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3.结果
3.1德赢vwin登录 复方制剂对小鼠体重的影响:通过30天喂养,对各大组小鼠初始、中期体重、
1.3 剂量选择及样品处理:据人体口服推荐量,设德赢vwin登录 复方制剂低、中、高剂量分别为0.17g/kg·bw、0.33g/kg·bw、1.00g/kg·bw(分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍)。实验时,分别取德赢vwin登录 复方制剂1.70g、3.33g、10.00g加蒸馏水定容至200ml,按0.2ml/10g·bw体积给小鼠灌胃,每天一次,连续灌胃30天。对照组灌胃予以等体积的蒸馏水。
1.4 主要仪器与试剂:电子天平、离心机、细胞破碎仪、振荡器、OLYMPUS AU400全自动生化分析仪、SBA40C生物传感分析仪、722分光光度计、游泳箱(大小约53cmx40cmx35cm)、铅皮、计时器、血色素吸管、加样器、吸量管、试管。血清尿素测试盒,由上海复星长征医学科学有限公司提供:肝糖原测试盒,由南京建成生物工程研究所提供。
2.试验方法
2.1负重游泳实验:末次给小鼠受试物30min后,置于游泳箱中游泳,水深约30cm,水温25℃±1.0℃,鼠尾根部负荷5%体重的铅皮。记录小鼠自游泳开始至死亡的时间作为负重游泳时间(s)。
2.2血清尿素测定:末次给小鼠受试物30min后,在温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后拔眼球采血。于4℃静置3h后2000转/分离心15min,取血清用全自动生化分析仪测定血清尿素。
2.3肝糖原测定:末次给小鼠受试物30min后,处死动物。取肝脏经生理盐水漂洗后用滤吸干,称取肝脏100mg,余下操作按试剂盒说明书进行肝糖原测定。
2.4血乳酸测定:末次给予受试物30min后从内眦静脉丛采血20ul,然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后停止,分别于运动后0min和20min同上采血20ul,测定血乳酸,计算血乳酸曲线下面积。
2.5实验数据处理:用Spss11.0软件进行统计分析。分析时,先对数据进行方差齐性检验,若方差齐,采用单因素方差分析进行总体比较,发现差异再用Dunnett法进行多个剂量组与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐,则对原始数据进行适当的变量转换,满足方差齐性检验后,用转换的数据进行统计:若变量转换后仍未达到方差齐的目的,改用秩和检验进行统计,发现总体比较有差异,则采用不要求方差齐性的Tamhane'sT2 检验进行两两比较[5]。
3.结果
3.1德赢vwin登录 复方制剂对小鼠体重的影响:通过30天喂养,对各大组小鼠初始、中期体重、
终末体重测定,实验结果见表1~表4:
表1样品对小鼠体重的影响(I组-负重游泳)
组 别 动物数 初始体重 中期体重 末期体重 增重
组 | 别 动物数 | 初始体重 | 中期体重 | 末期体重 | 增重 |
(只) | x±s(g) | x±s(g) | xts(g) | x±s(g) | |
对照组 10 20.03±1.42 30.15±2.43 36.66+3.14 16.63±2.80 | |||||
低剂量组 10 20.07+1.35 30.75±2.02 37.28±3.69 17.21±2.98 | |||||
中剂量组 10 20.13±1.22 29.88±1.96 36.56±3.85 16.43±4.18 | |||||
高剂量组 10 20.18±1.33 30.19±2.33 37.60±2.46 17.42±2.29 | |||||
与对照组比较,P>0.05 |
表2样品对小鼠体重的影响(II组-血清尿素测定)
组 别 动物数 初始体重 中期体重 末期体重 增重
(只) x±s(g) x±s(g) x±s(g) x±s(g) 对照组 10 19.76±1.15 30.22±2.01 36.10±3.29 16.34±3.44 低剂量组 10 19.81±1.17 30.87±2.35 37.04±3.43 17.23±2.85 中剂量组 10 19.81±1.00 30.39±2.41 36.47±3.58 16.66±3.04 高剂量组 10 19.89±1.12 30.54±2.51 36.90±4.39 17.01±3.74 与对照组比较,P>0.05
表3样品对小鼠体重的影响(III组-血乳酸测定)
组 别 动物数 初始体重 中期体重 末期体重 增重
(只) x±s(g) x±s(g) x±s(g) x±s(g) 对照组 10 20.06±1.42 31.00±3.37 37.36±4.85 17.30±3.66 低剂量组 10 20.09±1.36 30.33±2.02 36.80±2.95 16.71±2.88 中剂量组 10 20.17±1.24 31.02±2.56 37.38±2.58 17.21±2.08 高剂量组 10 20.13±1.22 30.09±2.30 36.63±3.08 16.05±3.04 与对照组比较,P>0.05
表4 样品对小鼠体重的影响(IV组-肝糖原含量测定)
组 别 动物数 初始体重 中期体重 末期体重 增重
(只) x±s(g) x±s(g) x±s(g) x±s(g)
对照组 10 19.81±1.51 30.34±2.41 36.94±3.44 17.13±2.62
低剂量组 10 19.85±1.44 30.82±2.29 37.15±3.28 17.30±3.16 中剂量组 10 19.84±1.41 31.13±3.71 36.92±4.35 17.08±3.51 高剂量组 10 19.84±1.38 30.28±2.56 36.89±2.86 17.05±2.78 与对照组比较,P>0.05
3.2德赢vwin登录 复方制剂对小鼠重游泳时间、血清尿素和肝糖原量的影响:通过30天喂养,
对各组小鼠负重游泳时间、血清尿素和肝糖原量进行测定,实验结果见表5:
表5德赢vwin登录 复方制剂对小鼠负重游泳时间、血清尿素和肝糖原量的影响
组 别 动物数 初始体重 中期体重 末期体重 增重
(只) x±s(g) x±s(g) x±s(g) x±s(g)
对照组 10 304.5±100.1 8.79±1.31 19.063±7.914
低剂量组 10 334.7±137.1 7.98±1.43 22.147±6.970
中剂量组 10 399.4±153.4 7.46±1.64 25.957±8.101
高剂量组 10 462.5±102.7*7.01±1.09*29.967±9.993*
与对照组比较:P>0.05,*P<0.05
3.3 德赢vwin登录 复方制剂对运动后小鼠血乳酸变化的影响:通过30天喂养,对各组小鼠体内血乳酸含量测定,实验结果见表6:
表6 德赢vwin登录 复方制剂对小鼠血乳酸的影响
组别 动物数 运动前血乳酸值 运动后 Omin 血乳酸值 运动后休息20min 后血乳值血乳酸
曲线下面积
(只) | (mmol/L) | (mmol/L) | (mmol/L) |
对照组 10 | 3.64±0.78 7.48 | ±1.26 4.90±0.63 | 179.40±28.63 |
低剂量组 10 3.69±0.63 7.36±1.18 4.87±0.76 177.55±26.20 | |||
中剂量组 10 3.72+0.58 7.20±0.82 4.79±0.58 174.50±18.68 | |||
高剂量组 10 3.62±0.75 7.17±0.92 4.58±0.65 171.45±21.04 |
与对照组比较,P>0.05
4.讨论
4.1本实验根据《保健食品检验与评价技术规范》[6],负重游泳实验结果阳性,且血乳酸、血清尿素、肝糖原三项生化指标中任二项指标阳性,即可判定该受试物具有抗疲劳功能的作用。
4.2 本实验室条件下,经口给予小鼠0.17g/kg·bw、0.33g/kg·bw、1.00g/kg·bw剂量的复方德赢vwin登录 制剂30天,1.00g/kgbw剂量能明显延长小鼠的负重游泳时间、增加小鼠肝糖原储备量、降低小鼠运动后血清尿素水平,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。各剂量对小鼠体重和血乳酸曲线下面积未见明显影响(P>0.05)。提示德赢vwin登录 复方制剂具有抗疲劳的功能。
参考文献:
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2010版(一部)[M].北京,化学工业出版社,2010:126.
[2] 汤小蕾,孙平飞,德赢vwin登录 的研究进展[].中医药导报,2009,15(5):101-104.
[3] 王果平,卿德刚,凯撤·苏莱曼,等.南疆不同产地肉苁蓉中松果菊甘含量测定[J].新疆中医药,2007,25(4):85-86.
[4] 马春梅,倪慧,卿德刚,等.德赢vwin登录 中松果菊甘的提取纯化[刀.新疆中医药,2009,27(1):45-47.
[5] 贺石林,王键,王净净,中医科研设计与统计学[M].长沙:湖南科学技术出版社,2003:316-353.
[6] 中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范[S].2003:82-85.
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