董法祥，李富有

（新疆克拉玛依市碧禾源农业科技开发有限公司，新疆克拉玛依 834014）

摘要：为探讨生长年限和采收季节等因素对内苁蓉药材有效成分的影响，通过试验探索肉苁蓉最佳采收年限与采收季节，从而保证肉苁蓉药材中有效成分的稳定性。本研究采用高效液相色谱法，对不同生长年限和采收季节下的人工接种肉苁蓉药材中的松果菊苷和毛蒸糖苷含量进行定量测定，分析生长年限和采收季节对人工接种肉苁蓉药材中活性成分的影响，结果表明：在春季采收3年及3年以上的肉苁蓉为好，此时肉苁蓉中的活性成分较高，品质较好。

关键词：肉苁蓉；生长年限；采收季节；人工接种；有效成分

肉苁蓉又称大芸，具有抗衰老、补肾壮阳、保护肝脏、增强免疫力等多种功效。梭梭具有耐旱、耐寒、抗盐碱、耐贫瘠等特性，新疆克拉玛依市生态环境脆弱，种植梭梭不仅能防风固沙、改良土壤、恢复植被，还能作为肉苁蓉生长繁殖的寄主，不仅能获得良好的生态效益，也能获得较好的经济效益。松果菊苷和毛蕊花糖苷含量是目前评定肉苁蓉质量的重要指标，《中国药典》（2015版）中关于肉苁蓉药效的描述也以这2个指标来评价肉苁蓉药材的质量＂。

新疆克拉玛依市地理条件、气候条件比较适宜肉苁蓉生长。目前，在该地区主要采用人工栽培手段将肉苁蓉种子置于梭梭植株根系附近，使它们形成寄生关系，从而促使肉苁蓉生长和繁殖。本研究以新疆克拉玛依市人工栽培的肉苁蓉为研究对象，通过分析测定不同生长年限下、不同采收季节肉苁蓉中有效成分松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量，探讨生长年限和采收季节等因素对肉苁蓉有效成分的影响，探索肉苁蓉最佳的采收年限与采收季节，从而保证肉苁蓉有效成分的稳定性，以期为肉苁蓉药材质量控制及采收加工提供理论依据。

一、材料与方法

1．仪器与试剂

使用LC98II型高效液相色谱仪进行相关指标的分析，KQ-500DE型数控超声波清洗器（常州科生达超声设备有限公司），中草药粉碎机（曲阜市启航机械有限公司），DHG-9145A型电热鼓风干燥箱（无锡玛瑞特科技有限公司）。

甲醇为色谱纯（Promptar Company Lid.），甲酸为分析纯（新疆阜瑞克生物有限公司），水为超纯水。对照品松果菊苷和毛蕊花糖苷购自sigma公司，实验中所用肉苁蓉药材采集于新疆克拉玛依市乌尔禾区人工肉苁蓉种植基地。

2．试验方法

色谱条件：色谱柱为 Apollo C18（4.6毫米x250毫米，微米）；流动相为甲醇-0.1％甲酸梯度洗脱，甲醇-0.1％甲酸26.5：73.5，保持17分钟，3分钟内换成29.5：705，保持27分钟，流速0.8毫升／分；检测波长333纳米，柱温31℃。

对照品溶液的制备：利用万分之一精密天平称取松果菊苷和毛蕊花糖苷对照品1.405毫克、1.009毫克，置于5毫升容量瓶中，50％甲醇溶解并稀释至刻度，制成含松果菊苷、毛蕊花糖苷0.2018毫克／毫升、0.2357毫克／毫升的对照品溶液。

供试液的制备和松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量测定参考金虎等方法进行测定。

3．试验设计

选择2个季节，春季（2018年4月30日）和秋季（2018年8月23日），在新疆克拉玛依市乌尔禾区工肉苁蓉种植基地内，按生长年限的不同，分为半年生、1年生、2年生、3年生和多年生5个处理，在各生长年限肉苁蓉种植地中随机选择3块样地，每块样地面积为667米，直接采挖肉苁蓉。具体方法：在接种区外侧0.5米处向接种区剖挖，先用坎土曼和铁锹挖1个长、宽、深分别为0.5米、0.3米、0.7米的小坑，然后换用小铲逐步向接种区缓挖。待挖到肉苁蓉肉质茎时，手轻刨，找到芦头即寄生点处，此时以接种点为中心，把接种点左右0.5米及上方的土取走，按照“采大留小”原则采收，去土过程中及时采收符合规格、个体长度＞25厘米的肉苁蓉。采挖后的肉苁蓉直接晾晒后切制成0.5-1.0厘米厚的切片，在经烘箱80℃烘干至恒重后，粉碎，过80目筛后测定松果菊苷和毛蕊花糖苷含量。

4．数据分析

用Excel 365进行相关图表的绘制，用SPSS21.0软件进行方差分析，用Duncan法对测定数据进行多重比较。

二、结果与分析

以春季和秋季采收的肉苁蓉为样品，按照上述方法测得样品中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量。由下表可知：随着生长年限的不断增加，肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量也逐渐增加，其中，3年生及多年生肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷2种有效成分含量最高；与春季相比，秋季采收的肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量均低于春季采收的肉苁蓉；采收季节和生长年限对松果菊苷和毛蕊花糖苷有极显著影响（P＜0.01），二者的互作效应对毛蕊花糖苷有极显著影响（P＜0.01），对松果菊苷则无显著影响(P>0.05)。

不同生长年限及采收季节肉苁蓉药材中

有效成分含量表 （毫克／克）

注：同列不同小写字母表示差异显著（P＜0.05），不同大写字母表示盖并极显著（P＜0.05）；SEM为标准误差；NS表示差异不显著；＊＊表示P＜0.01

中国药典（2015版）对于干燥肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷总量的要求为不少于0.3％，本试验所有处理肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷的总含量均符合上述要求。本研究中，春季采收时，肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量随着肉苁蓉生长年限的增加面增加，3年生和多年生处理相比，二者差异极显著（P＜0.01）。而在秋季采收时，3年生和多年生处理相比，肉苁蓉中松果菊苷含量无显著性差异（P＞0.05），毛蕊花糖苷含量甚至有所下降。这可能由于肉苁蓉开花时消耗了大量的营养成分，在秋季采收时使其有效成分大大降低～，但此结果仍需更多研究予以验证。

本研究结果表明：随着生长年限的不断增加，肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量也逐渐增加；与春季相比，秋季采收的肉苁蓉中，其松果菊苷和毛蕊花糖苷含量均低于春季采收的肉苁蓉；采收季节和生长年限对松果菊苷和毛蕊花糖苷有极显著影响（P＜0.01），二者的互作效应对毛蕊花糖苷有极显著影响（P＜0.01），对松果菊苷则无显著影响（P＞0.05）。综合考虑产量及经济效益的因素下，建议在春季采收3年生及3年生以上的肉苁蓉，此时肉苁蓉中的活性成分较高，品质较好。