四翅滨藜上的肉苁蓉中松果菊苷、肉苁蓉苷A和管花苷A含量均高于寄主在梭梭上肉苁蓉各成分含量,且差异显著(P<0.05),分别高出了49.05%、49.31%、59.39%。春季采收的不同寄主肉苁蓉中,四翅滨藜寄生肉苁蓉松果菊苷、肉苁蓉苷A和毛蕊花糖苷含量分别高出了梭梭寄生肉苁蓉73.50%、49.29%、50.95%,且差异显著。而以4种苯乙醇苷成分含量作为评价标准,不论是秋季采收还是春季采收,均以四翅滨藜寄生肉苁蓉苯乙醇苷成分含量高。

春季采收的梭梭寄生肉苁蓉中松果菊苷、管花苷A和毛蕊花糖苷含量都高于秋季采收的肉苁蓉,分别高出了29.06%、89.44%、90.77%,且差异显著,而肉苁蓉苷A含量差异不显著。春季采收的四翅滨藜寄生肉苁蓉中松果菊苷、管花苷A和毛蕊花糖苷含量显著高于秋季采收的肉苁蓉,分别高出了63.10%、68.67%、95.03%,而肉苁蓉苷A含量差异不明显。通过对两种不同寄主植物春秋两季采收肉苁蓉中4种苯乙醇苷成分含量进行分析,总体来看,以春季采收的质量较好。

1 不同寄主和不同采收季节肉苁蓉苯乙醇苷含量

Table 3 Determi nation of phenylethanoid glyconides in C. deserticola from different hosts and harvest seasons

(mg*g-')

寄主植物

采收季节

松果

肉苁

管花

毛蕊花

菊苷

蓉苷A

V8

糖苷

梭梭

秋季

19.464

4.724

0.260

1.715%

桉梭

春季

27.438"

4.872

2.458*

18.574

四翅滨藜

秋季

38.201

9.319*

0.639

1.884

四超滨藜

春季

103.526

9.607*

2.041

37.865*

注:同列不同小写字母表示差异显著,P0.05,下同。

3.2 不同寄主和不同采收季节肉苁蓉可溶性多糖含量

以甘肃省民勤治沙综合试验站采收的四翅滨藜寄生肉苁蓉和甘肃省民勤县采收的梭梭寄生肉苁蓉为研究对象,通过对不同寄主和不同采收季节肉苁蓉可溶性多糖含量的测定可以看出(表2),秋季采收的不同寄主肉苁蓉中,四翅滨藜寄生肉苁蓉可溶

性多糖含量高于梭梭寄生肉苁蓉,高出了24.73%;春季采收的不同寄主肉苁蓉中,梭梭寄生肉苁蓉可溶性多糖含量显著高于四翅滨藜寄生肉苁蓉(P<0.05),高出了84.97%。不同季节采收的梭梭寄生肉苁蓉中,春季采收的肉苁蓉可溶性多糖含量显著高于秋季采的肉苁蓉;不同季节采收的四翅滨藜寄生肉苁蓉中,秋季采收的肉苁蓉可溶性多糖含量显著高于春季采收的肉苁蓉(P<0.05)。

表2 不同寄主和不同采收季节肉苁蓉可溶性多糖含量Table 2. Dete mination of soluble polysaccharide content of

C.desertimla in different hosts and harvest seasons

(m*g-)

寄主植物

采收季节

可溶性多糖

梭梭

秋季

18.317

梭梭

春季

23.733

四翅滨藜

秋季

24.333*

四翅滨蒙

春季

3.567

3.3 不同产地梭梭寄生肉苁蓉苯乙醇苷含量

通过对甘肃省不同产地4种苯乙醇苷含量的测定可以看出(表3),不同产地的肉苁蓉样品中4种苯乙醇苷类含量存在差异,这可能是由于不同产地药材种植环境差异较大,甘肃民勤肉苁蓉松果菊苷含量为最高,达19.463mg*g',分别高出了甘肃靖远和甘肃景泰74.62%、26.15%,且差异显著(P<0.5)。甘肃景泰肉苁蓉肉苁蓉苷A含量相比其他两个产地较高,达到了5.239mg*g,且显著高于甘肃靖远72.09%。甘肃民勤肉苁蓉管花苷A含量最高为0.260mg·g,高出了甘肃靖远54.74%。甘肃靖远肉苁蓉毛蕊花糖苷含量最高,达到了1.898mg·g。通过对3个产地肉苁蓉4种苯乙醇苷含量分析,整体来看还是以甘肃民勤的质量最优。

表3 不同产地梭梭寄生肉苁蓉苯乙醇苷含量

Table 3 Detemination of phenylethancid glycosides in C.

deserticola from different habitats (mg*g-')

产地

松果菊苷

肉苁蓉苷A

 营花苷A

毛蕊花糖苷

甘肃民勤

19.464

4.724

0.260

1.715*

甘肃靖远

4.939

1.462

0.118

1.898*

甘肃景泰

14.375

5.239*

0.221

1.144

3.4 不同产地梭梭寄生肉苁蓉可溶性多糖含量

通过对甘肃省不同产地可溶性多糖含量的测定可以看出(表4),甘肃景泰肉苁蓉中可溶性多糖含量最高为20.467mg·g,与其他两个产地的肉苁蓉存在显著差距(P<0.05),3个产地肉苁蓉可溶性多糖含量依次为甘肃景泰>甘肃民勤>甘肃靖远。

表4 不同产地梭梭寄生肉苁蓉可溶性多糖含量

Table 4 Determination of soluble polysaccharides in C.

deserticola from different habitats

产地

可溶性多糖

甘肃民勤

18.317

甘肃靖远

17.133%

甘肃景泰

20.467*

4 讨论与结论

地、品种及采收期对中药材成分含量的影响一直是学者关注的热点问题,如赵志红等 研究发现,肉苁蓉在不同产地种药材的化学成分含量会产生变化:王雪媛等 研究发现,肉苁蓉春季、秋季样品中有效成分波动差异较大。本研究结果显示,不同寄主肉苁蓉药材中5种有效成分含量存在较大差异。四翅滨藜寄生肉苁蓉药材中苯乙醇苷和可溶性多糖的含量整体高于梭梭寄生肉苁蓉,原因可能与不同寄主植物、生长条件、水分等多种因素有关0。此外,因为四翅滨藜本身生物量大,可能给肉苁蓉提供了大量的养分,而到底是如何传递养分,需要后续的进行进一步说明。现阶段四翅滨藜寄生肉苁蓉研究较少且样本不够多,可为开发四翅滨藜寄生肉苁蓉提供一定的参考价值,为后续肉苁蓉的开发利用提供理论依据。对于春秋两季采收的肉苁蓉,两种不同寄主肉苁蓉药材苯乙醇苷含量均以春季采收的含量最高,梭梭寄生肉苁蓉药材可溶性多糖含量以春季最高,四翅滨藜寄生肉苁蓉可溶性多糖含量以秋季最高。这可能与不同采收期环境中生态因素(如土壤温度、空气温度、空气湿度、光合有效辐射等)会发生不同程度的变化等有关-0,而中国药典规定松果菊苷和毛蕊花糖苷含量作为肉苁蓉质量评价标准,可以得出肉苁蓉以春季采收较好,为后续肉苁蓉采收季节提供理论依据。甘肃不同产地梭梭寄生肉苁蓉苯乙醇苷含量有较大差距,说明产地对肉苁蓉质量有一定的影响,而不同产地肉苁蓉中可溶性多糖含量无较大变化,综合评价出甘肃民勤梭梭寄生肉苁蓉质量最优。

研究结果显示产地和寄主及采收季节均会影响肉苁蓉中苯乙醇含量和可溶性多糖含量。苯乙醇苷类成分,具有较强的补肾阳和神经保护作用,而肉苁蓉含有丰富多糖,具有较强的抗衰老和润肠通便之功效-。由上述可知,肉苁蓉寄主植物的不同对肉苁蓉质量有一定影响,且各成分含量存在较大差异性。新兴发现的四翅滨藜寄生肉苁蓉质量较好,且春季采收明显好于秋季采收,这需要后续研究学者对四翅滨藜寄生肉苁蓉进行大量研究,制定更加客观统一的质控标准。新兴寄主植物四翅滨藜的成功引入对于提高肉苁蓉资源以及开发利用具有深远意义。

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